Isolamento Semi-Automatizado da Fração Vascular Estromal do Tecido Adiposo Branco Murino Usando um Dissociador de Tecido

Estamos interessados nos subtipos marrom e bege de adipócitos que dissipam energia na forma de calor, enquanto os adipócitos brancos geralmente armazenam energia, pois Nosso objetivo é desenvolver um novo tratamento para obesidade e diabetes baseado na promoção do gasto energético, em vez da supressão da ingestão de energia. Identificamos um fator de transcrição, NFI, como um regulador crítico da diferenciação de adipócitos marrons por uma análise de cromatina aberta em todo o genoma. NFI e o regulador transcricional mestre da adipogênese, PPAR-gama, co-localizam como os potenciadores específicos de gordura marrom.

No processo de isolamento da fração vascular estromal do tecido adiposo de camundongos, a picagem manual e a digestão da colagenase do tecido adiposo podem levar à variabilidade experimental e contaminação. Nosso método utiliza um dissociador tecidual para digestão da colagenase, o que facilita o isolamento da FVS, reduz a variabilidade experimental e a contaminação e melhora a reprodutibilidade. Experimentos com adipócitos diferenciados individualmente são indispensáveis para pesquisas em nosso meio.

Nosso protocolo ofereceria isolamento fácil e reprodutível da FS para posterior diferenciação dos adipócitos e aceleraria a pesquisa em nossa comunidade. Atualmente, estamos investigando o papel do NFI do metabolismo de todos os corpos, como peso corporal e glicose, usando modelos de ganho e perda de função em camundongos. Também exploraremos outras ativações farmacológicas de NFI para cada via a jusante em um futuro próximo.