Purificación y caracterización biofísica de miosina-7a humana basada en el sistema MultiBac

Estamos tratando de responder por qué las mutaciones en los motores de miosina causan enfermedades humanas y qué roles juegan estas proteínas en el proceso auditivo. Nuestra investigación se centra en comprender los mecanismos moleculares de la miosina-7a y cómo funciona con las proteínas Usher para ensamblar y mantener la maquinaria celular necesaria para la audición. La comprensión de los mecanismos estructurales y funcionales de la miosina-7a requiere una proteína intacta de alta calidad, lo que ha sido un desafío de larga data en el campo.

Recientemente, logramos un progreso significativo y purificamos con éxito la enzima hueca Myosin-7a de longitud completa, lo que permite una mayor investigación de esta importante proteína. Con esta proteína ahora disponible, podemos investigar las características clave de este motor, incluida su estructura, generación de fuerza y su motilidad. Estos conocimientos son cruciales para comprender los mecanismos de la miosina-7a en la audición y los defectos moleculares que conducen a la sordera en pacientes humanos.

En el futuro, nuestro laboratorio aprovechará nuestra experiencia en el sistema multi vac para producir de forma recombinante grandes complejos biomoleculares, por ejemplo, el complejo Usher 1, que es fundamental para las funciones sensoriales humanas. Este enfoque nos permitirá determinar sus estructuras y los principios que subyacen a sus funciones en las células sensoriales.