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A High-throughput Automated Platform for the Development of Manufacturing Cell Lines for Protein Therapeutics

The fast-growing biopharmaceutical industry demands speedy development of highly efficient and reliable production systems to meet the increasing ...

Merck & Co., Inc

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MyD88 &#x7D20;&#x6570;&#x5168;&#x9762;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x7684;&#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x5E72;&#x6270;&#x7D20;&#xFF0C;&#x7136;&#x800C;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x5BF9;&#x7ED3;&#x6838;&#x5206;&#x679D;&#x6746;&#x83CC;&#x7684;&#x51E0;&#x4EFD;&#x7B54;&#x590D;&#x3002;

Macrophages are activated from a resting state by a combination of cytokines and microbial products. Microbes are often sensed through Toll-like receptors signaling through MyD88. We used large-scale microarrays in multiple replicate experiments followed by stringent statistical analysis to compare gene expression in wild-type (WT) and MyD88-/- macrophages. We confirmed key results by quantitative reverse transcription polymerase chain reaction, Western blot, and enzyme-linked immunosorbent assay. Surprisingly, many genes, such as inducible nitric oxide synthase, IRG-1, IP-10, MIG, RANTES, and interleukin 6 were induced by interferon (IFN)-gamma from 5- to 100-fold less extensively in MyD88-/- macrophages than in WT macrophages. Thus, widespread, full-scale activation of macrophages by IFN-gamma requires MyD88. Analysis of the mechanism revealed that MyD88 mediates a process of self-priming by which resting macrophages produce a low level of tumor necrosis factor. This and other factors lead to basal activation of nuclear factor kappaB, which synergizes with IFN-gamma for gene induction. In contrast, infection by live, virulent Mycobacterium tuberculosis (Mtb) activated macrophages largely through MyD88-independent pathways, and macrophages did not need MyD88 to kill Mtb in vitro. Thus, MyD88 plays a dynamic role in resting macrophages that supports IFN-gamma-dependent activation, whereas macrophages can respond to a complex microbial stimulus, the tubercle bacillus, chiefly by other routes.

MyD88 primes macrophages for full-scale activation by interferon-gamma yet mediates few responses to Mycobacterium tuberculosis.

Les macrophages sont activ&eacute;s d&#39;un &eacute;tat de repos par une combinaison de cytokines et de produits microbiens. Microbes sont souvent d&eacute;tect&eacute;es par l&#39;interm&eacute;diaire de r&eacute;cepteurs Toll-like de signalisation par l&#39;interm&eacute;diaire de MyD88. Nous avons utilis&eacute; des puces &agrave; ADN &agrave; grande &eacute;chelle dans plusieurs exp&eacute;riences r&eacute;p&eacute;t&eacute;es, suivies d&#39;une analyse statistique rigoureuse pour comparer l&#39;expression des g&egrave;nes de type sauvage (WT) et MyD88-/-macrophages. Nous avons confirm&eacute; les principaux r&eacute;sultats obtenus par transcription inverse quantitative polymerase chain reaction, Western blot et enzyme-linked immunosorbent assay. &Eacute;tonnamment, beaucoup de g&egrave;nes, tels que le monoxyde d&#39;azote synthase inductible, IRG-1, IP-10, MIG, RANTES et interleukine-6 ont &eacute;t&eacute; induites par l&#39;interf&eacute;ron (IFN)-gamma de 5 &agrave; 100 fois moins intensivement en MyD88-/-macrophages que dans les macrophages WT. G&eacute;n&eacute;ralis&eacute;e, grandeur nature d&#39;activation des macrophages par l&#39;IFN-gamma requiert donc MyD88. L&#39;analyse du m&eacute;canisme a r&eacute;v&eacute;l&eacute; que MyD88 intervient dans un processus d&#39;auto-amor&ccedil;antes par quels repos macrophages produisent un faible niveau de facteur de n&eacute;crose tumorale. Ceci et autres facteurs conduisent &agrave; activation basale du facteur nucl&eacute;aire kappaB, qui assortie avec IFN-gamma pour l&#39;induction de g&egrave;nes. En revanche, l&#39;infection par direct, particuli&egrave;rement virulente, Mycobacterium tuberculosis (Mtb) activ&eacute; macrophages en grande partie par le biais de voies MyD88-independent, et macrophages n&#39;a pas besoin de MyD88 pour tuer m. tuberculosis in vitro. Ainsi, MyD88 joue un r&ocirc;le dynamique dans les macrophages de repos qui prend en charge l&#39;activation d&eacute;pendante de l&#39;IFN-gamma, tandis que les macrophages peuvent r&eacute;pondre &agrave; un stimulus microbien complex, le bacille tuberculeux, principalement par d&#39;autres voies.

MyD88 nombres premiers macrophages pour l&#39;activation &agrave; grande &eacute;chelle par l&#39;interf&eacute;ron-gamma encore intervient dans quelques r&eacute;ponses &agrave; Mycobacterium tuberculosis.

MyD88 Primzahlen Makrophagen f&#xFC;r Full-Scale-Aktivierung durch Interferon-gamma vermittelt noch einige Antworten auf Mycobacterium tuberculosis.

Macrofagi sono attivati da uno stato di riposo da una combinazione di prodotti microbici e citochine. I microbi sono spesso percepiti attraverso i recettori Toll-like segnalazione attraverso MyD88. Abbiamo usato su larga scala microarrays in esperimenti di replicati pi&ugrave; seguiti da rigorose analisi statistica per confrontare l&#39;espressione genica nel wild-type (WT) e MyD88/macrofagi. Abbiamo confermato risultati chiave di reazione a catena della polimerasi quantitativa trascrizione d&#39;inversione, Western blot e analisi enzima-collegata dell&#39;immunosorbente. Sorprendentemente, molti geni, come inducibile ossido nitrico sintasi, IRG-1, IP-10, MIG, RANTES e interleuchina 6 sono state indotte da interferone (IFN)-gamma da 5 a 100 volte meno estesamente in MyD88-/-macrofagi rispetto nei macrofagi WT. Quindi, diffusa, su vasta scala l&#39;attivazione dei macrofagi da IFN-gamma richiede MyD88. Analisi del meccanismo ha rivelato che MyD88 da intermediario un processo di autoadescante da cui riposo macrofagi producono un basso livello di fattore di necrosi tumorale. Questo e altri fattori portano a basale attivazione del fattore nucleare kappaB, che superando con IFN-gamma per induzione genica. Al contrario, infezione da vivere, virulento Mycobacterium tuberculosis (Mtb) attivato macrofagi in gran parte attraverso percorsi indipendenti MyD88 e macrofagi non hanno bisogno di MyD88 per uccidere Mtb in vitro. Cos&igrave;, MyD88 gioca un ruolo dinamico in macrofagi di riposo che supporta l&#39;attivazione di IFN-gamma-dipendente, mentre i macrofagi possono rispondere a uno stimolo complesso microbico, il tubercolo bacillus, principalmente da altre vie.

MyD88 primi macrofagi per attivazione su larga scala di interferone-gamma ancora da intermediario poche risposte a Mycobacterium tuberculosis.

&#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x306F;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30AB;&#x30A4;&#x30F3;&#x3068;&#x5FAE;&#x751F;&#x7269;&#x306E;&#x88FD;&#x54C1;&#x306E;&#x7D44;&#x307F;&#x5408;&#x308F;&#x305B;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x9759;&#x6B62;&#x72B6;&#x614B;&#x304B;&#x3089;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5FAE;&#x751F;&#x7269;&#x306F;&#x3001;&#x3057;&#x3070;&#x3057;&#x3070; MyD88 &#x3092;&#x901A;&#x3058;&#x3066;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0; Toll &#x69D8;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x691C;&#x51FA;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x5927;&#x898F;&#x6A21;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED; &#x30A2;&#x30EC;&#x30A4;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x53B3;&#x683C;&#x306A;&#x7D71;&#x8A08;&#x89E3;&#x6790;&#x3092;&#x7D9A;&#x3051;&#x3066;&#x8907;&#x6570;&#x306E;&#x30EC;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B1;&#x30FC;&#x30C8;&#x5B9F;&#x9A13;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x91CE;&#x751F;&#x578B; &#xFF08;WT&#xFF09; &#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x306E;&#x6BD4;&#x8F03;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x304A;&#x3088;&#x3073; MyD88/&#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x3002;&#x5B9A;&#x91CF;&#x7684;&#x9006;&#x8EE2;&#x5199;&#x30DD;&#x30EA;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x9023;&#x9396;&#x53CD;&#x5FDC;&#x3001;&#x897F;&#x90E8;&#x306E;&#x3057;&#x307F;&#x3001;elisa &#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x3067;&#x306E;&#x30AD;&#x30FC;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3092;&#x78BA;&#x8A8D;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x9A5A;&#x3044;&#x305F;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3001;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x8A98;&#x5C0E;&#x578B;&#x4E00;&#x9178;&#x5316;&#x7A92;&#x7D20;&#x5408;&#x6210;&#x9175;&#x7D20;, IRG 1&#x3001;IP 10&#x3001;&#x30DF;&#x30B0;&#x3001;RANTES&#x3001;&#x30A4;&#x30F3;&#x30BF;&#x30FC;&#x30ED;&#x30A4;&#x30AD;&#x30F3; 6 &#x306A;&#x3069;&#x30A4;&#x30F3;&#x30BF;&#x30FC;&#x30D5;&#x30A7;&#x30ED;&#x30F3; (IFN) &#x8A98;&#x5C0E;&#x3055;&#x308C;&#x305F;-5 &#x301C; 100 &#x500D;&#x4EE5;&#x4E0B;&#x3067;&#x5E83;&#x304F; MyD88-/-&#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x3088;&#x308A; WT &#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x304B;&#x3089;&#x30AC;&#x30F3;&#x30DE;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x5E83;&#x7BC4;&#x56F2;&#x306B;&#x308F;&#x305F;&#x308B;&#x3001;&#x672C;&#x683C;&#x7684;&#x306A;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x306B;&#x3088;&#x308B; IFN-&gamma; MyD88 &#x304C;&#x5FC5;&#x8981;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x6A5F;&#x69CB;&#x306E;&#x89E3;&#x6790; MyD88 &#x306E;&#x816B;&#x760D;&#x58CA;&#x6B7B;&#x56E0;&#x5B50;&#x306E;&#x4F4E;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306E;&#x3069;&#x306E;&#x4F11;&#x606F;&#x306E;&#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x306E;&#x751F;&#x6210;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x81EA;&#x5438;&#x5F0F;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x3092;&#x4EF2;&#x4ECB;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3068;&#x4ED6;&#x306E;&#x8981;&#x56E0;&#x306E; IFN-&gamma; &#x3092;&#x767A;&#x73FE;&#x8A98;&#x5C0E;&#x306E; synergizes &#x6838;&#x56E0;&#x5B50;&#x30AB;&#x30C3;&#x30D1; b &#x57FA;&#x5E95;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306B; &#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5BFE;&#x7167;&#x7684;&#x306B;&#x3001;&#x30E9;&#x30A4;&#x30D6;&#x3001;&#x5F37;&#x6BD2;&#x6027;&#x7D50;&#x6838;&#x83CC; &#xFF08;Mtb&#xFF09; &#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x611F;&#x67D3; MyD88 &#x72EC;&#x7ACB;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306E;&#x5927;&#x90E8;&#x5206;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3057;&#x3001;&#x5927;&#x98DF;&#x7D30;&#x80DE; in vitro Mtb &#x3092;&#x6BBA;&#x3059; MyD88 &#x5FC5;&#x8981;&#x306F;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3067;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x306F;&#x8907;&#x96D1;&#x306A;&#x5FAE;&#x751F;&#x7269;&#x523A;&#x6FC0;&#x7D50;&#x6838;&#x83CC;&#x306B;&#x4ED6;&#x306E;&#x30EB;&#x30FC;&#x30C8;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x4E3B;&#x306B;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x306B;&#x5BFE;&#x3057; MyD88 IFN &gamma; &#x4F9D;&#x5B58;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3092;&#x30B5;&#x30DD;&#x30FC;&#x30C8;&#x3059;&#x308B;&#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x5B89;&#x9759;&#x6642;&#x306E;&#x52D5;&#x7684;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

MyD88 &#x306E;&#x672C;&#x683C;&#x7684;&#x306A;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x306E;&#x30A4;&#x30F3;&#x30BF;&#x30FC;&#x30D5;&#x30A7;&#x30ED;&#x30F3;-&gamma; &#x3067;&#x7D20;&#x6570;&#x307E;&#x3060;&#x6570;&#x306E;&#x5FDC;&#x7B54;&#x7D50;&#x6838;&#x83CC;&#x3092;&#x4EF2;&#x4ECB;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xB300; &#xC2DD; &#xC138;&#xD3EC;&#xB294; &#xD734;&#xC2DD; &#xC0C1;&#xD0DC;&#xC5D0;&#xC11C; cytokines &#xBC0F; &#xBBF8;&#xC0DD;&#xBB3C; &#xC81C;&#xD488;&#xC758; &#xC870;&#xD569;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBBF8;&#xC0DD;&#xBB3C;&#xC740; MyD88 &#xD1B5;&#xD574; &#xC2E0;&#xD638; &#xC218;&#xC2E0;&#xC790; &#xAC19;&#xC740; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; &#xC885;&#xC885; &#xAC10;&#xC9C0; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xC57C;&#xC0DD;-&#xD0C0;&#xC785; (WT)&#xC5D0;&#xC11C; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC1C;&#xD604;&#xC744; &#xBE44;&#xAD50; &#xB4A4;&#xC5D0; &#xC5C4;&#xACA9;&#xD55C; &#xD1B5;&#xACC4; &#xBD84;&#xC11D; &#xD558;&#xB294; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xBCF5;&#xC81C; &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB300;&#xADDC;&#xBAA8; microarrays &#xC0AC;&#xC6A9; &#xBC0F; MyD88/&#xB300; &#xC2DD; &#xC138;&#xD3EC;. &#xC591;&#xC774; &#xB9CE;&#xC740; &#xBC18;&#xC804; &#xB179;&#xC74C; &#xBC29;&#xC1A1; &#xC911; &#xD569; &#xD6A8;&#xC18C; &#xC5F0;&#xC1C4; &#xBC18;&#xC751;, &#xC11C;&#xCABD; &#xC624; &#xC810; &#xBC0F; &#xD6A8;&#xC18C; &#xC5F0;&#xACB0; &#xB41C; immunosorbent &#xBD84;&#xC11D; &#xACB0;&#xACFC; &#xC8FC;&#xC694; &#xACB0;&#xACFC; &#xD655;&#xC778; &#xD558; &#xACE0;. &#xB180;&#xB78D;&#xAC8C;&#xB3C4;, &#xC720;&#xB3C4;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xC9C8;&#xC18C; &#xC0B0;&#xD654;&#xBB3C; synthase, IRG 1, IP-10, &#xBBF8;&#xADF8;, RANTES, &#xC778;&#xD130; &#xB8E8; &#xD0A8; 6 &#xB4F1; &#xB9CE;&#xC740; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xAC00; &#xC778;&#xD130;&#xD398;&#xB860; (IFN)&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC720;&#xB3C4; &#xD588;&#xB2E4;-5-&#xC744; 100 &#xBC30; &#xB354; &#xC801;&#xC740; &#xAD11;&#xBC94;&#xC704; &#xD558; &#xAC8C; &#xC2DC;&#xB0B4; MyD88-/-&#xC138;&#xD3EC; &#xBCF4;&#xB2E4; WT &#xB300; &#xC2DD; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAC10;&#xB9C8;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;, &#xAD11;&#xBC94;&#xC704; &#xD558; &#xAC8C;, &#xD480; &#xC2A4;&#xCF00;&#xC77C; IFN-&#xAC10;&#xB9C8; &#xC5EC; &#xB300; &#xC2DD; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xB294; MyD88 &#xD544;&#xC694;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC758; &#xBD84;&#xC11D; MyD88 &#xC911;&#xC7AC; &#xD734;&#xC2DD; &#xB300; &#xC2DD; &#xC138;&#xD3EC;&#xB294; &#xC885;&#xC591; &#xAD34; &#xC0AC; &#xC694;&#xC778;&#xC758; &#xB0AE;&#xC740; &#xC218;&#xC900;&#xC744; &#xC0DD;&#xC0B0; &#xD558; &#xC5EC; &#xC790;&#xCCB4;&#xB97C; &#xBABB;&#xC4F0;&#xAC8C; &#xD558;&#xB294; &#xACFC;&#xC815;&#xC744; &#xACF5;&#xAC1C; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC774; &#xBC0F; &#xB2E4;&#xB978; &#xC694;&#xC778; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC720;&#xB3C4; &#xB300; &#xD55C; synergizes&#xC640; IFN-&#xAC10;&#xB9C8; &#xD575; &#xC778;&#xC790; Kappab&#xC758; &#xAE30;&#xC800; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xC774;&#xC5B4;&#xC9C8;. &#xBC18;&#xBA74;, &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C;, &#xC545;&#xC131; &#xACB0;&#xD575;&#xADE0; (Mtb)&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xAC10;&#xC5FC; MyD88 &#xB3C5;&#xB9BD;&#xC801;&#xC778; &#xACBD;&#xB85C; &#xD1B5;&#xD574; &#xC8FC;&#xB85C; &#xB300; &#xC2DD; &#xC138;&#xD3EC; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xBC0F; &#xB300; &#xC2DD; &#xC138;&#xD3EC;&#xB294; MyD88 Mtb &#xCCB4; &#xC678;&#xB97C; &#xC8FD; &#xC77C; &#xD544;&#xC694; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC558;&#xB2E4;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;, MyD88 &#xB300; &#xC2DD; &#xC138;&#xD3EC;&#xB294; &#xC8FC;&#xB85C; &#xB2E4;&#xB978; &#xACBD;&#xB85C; &#xC758;&#xD574; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; &#xBBF8;&#xC0DD;&#xBB3C; &#xC790;&#xADF9;, &#xACB0;&#xD575;&#xADE0;, &#xC751;&#xB2F5;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xBC18;&#xBA74; IFN-&#xAC10;&#xB9C8;-&#xC885;&#xC18D; &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xB97C; &#xC9C0;&#xC6D0; &#xD558;&#xB294; &#xB300; &#xC2DD; &#xC138;&#xD3EC;&#xB97C; &#xD734;&#xC2DD;&#xC758; &#xB3D9;&#xC801; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xD55C;&#xB2E4;.

MyD88 &#xC778;&#xD130;&#xD398;&#xB860;-&#xAC10;&#xB9C8;, &#xBCF8;&#xACA9;&#xC801;&#xC778; &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xB97C; &#xC704;&#xD574; &#xB300; &#xC2DD; &#xC138;&#xD3EC;&#xB97C; &#xC18C;&#xC218; &#xC544;&#xC9C1; &#xACB0;&#xD575;&#xADE0;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBA87; &#xAC00;&#xC9C0; &#xC751;&#xB2F5;&#xC744; &#xC911;&#xC7AC; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Los macr&oacute;fagos son activados desde un estado de reposo por una combinaci&oacute;n de citocinas y productos microbianos. Microbios se detecta a menudo a trav&eacute;s de receptores Toll-like de se&ntilde;alizaci&oacute;n a trav&eacute;s de MyD88. Utilizamos microarrays a gran escala en m&uacute;ltiples experimentos repetidos seguidos por riguroso an&aacute;lisis estad&iacute;stico para comparar la expresi&oacute;n g&eacute;nica en wild-type (WT) y MyD88-/-macr&oacute;fagos. Confirmamos resultados claves por reacci&oacute;n en cadena de polimerasa cuantitativa transcripci&oacute;n inversa, Western blot y enzyme-linked immunosorbent assay. Sorprendentemente, muchos genes, como el &oacute;xido n&iacute;trico sintasa inducible, IRG-1, IP-10, MIG, RANTES e interleucina 6 fueron inducidos por el interfer&oacute;n (IFN)-gamma de 5 a 100 veces menos extensivamente en MyD88-/-macr&oacute;fagos que en macr&oacute;fagos WT. Por lo tanto, generalizada, a gran escala la activaci&oacute;n de los macr&oacute;fagos de IFN-gamma requiere MyD88. El an&aacute;lisis del mecanismo revel&oacute; que MyD88 interviene en un proceso de autocebante por que macr&oacute;fagos en reposo producen un bajo nivel de factor de necrosis tumoral. Esto y otros factores llevan a basal activaci&oacute;n del factor nuclear kappaB, que lista sinergiza con IFN-gamma para la inducci&oacute;n del gen. Por el contrario, infecci&oacute;n por vivo, virulento Mycobacterium tuberculosis (Mtb) activa macr&oacute;fagos en gran parte a trav&eacute;s de v&iacute;as de MyD88 independiente, y los macr&oacute;fagos no necesit&oacute; MyD88 matar Mtb in vitro. As&iacute;, MyD88 desempe&ntilde;a un papel din&aacute;mico en macr&oacute;fagos de reclinaci&oacute;n que apoya la activaci&oacute;n de IFN-gamma-dependiente, mientras que los macr&oacute;fagos pueden responder a un est&iacute;mulo microbiano complejo, el bacilo tuberculoso, principalmente por otras v&iacute;as.

MyD88 ceba los macr&oacute;fagos para la activaci&oacute;n a gran escala de interfer&oacute;n-gamma pero media pocas respuestas a Mycobacterium tuberculosis.

&#x7ED3;&#x6838;&#x5206;&#x679D;&#x6746;&#x83CC; (&#x5C71;&#x5730;) &#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x5728;&#x957F;&#x65F6;&#x95F4;&#x4ECD;&#x7136;&#x5B58;&#x5728;&#xFF0C;&#x5B83;&#x5FC5;&#x987B;&#x9002;&#x5E94;&#x4EE3;&#x8C22;&#x7684;&#x5C40;&#x9650;&#x6027;&#x548C;&#x6C27;&#x5316;/nitrosative &#x5E94;&#x529B;&#x3002;&#x4F46;&#x662F;&#xFF0C;&#x4E86;&#x89E3;&#x751A;&#x5C11;&#x5C71;&#x5730;&#x8F66;&#x7684;&#x4E2D;&#x95F4;&#x4EE3;&#x8C22;&#x6216;&#x6297;&#x6C27;&#x5316;&#x9632;&#x5FA1;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x6700;&#x8FD1;&#x53D1;&#x73B0;&#x4E86;&#x8FC7;&#x6C27;&#x4E9A;&#x785D;&#x9178;&#x76D0;&#x8FD8;&#x539F;&#x9176;-&#x8FC7;&#x6C27;&#x5316;&#x7269;&#x9176;&#x590D;&#x5408;&#x4F53;&#x5305;&#x62EC;&#x57FA;&#x56E0; sucB &#x548C; lpd&#xFF0C;&#x90FD;&#x6CE8;&#x660E;&#x8981;&#x7F16;&#x7801;&#x7684; dihydrolipoamide succinyltransferase (E2) &#x548C; &alpha;-&#x916E;&#x620A;&#x4E8C;&#x9178;&#x8131;&#x6C22;&#x9176; (KDH) lipoamide &#x8131;&#x6C22;&#x9176; (E3) &#x7EC4;&#x4EF6;&#x4EA7;&#x54C1;&#x7684;&#x5C71;&#x5730;&#x8F66;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x53EF;&#x4EE5;&#x68C0;&#x6D4B;&#x6CA1;&#x6709; KDH &#x6D3B;&#x52A8;&#x4E2D;&#x7ED3;&#x6838;&#x5206;&#x679D;&#x6746;&#x83CC;&#x88C2;&#x89E3;&#xFF0C;&#x4E5F;&#x53EF;&#x80FD;&#x6211;&#x4EEC;&#x91CD;&#x5EFA; KDH &#x7ED3;&#x5408; &middot; &#x82CF;&#x5361; &middot; &#xFF08;&#x6CE8;&#x91CA;&#x4E3A; KDH &#x7684; E1 &#x7EC4;&#x4EF6;&#xFF09;&#x3001; SucB &#x548C; Lpd &#x7684;&#x91CD;&#x7EC4;&#x86CB;&#x767D;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x56E0;&#x6B64;&#x6539;&#x540D;&#x4E3A; sucB &#x4EA7;&#x54C1; dihydrolipoamide &#x9170; (&#x8FDB;&#x884C;&#x4E86;&#xFF09;&#x3002;&#x7ED3;&#x6838;&#x5206;&#x679D;&#x6746;&#x83CC;&#x88C2;&#x89E3;&#x6240;&#x8F7D;&#x4E19;&#x916E;&#x9178;&#x76D0;&#x8131;&#x6C22;&#x9176; (PDH) &#x6D3B;&#x52A8;&#xFF0C;&#x8FDB;&#x884C;&#x4E86;&#x57FA;&#x56E0; &#xFF08;&#x4EE5;&#x524D;&#xFF0C;sucB) &#x53D7;&#x5230;&#x5E72;&#x6270;&#xFF0C;&#x53C8;&#x5931;&#x53BB;&#x4E86;&#x3002;&#x7EAF;&#x5316;&#x5C71;&#x5730;&#x8F66;&#x4ECE; PDH &#x4EA7;&#x751F; AceE&#xFF0C;&#x6CE8;&#x660E;&#x4F5C;&#x4E3A; E1 &#x5149;&#x7AEF;&#x673A;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x53CA;&#x8FDB;&#x884C;&#x4E86;&#x548C; Lpd &#x7684;&#x7EC4;&#x6210;&#x90E8;&#x5206;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x53CD;&#x8FDB;&#x884C;&#x4E86;&#x6297;&#x4F53; coimmunoprecipitated AceE&#x3002;&#x6700;&#x540E;&#xFF0C;&#x91CD;&#x7EC4; AceE&#x3001; &#x8FDB;&#x884C;&#x4E86;&#x548C; Lpd&#xFF0C;&#x867D;&#x7136;&#x7531;&#x5E7F;&#x6CDB;&#x5730;&#x5206;&#x6563;&#x5728;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x7F16;&#x7801;&#x6539;&#x7EC4; PDH &#x4F53;&#x5916;&#x5177;&#x6709;&#x5178;&#x578B;&#x7684;&#x7EC6;&#x83CC; PDH &#x914D;&#x5408;&#x516C;&#x91CC;&#x503C;&#x3002;&#x603B;&#x4E4B;&#xFF0C;&#x5C71;&#x5730;&#x8F66;&#x4F3C;&#x4E4E;&#x7F3A;&#x4E4F; KDH&#x3002;&#x76F8;&#x53CD;&#xFF0C;&#x8FDB;&#x884C;&#x4E86;&#x548C; Lpd &#x4E00;&#x8D77; AceE &#x6784;&#x6210;&#x5149;&#x7AEF;&#x673A;&#x3002;

&#x7ED3;&#x6838;&#x5206;&#x679D;&#x6746;&#x83CC;&#x4F3C;&#x4E4E;&#x7F3A;&#x4E4F; &alpha;-&#x916E;&#x620A;&#x4E8C;&#x9178;&#x8131;&#x6C22;&#x9176;&#x548C;&#x4E19;&#x916E;&#x9178;&#x76D0;&#x8131;&#x6C22;&#x9176;&#x4E2D;&#x5E7F;&#x6CDB;&#x5206;&#x79BB;&#x57FA;&#x56E0;&#x8FDB;&#x884C;&#x7F16;&#x7801;&#x3002;

Mycobacterium tuberculosis (Mtb) persists for prolonged periods in macrophages, where it must adapt to metabolic limitations and oxidative/nitrosative stress. However, little is known about Mtb's intermediary metabolism or antioxidant defences. We recently identified a peroxynitrite reductase-peroxidase complex in Mtb that included products of the genes sucB and lpd, which are annotated to encode the dihydrolipoamide succinyltransferase (E2) and lipoamide dehydrogenase (E3) components of alpha-ketoglutarate dehydrogenase (KDH). However, we could detect no KDH activity in Mtb lysates, nor could we reconstitute KDH by combining the recombinant proteins SucA (annotated as the E1 component of KDH), SucB and Lpd. We therefore renamed the sucB product dihydrolipoamide acyltransferase (DlaT). Mtb lysates contained pyruvate dehydrogenase (PDH) activity, which was lost when the dlaT gene (formerly, sucB) was disrupted. Purification of PDH from Mtb yielded AceE, annotated as an E1 component of PDH, along with DlaT and Lpd. Moreover, anti-DlaT antibody coimmunoprecipitated AceE. Finally, recombinant AceE, DlaT and Lpd, although encoded by genes that are widely separated on the chromosome, reconstituted PDH in vitro with Km values typical of bacterial PDH complexes. In sum, Mtb appears to lack KDH. Instead, DlaT and Lpd join with AceE to constitute PDH.

Mycobacterium tuberculosis appears to lack alpha-ketoglutarate dehydrogenase and encodes pyruvate dehydrogenase in widely separated genes.

Mycobacterium tuberculosis (Mtb) persiste pendant des p&eacute;riodes prolong&eacute;es dans les macrophages, o&ugrave; il doit s&#39;adapter aux limites m&eacute;taboliques et stress oxydatif/nitrosative. Cependant, on conna&icirc;t de Mtb m&eacute;tabolisme interm&eacute;diaire ou les d&eacute;fenses antioxydantes. R&eacute;cemment, nous avons identifi&eacute; un complexe de r&eacute;ductase-peroxydase peroxynitrite en VTT qui a inclus des produits des g&egrave;nes sucB et lpd, qui sont annot&eacute;s pour coder la dihydrolipoamide succinyltransferase (E2) et les composants de lipoamide d&eacute;shydrog&eacute;nase (E3) de l&#39;alpha-c&eacute;toglutarate d&eacute;shydrog&eacute;nase (KDH). Cependant, nous ne pouvons d&eacute;tecter aucune activit&eacute; KDH dans les lysats de Mtb, ni nous pourrions reconstituer KDH en combinant les prot&eacute;ines recombinantes SucA (annot&eacute; comme la composante E1 du KDH), SucB et Lpd. Nous avons donc renomm&eacute; la sucB produit dihydrolipoamide acyltransf&eacute;rase (DlaT). MTB lysats contenaient l&#39;activit&eacute; pyruvate d&eacute;shydrog&eacute;nase (PDH), qui a &eacute;t&eacute; perdue lorsque le g&egrave;ne dlaT (anciennement sucB) a &eacute;t&eacute; perturb&eacute;. Purification de la PDH de Mtb a donn&eacute; AceE, annot&eacute; comme &eacute;l&eacute;ment E1 du PDH, ainsi que DlaT et Lpd. En outre, coimmunoprecipitated d&#39;anticorps anti-DlaT AceE. Enfin, recombinant AceE, DlaT et Lpd, bien que cod&eacute;es par des g&egrave;nes qui sont largement s&eacute;par&eacute;s sur le chromosome, reconstitu&eacute; PDH in vitro avec des valeurs de Km typiques des complexes bact&eacute;riens de PDH. En somme, Mtb semble d&eacute;pourvue KDH. Au lieu de cela, DlaT et Lpd rejoignent AceE constituer PDH.

Mycobacterium tuberculosis semble d&eacute;pourvue d&#39;alpha-c&eacute;toglutarate d&eacute;shydrog&eacute;nase et encode la pyruvate d&eacute;shydrog&eacute;nase dans les g&egrave;nes tr&egrave;s distanc&eacute;es.

Mycobacterium tuberculosis scheint Mangel Alpha-Ketoglutarat-Dehydrogenase und Pyruvat-Dehydrogenase kodiert in weit auseinander liegenden Gene.

Mycobacterium tuberculosis (Mtb) persiste per periodi prolungati nei macrofagi, dove esso deve adattarsi alle limitazioni metaboliche e lo stress ossidativo/A&beta;. Tuttavia, poco si sa circa il metabolismo intermedio di Mtb o le difese antiossidanti. Abbiamo recentemente identificato un complesso reduttasi-perossidasi perossinitrito in Mtb che comprendeva prodotti dei geni sucB e lpd, che vengono annotati per codificare la Diidrolipoamide succiniltransferasi (E2) e componenti di lipoamide deidrogenasi (E3) di alfa-chetoglutarato deidrogenasi (KDH). Tuttavia, noi non potremmo rilevare alcuna attivit&agrave; KDH in Mtb lisati, n&eacute; possiamo ricostituire KDH combinando le proteine ricombinanti SucA (annotata come componente del KDH E1), SucB e Lpd. Abbiamo quindi rinominato il sucB prodotto Diidrolipoamide aciltransferasi (DlaT). MTB lysates contenute piruvato deidrogenasi (PDH) attivit&agrave;, che &egrave; stato persa quando il gene dlaT (ex sucB) &egrave; stato interrotto. Purificazione di PDH da Mtb ha reso AceE, annotato come componente E1 di PDH, insieme a DlaT e Lpd. Inoltre, anti-DlaT anticorpo coimmunoprecipitated AceE. Infine, ricombinante AceE, DlaT e Lpd, anche se codificate da geni che sono ampiamente separati sul cromosoma, ricostituito in vitro con valori Km tipici dei complessi PDH batteriche PDH. In somma, Mtb sembra mancanza KDH. Invece, DlaT e Lpd unirsi con AceE a costituire PDH.

Mycobacterium tuberculosis viene visualizzata per la mancanza di alfa-chetoglutarato deidrogenasi e codifica piruvato deidrogenasi nei geni ampiamente separati.

&#x7D50;&#x6838;&#x83CC; (&#x30DE;&#x30A6;&#x30F3;&#x30C6;&#x30F3; &#x30D0;&#x30A4;&#x30AF;) &#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x3001;&#x9577;&#x6642;&#x9593;&#x7D9A;&#x304F;&#x305D;&#x308C;&#x306F;&#x4EE3;&#x8B1D;&#x306E;&#x5236;&#x9650;&#x3068; nitrosative/&#x9178;&#x5316;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EC;&#x30B9;&#x3092;&#x9069;&#x5FDC;&#x3059;&#x308B;&#x5FC5;&#x8981;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x5C11;&#x3057; Mtb &#x306E;&#x4E2D;&#x9593;&#x4EE3;&#x8B1D;&#x3084;&#x6297;&#x9178;&#x5316;&#x9632;&#x5FA1;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x6700;&#x8FD1;&#x3001;&#x30D1;&#x30FC;&#x30AA;&#x30AD;&#x30B7; &#x30CA;&#x30A4;&#x30C8; &#x30E9;&#x30A4;&#x30C8;&#x306E;&#x9084;&#x5143;&#x9175;&#x7D20;&#x30DA;&#x30EB;&#x30AA;&#x30AD;&#x30B7;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC;&#x8907;&#x96D1;&#x306A;&#x88FD;&#x54C1;&#x5C55;&#x958B;&#x3092;&#x3081;&#x3056;&#x3057;&#x3066;&#x30B8;&#x30D2;&#x30C9;&#x30ED;&#x30EA;&#x30DD;&#x30A2;&#x30DF;&#x30C9; (E2) &#x3068; &alpha;-&#x30B1;&#x30C8;&#x30B0;&#x30EB;&#x30BF;&#x30EB;&#x9178;&#x8131;&#x6C34;&#x7D20;&#x9175;&#x7D20; (KDH) &#x30EA;&#x30DD; &#x30C7;&#x30D2;&#x30C9;&#x30ED;&#x30B2;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC; (E3) &#x30B3;&#x30F3;&#x30DD;&#x30FC;&#x30CD;&#x30F3;&#x30C8;&#x3092;&#x30A8;&#x30F3;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x3059;&#x308B;&#x6CE8;&#x91C8;&#x4ED8;&#x304D;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50; sucB &#x3068; lpd&#x3001;&#x542B;&#x307E;&#x308C;&#x3066; Mtb &#x3067;&#x8B58;&#x5225;&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x6211;&#x3005; KDH &#x6D3B;&#x52D5; Mtb lysates &#x3067;&#x691C;&#x51FA;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x306A;&#x3044;&#x3082;&#x6211;&#x3005; KDH &#x7D44;&#x63DB;&#x3048;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA; (KDH &#x306E; E1 &#x30B3;&#x30F3;&#x30DD;&#x30FC;&#x30CD;&#x30F3;&#x30C8;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x6CE8;&#x91C8;&#x4ED8;&#x304D;&#xFF09; SucA&#x3001;SucB&#x3001;Lpd &#x3092;&#x7D44;&#x307F;&#x5408;&#x308F;&#x305B;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x518D;&#x69CB;&#x6210;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3067;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066; sucB &#x88FD;&#x54C1;&#x5C55;&#x958B;&#x3092;&#x3081;&#x3056;&#x3057;&#x3066;&#x30EC;&#x30B7;&#x30C1;&#x30F3;&#x30B3;&#x30EC;&#x30B9;&#x30C6;&#x30ED;&#x30FC;&#x30EB;&#x30A2;&#x30B7;&#x30EB;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A7;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC; (DlaT) &#x306B;&#x6539;&#x79F0;Mtb lysates &#x306B;&#x306F; dlaT &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50; (&#x65E7; sucB) &#x304C;&#x4E2D;&#x65AD;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3068;&#x304D;&#x306B;&#x5931;&#x308F;&#x308C;&#x305F;&#x30D4;&#x30EB;&#x30D3;&#x30F3;&#x9178;&#x30C7;&#x30D2;&#x30C9;&#x30ED;&#x30B2;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC; (PDH) &#x306E;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D3;&#x30C6;&#x30A3;&#x304C;&#x542B;&#x307E;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;PDH Mtb &#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x7CBE;&#x88FD; DlaT &#x3068; Lpd &#x3068;&#x4E00;&#x7DD2;&#x306B; PDH &#x306E; E1 &#x30B3;&#x30F3;&#x30DD;&#x30FC;&#x30CD;&#x30F3;&#x30C8;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x6CE8;&#x91C8; AceE &#x5C48;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x307E;&#x305F;, &#x6297; DlaT &#x6297;&#x4F53; coimmunoprecipitated AceE&#x3002;&#x6700;&#x5F8C;&#x306B;&#x3001;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048;&#x306E; AceE&#x3001;DlaT &#x3068; Lpd &#x306F;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x4E0A;&#x5E83;&#x304F;&#x533A;&#x5207;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x30A8;&#x30F3;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x304C; PDH &#x4F53;&#x5916;&#x7D30;&#x83CC;&#x306E; PDH &#x932F;&#x4F53;&#x306E;&#x5178;&#x578B;&#x7684;&#x306A;&#x306E; Km &#x5024;&#x3092;&#x518D;&#x69CB;&#x6210;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x5408;&#x8A08;&#x3067;&#x306F;&#x3001;Mtb KDH &#x4E0D;&#x8DB3;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x304C;&#x8868;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x4EE3;&#x308F;&#x308A;&#x306B;&#x3001;DlaT &#x3068; Lpd AceE &#x306E; PDH &#x3092;&#x69CB;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x53C2;&#x52A0;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x7D50;&#x6838;&#x83CC;&#x306F; &alpha;-&#x30B1;&#x30C8;&#x30B0;&#x30EB;&#x30BF;&#x30EB;&#x9178;&#x30C7;&#x30D2;&#x30C9;&#x30ED;&#x30B2;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x4E0D;&#x8DB3;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x8868;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x5E83;&#x304F;&#x533A;&#x5207;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x30D4;&#x30EB;&#x30D3;&#x30F3;&#x9178;&#x8131;&#x6C34;&#x7D20;&#x9175;&#x7D20;&#x3092;&#x30A8;&#x30F3;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xACB0;&#xD575;&#xADE0; (Mtb) &#xB300;&#xC0AC; &#xD55C;&#xACC4;&#xC640; &#xC0B0;&#xD654;/nitrosative &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xC801;&#xC751; &#xD574;&#xC57C; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xC5B4;&#xB514; &#xB300; &#xC2DD; &#xC138;&#xD3EC;, &#xC5F0;&#xC7A5;&#xB41C; &#xAE30;&#xAC04; &#xB3D9;&#xC548; &#xC9C0;&#xC18D; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xC791;&#xC740; Mtb&#xC758; &#xC911;&#xAC04; &#xB300;&#xC0AC; &#xB610;&#xB294; &#xD56D; &#xC0B0;&#xD654; &#xBC29;&#xC5B4;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC54C;&#xB824;&#xC838; &#xC788;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xCD5C;&#xADFC; &#xC720;&#xC804;&#xC790; sucB &#xBC0F; lpd, dihydrolipoamide succinyltransferase (E2)&#xC640; &#xC54C;&#xD30C; ketoglutarate &#xD6A8;&#xC18C; (KDH)&#xC758; lipoamide &#xD6A8;&#xC18C; (E3) &#xAD6C;&#xC131; &#xC694;&#xC18C;&#xB97C; &#xC778;&#xCF54;&#xB529;&#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xC8FC;&#xC11D; &#xC81C;&#xD488;&#xC744; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558;&#xB294; Mtb&#xC5D0;&#xC11C; peroxynitrite reductase &#xACFC;&#xC0B0;&#xD654; &#xD6A8;&#xC18C; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; &#xD655;&#xC778;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098; &#xC6B0;&#xB9AC; Mtb lysates&#xC5D0;&#xC11C; &#xC544;&#xBB34; KDH &#xD65C;&#xB3D9;&#xC744; &#xAC10;&#xC9C0;&#xD560; &#xC218; &#xC5C6;&#xC73C;&#xBA70; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; KDH SucA (KDH&#xC758; E1 &#xCEF4;&#xD3EC;&#xB10C;&#xD2B8;&#xB85C; &#xC8FC;&#xC11D;), SucB &#xBC0F; Lpd &#xC7AC;&#xC870;&#xD569; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC744; &#xACB0;&#xD569; &#xD558; &#xC5EC; &#xC7AC;&#xAD6C;&#xC131;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; sucB &#xC81C;&#xD488; dihydrolipoamide acyltransferase (DlaT) &#xC774;&#xB984;&#xC744; &#xBCC0;&#xACBD; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. Mtb lysates dlaT &#xC720;&#xC804;&#xC790; (&#xC774;&#xC804;, sucB)&#xB294; &#xC911;&#xB2E8; &#xB420; &#xB54C; &#xC190;&#xC2E4; &#xB41C; pyruvate &#xD6A8;&#xC18C; (PDH) &#xD65C;&#xB3D9;&#xC744; &#xD3EC;&#xD568;. Mtb&#xC5D0;&#xC11C; PDH &#xC815;&#xD654; AceE, PDH, DlaT &#xBC0F; Lpd&#xC758; E1 &#xCEF4;&#xD3EC;&#xB10C;&#xD2B8;&#xB85C; &#xC8FC;&#xC11D;&#xC774; &#xCD94;&#xAC00; &#xB41C;&#xC774; &#xB098;&#xC654;&#xACE0;. &#xB610;&#xD55C;, &#xC548;&#xD2F0;-DlaT &#xD56D; &#xCCB4; coimmunoprecipitated AceE. &#xB9C8;&#xC9C0;&#xB9C9;&#xC73C;&#xB85C;, &#xC7AC;&#xC870;&#xD569; AceE, DlaT &#xBC0F; Lpd, &#xC5FC;&#xC0C9;&#xCCB4;, &#xB110;&#xB9AC; &#xBD84;&#xB9AC; &#xB41C; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xBD80;&#xD638;&#xD654; &#xBE44;&#xB85D; &#xC7AC;&#xAD6C;&#xC131; PDH Km &#xAC12;&#xC774; &#xC804;&#xD615;&#xC801;&#xC778; &#xC138;&#xADE0;&#xC131; PDH &#xB2E8;&#xC9C0;&#xC758; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC678;&#xC5D0;&#xC11C;. &#xC694;&#xCEE8;&#xB300;, Mtb KDH &#xBD80;&#xC871;&#xC73C;&#xB85C; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0A9;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB300;&#xC2E0;, DlaT &#xBC0F; Lpd AceE PDH&#xB97C; &#xAD6C;&#xC131; &#xD558;&#xB294; &#xD568;&#xAED8; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xACB0;&#xD575;&#xADE0; &#xC54C;&#xD30C; ketoglutarate &#xD6A8;&#xC18C; &#xBD80;&#xC871;&#xC73C;&#xB85C; &#xB098;&#xD0C0;&#xB098;&#xACE0; &#xB110;&#xB9AC; &#xBD84;&#xB9AC; &#xB41C; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC5D0; pyruvate &#xD6A8;&#xC18C;&#xB97C; &#xC778;&#xCF54;&#xB529;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Mycobacterium tuberculosis (Mtb) persiste por per&iacute;odos prolongados en macr&oacute;fagos, donde deben adaptarse a las limitaciones metab&oacute;licas y estr&eacute;s oxidativo/nitrosativo. Sin embargo, poco se sabe sobre el metabolismo intermediario o las defensas antioxidantes de Mtb. Recientemente se identificaron un conjunto de reductasa-peroxidasa de peroxinitrito en Mtb que incluye productos de los genes sucB y lpd, anotados para codificar la Dihidrolipoil succiniltransferasa (E2) y componentes de deshidrogenasa (E3) Lipoamida de alfa-cetoglutarato deshidrogenasa (KDH). Sin embargo, no pudimos detectar ninguna actividad KDH en lisados de Mtb, ni podemos reconstituir KDH combinando las prote&iacute;nas recombinantes SucA (anotado como el componente E1 del KDH), SucB y Lpd. Por lo tanto nos hab&iacute;an retitulado el sucB producto Dihidrolipoil Aciltransferasa (DlaT). MTB lisados contienen actividad de piruvato deshidrogenasa (PDH), que se perdi&oacute; cuando se interrumpi&oacute; el gen dlaT (anteriormente, sucB). Purificaci&oacute;n de PDH de Mtb rindi&oacute; a AceE, anotado como un componente E1 de la PDH, junto con DlaT y Lpd. Por otra parte, coinmunoprecipit&oacute; de anticuerpos anti-DlaT AceE. Finalmente, recombinante AceE, DlaT y Lpd, aunque codificadas por los genes que est&aacute;n muy separados en el cromosoma, reconstituyen in vitro con valores de Km t&iacute;picos de complejos PDH bacterianas de la PDH. En suma, Mtb parece falta KDH. En cambio, DlaT y Lpd se unen a AceE para constituir la PDH.

Mycobacterium tuberculosis parece carecer de alfa-cetoglutarato deshidrogenasa y codifica piruvato deshidrogenasa en genes ampliamente separados.

Macrophages respond to several subcellular products of Mycobacterium tuberculosis (Mtb) through TLR2 or TLR4. However, primary mouse macrophages respond to viable, virulent Mtb by pathways largely independent of MyD88, the common adaptor molecule for TLRs. Using microarrays, quantitative PCR, and ELISA with gene-disrupted macrophages and mice, we now show that viable Mtb elicits the expression of inducible NO synthase, RANTES, IFN-inducible protein 10, immune-responsive gene 1, and many other key genes in macrophages substantially independently of TLR2, TLR4, their combination, or the TLR adaptors Toll-IL-1R domain-containing adapter protein and Toll-IL-1R domain-containing adapter inducing IFN-beta. Mice deficient in both TLR2 and TLR4 handle aerosol infection with viable Mtb as well as congenic controls. Viable Mtb also up-regulates inducible NO synthase, RANTES, IFN-inducible protein 10, and IRG1 in macrophages that lack mannose receptor, complement receptors 3 and 4, type A scavenger receptor, or CD40. These MyD88, TLR2/4-independent transcriptional responses require IFN-alphabetaR and STAT1, but not IFN-gamma. Conversely, those genes whose expression is MyD88 dependent do not depend on IFN-alphabetaR or STAT1. Transcriptional induction of TNF is TLR2/4, MyD88, STAT1, and IFN-alphabetaR independent, but TNF protein release requires the TLR2/4-MyD88 pathway. Thus, macrophages respond transcriptionally to viable Mtb through at least three pathways. TLR2 mediates the responses of a numerically minor set of genes that collectively do not appear to affect the course of infection in mice; regulation of TNF requires TLR2/4 for post-transcriptional control, but not for transcriptional induction; and many responding genes are regulated through an unknown, TLR2/4-independent pathway that may involve IFN-alphabetaR and STAT1.

Expression of many immunologically important genes in Mycobacterium tuberculosis-infected macrophages is independent of both TLR2 and TLR4 but dependent on IFN-alphabeta receptor and STAT1.

&#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5BF9;&#x51E0;&#x79CD;&#x4E9A;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4EA7;&#x54C1;&#x901A;&#x8FC7; TLR2 &#x6216; TLR4 &#x7684;&#x7ED3;&#x6838;&#x5206;&#x679D;&#x6746;&#x83CC; &#xFF08;&#x5C71;&#x5730;&#x8F66;&#xFF09; &#x4F5C;&#x51FA;&#x54CD;&#x5E94;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x4E3B;&#x5C0F;&#x9F20;&#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x901A;&#x8DEF;&#x5F88;&#x5927;&#x7A0B;&#x5EA6;&#x4E0A;&#x72EC;&#x7ACB;&#x4E8E; MyD88&#xFF0C;&#x901A;&#x8FC7;&#x54CD;&#x5E94;&#x53EF;&#x884C;&#x7684;&#x3001; &#x6076;&#x6BD2;&#x7684;&#x5C71;&#x5730;&#x8F66;&#x5171;&#x540C;&#x4E3A; TLRs&#x3002; &#x4F7F;&#x7528;&#x82AF;&#x7247;&#x3001; &#x5B9A;&#x91CF; PCR &#x548C;&#x9176;&#x8054;&#x514D;&#x75AB;&#x5438;&#x9644;&#x6CD5;&#x4E0E;&#x57FA;&#x56E0;&#x7834;&#x574F;&#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x548C;&#x5C0F;&#x9F20;&#x9002;&#x914D;&#x5668;&#x5206;&#x5B50;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x73B0;&#x5728;&#x663E;&#x793A;&#x53EF;&#x884C;&#x7684;&#x7ED3;&#x6838;&#x5206;&#x679D;&#x6746;&#x83CC;&#x5F15;&#x8D77;&#x7684;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x8868;&#x8FBE;&#xFF0C;&#x6C27;&#x5316;&#x6C2E;&#x5408;&#x9176;&#x3001; RANTES&#x3001; &#x5E72;&#x6270;&#x7D20;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x86CB;&#x767D; 10&#x3001; &#x514D;&#x75AB;&#x53CD;&#x5E94;&#x57FA;&#x56E0; 1 &#x548C;&#x5176;&#x4ED6;&#x8BB8;&#x591A;&#x5173;&#x952E;&#x57FA;&#x56E0;&#x5728;&#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5927;&#x91CF;&#x72EC;&#x7ACB; TLR2TLR4&#x3001; &#x5176;&#x7EC4;&#x5408;&#xFF0C;&#x6216;&#x5355;&#x53CD;&#x9002;&#x914D;&#x5668;&#x6536;&#x8D39;-IL-1R &#x57DF;&#x5305;&#x542B;&#x9002;&#x914D;&#x5668;&#x86CB;&#x767D;&#x548C;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x5E72;&#x6270;&#x7D20; &beta; &#x7684;&#x6536;&#x8D39;-IL-1R &#x57DF;&#x5305;&#x542B;&#x9002;&#x914D;&#x5668;&#x3002;&#x5C0F;&#x9F20;&#x7F3A;&#x4E4F; TLR2 &#x548C; TLR4 &#x5904;&#x7406;&#x6C14;&#x6EB6;&#x80F6;&#x611F;&#x67D3;&#x4E0E;&#x53EF;&#x884C;&#x7684;&#x5C71;&#x5730;&#x8F66;&#x4EE5;&#x53CA;&#x540C;&#x7C7B;&#x63A7;&#x4EF6;&#x3002;&#x53EF;&#x884C;&#x7684;&#x5C71;&#x5730;&#x8F66;&#x4E5F;&#x5411;&#x4E0A;-&#x8C03;&#x8282;&#x8BF1;&#x5BFC; NO &#x5408;&#x9176;&#x3001; RANTES&#x3001; &#x5E72;&#x6270;&#x7D20;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x86CB;&#x767D; 10&#x3001; &#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x7F3A;&#x4E4F;&#x7518;&#x9732;&#x7CD6;&#x53D7;&#x4F53;&#xFF0C;&#x8865;&#x4F53;&#x53D7;&#x4F53; 3 &#x548C; 4&#xFF0C;IRG1 &#x7C7B;&#x578B;&#x6E05;&#x9053;&#x592B;&#x53D7;&#x4F53;&#x6216; CD40&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B; MyD88 TLR2 4 &#x65E0;&#x5173;&#x8F6C;&#x5F55;&#x53CD;&#x5E94;&#x9700;&#x8981;&#x5E72;&#x6270;&#x7D20; alphabetaR &#x548C; STAT1&#xFF0C;&#x4F46;&#x4E0D;&#x662F;&#x5E72;&#x6270;&#x7D20; &gamma;&#x3002;&#x76F8;&#x53CD;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x662F; MyD88 &#x4F9D;&#x8D56;&#x4E0D;&#x4F9D;&#x8D56;&#x5E72;&#x6270;&#x7D20; alphabetaR &#x6216; STAT1&#x3002;&#x8F6C;&#x5F55;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x80BF;&#x7624;&#x574F;&#x6B7B;&#x56E0;&#x5B50;&#x662F;&#x72EC;&#x7ACB;&#x4E8E; TLR2/4&#x3001; MyD88&#x3001; STAT1 &#x548C;&#x5E72;&#x6270;&#x7D20; alphabetaR&#xFF0C;&#x4F46;&#x80BF;&#x7624;&#x574F;&#x6B7B;&#x56E0;&#x5B50;&#x86CB;&#x767D;&#x91CA;&#x653E;&#x9700;&#x8981; TLR2/4-MyD88 &#x901A;&#x8DEF;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x56DE;&#x5E94;&#x53EF;&#x884C;&#x5C71;&#x5730;&#x8F66;&#x81F3;&#x5C11;&#x4E09;&#x4E2A;&#x9014;&#x5F84;&#x3002;TLR2 &#x4ECB;&#x5BFC;&#x4E00;&#x6574;&#x5957;&#x6570;&#x5B57;&#x8F7B;&#x5FAE;&#x7684;&#x96C6;&#x4F53;&#x4E0D;&#x51FA;&#x73B0;&#x5F71;&#x54CD;&#x611F;&#x67D3;&#x7684;&#x5C0F;&#x9F20; &#xFF1B; &#x8BFE;&#x7A0B;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x53CD;&#x5E94;&#x80BF;&#x7624;&#x574F;&#x6B7B;&#x56E0;&#x5B50;&#x7684;&#x8C03;&#x8282;&#x9700;&#x8981; TLR2/4 &#x4E3A;&#x8F6C;&#x5F55;&#x63A7;&#x5236;&#xFF0C;&#x800C;&#x4E0D;&#x662F;&#x8F6C;&#x5F55;&#x4E0A;&#x5C97; &#xFF1B;&#x548C;&#x8BB8;&#x591A;&#x54CD;&#x5E94;&#x57FA;&#x56E0;&#x53D7;&#x9014;&#x5F84;&#x672A;&#x77E5;&#xFF0C;TLR2 4 &#x65E0;&#x5173;&#xFF0C;&#x53EF;&#x80FD;&#x6D89;&#x53CA;&#x5E72;&#x6270;&#x7D20; alphabetaR &#x548C; STAT1&#x3002;

&#x7ED3;&#x6838;&#x5206;&#x679D;&#x6746;&#x83CC;&#x611F;&#x67D3;&#x7ED3;&#x6838;&#x75C5;&#x7684;&#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x8BB8;&#x591A;&#x91CD;&#x8981;&#x514D;&#x75AB;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x662F;&#x72EC;&#x7ACB;&#x4E8E; TLR2 &#x548C; TLR4 &#x4F46;&#x4F9D;&#x8D56;&#x5E72;&#x6270;&#x7D20; alphabeta &#x53D7;&#x4F53;&#x548C; STAT1&#x3002;

Macrophages r&eacute;pondent &agrave; plusieurs produits subcellulaires de Mycobacterium tuberculosis (Mtb) par le biais de TLR2 ou TLR4. Cependant, les macrophages de souris primaire r&eacute;pondent &agrave; Mtb viable, particuli&egrave;rement virulente, par voies largement ind&eacute;pendantes de MyD88, la mol&eacute;cule commune d&#39;adaptateur pour TLR. &agrave; l&#39;aide de puces &agrave; ADN, PCR quantitative et ELISA avec g&egrave;ne-perturb&eacute; des macrophages et des souris, nous maintenant montrer que viable Mtb suscite l&#39;expression inductible de la NO synthase, RANTES, IFN-inducible prot&eacute;ine 10 immunitaire-responsive gene 1 et plusieurs autres g&egrave;nes cl&eacute;s dans les macrophages substantiellement ind&eacute;pendamment TLR2TLR4, leur combinaison, ou TLR adaptateurs Toll-IL-1R contenant du domaine adaptateur prot&eacute;ines et Toll-IL-1R contenant du domaine adaptateur induction IFN-b&ecirc;ta. Souris d&eacute;ficientes TLR2 et TLR4 g&eacute;rer infection a&eacute;rosol avec Mtb viable ainsi que les contr&ocirc;les cong&eacute;niques. Mtb viable aussi haut-r&eacute;glemente non inductible synthase, RANTES, IFN-inducible prot&eacute;ine 10 et IRG1 dans les macrophages qui manquent de r&eacute;cepteur du mannose, r&eacute;cepteurs du compl&eacute;ment 3 et 4, tapez un r&eacute;cepteur scavenger ou CD40. Ces MyD88, r&eacute;ponses transcriptionnelles TLR2/4-ind&eacute;pendantes exigent IFN-alphabetaR et STAT1, mais pas de IFN-gamma. &Agrave; l&#39;inverse, ces g&egrave;nes dont l&#39;expression est MyD88 d&eacute;pendant ne d&eacute;pendent pas IFN-alphabetaR ou STAT1. Induction transcriptionnelle de TNF est ind&eacute;pendant de la TLR2/4 MyD88, STAT1 et IFN-alphabetaR, mais la lib&eacute;ration de prot&eacute;ines TNF n&eacute;cessite la voie TLR2/4-MyD88. Ainsi, macrophages r&eacute;pondent transcriptionally &agrave; Mtb viable par au moins trois voies. TLR2 intervient dans les r&eacute;actions d&#39;un num&eacute;riquement mineur ensemble de g&egrave;nes qui, collectivement, ne semblent pas influer sur le cours de l&#39;infection chez la souris ; le r&egrave;glement du TNF obligation TLR2/4 pour contr&ocirc;le post-transcriptionnel, mais pas pour l&#39;induction de la transcription ; et de nombreux g&egrave;nes ayant r&eacute;pondu au questionnaire sont r&eacute;gis par une inconnu, voie TLR2/4-ind&eacute;pendante pouvant impliquer IFN-alphabetaR et STAT1.

Expression de nombreux g&egrave;nes immunologiquement importants dans les macrophages infect&eacute;s par la tuberculose Mycobacterium est ind&eacute;pendante des TLR2 et TLR4 mais d&eacute;pendent de l&#39;IFN-alphabeta r&eacute;cepteur et STAT1.

Die Expression von vielen immunologisch wichtigen Genen in Mycobacterium tuberculosis-infizierten Makrophagen ist unabh&#xE4;ngig sowohl von TLR2 und TLR4, sondern abh&#xE4;ngig von IFN-Rezeptor alphabeta und STAT1.

Macrofagi rispondono a diversi prodotti sottocellulare di Mycobacterium tuberculosis (Mtb) attraverso TLR2 o TLR4. Tuttavia, macrofagi principale del mouse rispondono alle Mtb vitali, virulento da percorsi in gran parte indipendente di MyD88, la molecola comune adattatore per TLR. usando i microarrays, la PCR quantitativa ed ELISA con gene perturbato macrofagi e topi, ora mostriamo che Mtb vitali induce l&#39;espressione di inducibile NO sintasi, RANTES, IFN-inducible protein 10, immunitario-reattiva gene 1 e molti altri geni chiave nei macrofagi sostanzialmente indipendentemente dal TLR2TLR4, loro combinazione, o il TLR adattatori pedaggio-IL-1R dominio contenenti adattatore proteine e pedaggio-IL-1R dominio contenenti adattatore induzione di IFN-beta. Topi carenti di entrambi TLR2 e TLR4 gestiscono infezione aerosol con Mtb valida come pure congenici controlli. Mtb praticabile anche up-regola inducible NO sintasi, RANTES, IFN-inducible protein 10 e IRG1 in macrofagi che la mancanza del recettore di mannosio, recettori del complemento, 3 e 4, tipo un recettore scavenger o CD40. Questi MyD88, risposte di transcriptional TLR2/4-indipendente richiedono IFN-alphabetaR e STAT1, ma non IFN-gamma. Al contrario, quei geni cui espressione &egrave; MyD88 dipendente non dipendono da IFN-alphabetaR o STAT1. Induzione trascrizionale di TNF &egrave; TLR2/4, MyD88, STAT1 e IFN-alphabetaR indipendente, ma rilascio TNF proteina richiede il pathway TLR2/4-MyD88. Quindi, macrofagi transcriptionally rispondono al Mtb vitali attraverso almeno tre vie. TLR2 da intermediario le risposte di un insieme numericamente minore di geni che collettivamente non sembrano influenzare il decorso dell&#39;infezione nei topi; regolamento del TNF richiede TLR2/4 controllo posttrascrizionale, ma non per induzione trascrizionale; e molti geni risponde sono regolati attraverso un pathway TLR2/4-indipendente sconosciuto, che pu&ograve; comportare IFN-alphabetaR e STAT1.

Espressione di molti geni immunologicamente importante nei macrofagi infetti da tubercolosi Mycobacterium &egrave; indipendente sia TLR2 e TLR4, ma dipende dal recettore IFN-Alfabeta e STAT1.

&#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x306F;&#x7D50;&#x6838; (&#x30DE;&#x30A6;&#x30F3;&#x30C6;&#x30F3; &#x30D0;&#x30A4;&#x30AF;) TLR2 &#x307E;&#x305F;&#x306F; TLR4 &#x3092;&#x901A;&#x3058;&#x3066;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x88FD;&#x54C1;&#x306B;&#x5BFE;&#x5FDC;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x305F;&#x3060;&#x3057;&#x3001;&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30DE;&#x30EA; &#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x306B;&#x5B9F;&#x884C;&#x53EF;&#x80FD;&#x306A;&#x5287;&#x6BD2;&#x6027;&#x306E; Mtb MyD88 &#x306E;&#x5927;&#x90E8;&#x5206;&#x304C;&#x72EC;&#x7ACB;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5FDC;&#x7B54;&#x5171;&#x901A;&#x30A2;&#x30C0;&#x30D7;&#x30BF;&#x30FC;&#x5206;&#x5B50;&#x306E; Tlr&#x3002; &#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED; &#x30A2;&#x30EC;&#x30A4;&#x3001;&#x5B9A;&#x91CF;&#x7684; PCR &#x304A;&#x3088;&#x3073; ELISA &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x7834;&#x58CA;&#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x3068;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x6211;&#x3005; &#x4ECA;&#x5B9F;&#x884C;&#x53EF;&#x80FD;&#x306A; Mtb &#x304C; NO &#x5408;&#x6210;&#x9175;&#x7D20;&#x3001;RANTES&#x3001;&#x30A4;&#x30F3;&#x30BF;&#x30FC;&#x30D5;&#x30A7;&#x30ED;&#x30F3;&#x8A98;&#x5C0E;&#x6027;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA; 10, &#x514D;&#x75AB;&#x5FDC;&#x7B54;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50; 1 &#x3068;&#x4ED6;&#x306E;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x4E3B;&#x8981;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50; TLR2 &#x3068;&#x306F;&#x72EC;&#x7ACB;&#x3057;&#x3066;&#x5B9F;&#x8CEA;&#x7684;&#x306B;&#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x306E;&#x8A98;&#x5F15;&#x53EF;&#x80FD;&#x306A;&#x8868;&#x73FE;&#x3092;&#x5F15;&#x304D;&#x51FA;&#x3059;&#x8868;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3001;TLR4&#x3001;&#x5F7C;&#x3089;&#x306E;&#x7D44;&#x307F;&#x5408;&#x308F;&#x305B;&#x307E;&#x305F;&#x306F; TLR &#x30A2;&#x30C0;&#x30D7;&#x30BF;&#x30FC; &#x30D5;&#x30EA;&#x30FC; &#x30C0;&#x30A4;&#x30E4;&#x30EB;-IL-1R &#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x30A2;&#x30C0;&#x30D7;&#x30BF;&#x30FC;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30D5;&#x30EA;&#x30FC; &#x30C0;&#x30A4;&#x30E4;&#x30EB;-IL-1R &#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x30A2;&#x30C0;&#x30D7;&#x30BF;&#x30FC;&#x306E; IFN &#x30D9;&#x30FC;&#x30BF;&#x3092;&#x8A98;&#x767A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;TLR2 &#x304A;&#x3088;&#x3073; TLR4 &#x306E;&#x6B20;&#x640D;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9; &#x30A8;&#x30A2;&#x30ED;&#x30BE;&#x30EB;&#x611F;&#x67D3;&#x30B3;&#x30F3;&#x30B8;&#x30A7;&#x30CB;&#x30C3;&#x30AF; &#x30B3;&#x30F3;&#x30C8;&#x30ED;&#x30FC;&#x30EB;&#x3068;&#x540C;&#x69D8;&#x306B;&#x5B9F;&#x884C;&#x53EF;&#x80FD;&#x306A; Mtb &#x3092;&#x51E6;&#x7406;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5B9F;&#x884C;&#x53EF;&#x80FD;&#x306A; Mtb &#x3082;&#x30A2;&#x30C3;&#x30D7;-&#x898F;&#x5236;&#x8A98;&#x5C0E;&#x578B; NO &#x5408;&#x6210;&#x9175;&#x7D20;&#x3001;RANTES, IFN &#x8A98;&#x5C0E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF; 10&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073; IRG1 &#x30DE;&#x30F3;&#x30CE;&#x30FC;&#x30B9;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;, &#x88DC;&#x4F53;&#x30EC;&#x30BB;&#x30D7;&#x30BF;&#x30FC; 3 &#x3068; 4 &#x3092;&#x6B20;&#x3044;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x306E;&#x5165;&#x529B;&#x306F;&#x30B9;&#x30AB;&#x30D9;&#x30F3; &#x30B8;&#x30E3;&#x30FC;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x307E;&#x305F;&#x306F; CD40&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089; MyD88 TLR2/4-&#x72EC;&#x7ACB;&#x8EE2;&#x5199;&#x5FDC;&#x7B54; IFN alphabetaR &#x3068; STAT1&#x3001;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x306A;&#x3044; IFN-&gamma; &#x304C;&#x5FC5;&#x8981;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x9006;&#x306B;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3092;&#x6301;&#x3064;&#x5F0F; MyD88 &#x4F9D;&#x5B58;&#x3067;&#x3059; IFN alphabetaR &#x307E;&#x305F;&#x306F; STAT1 &#x4F9D;&#x5B58;&#x3057;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;TNF &#x306E;&#x8EE2;&#x5199;&#x8A98;&#x5C0E; TLR2/4&#x3001;MyD88&#x3001;STAT1&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073; IFN alphabetaR &#x72EC;&#x7ACB;&#x304C; TNF &#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x30EA;&#x30EA;&#x30FC;&#x30B9; TLR2/4-MyD88 &#x7D4C;&#x8DEF;&#x304C;&#x5FC5;&#x8981;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x306B;&#x767A;&#x73FE;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x53EF;&#x80FD;&#x306A; Mtb &#x5C11;&#x306A;&#x304F;&#x3068;&#x3082; 3 &#x3064;&#x306E;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x3092;&#x901A;&#x3058;&#x3066;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;TLR2 &#x306F;&#x7DCF;&#x79F0;&#x3057;&#x3066;&#x611F;&#x67D3;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x30B3;&#x30FC;&#x30B9;&#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3055;&#x308C;&#x306A;&#x3044;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x6570;&#x5024;&#x7684;&#x30DE;&#x30A4;&#x30CA;&#x30FC;&#x306A;&#x30BB;&#x30C3;&#x30C8;&#x306E;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3092;&#x4EF2;&#x4ECB;&#x3059;&#x308B;;TNF &#x306E;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x306F;&#x8EE2;&#x5199;&#x5F8C;&#x306E;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C8;&#x30ED;&#x30FC;&#x30EB;&#x306B;&#x5BFE;&#x3057;&#x3066;&#x3067;&#x306F;&#x306A;&#x304F;&#x3001;&#x8EE2;&#x5199;&#x8A98;&#x5C0E; TLR2/4 &#x304C;&#x5FC5;&#x8981;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x305D;&#x3057;&#x3066; IFN alphabetaR &#x3068; STAT1 &#x3092;&#x4F34;&#x3046;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x304C;&#x4E0D;&#x660E;&#x3001;TLR2/4 &#x975E;&#x4F9D;&#x5B58;&#x6027;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x3092;&#x901A;&#x3058;&#x3066;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x5FDC;&#x7B54;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x304C;&#x898F;&#x5236;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30DE;&#x30A4;&#x30B3;&#x30D0;&#x30AF;&#x30C6;&#x30EA;&#x30A6;&#x30E0;&#x306E;&#x7D50;&#x6838;&#x611F;&#x67D3;&#x3057;&#x305F;&#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x514D;&#x75AB;&#x5B66;&#x7684;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x306F;&#x72EC;&#x7ACB;&#x306E; TLR2 &#x304A;&#x3088;&#x3073; TLR4 &#x304C; IFN alphabeta &#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x3068; STAT1 &#x4F9D;&#x5B58;&#x3067;&#x3059;&#x3002;

&#xB300; &#xC2DD; &#xC138;&#xD3EC; TLR2 &#xB610;&#xB294; TLR4 &#xD1B5;&#xD574; &#xACB0;&#xD575;&#xADE0; (Mtb)&#xC758; &#xC5EC;&#xB7EC; subcellular &#xC81C;&#xD488;&#xC5D0; &#xB300;&#xC751;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xAE30;&#xBCF8; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xB300; &#xC2DD; &#xC138;&#xD3EC; &#xACBD;&#xB85C; &#xD06C;&#xAC8C; MyD88, &#xB3C5;&#xB9BD;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC2E4;&#xD589; &#xAC00;&#xB2A5;&#xD55C; &#xC545;&#xC131; Mtb &#xC751;&#xB2F5;&#xD560; TLRs. &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xAD50;&#xB780; &#xD55C; &#xB300; &#xC2DD; &#xC138;&#xD3EC;&#xC640; &#xC0DD;&#xC950; microarrays, &#xC815;&#xB7C9;&#xC801; PCR, &#xBC0F; ELISA&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC778; &#xC5B4;&#xB311;&#xD130; &#xBD84;&#xC790;, &#xC6B0;&#xB9AC; &#xC9C0;&#xAE08; &#xD45C;&#xC2DC; &#xC5C6;&#xC74C; synthase, RANTES, IFN &#xC720;&#xB3C4;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; 10, &#xBA74;&#xC5ED; &#xBC18;&#xC751; &#xC720;&#xC804;&#xC790; 1, &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; TLR2 &#xBCC4;&#xAC1C;&#xB85C; &#xC2E4;&#xC9C8;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xB300; &#xC2DD; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xB9CE;&#xC740; &#xB2E4;&#xB978; &#xC8FC;&#xC694; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xAC00;&#xB2A5;&#xD55C; Mtb &#xC720;&#xB3C4;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294;&#xC758; &#xC2DD;&#xC744; elicits&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;TLR4, &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xC870;&#xD569; &#xB610;&#xB294; TLR &#xC5B4;&#xB311;&#xD130; 1 &#xB77C;&#xC6B4;&#xB4DC; &#xC218;&#xC2E0;&#xC790;-&#xC77C;&#xB9AC;&#xB178;&#xC774; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558;&#xB294; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; &#xC5B4;&#xB311;&#xD130; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xBC0F; &#xC218;&#xC2E0;&#xC790;-&#xC77C;&#xB9AC;&#xB178;&#xC774;-1R &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778;&#xC5D0; &#xD3EC;&#xD568; &#xB41C; &#xC5B4;&#xB311;&#xD130; IFN-&#xBCA0;&#xD0C0;&#xB97C; &#xC720;&#xB3C4;. &#xBAA8;&#xB450; tlr2&#xC640; TLR4 &#xACB0;&#xD54D; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xCC98;&#xB9AC; congenic &#xCEE8;&#xD2B8;&#xB864; &#xAC00;&#xB2A5;&#xD55C; Mtb&#xC640;&#xC5D0; &#xC5B4;&#xB85C; &#xC878; &#xAC10;&#xC5FC;. &#xAC00;&#xB2A5;&#xD55C; Mtb&#xB3C4; &#xC5C5;-&#xADDC;&#xC81C; &#xC720;&#xB3C4;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; NO synthase, RANTES, IFN &#xC720;&#xB3C4;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; 10, &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xBD80;&#xC871; &#xD55C; &#xC2A4; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;, &#xBCF4;&#xC644; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;, 3, 4, &#xB300; &#xC2DD; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; IRG1 &#xC785;&#xB825; &#xD3D0;&#xD488; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xB610;&#xB294; CD40. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; MyD88 TLR2/4 &#xB3C5;&#xB9BD;&#xC801;&#xC778; transcriptional &#xC751;&#xB2F5; IFN-alphabetaR &#xBC0F; STAT1, &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xD558;&#xC9C0; IFN-&#xAC10;&#xB9C8; &#xD544;&#xC694;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBC18;&#xB300;&#xB85C;, &#xADF8; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xB294; MyD88 &#xC885;&#xC18D; &#xB204;&#xAD6C;&#xC758; IFN-alphabetaR &#xB610;&#xB294; stat1&#xC5D0; &#xC758;&#xC874; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. TNF&#xC758; transcriptional &#xC720;&#xB3C4; TLR2/4, MyD88, STAT1, &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; IFN-alphabetaR &#xB3C5;&#xB9BD; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; TNF &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xB9B4;&#xB9AC;&#xC2A4; TLR2/4-MyD88 &#xD1B5;&#xB85C;&#xAC00; &#xD544;&#xC694; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;, &#xB300; &#xC2DD; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xC801;&#xC5B4;&#xB3C4; &#xC138; &#xAC00;&#xC9C0; &#xACBD;&#xB85C; &#xD1B5;&#xD574; &#xC2E4;&#xD589; &#xAC00;&#xB2A5;&#xD55C; Mtb transcriptionally &#xC751;&#xB2F5;. TLR2 &#xC911;&#xC7AC; &#xCD1D;&#xCE6D; &#xC950;;&#xC5D0; &#xAC10;&#xC5FC;&#xC758; &#xACFC;&#xC815;&#xC5D0; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xB098;&#xD0C0;&#xB098;&#xC9C0; &#xC54A;&#xB294; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xC22B;&#xC790; &#xC791;&#xC740; &#xC9D1;&#xD569;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC751;&#xB2F5; TNF&#xC758; &#xADDC;&#xC81C; &#xD544;&#xC694; TLR2/4 post-transcriptional &#xCEE8;&#xD2B8;&#xB864;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; transcriptional &#xC720;&#xB3C4;; &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xB9CE;&#xC740; &#xC751;&#xB2F5; &#xC720;&#xC804;&#xC790; IFN-alphabetaR &#xBC0F; stat1&#xC744; &#xD3EC;&#xD568;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xC54C; &#xC218; &#xC5C6;&#xB294;, TLR2/4 &#xB3C5;&#xB9BD;&#xC801;&#xC778; &#xD1B5;&#xB85C; &#xD1B5;&#xD574; &#xD1B5;&#xC81C; &#xB41C;&#xB2E4;.

&#xB9CE;&#xC740; immunologically &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC720;&#xC804;&#xC790; Mycobacterium &#xACB0;&#xD575;&#xC5D0; &#xAC10;&#xC5FC; &#xB41C; &#xB300; &#xC2DD; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC2DD; tlr2&#xC640; TLR4 &#xB3C5;&#xB9BD;&#xC801; &#xC774;&#xC9C0;&#xB9CC; IFN-alphabeta &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xC640; stat1&#xC5D0; &#xC758;&#xC874;.

Macr&oacute;fagos responden a varios productos subcelulares de Mycobacterium tuberculosis (Mtb) a trav&eacute;s de TLR2 o TLR4. Sin embargo, los macr&oacute;fagos primario de rat&oacute;n responden a Mtb viable, virulenta por rutas en gran parte independientes de MyD88, la mol&eacute;cula de adaptador com&uacute;n para TLRs. utilizando microarrays, PCR cuantitativa y ELISA con gene-disrupted macr&oacute;fagos y ratones, ahora mostramos que viable Mtb provoca la expresi&oacute;n inducible de la NO sintasa, RANTES, prote&iacute;nas 10 IFN-inducible, respuesta inmune gen 1 y muchos otros genes claves en macr&oacute;fagos substancialmente independientemente de TLR2TLR4, su combinaci&oacute;n, o prote&iacute;na de adaptador que contiene dominio TLR adaptadores peaje-IL-1R y peaje-IL-1R dominio que contienen adaptador inducir IFN-beta. Ratones deficientes en TLR2 y TLR4 manejan infecci&oacute;n de aerosol con Mtb viable as&iacute; como Cong&eacute;nicos controles. Mtb viable tambi&eacute;n para arriba-regula inducible NO sintasa, RANTES, prote&iacute;na IFN-inducible 10 y IRG1 en macr&oacute;fagos que carecen de receptores de manosa, receptores de complemento 3 y 4, tipo un receptor scavenger o CD40. Estos MyD88, respuestas transcripcionales TLR2/4-independiente requieren IFN-alphabetaR y STAT1, pero no de IFN-gamma. Por el contrario, los genes cuya expresi&oacute;n es MyD88 dependiente no se confie de IFN-alphabetaR o STAT1. Inducci&oacute;n transcripcional de TNF es independiente de TLR2/4, MyD88, STAT1 y IFN-alphabetaR, pero liberaci&oacute;n TNF proteica requiere la v&iacute;a TLR2/4-MyD88. Por ello, los macr&oacute;fagos responden transcripcionalmente al Mtb viable a trav&eacute;s de por lo menos tres v&iacute;as. TLR2 interviene en las respuestas de un grupo num&eacute;ricamente menor de genes que colectivamente no parecen afectar el curso de la infecci&oacute;n en ratones; Reglamento de TNF requiere TLR2/4 para control post-transcripcional, pero no para inducci&oacute;n transcripcional; y muchos genes respondieron a esta pregunta se regulan a trav&eacute;s de una v&iacute;a de TLR2/4-independiente desconocida, que puede implicar el IFN-alphabetaR y STAT1.

Expresi&oacute;n de muchos genes inmunol&oacute;gicamente importantes en los macr&oacute;fagos infectados por tuberculosis del Mycobacterium es independiente de TLR2 y TLR4 pero depende del receptor IFN-alphabeta y STAT1.

&#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5BF9;&#x7ED3;&#x6838;&#x5206;&#x679D;&#x6746;&#x83CC;&#x505A;&#x51FA;&#x54CD;&#x5E94;&#x542F;&#x52A8;&#x4E3B;&#x673A;&#x5148;&#x5929;&#x56DE;&#x5E94;&#x8FD9;&#x79CD;&#x5FAE;&#x751F;&#x7269;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x4EA7;&#x54C1;&#x7684;&#x8C03;&#x8282;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;&#x5728;&#x6B64;&#x7814;&#x7A76;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5411;&#x70ED;&#x6740;&#x7ED3;&#x6838;&#x5206;&#x679D;&#x6746;&#x83CC; (&#x6E2F;&#x5143;-&#x5C71;&#x5730;&#x8F66;&#xFF09; &#x5BFC;&#x81F4;&#x5206;&#x6CCC;&#x6027;&#x767D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x6291;&#x5236;&#x5242; (&#x516C;&#x53F8;) &#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x548C;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x5206;&#x6CCC;&#x7684;&#x65F6;&#x95F4;&#x548C;&#x5242;&#x91CF;&#x4F9D;&#x8D56;&#x6027;&#x7684;&#x65B9;&#x5F0F;&#x589E;&#x52A0;&#x62A5;&#x544A;&#x5C0F;&#x9F20;&#x7684;&#x8179;&#x8154;&#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x63A5;&#x89E6;&#x3002;&#x6E2F;&#x5143;-&#x5C71;&#x5730;&#x8F66;&#x81F4;&#x516C;&#x53F8;&#x8868;&#x8FBE;&#x4E86;&#x5BF9;&#x86CB;&#x767D;&#x5408;&#x6210;&#x6291;&#x5236;&#x5242;&#xFF0C;&#x65E2;&#x4E0D;&#x654F;&#x611F;&#x653E;&#x7EBF;&#x83CC;&#x916E;&#xFF0C;&#x4E5F;&#x4E0D;&#x5411;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x805A;&#x5408;&#x963B;&#x6EDE;&#x5242;&#xFF0C;cytochalasin D.&#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5E72;&#x6270;&#x7D20; &#xFF08;&#x5E72;&#x6270;&#x7D20;&#xFF09; &#x6CBB;&#x7597;-&gamma; &#x6291;&#x5236;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x6E2F;&#x5143;&#x5C71;&#x5730;&#x8F66;&#x516C;&#x53F8;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;RAW264.7 &#x7EC6;&#x80DE;&#x7A33;&#x5B9A;&#x8868;&#x8FBE;&#x516C;&#x53F8;&#x4EA7;&#x751F;&#x80BF;&#x7624;&#x574F;&#x6B7B;&#x56E0;&#x5B50; (TNF) &#x964D;&#x4F4E;&#x7684;&#x4E00;&#x7EA7;&#x54CD;&#x5E94;&#x4E0E;&#x6A21;&#x62DF; transfectants &#x6E2F;&#x5143;&#x5C71;&#x5730;&#x8F66;&#x3002;&#x6C14;&#x6EB6;&#x80F6;&#x611F;&#x67D3;&#x7684;&#x7ED3;&#x6838;&#x5206;&#x679D;&#x6746;&#x83CC;&#x6D3B;&#x5C0F;&#x9F20;&#x5BFC;&#x81F4;&#x611F;&#x67D3;&#x80BA;&#x90E8;&#x516C;&#x53F8;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x3002;&#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE; Toll &#x6837;&#x53D7;&#x4F53; 4 &#xFF08;TLR4&#xFF09;-/-&#x6216; MyD88-/-&#x5C0F;&#x9F20;&#x56DE;&#x5E94;&#x7ED3;&#x6838;&#x5206;&#x679D;&#x6746;&#x83CC;&#x540C;&#x6837;&#x4E3A;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x53C2;&#x5C55;&#x516C;&#x53F8;&#x8868;&#x8FBE;&#x589E;&#x52A0;&#x3002;&#x76F8;&#x6BD4;&#x4E4B;&#x4E0B;&#xFF0C;&#x4ECE; TLR2/&#x5C0F;&#x9F20;&#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x516C;&#x53F8;&#x56DE;&#x5E94;&#x7ED3;&#x6838;&#x5206;&#x679D;&#x6746;&#x83CC;&#x7684;&#x65E0;&#x529B;&#x3002;&#x8FD9;&#x79CD;&#x611F;&#x5E94;&#x6807;&#x5FD7; TLR2 &#x4F9D;&#x8D56;&#x4F46;&#x72EC;&#x7ACB;&#x4E8E; MyD88 &#x7684;&#x7ED3;&#x6838;&#x6746;&#x83CC;&#x4FE1;&#x53F7;&#x901A;&#x8DEF;&#x3001; &#x6697;&#x793A;&#x7684;&#x9002;&#x914D;&#x5668; protein(s) &#x4EE5;&#x5916; MyD88 M.&#x7ED3;&#x6838;&#x75C5;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x7684;&#x516C;&#x53F8;&#x53C2;&#x4E0E;&#x7684;&#x5B58;&#x5728;&#x3002;

&#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6E90;&#x6027;&#x516C;&#x53F8;&#x7531;&#x7ED3;&#x6838;&#x5206;&#x679D;&#x6746;&#x83CC;&#x7684;&#x611F;&#x5E94;&#x53D6;&#x51B3;&#x4E8E; TLR2 &#x4F46;&#x4E0D;&#x662F; MyD88&#x3002;

Macrophages respond to Mycobacterium tuberculosis by regulating expression of gene products that initiate a host innate response to this micro-organism. In this study, we report that exposure of murine peritoneal macrophages to heat-killed Mycobacterium tuberculosis (HK-Mtb) led to an increase in secretory leucocyte protease inhibitor (SLPI) gene expression and protein secretion in a time- and dose-dependent manner. HK-Mtb-induced SLPI mRNA expression was sensitive neither to a protein synthesis inhibitor, cycloheximide, nor to an actin polymerization blocker, cytochalasin D. Treatment of macrophages with interferon (IFN)-gamma inhibited HK-Mtb-induced SLPI expression. RAW264.7 cells stably expressing SLPI produced a reduced level of tumour necrosis factor (TNF) in response to HK-Mtb as compared with mock transfectants. Aerosol infection of mice with live M. tuberculosis resulted in an induction of SLPI gene expression in infected lungs. Macrophages from Toll-like receptor 4 (TLR4)-/- or MyD88-/- mice responded to M. tuberculosis similarly to wild-type macrophages by exhibiting increased SLPI expression. In contrast, macrophages from TLR2-/- mice were incapable of inducing SLPI in response to M. tuberculosis. This induction signifies the presence of a TLR2-dependent but MyD88-independent M. tuberculosis signalling pathway, suggesting involvement of adaptor protein(s) other than MyD88 in M. tuberculosis-mediated induction of SLPI.

Induction of macrophage-derived SLPI by Mycobacterium tuberculosis depends on TLR2 but not MyD88.

Macrophages r&eacute;pondent &agrave; Mycobacterium tuberculosis par r&eacute;gulation d&#39;expression des produits g&eacute;niques qui initie une r&eacute;ponse inn&eacute;e de l&#39;h&ocirc;te de ce micro-organisme. Dans cette &eacute;tude, nous rapportons que l&#39;exposition des macrophages p&eacute;riton&eacute;aux murines &agrave; tu&eacute;s par la chaleur Mycobacterium tuberculosis (HK-Mtb) conduit &agrave; une augmentation des leucocytes s&eacute;cr&eacute;teurs prot&eacute;ase inhibiteur (SLPI) g&egrave;ne expression et prot&eacute;ine s&eacute;cr&eacute;tion d&#39;une mani&egrave;re et dose-d&eacute;pendante du temps. SLPI induite par HK-Mtb ARNm est sensible ni &agrave; un inhibiteur de la synth&egrave;se prot&eacute;ique, cycloheximide, ni d&#39;un bloqueur de polym&eacute;risation de l&#39;actine, cytochalasine D. traitement des macrophages avec l&#39;interf&eacute;ron (IFN)-gamma a inhib&eacute; l&#39;expression SLPI induite par HK-Mtb. RAW264.7 cellules exprimant de mani&egrave;re stable SLPI produisent un niveau r&eacute;duit de facteur de n&eacute;crose tumorale (TNF) en r&eacute;ponse &agrave; HK-Mtb contre transfectants simul&eacute;. Infection des a&eacute;rosols de souris par direct M. tuberculosis a abouti &agrave; une induction de l&#39;expression g&eacute;nique SLPI dans poumons infect&eacute;s. Macrophages de Toll-like receptor 4 (TLR4)-/ ou MyD88-souris-/-a r&eacute;pondu &agrave; M. tuberculosis de m&ecirc;me &agrave; macrophages sauvage en exposant a augment&eacute; l&#39;expression de la SLPI. En revanche, les macrophages de souris TLR2-/-&eacute;taient incapables d&#39;induire SLPI en r&eacute;ponse &agrave; M. tuberculosis. Cette induction signifie la pr&eacute;sence d&#39;un TLR2-d&eacute;pendant mais MyD88-independent M. tuberculosis voie de signalisation, ce qui sugg&egrave;re l&#39;implication de l&#39;adaptateur ou des prot&eacute;ines autres que MyD88 dans l&#39;induction de la tuberculose par M. de SLPI.

Induction des macrophages d&eacute;riv&eacute;s SLPI par Mycobacterium tuberculosis d&eacute;pend TLR2 mais pas MyD88.

Makrophagen reagieren auf Mycobacterium Tuberculosis durch regulierende Ausdruck von Genprodukten, die eine angeborene Wirtsantwort gegen&uuml;ber dieser Mikroorganismus zu initiieren. In dieser Studie berichten wir, dass die Exposition der murinen peritonealen Makrophagen zu Hitze-beendete Mycobacterium Tuberculosis (HK-Mtb) f&uuml;hrte zu einem Anstieg der sekretorischen Einzelspende Protease Inhibitor (SLPI) Gen Ausdruck und Protein Sekretion auf Zeit-Dosis-abh&auml;ngigen Weise. HK-Mtb-induzierte SLPI mRNA Ausdruck war weder f&uuml;r ein Protein-Synthese-Hemmer, empfindlich Cycloheximid, noch ein Aktin-Polymerisation-Blocker, Cytochalasin D. Behandlung von Makrophagen mit Interferon (IFN)-Gamma gehemmt HK-Mtb-induzierte SLPI Ausdruck. RAW264.7 Zellen stabil SLPI Ausdruck produziert verminderter Tumor-Nekrose-Faktor (TNF) in Reaktion auf HK-Mtb im Vergleich mit gespielter Transfektanten. Aerosol-Infektion von M&auml;usen mit live M. Tuberkulose f&uuml;hrte zu einer Induktion von SLPI Genexpression in infizierten Lunge. Makrophagen von Toll-Like Receptor 4 (TLR4)-/ - oder MyD88-/-M&auml;use reagierten auf M. Tuberkulose &auml;hnlich Wildtyp Makrophagen von ausstellenden erh&ouml;ht SLPI Ausdruck. Im Gegensatz dazu konnten Makrophagen aus TLR2-/-M&auml;use induzierende SLPI Reaktion auf M. Tuberkulose. Diese Induktion bedeutet das Vorhandensein von TLR2-abh&auml;ngige aber MyD88-unabh&auml;ngige M. Tuberkulose Signalisierung Weg, Einbeziehung der Adapter-Proteine als MyD88 in M. Tuberkulose-vermittelte Induktion der SLPI vorschlagen.

Induktion von Makrophagen abgeleitete SLPI durch Mycobacterium Tuberculosis, TLR2 aber nicht MyD88 h&auml;ngt.

Macrofagi rispondono a Mycobacterium tuberculosis dall&#39;espressione regolare di prodotti genici che avviano una risposta innata di host di questo microrganismo. In questo studio, riportiamo che l&#39;esposizione dei macrofagi peritoneali murini di calore-ucciso Mycobacterium tuberculosis (Mtb-HK) ha portato ad un aumento dei leucociti secretiva proteasi inibitore (ABTPO) gene espressione e proteina secrezione nel tempo - e dose-dipendente. Espressione del mRNA di ABTPO HK-Mtb-indotta era sensibile n&eacute; a un inibitore della sintesi proteica, cicloeximide, n&eacute; a un blocco di polimerizzazione dell&#39;actina, citocalasina D. trattamento dei macrofagi con interferone (IFN)-gamma inibito espressione ABTPO HK-Mtb-indotta. RAW264.7 cellule che esprimono stabilmente ABTPO prodotto un livello ridotto di fattore di necrosi tumorale (TNF) in risposta a HK-Mtb rispetto transfettanti finto. Infezione aerosol di topi con live M. tuberculosis ha provocato un&#39;induzione dell&#39;espressione genica ABTPO nei polmoni infetti. Macrofagi dal recettore Toll-like 4 (TLR4)-/ - o MyD88-/-mice ha risposto per M. tuberculosis analogamente a selvaggio-tipo macrofagi esibendo aumentata espressione di ABTPO. Al contrario, macrofagi da TLR2/topi erano incapaci di indurre ABTPO in risposta a M. tuberculosis. Questa induzione indica la presenza di un dipendente TLR2 ma MyD88 indipendente M. tuberculosis pathway di segnalazione, suggerendo il coinvolgimento di proteine adattatore diverso da MyD88 nella induzione di tubercolosi-mediata della M. di ABTPO.

Induzione di ABTPO macrofagi derivati da Mycobacterium tuberculosis dipende dal TLR2 ma non MyD88.

&#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x7D50;&#x6838;&#x306B;&#x3053;&#x306E;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x6709;&#x6A5F;&#x4F53;&#x3078;&#x306E;&#x751F;&#x5F97;&#x7684;&#x306A;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3092;&#x30DB;&#x30B9;&#x30C8;&#x3092;&#x958B;&#x59CB;&#x3059;&#x308B;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x7523;&#x7269;&#x306E;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x5F0F;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x5206;&#x6CCC;&#x306E;&#x767D;&#x8840;&#x7403;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A2;&#x30FC;&#x30BC;&#x963B;&#x5BB3;&#x5264; (SLPI) &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x3068;&#x86CB;&#x767D;&#x5206;&#x6CCC;&#x6642;&#x9593;&#x3068;&#x7528;&#x91CF;&#x4F9D;&#x5B58;&#x7684;&#x306B;&#x5897;&#x52A0;&#x306B;&#x3064;&#x306A;&#x304C;&#x3063;&#x305F;&#x71B1;&#x6BBA;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x7D50;&#x6838; (HK &#x30DE;&#x30A6;&#x30F3;&#x30C6;&#x30F3; &#x30D0;&#x30A4;&#x30AF;&#xFF09; &#x306B;&#x305D;&#x306E;&#x9732;&#x51FA;&#x306E;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x8179;&#x8154;&#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x3092;&#x5831;&#x544A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;HK &#x8A98;&#x8D77; Mtb SLPI mRNA &#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x306F;&#x3069;&#x3061;&#x3089;&#x3082;&#x3001;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x5408;&#x6210;&#x963B;&#x5BB3;&#x5264;&#x306B;&#x654F;&#x611F;&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x30B7;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D8;&#x30AD;&#x30B7;&#x30DF;&#x30C9;&#x3082;&#x3001;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x91CD;&#x5408;&#x30D6;&#x30ED;&#x30C3;&#x30AB;&#x30FC;&#x3001;&#x30A4;&#x30F3;&#x30BF;&#x30FC;&#x30D5;&#x30A7;&#x30ED;&#x30F3; &#xFF08;IFN&#xFF09; &#x3068;&#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x306E;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30AB;&#x30E9;&#x30B7;&#x30F3; d. &#x6CBB;&#x7642;&#x3059;&#x308B;-&#x30AC;&#x30F3;&#x30DE;&#x6291;&#x5236; HK &#x8A98;&#x8D77; Mtb SLPI &#x5F0F;&#x3002;&#x5B89;&#x5B9A;&#x306B; SLPI &#x767A;&#x73FE;&#x3059;&#x308B;&#x84C4;&#x7A4D;&#x7D30;&#x80DE;&#x816B;&#x760D;&#x58CA;&#x6B7B;&#x56E0;&#x5B50; (TNF) &#x306E;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x304C;&#x4F4E;&#x4E0B;&#x30E2;&#x30C3;&#x30AF; &#x30C1;&#x30ED;&#x30B7;&#x30F3;&#x30EA;&#x30F3;&#x306B;&#x6BD4;&#x3079;&#x3066; HK Mtb &#x3078;&#x306E;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3067;&#x751F;&#x7523;&#x3002;&#x30A8;&#x30A2;&#x30ED;&#x30BE;&#x30EB;&#x611F;&#x67D3;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x30E9;&#x30A4;&#x30D6;&#x306F;, &#x7D50;&#x6838;&#x611F;&#x67D3;&#x80BA;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B; SLPI &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x306E;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3067;&#x8D77;&#x56E0;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8; Toll &#x69D8;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53; 4 &#xFF08;TLR4&#xFF09; &#x304B;&#x3089;- &#x307E;&#x305F;&#x306F; MyD88-/-&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x7B54;&#x3048;&#x305F;&#x7D50;&#x6838;&#x306B;&#x540C;&#x69D8;&#x306B;&#x5C55;&#x793A;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x5897;&#x52A0; SLPI &#x5F0F;&#x3002;&#x5BFE;&#x7167;&#x7684;&#x306B;&#x3001;&#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8; TLR2/&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x304B;&#x3089;&#x7D50;&#x6838;&#x306B;&#x5FDC;&#x3048;&#x3066; SLPI &#x3092;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3059;&#x308B;&#x80FD;&#x529B;&#x306F;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x8A98;&#x5C0E; TLR2 &#x4F9D;&#x5B58;&#x304C;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x7D4C;&#x8DEF;, &#x30A2;&#x30C0;&#x30D7;&#x30BF;&#x30FC;&#x4EE5;&#x5916;&#x306E;&#x86CB;&#x767D; MyD88 SLPI &#x306E; M. &#x7D50;&#x6838;&#x3092;&#x4ECB;&#x3059;&#x308B;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3067;&#x306E;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3092;&#x793A;&#x5506; MyD88 &#x72EC;&#x7ACB;&#x7D50;&#x6838;&#x306E;&#x5B58;&#x5728;&#x3092;&#x610F;&#x5473;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x8A98;&#x5C0E;&#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x7531;&#x6765; SLPI &#x7D50;&#x6838;&#x83CC;&#x306B;&#x3088;&#x308B; TLR2 MyD88 &#x306A;&#x3044;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xB300; &#xC2DD; &#xC138;&#xD3EC; &#xACB0;&#xD575;&#xADE0;&#xC774; &#xB9C8;&#xC774;&#xD06C;&#xB85C; &#xC720;&#xAE30; &#xCCB4;&#xB97C; &#xD0C0;&#xACE0; &#xB09C; &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xC751;&#xB2F5;&#xC744; &#xC2DC;&#xC791; &#xD558;&#xB294; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC81C;&#xD488;&#xC758; &#xADDC;&#xC81C; &#xC2DD;&#xC73C;&#xB85C; &#xC751;&#xB2F5;. &#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0;&#xC11C;&#xB294; &#xC6B0;&#xB9AC; &#xC5F4; &#xC0AC;&#xB9DD; &#xACB0;&#xD575;&#xADE0; (&#xD64D;&#xCF69;-Mtb) &#xBD84; &#xBD84; leucocyte protease &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C; (SLPI) &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xD45C;&#xD604;&#xACFC; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xBE44; &#xC2DC;&#xAC04; &#xBC0F; &#xBCF5;&#xC6A9;&#xB7C9; &#xC758;&#xC874; &#xBC29;&#xC2DD;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC99D;&#xAC00;&#xB97C; &#xC8FC;&#xB3C4; murine &#xBCF5; &#xB300; &#xC2DD; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xB178;&#xCD9C;&#xC744; &#xBCF4;&#xACE0; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. SLPI mRNA &#xD45C;&#xD604; &#xD64D;&#xCF69; Mtb &#xC720;&#xBC1C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD569;&#xC131; &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C;&#xC5D0;&#xB3C4; &#xBBFC;&#xAC10; &#xD588;&#xB2E4; cycloheximide&#xB3C4; &#xB9D0;&#xB77C; &#xD569; &#xCC28;&#xB2E8;, &#xC778;&#xD130;&#xD398;&#xB860; (IFN)&#xC640; &#xB300; &#xC2DD; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; cytochalasin &#xB514; &#xCE58;&#xB8CC;-&#xAC10;&#xB9C8; &#xC800;&#xD574; SLPI &#xD64D;&#xCF69; Mtb &#xC720;&#xB3C4; &#xC2DD;. RAW264.7 &#xC138;&#xD3EC; &#xC548;&#xC815;&#xC801; &#xD45C;&#xD604; SLPI &#xBAA8;&#xC758; transfectants&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574; &#xD64D;&#xCF69; Mtb&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC751;&#xB2F5;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC885;&#xC591; &#xAD34; &#xC0AC; &#xC778;&#xC790; (TNF)&#xC758; &#xAC10;&#xC18C; &#xC218;&#xC900;&#xC744; &#xC0DD;&#xC0B0;. &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C; M. &#xACB0;&#xD575;&#xC73C;&#xB85C; &#xC0DD;&#xC950;&#xC758;&#xC5D0; &#xC5B4;&#xB85C; &#xC878; &#xAC10;&#xC5FC; &#xAC10;&#xC5FC; &#xB41C; &#xD3D0;&#xC5D0;&#xC11C; SLPI &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC1C;&#xD604; &#xC720;&#xB3C4; &#xADC0;&#xCC29;&#xB418; &#xC5C8; &#xB2E4;. &#xB300; &#xC2DD; &#xC138;&#xD3EC; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xD1B5;&#xD589;&#xC138; &#xAC19;&#xC774; 4 (TLR4)&#xC5D0;&#xC11C;-/-&#xB610;&#xB294; MyD88-/-&#xC0DD;&#xC950;&#xC5D0; &#xC751;&#xB2F5; M. &#xACB0;&#xD575;&#xC5D0; &#xC720;&#xC0AC; &#xD558; &#xAC8C; &#xC57C;&#xC0DD; &#xD615; &#xB300; &#xC804;&#xC2DC; &#xD558; &#xC5EC; SLPI &#xC2DD; &#xC99D;&#xAC00;. &#xBC18;&#xBA74; TLR2/&#xC950;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB300; &#xC2DD; &#xC138;&#xD3EC; M. &#xACB0;&#xD575;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC751;&#xB2F5;&#xC5D0;&#xC11C; SLPI &#xC720;&#xB3C4; &#xAC00;&#xB2A5; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC720;&#xB3C4; TLR2 &#xC885;&#xC18D; &#xC2E0;&#xD638; &#xD1B5;&#xB85C;, SLPI&#xC758; M. &#xACB0;&#xD575; &#xC911;&#xC7AC; &#xC720;&#xB3C4;&#xC5D0; MyD88 &#xC774;&#xC678;&#xC758; &#xC5B4;&#xB311;&#xD130; protein(s)&#xC758; &#xCC38;&#xC5EC; &#xC81C;&#xC548; MyD88 &#xB3C5;&#xB9BD;&#xC801;&#xC778; M. &#xACB0;&#xD575;&#xC758; &#xC874;&#xC7AC;&#xB97C; &#xC758;&#xBBF8; &#xD55C;&#xB2E4;.

&#xACB0;&#xD575;&#xADE0;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xB300; &#xC2DD; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD30C;&#xC0DD; &#xB41C; SLPI&#xC758; &#xC720;&#xB3C4; TLR2 &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; MyD88 &#xD558;&#xC9C0;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xB2E4;&#xB985;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Macr&oacute;fagos responden a Mycobacterium tuberculosis por expresi&oacute;n regular de productos g&eacute;nicos que inician una respuesta innata de host a este microorganismo. En este estudio, Divulgamos que la exposici&oacute;n de los macr&oacute;fagos peritoneales murinos al calor-mat&oacute; Mycobacterium tuberculosis (Mtb-HK) conducido a un aumento en leucocitos secretores proteasa inhibidor (SLPI) gene expresi&oacute;n y prote&iacute;na secreci&oacute;n en forma tiempo y dosis dependiente. La expresi&oacute;n del mRNA SLPI HK-Mtb-inducida era sensible ni a un inhibidor de la s&iacute;ntesis de prote&iacute;na, cicloheximida, ni a un bloqueador de la polimerizaci&oacute;n de actina, Citocalasina D. tratamiento de macr&oacute;fagos con interfer&oacute;n (IFN)-gamma inhibe la expresi&oacute;n de SLPI HK-Mtb-inducida. 264.7 C&eacute;lulas expresando estable SLPI producen una disminuci&oacute;n del nivel de factor de necrosis tumoral (TNF) en respuesta a HK-Mtb en comparaci&oacute;n con la falsa transfectants. Infecci&oacute;n de aerosol de ratones con vivo M. tuberculosis dio lugar a una inducci&oacute;n de la expresi&oacute;n g&eacute;nica SLPI en pulmones infectados. Los macr&oacute;fagos de Toll-like receptor 4 (TLR4)-/ - o MyD88-/-ratones respondi&oacute; a M. tuberculosis semejantemente a los macr&oacute;fagos salvaje-tipo exhibiendo mayor expresi&oacute;n SLPI. En contraste, los macr&oacute;fagos de TLR2-/-ratones eran incapaces de inducir SLPI en respuesta a M. tuberculosis. Esta inducci&oacute;n significa la presencia de un dependiente de TLR2 pero MyD88-independiente M. tuberculosis v&iacute;a de se&ntilde;alizaci&oacute;n, sugiriendo la implicaci&oacute;n de las prote&iacute;nas del adaptador distintos MyD88 en inducci&oacute;n de M. tuberculosis-mediada de SLPI.

Inducci&oacute;n de SLPI macr&oacute;fagos derivados por el Mycobacterium tuberculosis depende de TLR2 pero no MyD88.

Mycobacterium tuberculosis has evolved to persist in host macrophages, where it faces a nutrient-poor environment and is exposed to oxidative and nitrosative stress. To defend itself against oxidative/nitrosative stress, M. tuberculosis expresses an NADH-dependent peroxidase and peroxynitrite reductase that is encoded by ahpC, ahpD, lpd, and dlaT. In addition to its central role in the peroxynitrite reductase complex, dlaT (Rv2215) also encodes the E2 component of pyruvate dehydrogenase. Here we demonstrate that inactivation of dlaT in the chromosome of H37Rv resulted in a mutant (H37RvDeltadlaT) that displayed phenotypes associated with DlaT's role in metabolism and in defense against nitrosative stress. The H37RvDeltadlaT strain showed retarded growth in vitro and was highly susceptible to killing by acidified sodium nitrite. Mouse macrophages readily killed intracellular H37RvDeltadlaT organisms, and in mice dlaT was required for full virulence.

Dihydrolipoamide acyltransferase is critical for Mycobacterium tuberculosis pathogenesis.

&#x7ED3;&#x6838;&#x5206;&#x679D;&#x6746;&#x83CC;&#x9010;&#x6E10;&#x6269;&#x5927;&#xFF0C;&#x575A;&#x6301;&#x5728;&#x90A3;&#x91CC;&#x9762;&#x4E34;&#x7740;&#x8425;&#x517B;&#x7F3A;&#x4E4F;&#x7684;&#x73AF;&#x5883;&#xFF0C;&#x63A5;&#x89E6;&#x5230;&#x6C27;&#x5316;&#x5BBF;&#x4E3B;&#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x548C; nitrosative &#x5E94;&#x529B;&#x3002;&#x4EE5;&#x4FDD;&#x536B;&#x81EA;&#x5DF1;&#x4E0D;&#x53D7;&#x6C27;&#x5316;/nitrosative &#x5E94;&#x529B;&#xFF0C;&#x7ED3;&#x6838;&#x5206;&#x679D;&#x6746;&#x83CC;&#x8868;&#x793A;&#x7531;&#x4E34;&#x5E8A;&#x3001; ahpD&#x3001; lpd &#x548C;&#x8FDB;&#x884C;&#x4E86;&#x7F16;&#x7801;&#x4F9D;&#x8D56;&#x4E8E; NADH &#x7684;&#x8FC7;&#x6C27;&#x5316;&#x7269;&#x548C;&#x8FC7;&#x6C27;&#x4E9A;&#x785D;&#x9178;&#x76D0;&#x8FD8;&#x539F;&#x3002;&#x9664;&#x4E86;&#x5728;&#x590D;&#x6742;&#x7684;&#x8FC7;&#x6C27;&#x4E9A;&#x785D;&#x9178;&#x76D0;&#x8FD8;&#x539F;&#x9176;&#x7684;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF0C;&#x8FDB;&#x884C;&#x4E86; (Rv2215) &#x4E5F;&#x5BF9;&#x4E19;&#x916E;&#x9178;&#x8131;&#x6C22;&#x9176; E2 &#x7EC4;&#x4EF6;&#x8FDB;&#x884C;&#x7F16;&#x7801;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x5C55;&#x793A;&#x8FD9;&#x706D;&#x6D3B;&#x7814;&#x7A76;&#x5458;&#x7684;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x8FDB;&#x884C;&#x4E86;&#x5BFC;&#x81F4;&#x663E;&#x793A;&#x4E0E;&#x4EE3;&#x8C22;&#x548C;&#x9632;&#x5FA1; nitrosative &#x5E94;&#x529B;&#x8FDB;&#x884C;&#x4E86;&#x7684;&#x89D2;&#x8272;&#x76F8;&#x5173;&#x8054;&#x7684;&#x8868;&#x578B;&#x7A81;&#x53D8;&#x4F53; &#xFF08;H37RvDeltadlaT&#xFF09;&#x3002;H37RvDeltadlaT &#x5E94;&#x53D8;&#x8868;&#x660E;&#x4F53;&#x5916;&#x53D1;&#x80B2;&#x8FDF;&#x7F13;&#xFF0C;&#x6781;&#x6613;&#x88AB;&#x6740;&#x5BB3;&#x7684;&#x9178;&#x5316;&#x7684;&#x94A0;&#x4E9A;&#x785D;&#x9178;&#x76D0;&#x3002;&#x5C0F;&#x9F20;&#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5BB9;&#x6613;&#x6B7B;&#x4EA1;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5185; H37RvDeltadlaT &#x751F;&#x7269;&#xFF0C;&#x548C;&#x5BF9;&#x5C0F;&#x9F20;&#x8FDB;&#x884C;&#x4E86;&#x662F;&#x9700;&#x8981;&#x5145;&#x5206;&#x7684;&#x6BD2;&#x529B;&#x3002;

Dihydrolipoamide &#x9170;&#x57FA;&#x8F6C;&#x79FB;&#x9176;&#x5206;&#x679D;&#x6746;&#x83CC;&#x80BA;&#x7ED3;&#x6838;&#x53D1;&#x75C5;&#x4E2D;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x81F3;&#x5173;&#x91CD;&#x8981;&#x3002;

Mycobacterium tuberculosis a &eacute;volu&eacute; pour persistent dans les macrophages de l&#39;h&ocirc;te, o&ugrave; il fait face &agrave; un environnement pauvre en nutriments et est expos&eacute;e &agrave; oxydatif et le stress de nitrosative. Pour se d&eacute;fendre contre le stress oxydatif/nitrosative, M. tuberculosis exprime une r&eacute;ductase de peroxydase et peroxynitrite NADH-d&eacute;pendante qui est cod&eacute;e par ahpC DSAE, lpd et dlaT. En plus de son r&ocirc;le central dans la r&eacute;ductase de peroxynitrite complexe, dlaT (Rv2215) encode &eacute;galement le composant E2 de la pyruvate d&eacute;shydrog&eacute;nase. Nous d&eacute;montrons que l&#39;inactivation de dlaT dans le chromosome de H37Rv a donn&eacute; lieu &agrave; un mutant (H37RvDeltadlaT) qui affiche les ph&eacute;notypes associ&eacute;s &agrave; r&ocirc;le de DlaT dans le m&eacute;tabolisme et dans la d&eacute;fense contre le stress nitrosative. La souche H37RvDeltadlaT a montr&eacute; le retard de croissance in vitro et a &eacute;t&eacute; tr&egrave;s sensible &agrave; la mise &agrave; mort par le nitrite de sodium acidifi&eacute;. Macrophages de souris facilement tu&eacute;s intracellulaires H37RvDeltadlaT organismes et chez les souris dlaT &eacute;tait n&eacute;cessaire pour la virulence complet.

Dihydrolipoamide acyltransf&eacute;rase est critique pour la pathog&eacute;nie de la tuberculose Mycobacterium.

Mycobacterium Tuberculosis hat entwickelt, um in Host Makrophagen, wo es steht vor eine n&auml;hrstoffarmen Umgebung und zu oxidativen ausgesetzt ist und Nitrosative Stress beizubehalten. Um sich gegen oxidativen/Nitrosative Stress zu verteidigen, dr&uuml;ckt M. Tuberkulose eine NADH-abh&auml;ngige Peroxydase und Peroxynitrite-Reduktase, die von AhpC RLAhP, Lpd und DlaT codiert ist. Neben seine zentrale Rolle in der komplexen Peroxynitrite-Reduktase codiert DlaT (Rv2215) auch die E2-Komponente des Pyruvat-Dehydrogenase. Hier zeigen wir die Inaktivierung von DlaT im Chromosom des H37Rv ergab eine Mutante (H37RvDeltadlaT), die Ph&auml;notypen DlaTs Rolle im Stoffwechsel und in der Verteidigung gegen Nitrosative Stress zugeordnet angezeigt. Der H37RvDeltadlaT-Stamm zeigte zur&uuml;ckgebliebene Wachstum in-vitro- und war sehr anf&auml;llig f&uuml;r T&ouml;tung durch anges&auml;uerten Natriumnitrit. Maus Makrophagen leicht get&ouml;tet intrazellul&auml;re H37RvDeltadlaT Organismen, und in den M&auml;usen war DlaT f&uuml;r volle Virulenz erforderlich.

Dihydro-Acyltransferase ist entscheidend f&uuml;r die Pathogenese der Mycobacterium-Tuberkulose.

Mycobacterium tuberculosis &egrave; evoluto per rendere persistenti in macrofagi host, dove affronta un ambiente povero di nutrienti ed &egrave; esposta a ossidativo e stress A&beta;. Per difendersi contro lo stress ossidativo/A&beta;, M. tuberculosis esprime una reduttasi NADH-dipendente perossidasi e perossinitrito che sono codificato da ahpC, ahpD, lpd e dlaT. Oltre al suo ruolo centrale nel perossinitrito reduttasi complesso, dlaT (Rv2215) codifica anche la componente E2 della piruvato deidrogenasi. Qui abbiamo dimostrato che l&#39;inattivazione del dlaT nel cromosoma di H37Rv ha portato in un mutante (H37RvDeltadlaT) che visualizzato fenotipi associati ruolo di DlaT nel metabolismo e nella difesa contro lo stress A&beta;. Il ceppo di H37RvDeltadlaT ha mostrato il ritardata della crescita in vitro e fu altamente sensibile alla uccisione di nitrito di sodio acidificato. Macrofagi di topo prontamente ucciso intracellulari degli organismi H37RvDeltadlaT, e nei topi dlaT era necessaria per la piena virulenza.

Diidrolipoamide aciltransferasi sono un fattore critico per la patogenesi di Mycobacterium tuberculosis.

&#x7D50;&#x6838;&#x83CC;&#x306F;&#x6804;&#x990A;&#x4E0D;&#x826F;&#x74B0;&#x5883;&#x306B;&#x76F4;&#x9762;&#x3057;&#x3001;&#x9178;&#x5316;&#x306B;&#x3055;&#x3089;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x30DB;&#x30B9;&#x30C8;&#x306E;&#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x304A;&#x3088;&#x3073; nitrosative &#x30B9;&#x30C8;&#x30EC;&#x30B9;&#x3067;&#x6C38;&#x7D9A;&#x5316;&#x3059;&#x308B;&#x9032;&#x5316;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x305D;&#x308C;&#x81EA;&#x8EAB;&#x3067; nitrosative/&#x9178;&#x5316;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EC;&#x30B9;&#x306B;&#x5BFE;&#x3057;&#x3066;&#x9632;&#x5FA1;&#x3059;&#x308B;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x7D50;&#x6838;&#x3001;ahpC&#x3001;ahpD&#x3001;lpd, &#x304A;&#x3088;&#x3073; dlaT &#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x30A8;&#x30F3;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x3055;&#x308C;&#x305F; NADH &#x4F9D;&#x5B58;&#x6027;&#x30DA;&#x30EB;&#x30AA;&#x30AD;&#x30B7;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC;&#x3068;&#x30DA;&#x30EB;&#x30AA;&#x30AD;&#x30B7; &#x30CA;&#x30A4;&#x30C8; &#x30E9;&#x30A4;&#x30C8; &#x30EC;&#x30C0;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC;&#x30BC;&#x3092;&#x8868;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30DA;&#x30EB;&#x30AA;&#x30AD;&#x30B7; &#x30CA;&#x30A4;&#x30C8; &#x30E9;&#x30A4;&#x30C8;&#x306E;&#x9084;&#x5143;&#x9175;&#x7D20;&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x305D;&#x306E;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x7684;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x306B;&#x52A0;&#x3048;&#x3066;&#x3001;dlaT (Rv2215) &#x306F;&#x307E;&#x305F;&#x30D4;&#x30EB;&#x30D3;&#x30F3;&#x9178;&#x8131;&#x6C34;&#x7D20;&#x9175;&#x7D20; E2 &#x30B3;&#x30F3;&#x30DD;&#x30FC;&#x30CD;&#x30F3;&#x30C8;&#x3092;&#x30A8;&#x30F3;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x6211;&#x3005; &#x306F; dlaT H37Rv &#x306E;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x306E;&#x4E0D;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x4EE3;&#x8B1D;&#x3068;&#x9632;&#x885B; nitrosative &#x30B9;&#x30C8;&#x30EC;&#x30B9;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B; DlaT &#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x3092;&#x8868;&#x793A;&#x3059;&#x308B;&#x5909;&#x7570;&#x4F53; (H37RvDeltadlaT) &#x306B;&#x8D77;&#x56E0;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;H37RvDeltadlaT &#x3072;&#x305A;&#x307F;&#x6210;&#x9577;&#x306E;&#x9045;&#x308C;&#x3092; in vitro &#x3067;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3057;&#x3001;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x53D7;&#x3051;&#x3084;&#x3059;&#x3044;&#x4E9C;&#x785D;&#x9178;&#x9178;&#x6027;&#x30CA;&#x30C8;&#x30EA;&#x30A6;&#x30E0;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x6BBA;&#x5BB3;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x306F;&#x5BB9;&#x6613;&#x306B;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x306E; H37RvDeltadlaT &#x751F;&#x7269;&#x3092;&#x6BBA;&#x3057;&#x305F;&#x3057;&#x3001;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B; dlaT &#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x75C5;&#x539F;&#x6027;&#x306E;&#x30D5;&#x30EB;&#x304C;&#x5FC5;&#x8981;&#x3067;&#x3057;&#x305F;&#x3002;

&#x5C55;&#x958B;&#x3092;&#x3081;&#x3056;&#x3057;&#x3066;&#x30EC;&#x30B7;&#x30C1;&#x30F3;&#x30B3;&#x30EC;&#x30B9;&#x30C6;&#x30ED;&#x30FC;&#x30EB;&#x30A2;&#x30B7;&#x30EB;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A7;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC; &#x30DE;&#x30A4;&#x30B3;&#x30D0;&#x30AF;&#x30C6;&#x30EA;&#x30A6;&#x30E0;&#x306E;&#x7D50;&#x6838;&#x75C5;&#x56E0;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x91CD;&#x8981;&#x3067;&#x3059;&#x3002;

&#xACB0;&#xD575;&#xADE0;&#xC740; &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xB300; &#xC2DD; &#xC138;&#xD3EC;, &#xADF8;&#xAC83;&#xC740; &#xC591;&#xBD84; &#xAC00;&#xB09C;&#xD55C; &#xD658;&#xACBD;&#xC5D0; &#xC9C1;&#xBA74; &#xD558; &#xACE0; &#xC0B0;&#xD654;&#xC5D0; &#xB178;&#xCD9C; &#xB418; &#xACE0; nitrosative &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xACC4;&#xC18D; &#xC9C4;&#xD654; &#xD588;&#xB2E4;. Nitrosative/&#xC0B0;&#xD654; &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC790;&#xCCB4; &#xBC29;&#xC5B4;, M. &#xACB0;&#xD575; ahpC, ahpD, lpd, &#xBC0F; Dlat&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC778;&#xCF54;&#xB529;&#xB41C; NADH &#xC758;&#xC874; &#xACFC;&#xC0B0;&#xD654; &#xD6A8;&#xC18C;&#xC640; peroxynitrite reductase&#xB294; &#xD45C;&#xD604; &#xD55C;&#xB2E4;. &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; peroxynitrite reductase&#xB294; &#xC911;&#xC559; &#xC5ED;&#xD560; &#xC77C; &#xBFD0;&#xB9CC; &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C; dlaT (Rv2215) &#xB610;&#xD55C; pyruvate &#xD6A8;&#xC18C;&#xC758; e 2&#xB294; &#xAD6C;&#xC131; &#xC694;&#xC18C;&#xB97C; &#xC778;&#xCF54;&#xB529;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xBCF4;&#xC5EC; H37Rv &#xC5FC;&#xC0C9;&#xCCB4;&#xC5D0;&#xC11C; Dlat&#xC758; &#xADF8; &#xBE44;&#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xADC0;&#xCC29;&#xB418; &#xC5C8; &#xB2E4; &#xACE0;&#xAE30; Dlat&#xC758; &#xC5ED;&#xD560;&#xC758; &#xC2E0;&#xC9C4; &#xB300;&#xC0AC; &#xBC0F; nitrosative &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBC29;&#xC5B4;&#xC640; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xD45C;&#xC2DC;&#xB294; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; (H37RvDeltadlaT). H37RvDeltadlaT &#xAE34;&#xC7A5;&#xACFC; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC678;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC800; &#xB2A5; &#xC544; &#xC131;&#xC7A5;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC900; acidified &#xB098;&#xD2B8;&#xB968; &#xC544; &#xC9C8;&#xC0B0;&#xC5FC;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC0B4;&#xC778;&#xC5D0; &#xB9E4;&#xC6B0; &#xCDE8;&#xC57D; &#xD588;&#xB2E4;. &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xB300; &#xC2DD; &#xC138;&#xD3EC;&#xB294; &#xC27D;&#xAC8C; &#xC138;&#xD3EC;&#xB0B4; H37RvDeltadlaT &#xC0DD;&#xBB3C; &#xC8FD;&#xACE0; &#xC950; dlaT &#xC804;&#xCCB4; &#xB3C5;&#xC131;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD544;&#xC694; &#xD588;&#xB2E4;.

Dihydrolipoamide acyltransferase&#xC740; Mycobacterium &#xACB0;&#xD575; &#xBCD1; &#xC778;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC911;&#xC694; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Mycobacterium tuberculosis ha evolucionado a persistir en los macr&oacute;fagos de anfitri&oacute;n, donde se enfrenta a un ambiente pobre en nutrientes y se expone a oxidativo y nitrosativo estr&eacute;s. Para defenderse contra el estr&eacute;s oxidativo/nitrosativo, M. tuberculosis expresa una reductasa de peroxidasa y peroxinitrito de NADH-dependiente que est&aacute; codificada por ahpC, ahpD, lpd y dlaT. Adem&aacute;s de su papel central en el compleja de reductasa de peroxinitrito, dlaT (Rv2215) tambi&eacute;n codifica el componente E2 de la piruvato deshidrogenasa. Aqu&iacute; demostramos que la inactivaci&oacute;n de dlaT en el cromosoma de H37Rv result&oacute; en un mutante (H37RvDeltadlaT) que muestran fenotipos asociados con papel de DlaT en el metabolismo y en la defensa contra el estr&eacute;s nitrosativo. La cepa de H37RvDeltadlaT demostr&oacute; crecimiento retardado en vitro y era altamente susceptible a matar por nitrito de sodio acidulado. Macr&oacute;fagos rat&oacute;n f&aacute;cilmente mataron a organismos intracelulares de H37RvDeltadlaT y en ratones dlaT fue requerido para virulencia completo.

Dihidrolipoil Aciltransferasa es cr&iacute;tico para la patogenesia de Mycobacterium tuberculosis.

The productivity of stably transfected cell lines is of critical importance for the manufacturing of therapeutic proteins. Various methods have been successfully implemented to increase the production output of mammalian cell cultures. Increasing evidence suggests that optimization of the gene coding sequences of an expression vector can improve specific cell line yield of the recombinant protein. Here we demonstrate that gene optimization substantially enhances antibody production in Chinese hamster ovary cells. When gene optimization was applied to the heavy and light chain genes of a therapeutic antibody, we observed increased antibody production in transient transfection. Elevated heavy chain mRNA level was associated with the increase of antibody production. Further analysis suggested that the increased antibody expression is attributable to enhanced mRNA stability resulting from gene optimization. Gene optimization also led to increased antibody production in stable clones.

mRNA stability and antibody production in CHO cells: improvement through gene optimization.

&#x7A33;&#x5B9A;&#x8F6C;&#x67D3;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x682A;&#x7684;&#x751F;&#x4EA7;&#x529B;&#x662F;&#x6781;&#x4E3A;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x836F;&#x7528;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7684;&#x5236;&#x9020;&#x3002;&#x5F97;&#x4EE5;&#x987A;&#x5229;&#x63A8;&#x884C;&#x7684;&#x5404;&#x79CD;&#x65B9;&#x6CD5;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x589E;&#x52A0;&#x751F;&#x4EA7;&#x7684;&#x54FA;&#x4E73;&#x52A8;&#x7269;&#x7EC6;&#x80DE;&#x57F9;&#x517B;&#x3002;&#x8D8A;&#x6765;&#x8D8A;&#x591A;&#x7684;&#x8BC1;&#x636E;&#x8868;&#x660E;&#xFF0C;&#x4F18;&#x5316;&#x57FA;&#x56E0;&#x7F16;&#x7801;&#x5E8F;&#x5217;&#x8868;&#x8FBE;&#x5F0F;&#x7684;&#x5411;&#x91CF;&#x53EF;&#x4EE5;&#x63D0;&#x9AD8;&#x7279;&#x5B9A;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x884C;&#x4EA7;&#x91CF;&#x7684;&#x91CD;&#x7EC4;&#x86CB;&#x767D;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x8868;&#x660E;&#x8BE5;&#x57FA;&#x56E0;&#x4F18;&#x5316;&#x5927;&#x5927;&#x589E;&#x5F3A;&#x4E86;&#x4E2D;&#x56FD;&#x4ED3;&#x9F20;&#x5375;&#x5DE2;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4EA7;&#x751F;&#x6297;&#x4F53;&#x7684;&#x4EA7;&#x91CF;&#x3002;&#x5F53;&#x57FA;&#x56E0;&#x4F18;&#x5316;&#x5E94;&#x7528;&#x4E8E;&#x91CD;&#x578B;&#x548C;&#x8F7B;&#x578B;&#x94FE;&#x57FA;&#x56E0;&#x6CBB;&#x7597;&#x6027;&#x6297;&#x4F53;&#x65F6;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x89C2;&#x5BDF;&#x5230;&#x589E;&#x52A0;&#x7684;&#x6297;&#x4F53;&#x751F;&#x4EA7;&#x7684;&#x77AC;&#x65F6;&#x8F6C;&#x67D3;&#x3002;&#x9AD8;&#x67B6;&#x91CD;&#x94FE; mRNA &#x6C34;&#x5E73;&#x662F;&#x6297;&#x4F53;&#x751F;&#x4EA7;&#x7684;&#x589E;&#x52A0;&#x4E0E;&#x76F8;&#x5173;&#x8054;&#x3002;&#x8FDB;&#x4E00;&#x6B65;&#x5206;&#x6790;&#x5EFA;&#x8BAE;&#x589E;&#x52A0;&#x7684;&#x6297;&#x4F53;&#x8868;&#x8FBE;&#x662F;&#x589E;&#x5F3A; mRNA &#x7A33;&#x5B9A;&#x9020;&#x6210;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x4F18;&#x5316;&#x6240;&#x81F4;&#x3002;&#x57FA;&#x56E0;&#x4F18;&#x5316;&#x4E5F;&#x5BFC;&#x81F4;&#x589E;&#x52A0;&#x7684;&#x6297;&#x4F53;&#x751F;&#x4EA7;&#x7A33;&#x5B9A;&#x65E0;&#x6027;&#x7CFB;&#x3002;

&#x5728; CHO &#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x7684; mRNA &#x7A33;&#x5B9A;&#x6027;&#x548C;&#x6297;&#x4F53;&#x751F;&#x4EA7;&#xFF1A; &#x901A;&#x8FC7;&#x57FA;&#x56E0;&#x4F18;&#x5316;&#x6539;&#x8FDB;&#x3002;

La productivit&#xE9; des lign&#xE9;es cellulaires transfect&#xE9;es de fa&#xE7;on stable est d&#x26;#39;une importance critique pour la fabrication de prot&#xE9;ines th&#xE9;rapeutiques. Diverses m&#xE9;thodes ont &#xE9;t&#xE9; appliqu&#xE9;es avec succ&#xE8;s pour augmenter le rendement de production des cultures de cellules de mammif&#xE8;res. Plus en plus &#xE9;vident que l&#x26;#39;optimisation du g&#xE8;ne codant des s&#xE9;quences d&#x26;#39;un vecteur d&#x26;#39;expression peut am&#xE9;liorer le rendement sp&#xE9;cifique lign&#xE9;e cellulaire de la prot&#xE9;ine recombinante. Ici, nous d&#xE9;montrons que l&#x26;#39;optimisation du g&#xE8;ne am&#xE9;liore sensiblement la production d&#x26;#39;anticorps dans ovariennes de hamster chinois. Lorsque l&#x26;#39;optimisation du g&#xE8;ne a &#xE9;t&#xE9; appliqu&#xE9;e aux g&#xE8;nes des cha&#xEE;nes lourdes et l&#xE9;g&#xE8;res d&#x26;#39;un anticorps th&#xE9;rapeutique, nous avons observ&#xE9; la production d&#x26;#39;anticorps a augment&#xE9; en transfection transitoire. Elevated niveau ARNm de la cha&#xEE;ne lourde a &#xE9;t&#xE9; associ&#xE9;e &#xE0; l&#x26;#39;augmentation de la production d&#x26;#39;anticorps. Une analyse plus pouss&#xE9;e sugg&#xE8;re que l&#x26;#39;expression d&#x26;#39;anticorps accrue est attribuable &#xE0; la stabilit&#xE9; des ARNm accrue r&#xE9;sultant de l&#x26;#39;optimisation des g&#xE8;nes. L&#x26;#39;optimisation Gene a &#xE9;galement conduit &#xE0; la production d&#x26;#39;anticorps a augment&#xE9; dans des clones stables.

Stabilit&#xE9; de l&#x26;#39;ARNm et la production d&#x26;#39;anticorps dans des cellules CHO: Am&#xE9;lioration g&#xE9;n&#xE9;tique gr&#xE2;ce &#xE0; l&#x26;#39;optimisation

Die Produktivit&auml;t der Stabil transfizierte Zellinien ist von entscheidender Bedeutung f&uuml;r die Herstellung von therapeutischen Proteinen. Verschiedene Methoden wurden erfolgreich umgesetzt, um die Produktionsleistung der S&auml;ugetier-Zellkulturen zu erh&ouml;hen. Zunehmender Beweis schl&auml;gt die Optimierung im Gen Sequenzen eines Ausdrucks Vektor kann bestimmte Zelle Zeile Ausbeute des rekombinanten Proteins zu verbessern. Hier zeigen wir, dass dieses Gen-Optimierung Antik&ouml;rperproduktion in chinesischen Hamsterzellen Eierstock erheblich verbessert. Beim gen-Optimierung auf die schwere und leichte Kette Gene ein therapeutischer Antik&ouml;rper angewendet wurde, beobachteten wir erh&ouml;hte Antik&ouml;rper-Produktion in transiente Transfektion. Erh&ouml;hten schwere Kette mRNA-Ebene war verbunden mit der Zunahme der Produktion von Antik&ouml;rpern. Weitere Analyse vorgeschlagen, dass der erh&ouml;hte Antik&ouml;rper-Ausdruck auf erh&ouml;hte mRNA Stabilit&auml;t aus gen Optimierung zur&uuml;ckzuf&uuml;hren ist. Gen Optimierung f&uuml;hrte zu erh&ouml;hte Antik&ouml;rper-Produktion in stabile Klone.

Stabilit&auml;t und Antik&ouml;rper-Produktion von mRNA in CHO-Zellen: Verbesserung durch Gen-Optimierung.

La produttivit&agrave; delle linee cellulari stabile transfected &egrave; di fondamentale importanza per la produzione di proteine terapeutiche. Vari metodi sono stati implementati con successo per aumentare la produzione di colture di cellule di mammifero. Crescente evidenza suggerisce che l&#39;ottimizzazione del gene che codifica le sequenze di un&#39;espressione vettoriale pu&ograve; migliorare la resa linea cella specifica della proteina ricombinante. Qui dimostriamo che ottimizzazione gene sostanzialmente aumenta la produzione dell&#39;anticorpo in cellule di ovaio di criceto cinese. Quando l&#39;ottimizzazione del gene &egrave; stata applicata ai geni di un anticorpo terapeutico catena pesante e leggera, abbiamo osservato produzione aumentata dell&#39;anticorpo nella trasfezione transiente. Livello di mRNA elevata catena pesante &egrave; stato associato con l&#39;aumento della produzione di anticorpi. Un&#39;ulteriore analisi ha suggerito che l&#39;espressione aumentata dell&#39;anticorpo &egrave; attribuibile ad una maggiore stabilit&agrave; del mRNA derivanti dall&#39;ottimizzazione del gene. Ottimizzazione del gene ha portato anche alla produzione aumentata dell&#39;anticorpo nei cloni stabili.

produzione di mRNA stabilit&agrave; e anticorpo nelle cellule CHO: miglioramento attraverso l&#39;ottimizzazione del gene.

&#x5B89;&#x5B9A;&#x7684;&#x306B;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A7;&#x30AF;&#x30C8;&#x7D30;&#x80DE;&#x682A;&#x306E;&#x751F;&#x7523;&#x6027;&#x306F;&#x6CBB;&#x7642;&#x7528;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x88FD;&#x9020;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x975E;&#x5E38;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x69D8;&#x3005;&#x306A;&#x65B9;&#x6CD5;&#x304C;&#x6B63;&#x5E38;&#x306B;&#x3001;&#x54FA;&#x4E73;&#x52D5;&#x7269;&#x7D30;&#x80DE;&#x57F9;&#x990A;&#x306E;&#x751F;&#x7523;&#x91CF;&#x3092;&#x5897;&#x52A0;&#x3055;&#x305B;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5B9F;&#x88C5;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5897;&#x52A0;&#x3059;&#x308B;&#x8A3C;&#x62E0;&#x306F;&#x3001;&#x767A;&#x73FE;&#x30D9;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC;&#x306E;&#x914D;&#x5217;&#x3092;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x3059;&#x308B;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x6700;&#x9069;&#x5316;&#x306F;&#x3001;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x30BB;&#x30EB;&#x30E9;&#x30A4;&#x30F3;&#x306E;&#x6B69;&#x7559;&#x307E;&#x308A;&#x3092;&#x5411;&#x4E0A;&#x3055;&#x305B;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x6700;&#x9069;&#x5316;&#x306F;&#x3001;&#x5B9F;&#x8CEA;&#x7684;&#x306B;&#x3001;&#x30C1;&#x30E3;&#x30A4;&#x30CB;&#x30FC;&#x30BA;&#x30CF;&#x30E0;&#x30B9;&#x30BF;&#x30FC;&#x5375;&#x5DE3;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6297;&#x4F53;&#x7523;&#x751F;&#x3092;&#x9AD8;&#x3081;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x6700;&#x9069;&#x5316;&#x306F;&#x3001;&#x6CBB;&#x7642;&#x7528;&#x6297;&#x4F53;&#x306E;&#x91CD;&#x9396;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x8EFD;&#x9396;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306B;&#x9069;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3068;&#x304D;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x4E00;&#x904E;&#x6027;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A7;&#x30AF;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306E;&#x5897;&#x52A0;&#x6297;&#x4F53;&#x7523;&#x751F;&#x3092;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x4E0A;&#x6607;&#x3057;&#x305F;&#x91CD;&#x9396;mRNA&#x306E;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306F;&#x3001;&#x6297;&#x4F53;&#x7523;&#x751F;&#x306E;&#x5897;&#x52A0;&#x3068;&#x95A2;&#x9023;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306A;&#x308B;&#x5206;&#x6790;&#x304C;&#x5897;&#x52A0;&#x3057;&#x200B;&#x200B;&#x305F;&#x6297;&#x4F53;&#x767A;&#x73FE;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x6700;&#x9069;&#x5316;&#x306B;&#x8D77;&#x56E0;&#x3059;&#x308B;&#x5F37;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x305F;mRNA&#x306E;&#x5B89;&#x5B9A;&#x6027;&#x306B;&#x8D77;&#x56E0;&#x3059;&#x308B;&#x3082;&#x306E;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x793A;&#x5506;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3002;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x6700;&#x9069;&#x5316;&#x306F;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x5B89;&#x5B9A;&#x306A;&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30F3;&#x306E;&#x5897;&#x52A0;&#x6297;&#x4F53;&#x7523;&#x751F;&#x306B;&#x3064;&#x306A;&#x304C;&#x3063;&#x305F;&#x3002;

CHO&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;mRNA&#x306E;&#x5B89;&#x5B9A;&#x6027;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x6297;&#x4F53;&#x7523;&#x751F;&#xFF1A;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x6700;&#x9069;&#x5316;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x6539;&#x5584;

&#xC548;&#xC815;&#xC801; transfected &#xC138;&#xD3EC; &#xB77C;&#xC778;&#xC758; &#xC0DD;&#xC0B0;&#xC131; &#xCE58;&#xB8CC; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xC0DD;&#xC0B0;&#xC744; &#xC704;&#xD55C; &#xB9E4;&#xC6B0; &#xC911;&#xC694;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xBC29;&#xBC95;&#xC740; &#xD3EC;&#xC720;&#xB958; &#xC138;&#xD3EC; &#xBC30;&#xC591;&#xC758; &#xC0DD;&#xC0B0;&#xB7C9; &#xC99D;&#xAC00;&#xB97C; &#xC131;&#xACF5;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xAD6C;&#xD604; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8; &#xCD5C;&#xC801;&#xD654; &#xC81C;&#xC548; &#xC99D;&#xAC70;&#xB97C; &#xC99D;&#xAC00; &#xD558;&#xB294; &#xC2DD;&#xC758; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4;&#xB97C; &#xCF54;&#xB529; &#xD558;&#xB294; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xBCA1;&#xD130; &#xC7AC;&#xC870;&#xD569; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xD2B9;&#xC815; &#xC140; &#xB77C;&#xC778; &#xC218;&#xC728;&#xC744; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xC2DC;&#xD0AC; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30; &#xC6B0;&#xB9AC; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xCD5C;&#xC801;&#xD654;&#xB294; &#xC2E4;&#xC9C8;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC911;&#xAD6D; &#xD584;&#xC2A4;&#xD130; &#xB09C;&#xC18C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD56D; &#xCCB4; &#xC0DD;&#xC0B0;&#xC744; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xD558;&#xB294; &#xBC29;&#xBC95;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xCD5C;&#xC801;&#xD654; &#xCE58;&#xB8CC; &#xD56D; &#xCCB4;&#xC758; &#xBB34; &#xAC81; &#xACE0; &#xAC00;&#xBCBC;&#xC6B4; &#xC0AC;&#xC2AC; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC5D0; &#xC801;&#xC6A9; &#xB41C; &#xACBD;&#xC6B0; &#xC99D;&#xAC00; &#xB41C; &#xD56D; &#xCCB4; &#xC0DD;&#xC0B0; &#xACFC;&#xB3C4; transfection&#xC5D0; &#xAD00;&#xCC30; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC0C1;&#xC2B9; &#xB41C; &#xBB34;&#xAC70;&#xC6B4; &#xCCB4;&#xC778; mRNA &#xC218;&#xC900;&#xC758; &#xD56D; &#xCCB4; &#xC0DD;&#xC0B0;&#xC758; &#xC99D;&#xAC00;&#xC640; &#xC5F0;&#xAD00; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xCD94;&#xAC00; &#xBD84;&#xC11D; &#xC99D;&#xAC00; &#xD56D; &#xCCB4; &#xC2DD; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xCD5C;&#xC801;&#xD654;&#xC5D0;&#xC11C; &#xACB0;&#xACFC; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xB41C; mRNA &#xC548;&#xC815;&#xC131;&#xC5D0; &#xAE30;&#xC778; &#xD558;&#xB294; &#xC81C;&#xC548; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xCD5C;&#xC801;&#xD654; &#xB610;&#xD55C; &#xC548;&#xC815;&#xC801;&#xC778; &#xD074;&#xB860;&#xC5D0; &#xC99D;&#xAC00; &#xB41C; &#xD56D; &#xCCB4; &#xC0DD;&#xC0B0;&#xC744; &#xC8FC;&#xB3C4;.

&#xC870; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; mRNA &#xC548;&#xC815;&#xC131;&#xACFC; &#xD56D; &#xCCB4; &#xC0DD;&#xC0B0;: &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xCD5C;&#xC801;&#xD654;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; &#xAC1C;&#xC120;.

La productividad de las l&#xED;neas celulares transfectadas establemente es de importancia cr&#xED;tica para la fabricaci&#xF3;n de prote&#xED;nas terap&#xE9;uticas. Varios m&#xE9;todos han sido aplicado con &#xE9;xito para aumentar el rendimiento de producci&#xF3;n de cultivos celulares de mam&#xED;feros. Aumento de la evidencia sugiere que la optimizaci&#xF3;n del gen que codifica secuencias de un vector de expresi&#xF3;n puede mejorar el rendimiento espec&#xED;fico l&#xED;nea celular de la prote&#xED;na recombinante. Aqu&#xED; demostramos que la optimizaci&#xF3;n del gen mejora sustancialmente la producci&#xF3;n de anticuerpos en las c&#xE9;lulas de ovario de h&#xE1;mster chino. Cuando gen optimizaci&#xF3;n se aplic&#xF3; a los genes de las cadenas pesada y ligera de un anticuerpo terap&#xE9;utico, se observ&#xF3; aumento de la producci&#xF3;n de anticuerpos en transfecci&#xF3;n transitoria. Elevado nivel de ARNm de la cadena pesada se asoci&#xF3; con el aumento de la producci&#xF3;n de anticuerpos. Un an&#xE1;lisis m&#xE1;s detallado sugiere que la expresi&#xF3;n de anticuerpos incrementada es atribuible a la estabilidad del mRNA mejorada como resultado de la optimizaci&#xF3;n del gen. Optimizaci&#xF3;n Gene tambi&#xE9;n condujo a la producci&#xF3;n de anticuerpos aumentado en los clones estables.

La estabilidad del mRNA y la producci&#xF3;n de anticuerpos en c&#xE9;lulas CHO: Mejora trav&#xE9;s de la optimizaci&#xF3;n gen&#xE9;tica

Mycobacterium tuberculosis (Mtb) adatta per persistere in un vano nutrizionalmente limitata dei macrofagi. Deficit di lipoamide deidrogenasi (Lpd), il terzo enzima (E3) in complesso piruvato deidrogenasi del Mtb (PDH), serve anche come E1 del perossinitrito reduttasi/perossidasi (PNR/P), che aiuta a Mtb resistere azoto reattivi host intermedi. In contrasto con la Mtb manca Diidrolipoamide aciltransferasi (DlaT), la E2 di PDH e PNR/P, Lpd-carenti Mtb gravemente &egrave; attenuato nei topi wild-type e immunodeficienti. Questo suggerisce che Lpd ha una funzione che DlaT non condivide. Quando DlaT &egrave; assente, sopraregola le Mtb un Lpd-dipendente dalla catena ramificata cheto acido deidrogenasi (BCKADH) codificati da pdhA, pdhB, pdhC e lpdC. Senza Lpd, Mtb non pu&ograve; metabolizzare aminoacidi a catena ramificata e potenzialmente tossici catena ramificata intermedi si accumulano. MTB carenti di DlaT sia PdhC fenocopie Mtb Lpd-carenti. Mtb richiede quindi, criticamente BCKADH insieme a PDH e PNR/P per la patogenesi. Questi risultati di posizione Lpd come un potenziale obiettivo per Antiinfettivi contro Mtb.

Lipoamide deidrogenasi, un membro dei tre complessi multienzyme dipende dalla virulenza del Mycobacterium tuberculosis.

&#x7ED3;&#x6838;&#x5206;&#x679D;&#x6746;&#x83CC; (&#x5C71;&#x5730;) &#x9002;&#x5E94;&#x5728;&#x8425;&#x517B;&#x65B9;&#x9762;&#x6709;&#x9650;&#x7684;&#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8F66;&#x53A2;&#x4F9D;&#x7136;&#x5B58;&#x5728;&#x3002;Lipoamide &#x8131;&#x6C22;&#x9176; (Lpd)&#xFF0C;&#x7B2C;&#x4E09;&#x4E2A;&#x9176; (E3) &#x4E2D;&#x7ED3;&#x6838;&#x5206;&#x679D;&#x6746;&#x83CC;&#x7684;&#x4E19;&#x916E;&#x9178;&#x76D0;&#x8131;&#x6C22;&#x590D;&#x6742; (PDH)&#xFF0C;&#x8FD8;&#x62C5;&#x4EFB;&#x8FC7;&#x6C27;&#x4E9A;&#x785D;&#x9178;&#x76D0;&#x8FD8;&#x539F;&#x9176;/&#x8FC7;&#x6C27;&#x5316;&#x7269; (PNR/P)&#xFF0C;&#x8FD9;&#x6709;&#x52A9;&#x4E8E;&#x62B5;&#x5236;&#x4E3B;&#x673A;&#x6D3B;&#x6027;&#x6C2E;&#x4E2D;&#x95F4;&#x4F53;&#x7684;&#x5C71;&#x5730;&#x8F66; E1&#x3002;&#x4E0E;&#x7ED3;&#x6838;&#x5206;&#x679D;&#x6746;&#x83CC;&#x7F3A;&#x4E4F;&#x9170;&#x57FA;&#x8F6C;&#x79FB;&#x9176; dihydrolipoamide (&#x8FDB;&#x884C;&#x4E86;&#xFF09;&#xFF0C;E2 &#x7684; PDH &#x548C; PNR/P&#xFF0C;Lpd &#x7F3A;&#x5C71;&#x5730;&#x8F66;&#x4E25;&#x91CD;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x53CA;&#x514D;&#x75AB;&#x7F3A;&#x9677;&#x5C0F;&#x9F20;&#x51CF;&#x6BD2;&#x3002;&#x8FD9;&#x8868;&#x660E; Lpd &#x8FDB;&#x884C;&#x4E86;&#x4E0D;&#x5171;&#x4EAB;&#x7684;&#x529F;&#x80FD;&#x3002;&#x5F53;&#x8FDB;&#x884C;&#x4E86;&#x7F3A;&#x5E2D;&#xFF0C;&#x5C71;&#x5730;&#x8F66;&#x4E0A;&#x8C03;&#x4F9D;&#x8D56; Lpd &#x7684;&#x652F;&#x94FE;&#x916E;&#x9178;&#x8131;&#x6C22;&#x9176; (BCKADH) &#x7F16;&#x7801;&#x7684; pdhA&#x3001; pdhB&#x3001; pdhC&#x3001; &#x4F4E;&#x538B;&#x94F8;&#x9020;&#x3002;Lpd&#xFF0C;&#x65E0;&#x7ED3;&#x6838;&#x5206;&#x679D;&#x6746;&#x83CC;&#x4E0D;&#x80FD;&#x4EE3;&#x8C22;&#x652F;&#x94FE;&#x6C28;&#x57FA;&#x9178;&#x548C;&#x53EF;&#x80FD;&#x6709;&#x6BD2;&#x7684;&#x652F;&#x94FE;&#x4E2D;&#x95F4;&#x79EF;&#x7D2F;&#x3002;&#x7ED3;&#x6838;&#x5206;&#x679D;&#x6746;&#x83CC;&#x8FDB;&#x884C;&#x4E86;&#x548C; PdhC phenocopies Lpd &#x7F3A;&#x5C71;&#x5730;&#x8F66;&#x6709;&#x4E0D;&#x8DB3;&#x4E4B;&#x5904;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x5C71;&#x5730;&#x8F66;&#x4F24;&#x52BF;&#x4E25;&#x91CD;&#x9700;&#x8981;&#x4EE5;&#x53CA; PDH &#x548C; PNR/P BCKADH &#x53D1;&#x75C5;&#x4E2D;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x5C06; Lpd &#x5B9A;&#x4F4D;&#x4E3A;&#x5BF9;&#x7ED3;&#x6838;&#x5206;&#x679D;&#x6746;&#x83CC;&#x6297;&#x611F;&#x67D3;&#x836F;&#x7269;&#x7684;&#x6F5C;&#x5728;&#x76EE;&#x6807;&#x3002;

&#x7ED3;&#x6838;&#x5206;&#x679D;&#x6746;&#x83CC;&#x7684;&#x81F4;&#x75C5;&#x529B;&#x53D6;&#x51B3;&#x4E8E; lipoamide &#x8131;&#x6C22;&#x9176;&#x3001; &#x4E09;&#x591A;&#x9176;&#x590D;&#x5408;&#x4F53;&#x7684;&#x6210;&#x5458;&#x3002;

Mycobacterium tuberculosis (Mtb) adapts to persist in a nutritionally limited macrophage compartment. Lipoamide dehydrogenase (Lpd), the third enzyme (E3) in Mtb's pyruvate dehydrogenase complex (PDH), also serves as E1 of peroxynitrite reductase/peroxidase (PNR/P), which helps Mtb resist host-reactive nitrogen intermediates. In contrast to Mtb lacking dihydrolipoamide acyltransferase (DlaT), the E2 of PDH and PNR/P, Lpd-deficient Mtb is severely attenuated in wild-type and immunodeficient mice. This suggests that Lpd has a function that DlaT does not share. When DlaT is absent, Mtb upregulates an Lpd-dependent branched-chain keto acid dehydrogenase (BCKADH) encoded by pdhA, pdhB, pdhC, and lpdC. Without Lpd, Mtb cannot metabolize branched-chain amino acids and potentially toxic branched-chain intermediates accumulate. Mtb deficient in both DlaT and PdhC phenocopies Lpd-deficient Mtb. Thus, Mtb critically requires BCKADH along with PDH and PNR/P for pathogenesis. These findings position Lpd as a potential target for anti-infectives against Mtb.

Virulence of Mycobacterium tuberculosis depends on lipoamide dehydrogenase, a member of three multienzyme complexes.

Mycobacterium tuberculosis (Mtb) s&#39;adapte pour faire persister dans un compartiment de macrophage limit&eacute;e sur le plan nutritionnel. Lipoamide d&eacute;shydrog&eacute;nase (Lpd), la troisi&egrave;me enzyme (E3) en complexe pyruvate d&eacute;shydrog&eacute;nase du Mtb (PDH), sert &eacute;galement de E1 de peroxynitrite r&eacute;ductase/peroxydase (DP/P), qui aide les VTT &agrave; r&eacute;sister aux interm&eacute;diaires de l&#39;azote r&eacute;actif-h&ocirc;te. Contrairement aux VTT manque dihydrolipoamide acyltransf&eacute;rase (DlaT), l&#39;E2 de PDH et DP/P, Lpd-deficient Mtb est s&eacute;v&egrave;rement att&eacute;nu&eacute;e chez les souris de type sauvage et un d&eacute;ficit immunitaire. Ceci sugg&egrave;re que la Lpd a une fonction qui DlaT ne partage pas. Lorsque DlaT est absent, Mtb r&eacute;gule &agrave; la hausse une Lpd-d&eacute;pendante ramifi&eacute;s c&eacute;to d&eacute;shydrog&eacute;nase (BCKADH) cod&eacute;e par pdhA, pdhB, CPD et lpdC. Sans Lpd, VTT ne peut m&eacute;taboliser les acides amin&eacute;s &agrave; cha&icirc;ne ramifi&eacute;e et potentiellement toxiques interm&eacute;diaires ramifi&eacute;s s&#39;accumulent. MTB d&eacute;ficiente en fois DlaT et CPD ph&eacute;nocopies Lpd-d&eacute;ficients en VTT. Mtb critique exige donc BCKADH avec PDH et DP/P pour la pathog&eacute;nie. Ces constatations positionnent Lpd comme une cible potentielle pour les agents anti-infectieux contre VTT.

Lipoamide d&eacute;shydrog&eacute;nase, membre de trois complexes multienzymatiques d&eacute;pend de la virulence de Mycobacterium tuberculosis.

Mycobacterium Tuberculosis (Mtb) passt sich in einem ern&auml;hrungsphysiologisch begrenzt Makrophage-Fach beibehalten. Lipoamid Dehydrogenase (Lpd), das dritte Enzym (E3) in Mtb Pyruvatdehydrogenase Komplex (PDH), dient auch als E1 der Peroxynitrite Reduktase/Peroxydase (PNR/P), die hilft, Mtb Host-reaktiven Stickstoff Zwischenprodukte zu widerstehen. Im Gegensatz zu Mtb dihydro-Acyltransferase (DlaT), die E2 von PDH und PNR/P fehlt, ist Lpd-defizienten Mtb in Wildtyp und immungeschw&auml;chte M&auml;use stark abgeschw&auml;cht. Dies l&auml;sst vermuten, dass Lpd verf&uuml;gt &uuml;ber eine Funktion, die DlaT nicht teilt. Wenn DlaT fehlt, codiert Mtb Upregulates ein Lpd-abh&auml;ngige verzweigtkettige Keto S&auml;ure-Dehydrogenase (BCKADH) PdhA, PdhB, PdhC und LpdC. Ohne Lpd Mtb kann nicht metabolisieren verzweigtkettige Aminos&auml;uren und potenziell toxischen verzweigtkettige Zwischenprodukte ansammeln. Einen Mangel an DlaT und PdhC Ph&auml;nokopien Lpd-defizienten Mtb MTB. Daher erfordert Mtb kritisch BCKADH zusammen mit PDH und PNR/P f&uuml;r Pathogenese. Diese Erkenntnisse positionieren Lpd als m&ouml;gliches Angriffsziel f&uuml;r Antiinfektiva gegen Mtb.

Virulenz von Mycobacterium Tuberculosis h&auml;ngt Lipoamid-Dehydrogenase, ein Mitglied der drei multienzyme komplexe.

&#x7D50;&#x6838;&#x83CC; (&#x30DE;&#x30A6;&#x30F3;&#x30C6;&#x30F3; &#x30D0;&#x30A4;&#x30AF;) &#x6804;&#x990A;&#x9650;&#x5B9A;&#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8; &#x30B3;&#x30F3;&#x30D1;&#x30FC;&#x30C8;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x306E;&#x6C38;&#x7D9A;&#x5316;&#x306B;&#x9069;&#x5FDC;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30EA;&#x30DD; &#x30C7;&#x30D2;&#x30C9;&#x30ED;&#x30B2;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC; (Lpd) Mtb &#x306E;&#x30D4;&#x30EB;&#x30D3;&#x30F3;&#x9178;&#x30C7;&#x30D2;&#x30C9;&#x30ED;&#x30B2;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x8907;&#x5408;&#x4F53; (PDH) &#x306E; 3 &#x756A;&#x76EE;&#x306E;&#x9175;&#x7D20; (E3) &#x307E;&#x305F;&#x30D1;&#x30FC;&#x30AA;&#x30AD;&#x30B7; &#x30CA;&#x30A4;&#x30C8; &#x30E9;&#x30A4;&#x30C8; &#x30EC;&#x30C0;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC;&#x30BC;/Mtb &#x30DB;&#x30B9;&#x30C8;&#x53CD;&#x5FDC;&#x6027;&#x7A92;&#x7D20;&#x306E;&#x4E2D;&#x9593;&#x4F53;&#x3092;&#x30EC;&#x30B8;&#x30B9;&#x30C8;&#x306B;&#x5F79;&#x7ACB;&#x3061;&#x307E;&#x3059;&#x30DA;&#x30EB;&#x30AA;&#x30AD;&#x30B7;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC; (PNR/P) &#x306E; E1 &#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;Mtb &#x3068;&#x306F;&#x5BFE;&#x7167;&#x7684;&#x5C55;&#x958B;&#x3092;&#x3081;&#x3056;&#x3057;&#x3066;&#x30EC;&#x30B7;&#x30C1;&#x30F3;&#x30B3;&#x30EC;&#x30B9;&#x30C6;&#x30ED;&#x30FC;&#x30EB;&#x30A2;&#x30B7;&#x30EB;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A7;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC; (DlaT)&#x3001;PDH E2 &#x3068; PNR/P &#x6B20;&#x3051;&#x3066;&#x3044;&#x308B; Lpd &#x6B20;&#x4E4F; Mtb &#x306F;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x3068;&#x514D;&#x75AB;&#x4E0D;&#x5168;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x6DF1;&#x523B;&#x306A;&#x6E1B;&#x8870;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x306F;&#x3001;Lpd &#x304C; DlaT &#x3092;&#x5171;&#x6709;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x306A;&#x3044;&#x95A2;&#x6570;&#x304C;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;DlaT &#x304C;&#x5B58;&#x5728;&#x3057;&#x306A;&#x3044;&#x5834;&#x5408;&#x3001;Mtb &#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30DF;&#x30F3;&#x30B0; Lpd &#x4F9D;&#x5B58;&#x578B;&#x5206;&#x5C90;&#x9396;&#x30B1;&#x30C8;&#x9178;&#x30C7;&#x30D2;&#x30C9;&#x30ED;&#x30B2;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC; (BCKADH) pdhA&#x3001;pdhB&#x3001;pdhC&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073; lpdC &#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x30A8;&#x30F3;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x3002;Lpd, &#x306A;&#x3057; Mtb &#x5206;&#x5C90;&#x9396;&#x30A2;&#x30DF;&#x30CE;&#x9178;&#x4EE3;&#x8B1D;&#x3067;&#x304D;&#x306A;&#x3044;&#x3057;&#x3001;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x306B;&#x6BD2;&#x6027;&#x306E;&#x5206;&#x5C90;&#x9396;&#x306E;&#x4E2D;&#x9593;&#x4F53;&#x3092;&#x84C4;&#x7A4D;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;Mtb DlaT &#x3068; PdhC &#x306E; phenocopies &#x3067; Lpd &#x6B20;&#x4E4F; Mtb &#x6B20;&#x4E4F;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;Mtb &#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x75C5;&#x56E0;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E; PDH &#x304A;&#x3088;&#x3073; PNR/P &#x3068;&#x5171;&#x306B; BCKADH &#x6279;&#x5224;&#x7684;&#x304C;&#x5FC5;&#x8981;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x6240;&#x898B;&#x306F; Mtb &#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x6297;&#x611F;&#x67D3;&#x85AC;&#x306E;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x306A;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x3068;&#x3057;&#x3066; Lpd &#x3092;&#x914D;&#x7F6E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x7D50;&#x6838;&#x83CC;&#x306E;&#x75C5;&#x539F;&#x6027;&#x30EA;&#x30DD; &#x30C7;&#x30D2;&#x30C9;&#x30ED;&#x30B2;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;, 3 &#x591A;&#x91CD;&#x9175;&#x7D20;&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x306E;&#x30E1;&#x30F3;&#x30D0;&#x30FC;&#x306B;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xACB0;&#xD575;&#xADE0; (Mtb) &#xC601;&#xC591; &#xC81C;&#xD55C; &#xB41C; macrophage &#xAD6C;&#xD68D;&#xC5D0; &#xC720;&#xC9C0; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xC801;&#xC751;. Lipoamide &#xD6A8;&#xC18C; (Lpd), Mtb&#xC758; pyruvate dehydrogenase &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; (PDH)&#xC5D0;&#xC11C; &#xC138; &#xBC88;&#xC9F8; &#xD6A8;&#xC18C; (E3) E1 &#xACFC;&#xC0B0;&#xD654; peroxynitrite reductase/&#xD6A8;&#xC18C; (PNR/P) &#xB3C4;&#xC6C0;&#xC774; &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xBC18;&#xC751;&#xC131; &#xC9C8;&#xC18C; &#xC911;&#xAC04;&#xCCB4;&#xC5D0; &#xC800;&#xD56D; &#xD558;&#xB294; Mtb&#xC758; &#xC5ED;&#xD560;&#xB3C4; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. Mtb dihydrolipoamide acyltransferase (DlaT), e 2&#xC758; PDH&#xC640; PNR/P, &#xBD80;&#xC871; &#xD55C; &#xBC18;&#xBA74; Lpd &#xBD88;&#xCDA9;&#xBD84; &#xD55C; Mtb&#xB294; &#xC57C;&#xC0DD;-&#xD0C0;&#xC785; &#xBC0F; immunodeficient &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xC2EC;&#xAC01; &#xD558; &#xAC8C; &#xAC10;&#xC1E0; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; Lpd DlaT &#xACF5;&#xC720; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xB294; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744;&#xAC00;&#xC9C0;&#xACE0; &#xB098;&#xC654;&#xB2E4;. DlaT &#xACB0; &#xC11D; &#xB54C; Mtb upregulates&#xB294; Lpd &#xC885;&#xC18D;&#xC801; &#xBD84;&#xAE30; &#xCCB4;&#xC778; keto &#xC0B0; &#xD6A8;&#xC18C; (BCKADH) &#xC778;&#xCF54;&#xB529; pdhA, pdhB, pdhC, &#xBC0F; lpdC. Lpd, &#xC5C6;&#xC774; Mtb &#xCE21; &#xC1C4; &#xC0AC;&#xC2AC; &#xC544;&#xBBF8;&#xB178;&#xC0B0; &#xB300;&#xC0AC; &#xC218; &#xC5C6;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xD558; &#xACE0; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC720;&#xB3C5;&#xD55C; &#xBD84;&#xAE30; &#xCCB4;&#xC778; &#xC911;&#xAC04;&#xCCB4; &#xCD95;&#xC801;. Mtb DlaT &#xBC0F; PdhC phenocopies Lpd &#xBD88;&#xCDA9;&#xBD84; &#xD55C; Mtb&#xC758;&#xC5D0;&#xC11C; &#xACB0;&#xD54D;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;, Mtb&#xC5D0;&#xB294; pathogenesis&#xC758; PDH&#xC640; PNR/P BCKADH&#xB97C; &#xBE44;&#xD310;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xD544;&#xC694;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xACB0;&#xACFC; Mtb&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; anti-infectives&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xC801;&#xC778; &#xB300;&#xC0C1;&#xC73C;&#xB85C; Lpd&#xB97C; &#xB193;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xACB0;&#xD575;&#xADE0;&#xC758; &#xB3C5;&#xC131; lipoamide &#xD6A8;&#xC18C;, 3 multienzyme &#xB2E8;&#xC9C0;&#xC758; &#xAD6C;&#xC131;&#xC6D0;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xB2EC;&#xB77C; &#xC9D1;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Mycobacterium tuberculosis (Mtb) se adapta a persistir en un compartimiento del macr&oacute;fago nutricionalmente limitada. Lipoamida deshidrogenasa (Lpd), la tercera enzima (E3) en piruvato complejo deshidrogenasa de Mtb (PDH), tambi&eacute;n sirve como E1 de peroxinitrito reductasa/peroxidasa (PNR/P), que ayuda a Mtb resistir host-reactivos del nitr&oacute;geno intermedios. En contraste con Mtb falta Dihidrolipoil Aciltransferasa (DlaT), el E2 de PDH y PNR/P, Lpd-deficiente Mtb severamente se aten&uacute;a en ratones inmunodeficientes y de tipo salvaje. Esto sugiere que Lpd tiene una funci&oacute;n que DlaT no comparte. Cuando DlaT est&aacute; ausente, Mtb estimula una deshidrogenasa de &aacute;cido ceto ramificados de Lpd-dependiente (BCKADH) codificada por pdhA, pdhB, pdhC y fundici&oacute;n. Sin Lpd, Mtb no puede metabolizar los amino&aacute;cidos de cadena ramificada y potencialmente t&oacute;xicos intermedios de cadena ramificada se acumulan. MTB deficiente en DlaT tanto PdhC fenocopias Mtb Lpd-deficiente. As&iacute;, Mtb cr&iacute;ticamente requiere BCKADH junto con la PDH y PNR/P para la patogenesia. Estos resultados posici&oacute;n Lpd como un blanco potencial para antiinfecciosos contra Mtb.

Shuangping Shi

Merck Research Laboratory

Merck & Co., Inc

A High-throughput Automated Platform for the Development of Manufacturing Cell Lines for Protein Therapeutics