Extension Proboscis Réponse (PER) Dosage de la drosophile

Résumé

La réponse d'extension proboscis ou PER est un test de comportement goût qui a été utilisé dans mouches ainsi que chez les abeilles. Lorsque la trompe est en contact avec une substance attractive, la mouche étend sa trompe de consommer la substance. Solutions de différents sucres sont très attrayants pour la volée.

Résumé

La réponse d'extension proboscis (PER) est un test de comportement goût qui a été utilisé dans mouches ainsi que chez les abeilles.

Sur la surface de la bouche de la mouche (labelle), il ya des poils ressemblant à des structures appelées sensilles qui abrite les neurones goût. Quand une substance attractive en contact à l'labelle, la mouche étend sa trompe pour consommer la matière. Extension Proboscis Réponse (PER) de dosage des mesures de cette réponse comportements goût, et c'est une méthode utile pour se renseigner sur les préférences alimentaires dans une seule mouche. Solutions de sucres divers, tels que le saccharose, le glucose et le fructose, sont très attractifs à la mouche. L'effet des substances aversives peuvent également être testés comme la réduction de la PAR, lorsqu'ils sont mélangés dans une solution sucrée.

Malgré la simplicité de la procédure de base, il ya beaucoup de choses qui peuvent l'empêcher de travailler. Un des facteurs qui nécessite l'attention est l'état réceptif de la mouche. Le temps de la famine nécessaire d'apporter à la volée pour le bon état réceptif varient considérablement d'36 à 72 heures. Nous avons établi une série de contrôles pour évaluer l'état de la mouche et qui permet le dépistage de non recevable ou hyper-réactive animaux individuels. Un autre facteur important est le niveau de l'impact et la position de la contacter pour le labelle, ce qui serait difficile à décrire par des mots. Cette présentation vidéo démontre toutes ces choses ensemble avec plusieurs autres améliorations qui pourraient augmenter la reproductibilité de cette méthode.

Protocole

Famine

1. Premièrement, affamer la volée.
2. Mettez un petit morceau de Kim-Wipe imbibé d'eau dans un flacon vide.
3. Transfert 20-30 bien nourris vole vers le flacon vide.
4. Vérifiez tous les 12 -24 heures pour s'assurer que le papier est humide.
5. Affamer les voler pour 36 à 72 heures.

Fixer la volée

1. Prendre une mouche dans un aspirateur.
2. Placer une pointe de 200 ul jaune sur l'ouverture. Simultanément renversant et en soufflant dessus, vous pouvez presser le voler dans l'extrémité jaune.
3. Appliquez doucement un peu d'air pour pousser à la volée jusqu'à un point où il ne peut pas bouger.
4. En utilisant une lame de rasoir, mettre une marque à peu près à l'œil de la mouche, puis aspirer le vol de retour et de couper la pointe.
5. Soufflez doucement à la volée en position, mais juste avant d'atteindre la fin, faire une inclinaison coupé à l'endroit où la trompe va être situé. Vous pouvez le faire sans cette coupe oblique, mais il serait certainement rendre le processus plus facile après.

Préparez des mèches de saccharose

1. Twist une bande de 6 mm de large Kimwipes ® papier dans un fil, et séparer en petits morceaux de cône, comme la mèche en forme (<1 cm).
2. Ces mèches ont été plongés dans de petites solutions de saccharose ou de l'eau et présenté à la trompe en faisant le contact.

Préparer des témoins et des animaux de laboratoire

1. Avant de tester toute sapides, donne une solution de saccharose 4% à la volée. Cela agit comme un contrôle positif. Jeter toute volée qui n'ont pas répondu.
2. Ensuite, testez dH ₂ 0 à la volée. Cet acte comme un contrôle négatif. Jetez à la volée si elle ne répond.
3. Testez ces commandes après avoir testé votre sapides.

Discussion

Dans cette présentation, nous avons franchi toutes les étapes de test de réponse Proboscis extension. La méthode semble assez simple, mais comme dans de nombreux dosages d'autres comportements, beaucoup de petites choses peuvent empêcher le dosage de travailler. Nous avons traversé de nombreuses étapes telles que le besoin d'une attention particulière. Ici, je souligner à nouveau quelques-uns des facteurs les plus importants.

Un tel facteur est la forme de la mèche. J'ai montré quelques-unes des très bons exe...

matériels

Name	Company	Catalog Number	Comments
HDR-HC1	Camera	Sony Corporation
SMZ800	Microscope	Nikon Instruments
P-IBSS	Camera Adapter	Nikon Instruments
1x DC10LN	Camera Adapter	Optem, Qioptiq Inc.
257010	Camera Adapter	Optem, Qioptiq Inc.
TREKKER Mk2	Tripod	BENBO
Gorillapod SLR	Tripod	Joby
iMac G5	Computer	Apple
Power Mac G5	Computer	Apple
iMovie	Software	Apple
MPEG Streamclip	Software	SQUARED 5