Un modèle modifié d’occlusion de l’artère cérébrale moyenne transcrânienne pour étudier les résultats de l’AVC chez des souris âgées

Résumé

Ce protocole démontre un modèle unique d’AVC chez la souris avec un infarctus de taille moyenne et un excellent taux de survie. Ce modèle permet aux chercheurs en AVC préclinique de prolonger la durée de l’ischémie, d’utiliser des souris âgées et d’évaluer les résultats fonctionnels à long terme.

Résumé

Dans la recherche expérimentale sur l’AVC, l’occlusion de l’artère cérébrale moyenne (MCAO) avec un filament intraluminal est largement utilisée pour modéliser l’AVC ischémique chez la souris. Le modèle MCAO filamentaire présente généralement un infarctus cérébral massif chez les souris C57Bl/6 qui inclut parfois du tissu cérébral dans le territoire alimenté par l’artère cérébrale postérieure, ce qui est en grande partie dû à une incidence élevée d’atrésie de l’artère communicante postérieure. Ce phénomène est considéré comme un contributeur majeur au taux de mortalité élevé observé chez les souris C57Bl/6 lors de la récupération à long terme après un MCAO filamentaire. Ainsi, de nombreuses études sur les accidents vasculaires cérébraux chroniques exploitent des modèles MCAO distals. Cependant, ces modèles ne produisent généralement un infarctus que dans la région du cortex et, par conséquent, l’évaluation des déficits neurologiques post-AVC pourrait être un défi. Cette étude a permis d’établir un modèle de MCAO transcrânien modifié dans lequel le MCA au niveau du tronc est partiellement occlus, soit de façon permanente, soit transitoirement via une petite fenêtre crânienne. Étant donné que l’emplacement de l’occlusion est relativement proche de l’origine de l’ACM, ce modèle génère des lésions cérébrales à la fois dans le cortex et le striatum. La caractérisation approfondie de ce modèle a démontré un excellent taux de survie à long terme, même chez les souris âgées, ainsi que des déficits neurologiques facilement détectables. Par conséquent, le modèle murin MCAO décrit ici représente un outil précieux pour la recherche expérimentale sur l’AVC.

Introduction

Près de 800 000 personnes subissent un accident vasculaire cérébral aux États-Unis chaque année, et la plupart de ces accidents vasculaires cérébraux sont de nature ischémique¹. La restauration rapide du flux sanguin cérébral à l’aide d’un activateur tissulaire du plasminogène (tPA) et/ou d’une thrombectomie est actuellement le traitement le plus efficace pour les patients victimes d’un AVC. Cependant, la récupération complète des fonctions neurologiques à long terme est rare ^2,3. Ainsi, la recherche d’une nouvelle thérapie de l’AVC qui cible l’amélioration fonctionnelle est un domaine ....

Protocole

Toutes les procédures décrites dans ce travail sont menées conformément aux directives du NIH pour le soin et l’utilisation des animaux dans la recherche, et le protocole a été approuvé par le Comité de protection et d’utilisation des animaux de l’Institut Duke (IACUC). De jeunes souris mâles (âgées de 8 à 10 semaines) et âgées (22 mois) C57Bl/6 ont été utilisées pour la présente étude. Un aperçu de ce protocole est illustré à la figure 1.

1. Préparation chirurgicale

1. Examinez la souris à la recherche d’anomalies grossières et de déficits comportementaux.
   REMARQUE : Avant la chirurg....

Résultats

Avec une vue directe sous un microscope chirurgical, il peut être confirmé visuellement que le flux sanguin MCA est bloqué pendant l’ischémie. Notre étude précédente a montré une réduction de >80% du flux sanguin dans la zone ischémique à l’aide d’un moniteur laser Doppler⁶. Afin de déterminer les changements de débit sanguin post-MCAO, le LSCI peut être utilisé pour confirmer davantage l’agression ischémique et la reperfusion (Figure 1). En ef.......

Discussion

Le premier modèle d’occlusion MCA transcrânienne a été établi chez le rat en 1981 11,12^, et remplacé par le modèle MCAO sans craniectomie en^{1989 4}. L’occlusion transcrânienne initiale de l’ACM avait un large champ chirurgical, de sorte que l’ensemble de l’arcade zygomatique a été retiré et les muscles tirés latéralement. Les tissus locaux ont été enflés après la chirurgie, ce qui a causé du stress et une diminut.......

matériels

Name	Company	Catalog Number	Comments
0.25% bupivacaine	Hospira	NDC 0409-1159-18
0.9% sodium chloride	ICU Medical	NDC 0990-7983-03
2,3,5-Triphenyltetrazolium Chloride (TTC)	Sigma or any available vendor
20 G IV catheter	BD	381534	20 GA 1.6 IN
30 G needle	BD	305106
4-0 silk suture	Look	SP116	Black braided silk
8-0 suture with needle	Ethilon	2822G
Alcohol swabs	BD	326895
Anesthesia induction box	Any suitable vendor		Pexiglass make
Electrical grinder	JSDA	JD 700
High temperature cautery loop tip	Bovie	AA03
Isoflurane	Covetrus	NDC 11695-6777-2
Laser doppler perfusion monitor	Moor Instruments	moorVMS-LDF1
Lubricant eye ointment	Bausch + Lomb	339081
Mouse rectal probe	Physitemp	RET-3
Nitrous Oxide	Airgas	UN1070
Otoscope	Welchallyn	728	2.5 mm Speculum
Oxygen	Airgas	UN1072
Povidone-iodine	CVS	955338
Recovery box	Brinsea	TLC eco
Rimadyl (carprofen)	Zoetis	6100701	Injectable 50 mg/mL
Rodent ventilator	Harvard	Model 683
Temperature controller	Physitemp	TCAT-2DF
Triple antibioric & pain relief	CVS	NDC 59770-823-56
Vaporizer	RWD	R583S