Assemblage et fonctionnement d’une platine de refroidissement pour immobiliser C. elegans sur leurs plaques de culture

Nous développons une approche simple qui peut immobiliser toute la population de Caenorhabditis elegans directement sur des plaques de culture. Cette stratégie accélère considérablement les expériences liées à l’imagerie. L’immobilisation de l’azoture de sodium généralement utilisée pour l’imagerie à haute résolution de la population de C. elegans exige énormément de main-d’œuvre, nécessitant un montage et une manipulation individuels des animaux.

Cette méthode peut également réduire la durée de vie et la viabilité des animaux, ce qui peut confondre les données. La méthode de refroidissement traditionnelle utilisait des températures relativement basses de deux à quatre degrés Celsius de microfluide utilisé, ce qui nécessite une formation approfondie de l’utilisateur. Nous avons constaté qu’avec l’étage de refroidissement, les températures chaudes comme six degrés Celsius, immobilisent plus fortement les animaux pour l’imagerie à haute révolution.

L’immobilisation de refroidissement de C. elegans n’est pas largement utilisée, mais lorsqu’elle est utilisée, elle est généralement associée à une microfluidique complexe qui nécessite une formation importante de l’utilisateur. En raison de la lacune de la méthodologie d’immobilisation typique, notre amélioration de la mobilisation et de l’accessibilité du refroidissement permet un débit élevé et une imagerie à plus haute résolution pour les chercheurs. Par rapport au montage et à l’anesthésie laborieux d’animaux individuels, notre approche de refroidissement peut immobiliser de manière réversible de grandes populations de C. elegans, éliminant ainsi 98% du temps de traitement.

L’absence d’anesthésiques chimiques minimise également l’exposition nocive des animaux et des chercheurs. Un étage de refroidissement permet d’obtenir un débit élevé et une imagerie haute résolution directement sur les plaques de culture. La simplicité de cette conception permet à d’autres chercheurs de construire facilement leurs propres dispositifs et de les intégrer dans leurs installations existantes, afin de révolutionner la portée et le rythme de leurs études biologiques.

Notre laboratoire adaptera l’étage de refroidissement à différentes configurations de microscopes. Différentes conceptions fonctionneront avec des microscopes inversés, des microscopes droits composés, ainsi que différentes plates-formes d’imagerie.