Pour commencer, rincez doucement les gaines foliaires du maïs inoculées avec des spores fongiques dans de l’eau déminéralisée. Placez la gaine sur une lame de microscope en verre propre avec la surface adaxiale vers le bas et la surface abaxiale vers le haut. À l’aide d’une lame de rasoir à un seul tranchant, coupez environ un centimètre des extrémités de la gaine et retirez la plupart des tissus du limbe de chaque côté de la nervure médiane.
Tenez la lame de rasoir à un angle de 90 degrés pour raser le tissu de la nervure médiane abaxiale, exposant la couche épidermique sur la surface adaxiale au-dessus de la tache inoculée. Soulevez délicatement la section de la gaine d’un bord et transférez-la sur une nouvelle diapositive avec la surface adaxiale orientée vers la partie supérieure la plus proche de la lentille de l’objectif. Appliquez 60 microlitres d’eau déminéralisée sur la section et placez une lamelle de verre sans introduire de bulles d’air.
Stenocarpella maydis a rapidement envahi les cellules épidermiques directement via des gonflements hyphes indifférenciés. Tandis que Colletotrichum graminicola produisait de l’appressoria mélanisée. La coloration au bleu trypan a révélé la nature et l’étendue de la colonisation des hyphes fongiques, C. graminicola envahissant d’abord par des hyphes primaires épais et passant plus tard à un stade nécrotrophe.
C. graminicola envahit les cellules vivantes du maïs à l’aide d’épais hyphes primaires séparés du cytoplasme de l’hôte par une membrane. En revanche, S. maydis produit une phytotoxine qui tue les cellules de l’épiderme avant de les envahir. Chez C. graminicola, la production de précipité brun foncé dans les gaines foliaires du maïs indique une explosion oxydative liée à une réponse de résistance de l’hôte.
