Pour commencer, incubez des œufs de poule fécondés dans un incubateur humidifié à 38 degrés Celsius. Ensuite, placez un embryon de poulet de stade 28 à 32 dans une boîte de Pétri de 60 millimètres remplie de HBSS. Après avoir disséqué la peau et la tête de l’embryon dorsal, tirez doucement sur les bourgeons des membres pour repositionner la face ventrale du corps vers le bas.
Maintenant, le long des deux côtés du corps de l’embryon, faites une incision d’avant en arrière. Saisissez les bourgeons des membres longitudinalement avec une paire de pinces pour stabiliser le corps. À l’aide d’une pince d’horloger, décollez soigneusement la peau du cou jusqu’à la région de la queue.
À l’aide de ciseaux tranchants, retirez délicatement les tissus sous-cutanés restants encore attachés à la peau pelée et lissez les bords de la peau. Ensuite, ajoutez deux millilitres de DMEM supplémenté dans chaque puits d’un plat à six puits. Après avoir ajouté des antibiotiques dans les puits, placez un insert de culture tissulaire stérile à l’intérieur du puits, en vous assurant que le milieu entoure l’extérieur de l’insert de culture.
Déplacez ensuite la peau sur une spatule tout en l’immergeant dans HBSS pour éviter les plis et les plis. Une fois cela fait, transférez la peau excisée dans un plat contenant du HBSS. Faites glisser lentement la peau de la spatule sur l’insert de culture sans plier.
À l’aide d’une pipette de 200 microlitres, retirez tout excès de HBSS de l’insert. Enfin, incubez les cultures d’explants de peau à 37 degrés Celsius avec un mélange de 5% de dioxyde de carbone et 95% d’air. Remplacez le milieu tous les deux jours.
Les primordia de plumes se sont transformés en courts bourgeons de plumes après deux jours de culture. et de longs bourgeons de plumes se sont développés après quatre jours de culture. Les placodes dermiques étaient plus matures sur la ligne médiane que sur les côtés.
