Collection of Primordial Germ Cells from Drosophila Donor Embryos

Procéder à la collecte des cellules germinales primordiales ou PGC des embryons de filia scories. Après avoir assemblé le système de micro-manipulateur. Lorsque vous travaillez sous un microscope stéréoscopique, utilisez des pinces pour transférer les embryons.

Alignez les embryons enrobés en deux rangées sur une lame de verre de prélèvement PGC le long de deux lignes de référence. Orientez les embryons avec leur partie antérieure vers la droite et la face ventrale vers le haut. Déplacez doucement la pointe de l’aiguille de transplantation vers l’extrémité antérieure d’un embryon.

Pénétrez dans l’embryon en déplaçant la platine du microscope et rétractez légèrement l’aiguille. Lorsque la pointe atteint l’extrémité postérieure. Déchargez tout joug dans l’aiguille à l’intérieur de la couche de cellules somatiques.

Déplacez la pointe de l’aiguille vers le pôle postérieur et chargez doucement les PGC dans l’aiguille sans prendre beaucoup de temps. Retirez rapidement l’aiguille de l’embryon. Déchargez le jaune d’œuf et les autres contaminants de l’aiguille tout en conservant les PGC.

Chargez l’huile de silicone propre de la piscine dans l’aiguille. Avant de prélever des PGC sur un nouvel embryon, déposez autant d’huile de silicone que possible à l’intérieur de la couche de cellules somatiques tout en gardant les PGC chargés dans l’aiguille. Après avoir recueilli les PGC de tous les embryons d’affilée, déposez-les sur la surface d’un embryon et déchargez tout joug ou autre contaminant sur un autre embryon voisin.

De la même manière, collectez et combinez les PGC des embryons de la deuxième rangée.