Pour commencer, ensemencez les cellules DAKIKI dans des plaques de 96 puits à une densité de 0,4 million de cellules par puits. Mettre en place les différents groupes expérimentaux, et après, les traitements correspondants en fonction de la méthode de regroupement. Incuber les plaques pendant 24 heures à 37 degrés Celsius et 5 % de dioxyde de carbone.
Pour le test de cytotoxicité de la lactate déshydrogénase, ajouter cinq microlitres de lysat dans chaque puits du groupe témoin élevé. Et incubez l’assiette à 5 % de dioxyde de carbone et 37 degrés Celsius pendant 15 minutes. Ensuite, ajoutez 100 microlitres du mélange réactionnel dans chaque puits.
Pour éteindre la réaction, ajoutez 50 microlitres de solution de réaction d’arrêt par puits. Pour le test Cell Counting Kit-8, ou CCK-8, après l’incubation initiale de 24 heures, ajoutez 20 microlitres de réactif CCK-8 dans chaque puits. Et remettez les plaques dans l’incubateur à 5 % de dioxyde de carbone et 37 degrés Celsius pendant deux heures.
Les résultats de l’essai de cytotoxicité de la lactate déshydrogénase ont montré une cytotoxicité insignifiante induite par la dioscine à des concentrations de 0,25 à 1,0 microgramme par millilitre, dont les taux de libération de lactate déshydrogénase étaient inférieurs à 10 % et que l’essai CCK-8 avait montré que, par rapport au groupe modèle, la dioscine inhibait la prolifération des cellules DAKIKI induite par le LPS d’une manière dépendante de la concentration, les concentrations de 0,5 et 1,0 microgramme par millilitre montrant une inhibition significative.
