Commencez par placer le tissu cérébral de souris isolé dans 1 millilitre de tampon de digestion par cerveau dans des boîtes de Pétri séparées sur de la glace. Hachez soigneusement les tissus cérébraux en petits morceaux à l’aide d’une lame de scalpel propre. À l’aide d’une pipette de transfert en plastique dont l’extrémité est coupée, transférez soigneusement la cervelle hachée dans des puits individuels à l’intérieur d’une plaque de 24 puits sur de la glace.
Couvrez l’assiette d’un grand morceau de film transparent et flexible, fermez le couvercle et incubez sur de la glace pendant 30 minutes. Ensuite, transférez la solution cérébrale digérée dans des homogénéisateurs individuels en verre glacé de 7 millilitres sur de la glace contenant 5 millilitres de tampon FACS froid. Trempez doucement chaque cerveau avec un pilon lâche jusqu’à l’obtention d’une suspension unicellulaire.
Trempez doucement avec le pilon serré trois à quatre fois pour assurer une suspension unicellulaire avant de transférer dans des tubes en polypropylène de 15 millilitres.