Quantificazione delle modificazioni post-traduzionali degli istoni globali utilizzando la citometria a flusso intranucleare nella microglia cerebrale di topo isolata

La nostra ricerca mira a comprendere i meccanismi regolatori fondamentali che controllano l'espressione genica nel cervello e siamo particolarmente interessati a capire come l'interruzione di questi meccanismi contribuisca alle condizioni dello sviluppo neurologico e neuropsichiatrico. Ci concentriamo sulla comprensione di come i fattori di rischio genetici e ambientali si combinano per alterare la funzione cellulare e produrre disturbi comportamentali. Questo protocollo include metodi per lo screening ad alto rendimento delle modificazioni istoniche nella microglia isolata, consentendoci di eseguire lo screening attraverso dozzine di diverse modificazioni epigenetiche prima di impegnarci in studi di sequenziamento ad alto rendimento e follow-up funzionale.

Il nostro protocollo fornisce misure delle modificazioni storiche globali simili alla trama occidentale. Tuttavia, la nostra tecnica è più veloce, richiede meno celle di input, è più quantitativa e può essere multiplexata.