Préparation de coupes de cerveau ex-vivo à partir de tissu cérébral de souris pour l’étude des circuits hippocampiques-corticaux et olfactifs

Pour commencer, configurez l’espace de travail de récupération et de maintenance de la tranche de cerveau. Préparez l’espace de travail de préparation de la tranche de cerveau et configurez le vibratome. Ensuite, configurez l’espace de travail d’extraction et de préparation du cerveau.

Transférez ensuite le cerveau de souris extrait dans un plat de culture en plastique de 90 millimètres avec une solution de coupe gazeuse réfrigérée dans l’espace de travail de préparation du cerveau. Orientez le cerveau pour le positionner dans le moule d’agarose. Appliquez de la super colle sur l’extrémité rostrale du moule à agarose.

Utilisez une spatule pour placer le cerveau dans le moule avec le côté dorsal vers le bas pour un tranchage horizontal. Coupez l’hippocampe et les tissus du bulbe olfactif. Et à l’aide d’une pipette Pasteur en verre, prélevez les tranches après chaque tour.

Incuber les tranches dans la chambre de récupération artificielle remplie de liquide céphalo-rachidien dans un bain-marie à 32 degrés Celsius pendant 45 minutes, suivi d’une heure à température ambiante.