Pour commencer, placez une souris anesthésiée sur un champ chirurgical frais. Appliquez une pommade ophtalmique sur l’œil de l’animal pour prévenir la sécheresse, puis injectez Metacam, suivi de 0,5 millilitre de solution saline par voie sous-cutanée dans la souris. Rasez le cou de la souris à la base de l’os occipital et essuyez la surface avec du PBS stérile.
Transférez la souris sur le cadre stéréotaxique en position couchée. Placez la barre nasale du cadre stéréotaxique sur le dessus de la souris pour assurer la stabilité et assurez-vous que les dents supérieures sont fixées. Positionnez la tête de l’animal à un angle de 120 degrés par rapport au corps pour élever et distendre la nuque.
Ensuite, à l’aide d’une gaze stérile, nettoyez le site chirurgical trois fois avec un gommage à la bétadine et de l’éthanol à 70%. Essuyez ensuite une fois avec la solution de bétadine. À l’aide d’un scalpel, faites une petite incision d’un centimètre.
Passez soigneusement le scalpel le long de la ligne médiane pour couper les muscles. À l’aide d’une pince, écartez doucement les muscles vers la gauche et la droite. Chargez ensuite la seringue Hamilton avec 2,5 microlitres d’élastase en évitant les bulles d’air.
Insérez lentement la seringue avec le biseau vers le haut au centre de la citerne magna. Après la ponction, retirez soigneusement le biseau pour faciliter la libération d’une petite quantité de liquide céphalo-rachidien ou de LCR. Ensuite, réinsérez le biseau sur le site de ponction et injectez lentement de l’élastase ou du véhicule dans la citerne magna, en laissant l’aiguille en place pendant une minute pour éviter les fuites d’élastase.
Après avoir retiré le biseau, fermez le site d’incision avec une suture chirurgicale non résorbable et éteignez l’anesthésique. Retirez l’animal du cadre stéréotaxique et placez-le sur un coussin chauffant à 37 degrés Celsius jusqu’à ce que la souris récupère.
