Pour commencer, préparez la ligne d’essai et la solution de revêtement de la ligne de contrôle. Diluez l’anticorps de capture de la protéine C-réactive et l’immunoglobuline G anti-lapin de chèvre avec un tampon de phosphate. Ensuite, placez correctement le panneau de polychlorure de vinyle et retirez le papier de protection situé à 25 millimètres du bord du panneau.
Alignez et collez la membrane de nitrocellulose le long du bord inférieur du papier de protection restant sur le panneau de polychlorure de vinyle. Distribuez les solutions de revêtement de la ligne d’essai et de la ligne de contrôle sur la membrane de nitrocellulose, en veillant à ce qu’elle soit placée à 20 millimètres du bord supérieur, formant ainsi une ligne d’essai. Pour le séchage, placez la membrane de nitrocellulose dans des conditions où l’humidité est inférieure à 30 % et où la température varie entre 18 et 26 degrés Celsius.
Pour préparer le tampon conjugué, immergez-le dans la solution de traitement du tampon conjugué, puis placez le tampon conjugué trempé dans une étuve de séchage pour un traitement de séchage pendant la nuit. Diluez la solution conjuguée d’anticorps à nanobilles QD préparée avec la solution de conservation et distribuez-la sur le tampon conjugué. Pour la préparation des tampons d’échantillons.
Immergez le tampon d’échantillon dans la solution de traitement du tampon d’échantillon. Placez ensuite le tampon d’échantillon trempé dans un four de séchage réglé à 45 degrés Celsius et séchez-le pendant 24 heures. Placez successivement le papier absorbant, le tampon conjugué et le tampon d’échantillon sur le panneau de polychlorure de vinyle avec la membrane de nitrocellulose.
Pipeter 10 microlitres d’échantillon de plasma ou de solution d’étalonnage dans un millilitre de tampon A PBS contenant 0,1% entre 20. Transférez ensuite 100 microlitres de l’échantillon dilué préparé sur le tampon d’échantillonnage de la bandelette de test. Après une course de 15 minutes, observez les signaux fluorescents de la ligne d’essai et de la ligne de contrôle sous exposition à la lumière ultraviolette pour obtenir des résultats qualitatifs.
Insérez la carte de bandelette dans un lecteur de test à flux latéral fluorescent pour obtenir les intensités de fluorescence pour l’analyse quantitative.
