Pour commencer, portez un équipement de protection individuelle approprié. Avant l’intervention, pesez le rat pour déterminer la dose correcte pour les médicaments basés sur le poids et les réglages de ventilateur. Après avoir anesthésié le rat, placez-le en position couchée.
Pour confirmer la profondeur de l’anesthésie, utilisez une pince pour appuyer doucement sur le coussinet du pied du membre postérieur et vérifiez l’absence de réponse de retrait. Appliquez maintenant une pommade à base de pétrole approuvée par un vétérinaire sur les yeux du rat pour prévenir la sécheresse. Observez la fréquence respiratoire et évaluez les réponses de sevrage, comme indiqué précédemment.
Ensuite, à l’aide d’une tondeuse, rasez la patte arrière du rat. Utilisez du ruban adhésif pour positionner le membre avec la cheville fixée à 90 degrés en dorsiflexion, le genou en extension et la hanche en abduction. Ensuite, insérez une paire d’aiguilles monopolaires isolées de calibre 28 pour stimuler le nerf sciatique avec la cathode placée dans la région du membre postérieur proximal et l’anode positionnée plus proximale dans le tissu sous-cutané, recouvrant le sacrum.
Placez ensuite une électrode de masse jetable sur le membre postérieur ou la queue controlatérale. Insérez avec précaution une électrode à aiguille d’autoclave de calibre 27 et de 25 millimètres, spécialement conçue pour l’électromyographie à fibre unique, dans le muscle gastrocnémien droit. Insérez l’électrode de l’aiguille d’électromyographie à fibre unique en parallèle avec les fibres du muscle gastrocnémien pour capturer le potentiel d’action de la fibre unique.
Appliquez une stimulation à courant constant sur le nerf sciatique droit à une fréquence de 10 hertz, en utilisant une plage d’intensité de 0,3 à 10 milliampères et une durée d’impulsion de 0,1 milliseconde. Ajustez le gain de 200 microvolts à 1000 microvolts par division pour améliorer la visualisation du potentiel. Configurez la vitesse de balayage pour qu’elle soit de 500 microsecondes par division.
Pour classer une réponse comme un SFAP, elle doit présenter un temps de montée inférieur à 500 microsecondes, une amplitude minimale de 200 microvolts et démontrer un comportement tout ou rien. Calculez la gigue ou la variabilité de la latence SFAP entre des décharges consécutives après au moins 50 stimulations à l’aide de l’équation donnée. Évaluer et quantifier le blocage.
Après avoir évalué 10 synapses de chaque animal, calculez la gigue et déterminez les valeurs moyennes par animal. Lors de l’enregistrement de potentiels qui montrent un blocage intermittent, augmentez l’intensité du stimulus pour confirmer que l’échec du SFAP n’est pas dû à une stimulation sous-maximale. Au cours de l’administration de rocuronium, l’EMG à fibre unique a montré une variabilité accrue de la transmission et du blocage de la jonction neuromusculaire par rapport aux individus en bonne santé.
