Extraction d’ADN à partir de tissus cancéreux pour la détection de mutations à basse fréquence à l’aide de la technologie d’amplification par déplacement de bloqueur

Pour commencer, préparez tous les réactifs nécessaires à la préparation des échantillons de tissus et à l’extraction de l’ADN. Ajoutez 500 microlitres de tampon de paraffine profond et 20 microlitres de solution de protéinase K à environ 30 milligrammes de tissu dans un microtube à centrifuger. Manipulez le tube de la micro-centrifugeuse pendant au moins 10 secondes et placez-le dans un thermostat sec réglé à 55 degrés Celsius pendant 90 minutes.

Après l’incubation, transférez l’échantillon, y compris le liquide et le tissu, dans la colonne de centrifugation qui est placée dans un tube filtrant. Centrifuger à 16, 500 G pendant cinq minutes pour séparer le liquide dans le tube filtrant. Ensuite, transférez le liquide du tube filtrant dans un tube d’échantillon étiqueté et effectuez l’extraction de l’ADN conformément aux instructions du fabricant.

Mesurez la concentration et la pureté de l’ADN extrait.