חסימת PCR מסוג Wild בשילוב עם ריצוף Sanger לאיתור מוטציה סומטית בתדר נמוך

אנו מעוניינים להבין מוטציות סומטיות בתדירות נמוכה ברקמות סרטניות. מאמר זה מציג את היישום לשיטת זיהוי מוטציות בתדירות נמוכה המבוססת על ריצוף סנגר שלנו בבדיקת לימפומה אנגיואימונובלסטית, ומספק בסיס ליישום שיטה זו בבדיקות מחלה אחרות. כיום קיימות שיטות לזיהוי מוטציות בתדירות נמוכה כגון PCR כמותי, PCR דיגיטלי ו- NGS.

אבל אין דיווח על גילוי מוטציה בתדר נמוך IGHV7-3 בהתבסס על ריצוף Sanger, שמגבלת הגילוי שלו היא רק 5%-20%. בדרך כלל בשל מגבלות טכניות, לא ניתן לכמת במדויק זיהוי בתדר נמוך המבוסס על ריצוף Sanger. הטכניקה שלנו מציעה רגישות גבוהה, עלות נמוכה וגמישות חזקה, מה שהופך אותה לבחירה אידיאלית לזיהוי מוטציות בתדר נמוך. אנו מתכננים לעצב פריימרים פסאודוגנים כמו גם פריימרים GCR מרובים כדי לחקור את היישום שלהם במחלות דם.