Wildtyp-Blocking-PCR in Kombination mit Sanger-Sequenzierung zum Nachweis niederfrequenter somatischer Mutationen

Wir sind daran interessiert, die niederfrequente somatische Mutation in Krebsgeweben zu verstehen. Dieser Artikel stellt die Anwendung der niederfrequenten Mutationsnachweismethode vor, die auf unserem Sanger-Sequenzierungstest im angioimmunoblastischen Lymphomtest basiert, und bietet eine Grundlage für die Anwendung dieser Methode auf andere Krankheitstests. Derzeit gibt es niederfrequente Methoden zum Nachweis von Mutationen wie quantitative PCR, digitale PCR und NGS.

Es gibt jedoch keinen Bericht über den Nachweis von IGHV7-3-Niederfrequenzmutationen auf der Grundlage der Sanger-Sequenzierung, bei der die Nachweisgrenze nur 5 % bis 20 % beträgt. Im Allgemeinen kann der niederfrequente Nachweis auf der Grundlage der Sanger-Sequenzierung aufgrund technischer Einschränkungen nicht genau quantifiziert werden. Unsere Technik bietet eine hohe Empfindlichkeit, niedrige Kosten und hohe Flexibilität und ist damit die ideale Wahl für die Erkennung von niederfrequenten Mutationen. Wir planen, sowohl Pseudogen-Primer als auch Multiplex-GCR-Primer zu entwickeln, um ihre Anwendung bei Blutkrankheiten zu erforschen.