Ce travail a été soutenu par une subvention du ministère fédéral allemand de l&#39;Education et la Recherche (BMBF) dans la Focus Bernstein: bases neuronales de l&#39;apprentissage (BFNL) à DE Nous remercions Randolf Menzel pour leurs précieux commentaires sur une version antérieure du manuscrit.

1. Attraper les abeilles de la ruche <ol><li> Un jour avant l&#39;expérience commence, entre 2 et 16 heures, laissant les abeilles de la ruche sont capturés. Pour ce faire, une pyramide en plexiglas lumière UV-perméable (hauteur = 30 cm, apex 3,5 x 3, 5 cm, base 18 x 18 cm), qui peut être fermée à l&#39;apex et la base, est maintenu à un 20 - 30 cm de distance en face de l&#39;entrée de la ruche avec la base et d&#39;ouvrir l&#39;apex fermé afin que les abeilles de la ruche en laissant entrer dans la base de la pyramide. La base est alors fermé et les abeilles capturées sont introduits dans le laboratoire pour traitement ultérieur. </li></ol> 2. Transfert des abeilles de la Pyramide dans des flacons de verre <ol><li> Dans le laboratoire, la pyramide est placé sur sa base. Les murs de la pyramide sont assombris (par exemple avec une serviette), mais l&#39;apex est laissé à découvert. En raison de leur phototaxie positive, les abeilles vont quitter la pyramide par le sommet lorsqu&#39;il est ouvert. Un par un, les abeilles sont transférés de la pyramide dans des flacons en verre en tenant le flacon au cours de l&#39;apex ouvert. Un flacon est utilisé par abeille. Par conséquent, le sommet est fermé lorsque l&#39;on pénètre dans le flacon abeille. </li></ol> 3. Exploiter les abeilles dans les tubes <ol><li> Les abeilles sont immobilisés en les refroidissant dans les flacons de verre sur la glace pour 02.05 à 03.05 min. Il est conseillé de regarder l&#39;abeille et l&#39;enlever de la glace dès qu&#39;il cesse de bouger. </li><li> Une seule abeille immobilisée est exploitée dans un petit tube en plastique avec du ruban adhésif, tel qu&#39;il est capable de se déplacer librement mais sa trompe pas sa tête, le thorax et les jambes. Il est important que le cou n&#39;est pas compressée. </li><li> Chaque abeille fixée dans un tube en plastique est mis dans un trou numéroté sur une grille pour une meilleure manipulation et d&#39;identification. Après qu&#39;il a été enlevé pour la récupération de conditionnement ou de la mémoire du tube est toujours retourné à l&#39;forage exactement les mêmes. </li></ol> 4. Abeilles alimentation <ol><li> Le premier soir (4-6 heures), après avoir été capturés, les abeilles sont nourries à satiété avec une solution de saccharose (0,88 M, sucre blanc raffiné ménages dissous dans l&#39;eau du robinet). Pour nourrir une abeille, son PER est suscité par le toucher de ses antennes avec une solution de saccharose et de l&#39;animal est autorisé à consommer une gouttelette (4 pi) de solution de saccharose. Les abeilles sont nourries l&#39;une après l&#39;autre jusqu&#39;à ce qu&#39;ils ne montrent plus un PER d&#39;une rapide et fiable lorsque leurs antennes sont touchés avec une solution de saccharose. </li><li> Sur chaque soir ultérieures (4-6 heures) des abeilles expérimentation sont nourris l&#39;un après l&#39;autre quatre fois avec une goutte de solution de saccharose (4 pl, 0,88 M, sucre blanc raffiné résolu dans l&#39;eau du robinet). Il est important que la solution de saccharose n&#39;est pas étalé sur les antennes de l&#39;abeille ou de la trompe lors de l&#39;alimentation et que les tubes ne sont pas contaminées avec une solution de saccharose. Les abeilles ne devraient pas être nourris à ou près du site de conditionnement d&#39;exclure la possibilité d&#39;associer le contexte de formation à la relance du saccharose. </li></ol> 5. Élevage des abeilles Harnaché Nuit <ol><li> Les abeilles sont gardées la nuit dans un bol en plastique à température ambiante. L&#39;eau du robinet est remplie dans le bol (environ 0,5-1 cm de haut). Supports avec les abeilles exploitée sont placés dans le bol dessus de la flottaison en utilisant des plaques ELISA comme une plate-forme. Enfin, le bol est couvert avec du carton. </li></ol> 6. Conditionnement olfactif Le premier matin (10 h) de l&#39;expérience de conditionnement olfactif est effectuée. Le stimulus conditionné (CS) est une odeur, le stimulus inconditionnel (US) est solution de saccharose. <ol><li> 4 pl de l&#39;odeur (par exemple l&#39;huile de clou de girofle) sont à la pipette sur un papier filtre rond (1,3 cm de diamètre) qui est ensuite inséré dans une seringue de 20 ml. L&#39;odeur est pipeté sous une hotte et pointes à filtre sont utilisés pour prévenir la contamination de la pipette. </li><li> Le rack d&#39;abeilles exploitée est placé à proximité du site de conditionnement 30 min avant la procédure de conditionnement commence, mais à une distance de la place en face d&#39;un tuyau d&#39;échappement simple où les abeilles sont conditionnés. </li><li> Conditionnement constitué de trois paires d&#39;odeur (le stimulus conditionné, SC) et de solution de saccharose (le stimulus inconditionné, Etats-Unis, 1,25 m) avec un intervalle inter-essai (IIT) de 10 min. Un signal acoustique livré à l&#39;expérimentateur via un lecteur audio assure la synchronisation précise de l&#39;apparition de relance, relance de décalage, la durée de relance et de placement. Un essai d&#39;acquisition commence par un stage de 10 sec de l&#39;animal en face d&#39;un échappement. Peu avant la fin de la 10 sec la seringue contenant l&#39;odeur est placée à 3 cm en face de l&#39;abeille destinés aux antennes de l&#39;abeille. Par la suite, l&#39;odeur est présenté pendant 5 sec, en poussant l&#39;air 20 ml par la seringue. Après le premier 3 sec les flagelles distales des deux antennes sont touchées par un sucrose solution humidifié cure-dent et les animaux sont autorisés à lécher le cure-dent moistend pendant 4 sec. 13 sec après la fin de la stimulation CS, les abeilles sont prises hors du contexte de formation et replacée dans le rack. Au total, un essai de formation dure 28 sec. Il est important que ni l&#39;abeille antennes, ni la trompe sont couverts avec du saccharose après conditionnement. Par conséquent, il doit être assuré que le cure-dent est seulement humidifié avec une solution de saccharose et qu&#39;aucune forme des gouttes de solution de saccharose sur le cure-dent. </li><li> Après conditionnement les racks sont replacés dans le bol. </li><li> Le comportement des animaux pendant l&#39;expérience, c&#39;est à dire l&#39;apparition de la PER pendant le placement et le CS et la présentation des Etats-Unis, est contrôlé et noté par l&#39;expérimentateur. </li></ol> 7. Rétention de mémoire <ol><li> Rétention des tests peuvent être effectués à n&#39;importe quel intervalle (min à jour). Le rack d&#39;abeilles est placé à proximité du site de conditionnement 30 min avant le test de mémoire commence. </li><li> Un test de mémoire se compose de 5 sec CS présentation sans la présentation US. Le test commence par un stage de 10 sec de l&#39;animal en face de l&#39;échappement. Par la suite, l&#39;odeur est présenté pendant 5 sec comme décrit ci-dessus. Le comportement de l&#39;animal, c&#39;est à dire l&#39;apparition du PER au cours du placement et la présentation CS est noté pendant l&#39;expérience. </li><li> A la fin de l&#39;expérience de la réponse extention proboscis est de nouveau déclenchée par toucher les antennes avec une solution de sucrose pour s&#39;assurer que l&#39;animal est toujours en mesure d&#39;étendre sa trompe. </li></ol> 8. Injection systémique Le point le temps d&#39;injection systémique dépend de la conception expérimentale. <ol><li> Un petit trou est fait dans la cuticule de la partie postérieure de la scutum côté de la fissure au-dessus des 17 scutal muscles de vol en utilisant une aiguille hypodermique jetables (21 G). </li><li> En utilisant un tube capillaire en verre, une solution est injectée à travers uL le trou dans la cuticule dans le muscle de vol. Expérimentateurs formés sont en mesure d&#39;injecter une abeille toutes les 30 secondes, permettant une synchronisation précise de l&#39;injection et le conditionnement. </li></ol> 9. Abeilles alimentation cours de l&#39;expérience <ol><li> Dans la soirée (4-6 heures) après le conditionnement, les abeilles sont nourries l&#39;une après l&#39;autre quatre fois avec une goutte de solution de saccharose (4 pl, 0,88 M, sucre blanc raffiné dissous dans l&#39;eau du robinet). Il est important que la solution de saccharose n&#39;est pas étalé sur les antennes de l&#39;abeille ou de la trompe lors de l&#39;alimentation et que les tubes ne sont pas contaminées avec une solution de saccharose. Les abeilles ne devraient pas être nourris à ou près du site de conditionnement d&#39;exclure la possibilité d&#39;associer le contexte de formation à la relance du saccharose. </li></ol> 10. Collecte et analyse des données <ol><li> Présence de la réponse d&#39;extension proboscis pendant l&#39;expérience est surveillée. Une abeille est marqué positive si elle étend sa trompe entre le début de la CS et la présentation des États-Unis (pendant la formation) ou lors de la présentation CS (durant la phase de test), en traversant une ligne virtuelle entre les mandibules ouvertes. </li><li> Pour être inclus dans l&#39;analyse des animaux doit remplir deux critères: ils doivent survivre toute l&#39;expérience et ils doivent montrer la réaction d&#39;extension inconditionnée proboscis (PER) à la solution de saccharose à la fin de l&#39;expérience. Le pourcentage d&#39;abeilles montrant le PER lors de l&#39;acquisition et de tests de rétention est tracée pour chaque présentation CS. </li></ol> 11. Les résultats représentatifs: Deux expériences sont présentées ici. Dans la première expérience nous regardons l&#39;impact de l&#39;injection systémique de tampon phosphate salin (PBS; en mM: NaCl 137, KCl 2,7, 10,1 Na 2 HPO 4, 1,8 KH 2 PO 4, pH 7, 2) sur l&#39;apprentissage et la formation de la mémoire à long terme. Trois groupes d&#39;abeilles ont été formés avec trois CS-US appariements avec un intervalle inter-essai de 10 min: un groupe non traité, un groupe qui a été injecté avec 1 ul de PBS 30 min avant l&#39;entraînement, et un groupe témoin traité le-injectée même manière que le groupe PBS-injecté, mais sans l&#39;injection de PBS. 24 h après la formation de la mémoire a été testé avec une présentation CS dans les trois groupes. Le pourcentage d&#39;animaux présentant la réponse conditionnée pendant le conditionnement augmente sensiblement dans les trois essais de formation (Fig.1, ANOVA pour mesures répétées pour le facteur temps F 2378 = 340 456, p &lt;0,05). Aucune différence en PER pouvait être observée entre les trois groupes lors du conditionnement (ANOVA pour mesures répétées pour des groupes facteur F2, 189 = 1299, p&gt; 0,05). Cela est vrai pour un test de rétention 24 h (F2, 187 = 0752, p&gt; 0,05) lors de la comparaison des animaux non traités avec du PBS-injecté des animaux et des sham-injecté. Dans la deuxième expérience, nous démontrons l&#39;inhibition de trois rétention de la mémoire et quatre jours après la formation lorsque l&#39;inhibiteur de la synthèse des protéines anisomycine (10 mM) a été injecté par voie systémique 30 min après trois paires CS-US. Comparaison d&#39;un groupe anisomycine-injecté avec un groupe PBS-injecté révèle une différence significative entre les groupes lors de la rétention de tEST (Fig.2, ANOVA pour mesures répétées pour le facteur groupe de F1, 94 = 8,86, p &lt;0,05). Une différence majeure peut être observée à l&#39;épreuve la mémoire le jour 3 et jour 4. Cela ressemble à des résultats de Wüstenberg et al. 18, qui a également conditionnée abeilles avec trois paires de CS-US, mais avec un protocole différent. <img src="/files/ftp_upload/2282/2282fig1.jpg" alt="Figure 1" /> Figure 1. Lésion cutícula ou l&#39;injection de PBS ne modifie pas l&#39;acquisition et la rétention de la mémoire. Les animaux ont été formés avec trois paires de CS-US (d&#39;acquisition). Après 24 h, la mémoire a été testé (Conservation de la mémoire). Trente minutes avant l&#39;entraînement, un trou a été fait dans la cuticule des deux groupes (lésion, PBS) et un de ces groupes a été injecté avec 1 ul de PBS (PBS). Un troisième groupe a été laissée intacte (aucun traitement). Présenté est le pourcentage d&#39;animaux de chaque groupe répondant à la présentation de l&#39;odeur avec un PER. Une ANOVA ne révèle aucune différence significative entre les groupes de la phase d&#39;acquisition (F2, 189 = 1,299, p&gt; 0,05) ou de la rétention de la mémoire (F2, 187 = 0,752, p&gt; 0,05). <img src="/files/ftp_upload/2282/2282fig2.jpg" alt="Figure 2" /> Figure 2. L&#39;injection de anisomycine 40 min après la dernière CS-US appariement réduit la rétention de la mémoire de trois jours et quatre jours après la formation. Les animaux ont été formés avec trois paires de CS-US (acquisition) et une injection de 1 uL 10 mM (Aniso) anisomycine ou 1 ul de PBS 1 h après le procès de formation d&#39;abord. La mémoire a été testé (Rétention de mémoire) 24 h, 48 h, 72 h et 96 h plus tard. Présenté est le pourcentage d&#39;animaux par groupe répondant à la présentation de l&#39;odeur avec un PER. L&#39;injection de anisomycine conduit à une réduction significative de la mémoire de rétention de 72 h et 96 h après la formation (F1, 94 = 8,86, p &lt;0,05) tel que révélé par une analyse de variance.

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	<li>Menzel, R., Giurfa, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cognitive+architecture+of+a+mini-brain:+the+honeybee.">Cognitive architecture of a mini-brain: the honeybee.</a> Trends Cogn Sci. 5, 62-71 (2001).</li><li>Menzel, R., Leboulle, G., Eisenhardt, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Small+brains,+bright+minds.">Small brains, bright minds.</a> Cell. 124, 237-239 (2006).</li><li>Menzel, R., Kesner, R. P., Olton, D. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Neurobiology of comparative cognition. , (1990).</li><li>Bitterman, M. E., Menzel, R., Fietz, A., Schafer, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Classical-Conditioning+of+Proboscis+Extension+in+Honeybees+(Apis-Mellifera).">Classical-Conditioning of Proboscis Extension in Honeybees (Apis-Mellifera).</a> J. Comp. Psyc. 97, 107-119 (1983).</li><li>Menzel, R., Muller, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Learning+and+memory+in+honeybees:+from+behavior+to+neural+substrates.">Learning and memory in honeybees: from behavior to neural substrates.</a> Annu. Rev. Neurosci. 19, 379-404 (1996).</li><li>Menzel, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Memory+dynamics+in+the+honeybee.">Memory dynamics in the honeybee.</a> Journal of Comparative Physiology A-Neuroethology Sensory Neural and Behavioral Physiology. 185, 323-340 (1999).</li><li>Menzel, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Searching+for+the+memory+trace+in+a+mini-brain,+the+honeybee.">Searching for the memory trace in a mini-brain, the honeybee.</a> Learn. Mem. 8, 53-62 (2001).</li><li>Eisenhardt, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Learning+and+memory+formation+in+the+honeybee+(Apis+mellifera)+and+its+dependency+on+the+cAMP-protein+kinase+A+pathway.">Learning and memory formation in the honeybee (Apis mellifera) and its dependency on the cAMP-protein kinase A pathway.</a> Animal Biology. 56, 259-278 (2006).</li><li>Hourcade, B., Muenz, T. S., Sandoz, J. C., Rossler, W., Devaud, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Long-term+memory+leads+to+synaptic+reorganization+in+the+mushroom+bodies:+a+memory+trace+in+the+insect+brain.">Long-term memory leads to synaptic reorganization in the mushroom bodies: a memory trace in the insect brain.</a> J. Neurosci. 30, 6461-6465 (2010).</li><li>Denker, M., Finke, R., Schaupp, F., Grun, S., Menzel, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neural+correlates+of+odor+learning+in+the+honeybee+antennal+lobe.">Neural correlates of odor learning in the honeybee antennal lobe.</a> Eur. J. Neurosci. 31, 119-133 (2010).</li><li>Szyszka, P., Galkin, A., Menzel, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Associative+and+non-associative+plasticity+in+kenyon+cells+of+the+honeybee+mushroom+body.">Associative and non-associative plasticity in kenyon cells of the honeybee mushroom body.</a> Front Syst. Neurosci. 2, 3-3 (2008).</li><li>Okada, R., Rybak, J., Manz, G., Menzel, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Learning-related+plasticity+in+PE1+and+other+mushroom+body-extrinsic+neurons+in+the+honeybee+brain.">Learning-related plasticity in PE1 and other mushroom body-extrinsic neurons in the honeybee brain.</a> J. Neurosci. 27, 11736-11747 (2007).</li><li>Muller, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Prolonged+activation+of+cAMP-dependent+protein+kinase+during+conditioning+induces+long-term+memory+in+honeybees.">Prolonged activation of cAMP-dependent protein kinase during conditioning induces long-term memory in honeybees.</a> Neuron. 27, 159-168 (2000).</li><li>Locatelli, F., Bundrock, G., Muller, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Focal+and+temporal+release+of+glutamate+in+the+mushroom+bodies+improves+olfactory+memory+in+Apis+mellifera.">Focal and temporal release of glutamate in the mushroom bodies improves olfactory memory in Apis mellifera.</a> J. Neurosci. 25, 11614-11618 (2005).</li><li>Stollhoff, N., Menzel, R., Eisenhardt, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Spontaneous+recovery+from+extinction+depends+on+the+reconsolidation+of+the+acquisition+memory+in+an+appetitive+learning+paradigm+in+the+honeybee+(Apis+mellifera.">Spontaneous recovery from extinction depends on the reconsolidation of the acquisition memory in an appetitive learning paradigm in the honeybee (Apis mellifera.</a> J. Neurosci. 25, 4485-4492 (2005).</li><li>Stollhoff, N., Eisenhardt, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Consolidation+of+an+extinction+memory+depends+on+the+unconditioned+stimulus+magnitude+previously+experienced+during+training.">Consolidation of an extinction memory depends on the unconditioned stimulus magnitude previously experienced during training.</a> J. Neurosci. 29, 9644-9650 (2009).</li><li>Snodgrass, R. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Anatomy of the honeybee. , (1956).</li><li>Wustenberg, D., Gerber, B., Menzel, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Short+communication:+long-+but+not+medium-term+retention+of+olfactory+memories+in+honeybees+is+impaired+by+actinomycin+D+and+anisomycin.">Short communication: long- but not medium-term retention of olfactory memories in honeybees is impaired by actinomycin D and anisomycin.</a> Eur. J. Neurosci. 10, 2742-2745 (1998).</li><li>Vollbehr, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Zur+Orientierung+junger+Honigbienen+bei+ihrem+1.">Zur Orientierung junger Honigbienen bei ihrem 1.</a> Orientierungsflug. Zool. Jb. Physiol. 79, 33-69 (1975).</li><li>Scheiner, R., Erber, J., Page, R. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tactile+learning+and+the+individual+evaluation+of+the+reward+in+honey+bees+(Apis+mellifera+L.).">Tactile learning and the individual evaluation of the reward in honey bees (Apis mellifera L.).</a> J. Comp Physiol [A]. 185, 1-10 (1999).</li><li>Sanchez, B. r. i. t. o., G, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Behavioral+studies+on+tarsal+gustation+in+honeybees:+sucrose+responsiveness+and+sucrose-mediated+olfactory+conditioning.">Behavioral studies on tarsal gustation in honeybees: sucrose responsiveness and sucrose-mediated olfactory conditioning.</a> J. Comp Physiol A Neuroethol. Sens. Neural Behav. Physiol. 194, 861-869 (2008).</li><li>Menzel, R., Manz, G., Menzel, R., Greggers, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Massed+and+spaced+learning+in+honeybees:+the+role+of+CS,+US,+the+intertrial+interval,+and+the+test+interval.">Massed and spaced learning in honeybees: the role of CS, US, the intertrial interval, and the test interval.</a> Learn. Mem. , 198-208 (2001).</li><li>Friedrich, A., Thomas, U., Muller, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Learning+at+different+satiation+levels+reveals+parallel+functions+for+the+cAMP-protein+kinase+A+cascade+in+formation+of+long-term+memory.">Learning at different satiation levels reveals parallel functions for the cAMP-protein kinase A cascade in formation of long-term memory.</a> J. Neurosci. 24, 4460-4468 (2004).</li></ol>

<ol><li> Attraper les abeilles: Pour collecter expérimentés butineuses, les abeilles sont pris soit le matin ou l&#39;après-midi, en évitant le temps où les jeunes abeilles sont les 19 vols d&#39;orientation. Les butineuses recueillent le pollen ou le nectar soit. Différences entre le pollen et le nectar butineuses ont été observées en fonction de leur réactivité à sucre et de leurs capacités d&#39;apprentissage 20. Afin d&#39;attraper les butineuses de nectar seulement, une source de nourriture artificiel rempli avec une solution de saccharose peut être installé à proximité de la ruche et les animaux peuvent être recueillis là. Butineuses retournant à la ruche peuvent être identifiés par les corbeilles à pollen sur leurs pattes arrière 20. </li><li> Fixation et de manutention: refroidissement prolongé des abeilles sur la glace doit être évitée car elle pourrait affecter leur capacité à apprendre et à survivre jusqu&#39;à la fin de l&#39;expérience. Les tarses doivent être fixés avec soin dans le tube pour éviter la stimulation accidentelle avec une solution de saccharose. Ceci est important, car les abeilles ont été montré pour apprendre par la stimulation du tarse avec une solution succrose 3,21. </li><li> Conditionnement olfactif: Le nombre d&#39;essais de conditionnement, l&#39;intervalle entre les essais et le point le temps de test peut être varié en fonction de l&#39;objectif de l&#39;étude 3,22. </li><li> Alimentation: Le niveau de satiété des abeilles est connue pour affecter leurs performances d&#39;apprentissage et de rétention 3,23 mémoire. Ceci doit être pris en compte lors de la planification des expériences. </li><li> Injection: sacs d&#39;air sont situées dans le thorax des abeilles 17. Ces parties vitales du système respiratoire sont nécessaires pour la survie. Ainsi il faut prendre soin de ne pas endommager les sacs d&#39;air pendant l&#39;injection. La libération de bulles d&#39;air indique endommager les sacs aériens. </li></ol>

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		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
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<td>Syringe Omnifix 20 ml</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>B.Braun, Melsungen, Germany </td>
<td>4616200 V</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>White refined household sugar</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Kaisers Supermarket, Berlin, Germany</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Clove oil</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Bombastus, Freital, Germany </td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Multipette plus</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Eppendorf, Hamburg, Germany</td>
<td>4981 000.019</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Rack for 30 bee tubes</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Self-made</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Plastic tubes</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Self-made</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>UV light-permeable plexiglass pyramid</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Self-made</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>height = 30cm, 
apex 3.5 x 3.5cm, 
base 18x18cm</td>
</tr>
<tr>
<td>Sticky tape</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Tesa, Hamburg, Germany</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Capillator sticks 1-5&mu;l</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Selzer, Driedorf-Roth, Germany</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Capillator tips 1-5&mu;l</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Selzer, Driedorf-Roth, Germany</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Filter paper 0.16-0.2 mm thick</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Macherey-Nagel, D&uuml;ren, Germany</td>
<td>MN 616 or MN615</td>
<td>Adjusted to circular pieces with a 1.3 cm diameter</td>
</tr>
<tr>
<td>Disposable hypodermic needle</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>B. Braun, Melsungen, Germany</td>
<td>4657683</td>
<td>0.45 mm diameter</td>
</tr>		</tbody>
		</table>
		</div>

behavioural pharmacology in classical conditioning of the proboscis extension response in honeybees (apis mellifera)

Les abeilles domestiques (Apis mellifera) sont bien connus pour leurs compétences de communication et d&#39;orientation et de leur capacité d&#39;apprentissage 1,2 impressionnante. Parce que la survie d&#39;une colonie d&#39;abeilles dépend de l&#39;exploitation des sources de nourriture, les abeilles butineuses apprendre et mémoriser les sites de fleurs variable ainsi que leur rentabilité. Butineuses peuvent être facilement entraînés dans un cadre naturel où ils fourrages à un site d&#39;alimentation et d&#39;apprendre les signaux liés tels que l&#39;odeur ou la couleur. Appétitive apprentissage associatif peut aussi être étudié sous des conditions contrôlées en laboratoire par le conditionnement de la réponse d&#39;extension proboscis (PER) de 3,4 individuellement exploité abeilles. Ce paradigme de l&#39;apprentissage permet l&#39;étude des mécanismes neuronaux et moléculaires qui sous-tendent l&#39;apprentissage et la formation de la mémoire d&#39;une manière simple et très fiable 5-12. Une approche pharmacologie comportementale est utilisée pour étudier les mécanismes moléculaires. Les médicaments sont injectés par voie systémique d&#39;interférer avec la fonction de molécules spécifiques pendant ou après l&#39;apprentissage et 13-16 formation de la mémoire. Ici nous démontrons comment former les abeilles exploitée dans le conditionnement PER et comment appliquer la drogue systémique par injection dans le muscle de vol des abeilles.

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Behavioural Pharmacology in Classical Conditioning of the Proboscis Extension Response in Honeybees Apis mellifera

Nous démontrons comment mettre en œuvre une méthode pharmacologie comportementale dans un paradigme de conditionnement olfactif appétitif chez les abeilles (Apis mellifera) par application systémique de médicaments. Cette méthode permet l&#39;étude des mécanismes sous-jacents de l&#39;apprentissage et la formation de la mémoire d&#39;une manière simple et fiable.

Pharmacologie comportementale dans le conditionnement classique de la réponse Extension Proboscis chez les abeilles ( Apis mellifera)

Honeybees (Apis mellifera) are well known for their communication and orientation skills and for their impressive learning capability1,2. Because the ...

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Research

JoVE Journal

Neuroscience

Behavioural Pharmacology in Classical Conditioning of the Proboscis Extension Response in Honeybees (Apis mellifera)

19.2K vues.  Freie Universität Berlin. Nous démontrons comment mettre en œuvre une méthode pharmacologie comportementale dans un paradigme de conditionnement olfactif appétitif chez les abeilles (Apis mellifera) par application systémique de médicaments. Cette méthode permet l'étude des mécanismes sous-jacents de l'apprentissage et la formation de la mémoire d'une manière simple et fiable.

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Recording Large-scale Neuronal Ensembles with Silicon Probes in the Anesthetized Rat

Large scale electrophysiological recordings from neuronal ensembles offer the opportunity to investigate how the brain orchestrates the wide variety of behaviors from the spiking activity of its neurons. One of the most effective methods to monitor spiking activity from a large number of neurons in multiple local neuronal circuits simultaneously is by using silicon electrode arrays1-3.
Action potentials produce large transmembrane voltage changes in the vicinity of cell somata. These output signals can be measured by placing a conductor in close proximity of a neuron. If there are many active (spiking) neurons in the vicinity of the tip, the electrode records combined signal from all of them, where contribution of a single neuron is weighted by its 'electrical distance'. Silicon probes are ideal recording electrodes to monitor multiple neurons because of a large number of recording sites (+64) and a small volume. Furthermore, multiple sites can be arranged over a distance of millimeters, thus allowing for the simultaneous recordings of neuronal activity in the various cortical layers or in multiple cortical columns (Fig. 1). Importantly, the geometrically precise distribution of the recording sites also allows for the determination of the spatial relationship of the isolated single neurons4. Here, we describe an acute, large-scale neuronal recording from the left and right forelimb somatosensory cortex simultaneously in an anesthetized rat with silicon probes (Fig. 2).

Extracellular recordings of neuronal activity using silicon probes in the anesthetized rat will be described. This technique allows information to be obtained across multiple brain areas from more than 100 neurons simultaneously. It provides information with single cell resolution about neuronal ensembles dynamics in multiple local circuits.

Enregistrement à grande échelle ensembles neuronaux avec des sondes en silicone chez le rat anesthésié

Large scale electrophysiological recordings from neuronal ensembles offer the opportunity to investigate how the brain orchestrates the wide variety of ...

Recherche

Neurosciences

Behavioral Determination of Stimulus Pair Discrimination of Auditory Acoustic and Electrical Stimuli Using a Classical Conditioning and Heart-rate Approach

Acute animal preparations have been used in research prospectively investigating electrode designs and stimulation techniques for integration into neural auditory prostheses, such as auditory brainstem implants1-3 and auditory midbrain implants4,5. While acute experiments can give initial insight to the effectiveness of the implant, testing the chronically implanted and awake animals provides the advantage of examining the psychophysical properties of the sensations induced using implanted devices6,7.
Several techniques such as reward-based operant conditioning6-8, conditioned avoidance9-11, or classical fear conditioning12 have been used to provide behavioral confirmation of detection of a relevant stimulus attribute. Selection of a technique involves balancing aspects including time efficiency (often poor in reward-based approaches), the ability to test a plurality of stimulus attributes simultaneously (limited in conditioned avoidance), and measure reliability of repeated stimuli (a potential constraint when physiological measures are employed).
Here, a classical fear conditioning behavioral method is presented which may be used to simultaneously test both detection of a stimulus, and discrimination between two stimuli. Heart-rate is used as a measure of fear response, which reduces or eliminates the requirement for time-consuming video coding for freeze behaviour or other such measures (although such measures could be included to provide convergent evidence). Animals were conditioned using these techniques in three 2-hour conditioning sessions, each providing 48 stimulus trials. Subsequent 48-trial testing sessions were then used to test for detection of each stimulus in presented pairs, and test discrimination between the member stimuli of each pair. 
This behavioral method is presented in the context of its utilisation in auditory prosthetic research. The implantation of electrocardiogram telemetry devices is shown. Subsequent implantation of brain electrodes into the Cochlear Nucleus, guided by the monitoring of neural responses to acoustic stimuli, and the fixation of the electrode into place for chronic use is likewise shown.

The application of a classical fear conditioning behavioral paradigm for auditory prosthetic research in rats is described. This paradigm provides a mechanism for identifying both detection of, and discrimination between, distinct acoustic and electrical stimuli using heart-rate as an outcome measure.

Détermination du comportement de la discrimination de la paire de stimuli acoustiques des stimuli auditifs et électrique en utilisant un conditionnement classique et de fréquence cardiaque approche

Acute animal preparations have been used in research prospectively investigating electrode designs and stimulation techniques for integration into neural ...

The Mouse Forced Swim Test

The forced swim test is a rodent behavioral test used for evaluation of antidepressant drugs, antidepressant efficacy of new compounds, and experimental manipulations that are aimed at rendering or preventing depressive-like states. Mice are placed in an inescapable transparent tank that is filled with water and their escape related mobility behavior is measured. The forced swim test is straightforward to conduct reliably and it requires minimal specialized equipment. Successful implementation of the forced swim test requires adherence to certain procedural details and minimization of unwarranted stress to the mice. In the protocol description and the accompanying video, we explain how to conduct the mouse version of this test with emphasis on potential pitfalls that may be detrimental to interpretation of results and how to avoid them. Additionally, we explain how the behaviors manifested in the test are assessed.

The forced swim test is validated as an experimental approach to assess potential antidepressant efficacy in rodents. Experimental animals are placed in a tank of water and escape-related mobility behavior is quantified. The common procedures for the mouse version of this test are described.

Le test de natation forcée souris

The forced swim test is a rodent behavioral test used for evaluation of antidepressant drugs, antidepressant efficacy of new compounds, and experimental ...

The Tail Suspension Test

The tail-suspension test is a mouse behavioral test useful in the screening of potential antidepressant drugs, and assessing of other manipulations that are expected to affect depression related behaviors. Mice are suspended by their tails with tape, in such a position that it cannot escape or hold on to nearby surfaces. During this test, typically six minutes in duration, the resulting escape oriented behaviors are quantified. The tail-suspension test is a valuable tool in drug discovery for high-throughput screening of prospective antidepressant compounds. Here, we describe the details required for implementation of this test with additional emphasis on potential problems that may occur and how to avoid them. We also offer a solution to the tail climbing behavior, a common problem that renders this test useless in some mouse strains, such as the widely used C57BL/6. Specifically, we prevent tail climbing behaviors by passing mouse tails through a small plastic cylinder prior to suspension. Finally, we detail how to manually score the behaviors that are manifested in this test.

The tail-suspension test is validated as an experimental procedure to assess antidepressant efficacy of drug treatments in mice. Mice are suspended by their tails for six minutes and escape-related behaviors are assessed. We describe procedures used in conducting the tail suspension test.

Le test de suspension caudale

The tail-suspension test is a mouse behavioral test useful in the screening of potential antidepressant drugs, and assessing of other manipulations that ...

Tactile Conditioning And Movement Analysis Of Antennal Sampling Strategies In Honey Bees (Apis mellifera L.)

Honey bees (Apis mellifera L.) are eusocial insects and well known for their complex division of labor and associative learning capability1, 2. The worker bees spend the first half of their life inside the dark hive, where they are nursing the larvae or building the regular hexagonal combs for food (e.g. pollen or nectar) and brood3. The antennae are extraordinary multisensory feelers and play a pivotal role in various tactile mediated tasks4, including hive building5 and pattern recognition6. Later in life, each single bee leaves the hive to forage for food. Then a bee has to learn to discriminate profitable food sources, memorize their location, and communicate it to its nest mates7. Bees use different floral signals like colors or odors7, 8, but also tactile cues from the petal surface9 to form multisensory memories of the food source. Under laboratory conditions, bees can be trained in an appetitive learning paradigm to discriminate tactile object features, such as edges or grooves with their antennae10, 11, 12, 13. This learning paradigm is closely related to the classical olfactory conditioning of the proboscis extension response (PER) in harnessed bees14. The advantage of the tactile learning paradigm in the laboratory is the possibility of combining behavioral experiments on learning with various physiological measurements, including the analysis of the antennal movement pattern.

Tactile Conditioning And Movement Analysis Of Antennal Sampling Strategies In Honey Bees Apis mellifera L.

In this protocol we show how to condition harnessed honey bees to tactile stimuli and introduce a 2D motion capture technique for analyzing the kinematics of fine-scale antennal sampling pattern.

Conditionnement tactile et d&#39;analyse des mouvements des stratégies d&#39;échantillonnage antennaires chez les abeilles (<em&gt; Apis mellifera</em&gt; L.)

Honey bees (Apis mellifera L.) are eusocial insects and well known for their complex division of labor and associative learning capability1, 2. The worker ...

RNAi-mediated Double Gene Knockdown and Gustatory Perception Measurement in Honey Bees (Apis mellifera)

This video demonstrates novel techniques of RNA interference (RNAi) which downregulate two genes simultaneously in honey bees using double-stranded RNA (dsRNA) injections. It also presents a protocol of proboscis extension response (PER) assay for measuring gustatory perception.	
	RNAi-mediated gene knockdown is an effective technique downregulating target gene expression. This technique is usually used for single gene manipulation, but it has limitations to detect interactions and joint effects between genes. In the first part of this video, we present two strategies to simultaneously knock down two genes (called double gene knockdown). We show both strategies are able to effectively suppress two genes, vitellogenin (vg) and ultraspiracle (usp), which are in a regulatory feedback loop. This double gene knockdown approach can be used to dissect interrelationships between genes and can be readily applied in different insect species.	
	The second part of this video is a demonstration of proboscis extension response (PER) assay in honey bees after the treatment of double gene knockdown. The PER assay is a standard test for measuring gustatory perception in honey bees, which is a key predictor for how fast a honey bee's behavioral maturation is. Greater gustatory perception of nest bees indicates increased behavioral development which is often associated with an earlier age at onset of foraging and foraging specialization in pollen. In addition, PER assay can be applied to identify metabolic states of satiation or hunger in honey bees. Finally, PER assay combined with pairing different odor stimuli for conditioning the bees is also widely used for learning and memory studies in honey bees.

RNAi-mediated Double Gene Knockdown and Gustatory Perception Measurement in Honey Bees Apis mellifera

In this protocol, we describe two strategies that simultaneously suppress two genes (double gene knockdown) in honey bees. Then we present how to use the proboscis extension response (PER) assay to study the effect of double gene knockdown on honey bee gustatory perception.

ARNi médiée double inactivation génique et de mesure de la perception gustative chez les abeilles (<em&gt; Apis mellifera</em&gt;)

This video demonstrates novel techniques of RNA  interference (RNAi) which downregulate two genes simultaneously in honey bees  using double-stranded RNA ...

A Proboscis Extension Response Protocol for Investigating Behavioral Plasticity in Insects: Application to Basic, Biomedical, and Agricultural Research

Insects modify their responses to stimuli through experience of associating those stimuli with events important for survival (e.g., food, mates, threats). There are several behavioral mechanisms through which an insect learns salient associations and relates them to these events. It is important to understand this behavioral plasticity for programs aimed toward assisting insects that are beneficial for agriculture. This understanding can also be used for discovering solutions to biomedical and agricultural problems created by insects that act as disease vectors and pests. The Proboscis Extension Response (PER) conditioning protocol was developed for honey bees (Apis mellifera) over 50 years ago to study how they perceive and learn about floral odors, which signal the nectar and pollen resources a colony needs for survival. The PER procedure provides a robust and easy-to-employ framework for studying several different ecologically relevant mechanisms of behavioral plasticity. It is easily adaptable for use with several other insect species and other behavioral reflexes. These protocols can be readily employed in conjunction with various means for monitoring neural activity in the CNS via electrophysiology or bioimaging, or for manipulating targeted neuromodulatory pathways. It is a robust assay for rapidly detecting sub-lethal effects on behavior caused by environmental stressors, toxins or pesticides.
We show how the PER protocol is straightforward to implement using two procedures. One is suitable as a laboratory exercise for students or for quick assays of the effect of an experimental treatment. The other provides more thorough control of variables, which is important for studies of behavioral conditioning. We show how several measures for the behavioral response ranging from binary yes/no to more continuous variable like latency and duration of proboscis extension can be used to test hypotheses. And, we discuss some pitfalls that researchers commonly encounter when they use the procedure for the first time.

The Proboscis Extension Response (PER) conditioning protocol, developed for the honey bee (Apis mellifera), provides an ecologically-relevant and easily quantifiable means for studying several different mechanisms of learning in many insect species.

Un Protocole d&#39;intervention en Trompe d&#39;extension pour les enquêtes plasticité comportementale chez les insectes: application à la base, biomédicale et la recherche agricole

Insects modify their responses to stimuli through experience of associating those stimuli with events important for survival (e.g., food, mates, threats). ...

Simultaneous Long-term Recordings at Two Neuronal Processing Stages in Behaving Honeybees

In both mammals and insects neuronal information is processed in different higher and lower order brain centers. These centers are coupled via convergent and divergent anatomical connections including feed forward and feedback wiring. Furthermore, information of the same origin is partially sent via parallel pathways to different and sometimes into the same brain areas. To understand the evolutionary benefits as well as the computational advantages of these wiring strategies and especially their temporal dependencies on each other, it is necessary to have simultaneous access to single neurons of different tracts or neuropiles in the same preparation at high temporal resolution. Here we concentrate on honeybees by demonstrating a unique extracellular long term access to record multi unit activity at two subsequent neuropiles1, the antennal lobe (AL), the first olfactory processing stage and the mushroom body (MB), a higher order integration center involved in learning and memory formation, or two parallel neuronal tracts2 connecting the AL with the MB.&#160;The latter was chosen as an example and will be described in full. In the supporting video the construction and permanent insertion of flexible multi&#160;channel wire electrodes is demonstrated. Pairwise differential amplification of the micro&#160;wire electrode channels drastically reduces the noise and verifies that the source of the signal is closely related to the position of the electrode tip. The mechanical flexibility of the used wire electrodes allows stable invasive long&#160;term recordings over many hours up to days, which is a clear advantage compared to conventional extra&#160;and intracellular in vivo recording techniques.

Simultaneous extracellular long term recordings from two different brain neuropiles or two different anatomical tracts were established in honeybees. These recordings allow the investigation of temporal aspects of neuronal processing across different brain areas at the single neuron as well as at the ensemble level in a behaving animal.

Les enregistrements simultanés à long terme à deux étapes de traitement neuronal à se conduire abeilles

In both mammals and insects neuronal information is processed in different higher and lower order brain centers. These centers are coupled via convergent ...

Electroretinogram Analysis of the Visual Response in Zebrafish Larvae

The electroretinogram (ERG) is a noninvasive electrophysiological method for determining retinal function. Through the placement of an electrode on the surface of the cornea, electrical activity generated in response to light can be measured and used to assess the activity of retinal cells in vivo. This manuscript describes the use of the ERG to measure visual function in zebrafish. Zebrafish have long been utilized as a model for vertebrate development due to the ease of gene suppression by morpholino oligonucleotides and pharmacological manipulation. At 5-10 dpf, only cones are functional in the larval retina. Therefore, the zebrafish, unlike other animals, is a powerful model system for the study of cone visual function in vivo. This protocol uses standard anesthesia, micromanipulation and stereomicroscopy protocols that are common in laboratories that perform zebrafish research. The outlined methods make use of standard electrophysiology equipment and a low light camera to guide the placement of the recording microelectrode onto the larval cornea. Finally, we demonstrate how a commercially available ERG stimulator/recorder originally designed for use with mice can easily be adapted for use with zebrafish. ERG of larval zebrafish provides an excellent method of assaying cone visual function in animals that have been modified by morpholino oligonucleotide injection as well as newer genome engineering techniques such as Zinc Finger Nucleases (ZFNs), Transcription Activator-Like Effector Nucleases (TALENs), and Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats (CRISPR)/Cas9, all of which have greatly increased the efficiency and efficacy of gene targeting in zebrafish. In addition, we take advantage of the ability of pharmacological agents to penetrate zebrafish larvae to evaluate the molecular components that contribute to the photoresponse. This protocol outlines a setup that can be modified and used by researchers with various experimental goals.

We present a method for the electroretinographic (ERG) analysis of zebrafish larvae utilizing micromanipulation and electroretinography techniques. This is a simple and straightforward method for assaying visual function of zebrafish larvae in vivo.

Électrorétinogramme Analyse de la réponse visuelle chez le poisson zèbre larves

The electroretinogram (ERG) is a noninvasive electrophysiological method for determining retinal function. Through the placement of an electrode on the ...

Neuropharmacological Manipulation of Restrained and Free-flying Honey Bees, Apis mellifera

Honey bees demonstrate astonishing learning abilities and advanced social behavior and communication. In addition, their brain is small, easy to visualize and to study. Therefore, bees have long been a favored model amongst neurobiologists and neuroethologists for studying the neural basis of social and natural behavior. It is important, however, that the experimental techniques used to study bees do not interfere with the behaviors being studied. Because of this, it has been necessary to develop a range of techniques for pharmacological manipulation of honey bees. In this paper we demonstrate methods for treating restrained or free-flying honey bees with a wide range of pharmacological agents. These include both noninvasive methods such as oral and topical treatments, as well as more invasive methods that allow for precise drug delivery in either systemic or localized fashion. Finally, we discuss the advantages and disadvantages of each method and&#160;describe common hurdles and how to best overcome them. We conclude with a discussion on the importance of adapting the experimental method to the biological questions rather than the other way around.

Neuropharmacological Manipulation of Restrained and Free-flying Honey Bees, Apis mellifera

This manuscript describes several protocols for administering pharmacological agents to honey bees, including simple noninvasive methods for free-flying bees, as well as more invasive variants that allow precise localized treatment of restrained bees.

Manipulation neuropharmacologiques de Restrained et vol libre abeilles,<em&gt; Apis mellifera</em

Honey bees demonstrate astonishing learning abilities and advanced social behavior and communication. In addition, their brain is small, easy to visualize ...