Les auteurs remercient Pascal Paschenda et Mareike Schulz pour leur assistance technique.

<ol>
	<li>Puhl, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Low+viscosity+histidine-tryptophan-ketoglutarate+graft+flush+improves+subsequent+extended+cold+storage+in+University+of+Wisconsin+solution+in+an+extracorporeal+rat+liver+perfusion+and+rat+liver+transplantation+model.">Low viscosity histidine-tryptophan-ketoglutarate graft flush improves subsequent extended cold storage in University of Wisconsin solution in an extracorporeal rat liver perfusion and rat liver transplantation model.</a> Liver Transpl. 12, 1841-1849 (2006).</li><li>Yagi, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Improved+Preservation+and+Microcirculation+with+POLYSOL+After+Partial+Liver+Transplantation+in+Rats.">Improved Preservation and Microcirculation with POLYSOL After Partial Liver Transplantation in Rats.</a> J Surg Res. 167, e375-e383 (2011).</li><li>Engemann, R., Ulrichs, K., Thiede, A., Muller-Ruchholtz, W., Hamelmann, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Value+of+a+physiological+liver+transplant+model+in+rats.+Induction+of+specific+graft+tolerance+in+a+fully+allogeneic+strain+combination.">Value of a physiological liver transplant model in rats. Induction of specific graft tolerance in a fully allogeneic strain combination.</a> Transplantation. 33, 566-568 (1982).</li><li>Sumimoto, R., Shinomiya, T., Yamaguchi, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Influence+of+hepatic+arterial+blood+flow+in+rats+with+liver+transplants.+Examination+of+donor+liver-derived+serum+class+I+MHC+antigen+in+rats+with+liver+transplants+with+or+without+hepatic+arterial+reconstruction.">Influence of hepatic arterial blood flow in rats with liver transplants. Examination of donor liver-derived serum class I MHC antigen in rats with liver transplants with or without hepatic arterial reconstruction.</a> Transplantation. 51, 1138-1139 (1991).</li><li>Chaland, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Orthotopic+liver+transplantation+with+hepatic+artery+anastomoses.+Hemodynamics+and+response+to+hemorrhage+in+conscious+rats.">Orthotopic liver transplantation with hepatic artery anastomoses. Hemodynamics and response to hemorrhage in conscious rats.</a> Transplantation. 49, 675-678 (1990).</li><li>Imamura, H., Rocheleau, B., Cote, J., Huet, P. 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P., Neuhaus, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rodent+models+of+partial+hepatectomies.">Rodent models of partial hepatectomies.</a> Liver Int. 28, 3-11 (2008).</li><li>Russell, W. M. S., Burch, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> The Principles of Humane Experimental Technique. , (1992).</li></ol>

Nous n&#39;avons pas de conflits d&#39;intérêts à déclarer. Les rats sont logés sous pathogènes spécifiques sans conditions, selon les directives de la Fédération des Associations de laboratoire Sciences de l&#39;Animal (FELASA). Toutes les expériences ont été menées conformément à la loi fédérale allemande sur la protection des animaux et le «Guide pour le soin et l&#39;utilisation des animaux de laboratoire» (National Institutes of Health publication n ° 86-23, révisée en 1985).

Le premier modèle de rat BTA a été rapportée par Lee et al., En 1973 9, dans lequel tous les navires, y compris l&#39;artère hépatique ont été reconstruits par une méthode cousu main et le shunt porto-systémique extracorporelle a été utilisée. Ce modèle est techniquement compliqué et difficile à réaliser. Le modèle suivant a été l&#39;un sans reconstruction de l&#39;artère hépatique et le shunt extracorporelle, développé par les auteurs mêmes 10 en 1975. Par la suite, en 1979, Kamada et al. Introduit la technique d&#39;anastomose brassard pour le modèle sans 11 rearterialization hépatique. Avec ces modifications, le BTA chez le rat a été simplifiée avec un temps de anhépatique raccourci dans les opérations bénéficiaires et a été largement utilisé comme un modèle accepté expérimentale. Cependant, il ya eu une controverse considérable depuis lors sur la signification de artérialisation hépatique chez le rat BTA 8 parce que la artérialisation était une tâche exigeante, mais diserais pas affecté la survie après la transplantation. De nombreuses études sur artérialisation hépatique en utilisant des techniques de reconstruction différents ont été rapportés 8, tel qu&#39;un segment de l&#39;aorte à l&#39;aorte anastomose 3,9,17, une technique d&#39;anastomose brassard 18,19,20, une technique télescopique 5, une technique de stent 13, 16, et une technique d&#39;anastomose manchon 12,21-23. Bien que la technique de BTA rat n&#39;est pas encore standardisé aujourd&#39;hui, le modèle artérialisée a été de plus en plus favorisés en termes de sa supériorité physiologique 8,12,13,14. Parmi les techniques mentionnées ci-dessus, une technique de stent qui est simple et rapide à effectuer a été rapporté par Lehmann et al. 16 en 2005. L&#39;étude a montré d&#39;excellents résultats: pas de taux d&#39;occlusion a été observée dans l&#39;artère hépatique reconstruite à 8 h, 24 h et 6 mois après la reperfusion. Nous avons donc adopté cette technique pour artérialisation hépatique. Nous performancema cousu main anastomose pour la reconstruction de la SHVC et IHVC. Cette méthode fournit le site anastomotique avec une condition physiologique optimale, ce qui conduit à la réduction de l&#39;incidence de la thrombose 8, et est la meilleure simulation de microchirurgie et de la formation pour les chirurgiens. En outre, l&#39;anastomose peut être possible même avec des souches de vaisseaux courts. En ce qui concerne l&#39;anastomose de IHVC, cette méthode ne nécessite pas une longue IHVC sur le côté du greffon par rapport à la technique d&#39;anastomose brassard. Par conséquent, lorsque la veine rénale est disséquée des bailleurs de fonds pour faire l&#39;IHVC du greffon à long, cette méthode est applicable à la transplantation d&#39;un greffon qui nécessite une petite IHVC longue, comme une greffe de 30% qui se compose de lobes latéraux droit et du noyau caudé avec une courte intrahépatique la veine cave sans SHVC 2. En ce qui concerne les techniques de résection hépatique chez le rat, à ce jour, plusieurs méthodes ont été signalés, les deux principales techniques sont la technique de ligature de masse classiqueet la technique de bâtiment orienté 24. Nous effectuons la technique de ligature classique pour une résection hépatique 50% 15, mais sous un microscope chirurgical pour faire la fine procédure et d&#39;éviter des dommages aux lobes restants et les structures. Nous avons décrit les résultats représentatifs des rats receveurs dans notre modèle, les rats ont survécu pendant la période d&#39;observation de 7 jours sans complications apparentes. Le modèle peut être modifié à des fins différentes des expériences en choisissant les différents paramètres, tels que le stockage froid prolongé, prolongée d&#39;ischémie chaude qui inclut le don après la mort cardiaque, et l&#39;utilisation de greffons hépatiques plus petites ou des greffes à partir de modèles expérimentaux de lésions du foie ou des maladies. Dans notre expérience, il ya trois facteurs clés dans l&#39;ensemble des procédures qui peuvent affecter la survie après la transplantation, le paramètre le plus fiable pour les résultats du BTA rat: le montant de la perte de sang, le temps de fonctionnement, espécialement serrage moment de la veine porte et IHVC et la pertinence de la reconstruction de chaque navire, ce qui pourrait entraîner une sténose, thrombose, ou des saignements. Dans une période de formation de ce modèle, la plupart des échecs pourrait probablement être liée à ces facteurs. Dans cet article, vidéo, nous vous présentons étape par étape les instructions pour les procédures chirurgicales pour notre modèle de rat de BTA à la reconstruction partielle de l&#39;artère hépatique. Même si un modèle de rat de BTA est complexe et nécessite des compétences avancées de microchirurgie, cet article fournit une foule de renseignements pratiques, qui devrait servir comme un bon guide pour la formation et l&#39;apprentissage de ce modèle. Apprendre efficacement ce modèle est particulièrement important pour la réduction de la période d&#39;apprentissage, ce qui réduit le nombre d&#39;animaux et les coûts nécessaires à la pratique, et plus tard la reproduction de résultats fiables dans les expériences. Ceci est en ligne avec le concept des 3R (remplacement, réduction et raffinement) de l&#39;expérimentation animale, qui a été postulée par Russell et Burch en1959 25.

<table border="1"><tbody><tr><td> Nom </td><td> Entreprise </td><td> Numéro de catalogue </td><td> Commentaires </td></tr><tr><td> Microscope d&#39;opération </td><td> Leica </td><td> M651 </td><td></td></tr><tr><td> Source lumineuse </td><td> Schott </td><td> KL1500LCD </td><td></td></tr><tr><td> Des cotons-tiges </td><td> NOBA Verbandmittel </td><td> 974202 </td><td></td></tr><tr><td> Tampons de gaze (5x5 cm) </td><td> Fuhrmann </td><td> 10002 </td><td></td></tr><tr><td> solution de polyvidone iodée </td><td> Mundipharma </td><td> 6108022.00.01 </td><td></td></tr><tr><td> L&#39;huile à base d&#39;argile </td><td> Debika société </td><td> 090148 </td><td></td></tr><tr><td> TachoSil </td><td> Takeda Pharmaceuticals International GmbH </td><td> EU/1/04/277/001-004</td><td> Appliquée à la surface du foie réséqué </td></tr><tr><td> Scalpel lame n ° 11 </td><td> Pfm médical </td><td> 200130011 </td><td> Préparation de manchette et stents </td></tr><tr><td> Cathéter de calibre 14 </td><td> B. Braun </td><td> 4268210S </td><td> Brassard pour PV </td></tr><tr><td> Cathéter de calibre 18 </td><td> B. Braun </td><td> 4268130S </td><td> Perfusion par PV </td></tr><tr><td> Cathéter de calibre 24 </td><td> B. Braun </td><td> 4269071S </td><td> Stent pour les BD et HA </td></tr><tr><td> Suture soie 4-0 </td><td> Resorba </td><td> H3F </td><td> La résection hépatique </td></tr><tr><td> 6-0 suture de soie </td><td> Resorba </td><td> H1F </td><td></td></tr><tr><td> 7-0 Prolene (polypropylène) de suture </td><td> Ethicon </td><td> 8701H </td><td> SHVC et IHVC </td></tr><tr><td> 4-0 suture Vicryl </td><td> Ethicon </td><td> V304H </td><td> Fermeture abdominale </td></tr><tr><td> 5 ml seringue </td><td> Terumo </td><td> SS + T05ES1 </td><td> Sauvegardez oreiller </td></tr><tr><td> Coussin chauffant </td><td> Thermo </td><td> 190 x 260 mm </td><td></td></tr><tr><td> Magnetic système de rétraction fixateur </td><td> Fin Sciences Tools Inc </td><td> 18200-01 18200-02 18200-03 18200-12 </td><td></td></tr><tr><td> Bain d&#39;eau froide </td><td> Huber </td><td> 740.000X </td><td> La préservation du greffon </td></tr><tr><td> Pince bipolaire </td><td> Söring </td><td> MBC-200 </td><td></td></tr><tr><td> Pince Mosquito </td><td> BONIMED </td><td> 451-476-03 </td><td> Deux paires utilisées </td></tr><tr><td> Adson micro pince </td><td> Dimeda </td><td> 10.176.12 </td><td></td></tr><tr><td> Km courbecro pince </td><td> AESCULAP </td><td> FD281R </td><td></td></tr><tr><td> Droites micropincettes </td><td> Bonimed </td><td> 451-476-03 </td><td></td></tr><tr><td> Courbes Ciseaux micro </td><td> Medicon </td><td> 15/05/83 </td><td></td></tr><tr><td> Droites Ciseaux micro </td><td> AESCULAP </td><td> FD12 </td><td> Fine incision </td></tr><tr><td> Ciseaux </td><td> AESCULAP </td><td> BC211W </td><td></td></tr><tr><td> Porte-aiguille micro </td><td> AESCULAP </td><td> FD241R </td><td> Reconstruction </td></tr><tr><td> Porte-aiguille maire-Hegar </td><td> Mizuho Ikakogyo </td><td> 06-798-00 </td><td> Fermeture abdominale </td></tr><tr><td> DeBakey Bulldog pince (droite) </td><td> ULRICH </td><td> CV3054 </td><td></td></tr><tr><td> DeBakey Bulldog pince (courbe) </td><td> CODMAN </td> &lt;td&gt; 37-1062 </td><td></td></tr><tr><td> Satinsky pince </td><td> Mizuhoika </td><td> 09-230-24 </td><td></td></tr><tr><td> Pince vasculaire périphérique </td><td> Teleflex Medical </td><td> 353494 </td><td> Bénéficiaire SHVC </td></tr><tr><td> Pince micro navire (jetable) </td><td> AROSurgical Instruments Corporation </td><td> TKM-1-60 g </td><td> PV, IHVC greffe, et le destinataire HA </td></tr><tr><td> Pince micro navire (métal) </td><td> Fin Sciences Tools Inc </td><td> 18052-01 </td><td> Bénéficiaire IHVC </td></tr><tr><td> Solution de Ringer lactate </td><td> Fresenius Kabi </td><td> 6150917.00.00 </td><td></td></tr><tr><td> Une solution saline normale </td><td> DeltaSelect </td><td> 1299.99.99 </td><td></td></tr><tr><td> Solution HTK </td><td> Dr. Franz Köhler Chemie GmbH </td><td> 31268.00.00 </td><td> Solution de conservation </td></tr><tr><td> Héparine-Natrium </td><td> Ratiopharm </td><td> 5394.02.00 </td><td> 500 UI avant la perfusion du greffon </td></tr><tr><td> Bicarbonate de sodium 8,4% </td><td> Fresenius Kabi </td><td> 4399.97.99 </td><td> 0,5 ml après la reperfusion </td></tr><tr><td> Solution de glucose à 5% </td><td> B. Braun </td><td> 6714567.06.00 </td><td> 1,0 ml après la reperfusion </td></tr><tr><td> De sodium Cefuroxim </td><td> Fresenius Kabi </td><td> 38985.01.00 </td><td> Antibiotique, 16 mg / kg </td></tr><tr><td> La buprénorphine </td><td> Essex Pharma </td><td> 997.00.00 </td><td> Analgésique, 0,1 mg / kg </td></tr><tr><td> Intensive Care Unit Cage </td><td> Produits Brinsea Ltd </td><td> Vetario S10 </td><td> Les soins postopératoires </td></tr></tbody></table>

surgical procedures for a rat model of partial orthotopic liver transplantation with hepatic arterial reconstruction

Transplantation hépatique orthotopique (OLT) chez le rat en utilisant une greffe totale ou partielle est un modèle indispensable pour la recherche en transplantation expérimentale, telles que les études sur la préservation du greffon et 1,2 lésions d&#39;ischémie-reperfusion, les réponses immunologiques 3,4, 5,6 hémodynamique et petit-for-size syndrome 7. Le BTA rat est l&#39;un des modèles animaux les plus difficiles de la chirurgie expérimentale et exige des compétences de microchirurgie de pointe qui prennent beaucoup de temps à apprendre. Par conséquent, l&#39;utilisation de ce modèle a été limité. Depuis la fiabilité et la reproductibilité des résultats sont des éléments clés des expériences dans lesquelles ces modèles animaux complexes sont utilisés, il est essentiel pour les chirurgiens qui sont impliqués dans le BTA rat d&#39;être formés à des procédures bien standardisés et sophistiqués pour ce modèle. Bien que les techniques diverses variantes et modifications du BTA chez le rat ont été rapportés 8 depuis le premier modèle était décrivanted par Lee et al. 9 en 1973, la suppression de la reconstruction de l&#39;artère hépatique 10 et l&#39;introduction de la technique d&#39;anastomose brassard en Kamada et al. 11 ont été une avancée majeure dans ce modèle, car ils ont simplifié les procédures de reconstruction dans une grande mesure . Dans le modèle de Kamada et al., Le rearterialization hépatique a également été éliminé. Les rats ne pourrait survivre sans flux artériel hépatique après transplantation hépatique, il ya eu une controverse considérable sur la valeur de artérialisation hépatique. Cependant, la supériorité physiologique du modèle artérialisée a été de plus en plus reconnu, notamment en termes de préservation du système biliaire et l&#39;intégrité 8,12 8,13,14 foie. Dans cet article, nous présentons détaillées des interventions chirurgicales pour un modèle de rat de BTA à la reconstruction de l&#39;artère hépatique à l&#39;aide d&#39;une greffe partielle de 50% après résection du foie ex vivotion. Les procédures de reconstruction pour chaque navire et le canal biliaire sont réalisées par les méthodes suivantes: une suture 7-0 polypropylène continue pour le supra-et infrahepatic la veine cave; une technique brassard pour la veine porte, et une technique de stent pour l&#39;artère hépatique et la voie biliaire.

Toutes les rats destinataire (n = 20) ont survécu sans complications apparentes jusqu&#39;à ce que l&#39;euthanasie prévue pour le prélèvement sanguin à 1, 3, 24, et 168 heures (7 jours) après la reperfusion portale (n = 5 à chaque point dans le temps). Les échantillons de sang ont été prélevés dans la IHVC par une ponction directe avec une aiguille de calibre 27. Après la centrifugation à 5340 xg pendant 10 min, les échantillons de sérum ont été prélevés et analysés pour l&#39;alanine aminotransférase (ALAT), qui reflètent le degré d&#39;atteinte hépatocellulaire après la transplantation. L&#39;évolution temporelle de l&#39;évolution des taux sériques d&#39;ALT est illustré à la figure 16. Les taux d&#39;ALAT a atteint un pic à 24 h (moyenne ± écart type: 212,6 ± 67,9 UI / L), puis a diminué à l&#39;intérieur des limites normales à 168 h (33,6 ± 6,8 UI / L). <img alt="Figure 1" src="/files/ftp_upload/4376/4376fig1.jpg" /> Figure 1. Brassard pour la veine porte (PV) à partir d&#39;un 14-jauge de cathéter, et les stents de l&#39;artère hépatique (HA) et du canal cholédoque (BD) du 24-jauge cathéters. <img alt="Figure 2" fo:content-width="4in" fo:src="/files/ftp_upload/4376/4376fig2highres.jpg" src="/files/ftp_upload/4376/4376fig2.jpg" /> Figure 2. Schéma de la suppression du foie du rat donneur BD, des voies biliaires; artère hépatique. HA,; IHVC, infrahepatic la veine cave; PV, la veine porte; SHVC, la veine cave sus-hépatique. <img alt="Figure 3" src="/files/ftp_upload/4376/4376fig3.jpg" /> Figure 3. Fonctionnement des bailleurs de fonds. a. Le rat est placé sur un coussin chauffant d&#39;un système de rétraction fixateur magnétique. L&#39;abdomen est ouvert par une incision médiane avec des extensions bilatérales. B. L&#39;insertion de l&#39;endoprothèse dans le canal cholédoque. C. Perfusion du foie par la veine porte. Les abréviations sont expliquered dans la figure 2. <img alt="Figure 4" src="/files/ftp_upload/4376/4376fig4.jpg" /> Figure 4. La fixation d&#39;une manchette de la veine porte. a, b. La pince DeBakey Bulldog qui saisit le tronc de la veine porte est placée au-dessus de la coupelle métallique. La coupe est monté dans le boîtier en plastique rempli de glace pilée. C. La veine porte est mis à travers le brassard. D. La paroi de la veine porte est retourné sur le brassard avec le moignon de la veine splénique l&#39;extérieur de la manchette lors de la 7 heures de position et une extension de la manchette à la position 12 heures. e. La veine porte est sécurisé avec un fil de soie 6-0 circonférentielle sur le brassard. Les flèches noires indiquent le moignon de la veine splénique. <img alt="Figure 5" src="/files/ftp_upload/4376/4376fig5.jpg" /> Figure 5. Ex vivol&#39;insertion d&#39;une endoprothèse dans l&#39;artère hépatique. a. Le foie est fixé par serrage des deux bords de la membrane, et l&#39;artère hépatique est tiré en ligne droite en maintenant le fil de ligature de l&#39;artère. b. La paroi antérieure de la petite incision sur l&#39;artère hépatique est maintenue par une pince droites micro . c, d. L&#39;endoprothèse est introduite dans l&#39;artère hépatique et fixé avec un fil de soie 6-0. <img alt="Figure 6" fo:content-width="3.5in" fo:src="/files/ftp_upload/4376/4376fig6highres.jpg" src="/files/ftp_upload/4376/4376fig6.jpg" /> Figure 6. Le schéma de la résection hépatique ex vivo de 50%. Lobes de couleur grise sont supprimés. ACL, antérieure du lobe caudé; PCL, lobe caudé postérieure; LLL, à gauche lobe latéral; LML, la partie gauche du lobe médian; RML, partie droite du lobe médian; SRL, supérieur du lobe latéral droit; IRL, inférieure du lobe latéral droit. Figure 7. Ex vivo résection hépatique de 50%. une ligature. Ligature du pédicule du lobe caudé postérieure. b. du pédicule de la partie gauche du lobe médian. c. Le foie avant la résection de 50%. d. Le foie après résection de 50%. <img alt="Figure 8" src="/files/ftp_upload/4376/4376fig8.jpg" /> Figure 8. Ex vivo plastie de la veine cave sus-hépatique. a. Le foie est fixé par serrage des deux bords de la membrane avec la pince de moustiques. b. loger sutures avec 7-0 polypropylène sont fixés aux deux coins. <img alt="Figure 9" fo:content-width="4in" fo:src="/files/ftp_upload/4376/4376fig9highres.jpg" src = &quot;/ files/ftp_upload/4376/4376fig9.jpg&quot; /&gt; Figure 9. Schéma de l&#39;implantation du greffon chez le rat. Destinataire Les procédures de reconstruction sont effectués pour le supra-et infrahepatic veine cave (SHVC et IHVC) avec une suture 7-0 continu, la veine porte (PV) par une technique de manchette, et l&#39;hépatique artère (HA) et du canal cholédoque (BD) par une technique de stent. <img alt="Figure 10" src="/files/ftp_upload/4376/4376fig10.jpg" /> Figure 10. Destinataire opération jusqu&#39;à ce que l&#39;enlèvement du foie natif. une. L&#39;abdomen est ouvert par une incision médiane. b. La veine surrénale droite est ligaturé. c. Le foie natif est excisé. Les abréviations sont expliquées dans la figure 2. <img alt="Figure 11" src="/files/ftp_upload/4376/4376fig11.jpg" /> Figure 11. Anastomose de l&#39;suprahepatic la veine cave. a, b. Pince vasculaire périphérique pour la veine cave sus-hépatique est fixé à un bloc de l&#39;huile à base d&#39;argile. Les sutures de fixation aux deux coins sont maintenus avec une légère traction superiolaterally d&#39;élargir l&#39;anastomose. C. Continu de suture intraluminale de la rangée postérieure en cours. D. Suture continue de la rangée antérieure en cours. <img alt="Figure 12" src="/files/ftp_upload/4376/4376fig12.jpg" /> Figure 12. La reconstruction de la veine porte. a, b. La pince de serrage de moustiques de la veine porte est fixé dans l&#39;argile à base d&#39;huile et tiré vers le hile du foie. cf. l&#39;insertion de la coiffe dans la veine porte. <img alt="Figure 13" src="/files/ftp_upload/4376/4376fig13.jpg" /> Figure 13. Reconstruction de l&#39;artère hépatique. a, b,. </stron<html> g Insertion&gt; d&#39;un stent dans l&#39;artère hépatique commune bénéficiaire (CHA) à la bifurcation de l&#39;artère hépatique propre (PHA) et l&#39;artère gastro-duodénale (GDA). <img alt="Figure 14" src="/files/ftp_upload/4376/4376fig14.jpg" /> Figure 14. Anastomose de la veine cave infrahepatic. une reperfusion. Les sutures de fixation à deux coins. b. suture continue de la rangée postérieure. c. suture continue de la rangée antérieure. d. du infrahepatic la veine cave. Les abréviations sont expliquées dans la figure 2. <img alt="Figure 15" src="/files/ftp_upload/4376/4376fig15.jpg" /> Figure 15. Toutes les procédures de reconstruction est terminée. Les abréviations sont expliquées dans la figure 2. <img alt="&lt;/ Html">&quot;Figure 16&quot; src = &quot;/ files/ftp_upload/4376/4376fig16.jpg&quot; /&gt; Figure 16 postopératoire évolution temporelle de l&#39;évolution des taux sériques d&#39;alanine aminotransférase (ALAT) (n = 20, n = 5 à chaque point dans le temps).. Les données sont exprimées en tant que moyen de barres d&#39;erreur qui indiquent l&#39;écart type. Les taux d&#39;ALAT a atteint un pic à 24 h (212,6 ± 67,9 UI / L), puis a diminué à l&#39;intérieur des limites normales à 168 h (33,6 ± 6,8 UI / L).

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Surgical Procedures for a Rat Model of Partial Orthotopic Liver Transplantation with Hepatic Arterial Reconstruction

Transplantation hépatique orthotopique chez le rat est un modèle expérimental indispensable pour la recherche biomédicale. Nous présentons ici nos procédures chirurgicales de transplantation hépatique orthotopique chez le rat à la reconstruction de l&#39;artère hépatique à l&#39;aide d&#39;une greffe partielle de 50%.

Interventions chirurgicales pour un modèle de rat de transplantation hépatique orthotopique partielle avec reconstruction artérielle hépatique

Orthotopic liver transplantation (OLT) in rats using a whole or partial graft is an indispensable experimental model for transplantation research, such as ...

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36.0K vues.  RWTH-Aachen University. Transplantation hépatique orthotopique chez le rat est un modèle expérimental indispensable pour la recherche biomédicale. Nous présentons ici nos procédures chirurgicales de transplantation hépatique orthotopique chez le rat à la reconstruction de l'artère hépatique à l'aide d'une greffe partielle de 50%.

Vidéo: Surgical Procedures for a Rat Model of Partial Orthotopic Liver Transplantation with Hepatic Arterial Reconstruction

Orthotopic Aortic Transplantation: A Rat Model to Study the Development of Chronic Vasculopathy

Research models of chronic rejection are essential to investigate pathobiological and pathophysiological processes during the development of transplant vasculopathy (TVP).
The commonly used animal model for cardiovascular chronic rejection studies is the heterotopic heart transplant model performed in laboratory rodents. This model is used widely in experiments since Ono and Lindsey (3) published their technique. To analyze the findings in the blood vessels, the heart has to be sectioned and all vessels have to be measured.
Another method to investigate chronic rejection in cardiovascular questionings is the aortic transplant model (1, 2). In the orthotopic aortic transplant model, the aorta can easily be histologically evaluated (2). The PVG-to-ACI model is especially useful for CAV studies, since acute vascular rejection is not a major confounding factor and Cyclosporin A (CsA) treatment does not prevent the development of CAV, similar to what we find in the clinical setting (4). A7-day period of CsA is required in this model to prevent acute rejection and to achieve long-term survival with the development of TVP.
This model can also be used to investigate acute cellular rejection and media necrosis in xenogeneic models (5).

This video demonstrates the orthotopic aortic transplant model as a simple model to study the development of transplant vasculopathy (TVP) in rats.

Orthotopique aortique transplantation: un modèle de rat pour étudier le développement de la vasculopathie chronique

Research models of chronic rejection are essential to investigate pathobiological and pathophysiological processes during the development of transplant ...

Recherche

Médecine

Orthotopic Liver Transplantation in Rats

Clinical progress in the field of liver transplantation has been largely supported by animal models1,2. Since the publication of the first orthotopic rat liver transplantation in 1979 by Kamada et al.3, this model has remained the gold standard despite various proposed alternative techniques4. Nevertheless, its broader use is limited by its steep learning curve5.
In this video paper, we show a simple and easy-to-establish revision of Kamada's two-cuff technique. The suprahepatic vena cava anastomosis is performed manually with a running suture, and the vena porta and infrahepatic vena cava anastomoses are performed utilizing a quick-linker cuff system6. Manufacturing the quick-linker kit is shown in a separate video paper.

We present an easy-to-establish revision of the classical two-cuff technique for orthotopic liver transplantation in rat.

Une transplantation hépatique orthotopique chez le rat

Clinical progress in the field of liver transplantation has been largely supported by animal models1,2. Since the publication of the first orthotopic rat ...

Heterotopic Auxiliary Rat Liver Transplantation With Flow-regulated Portal Vein Arterialization in Acute Hepatic Failure

In acute hepatic failure auxiliary liver transplantation is an interesting alternative approach. The aim is to provide a temporary support until the failing native liver has regenerated.1-3 The APOLT-method, the orthotopic implantation of auxiliary segments- averts most of the technical problems. However this method necessitates extensive resections of both the native liver and the graft.4 In 1998, Erhard developed the heterotopic auxiliary liver transplantation (HALT) utilizing portal vein arterialization (PVA) (Figure 1). This technique showed promising initial clinical results.5-6 We developed a HALT-technique with flow-regulated PVA in the rat to examine the influence of flow-regulated PVA on graft morphology and function (Figure 2).
A liver graft reduced to 30 % of its original size, was heterotopically implanted in the right renal region of the recipient after explantation of the right kidney.&#160; The infra-hepatic caval vein of the graft was anastomosed with the infrahepatic caval vein of the recipient. The arterialization of the donor&#8217;s portal vein was carried out via the recipient&#8217;s right renal artery with the stent technique. The blood-flow regulation of the arterialized portal vein was achieved with the use of a stent with an internal diameter of 0.3 mm. The celiac trunk of the graft was end-to-side anastomosed with the recipient&#8217;s aorta and the bile duct was implanted into the duodenum. A subtotal resection of the native liver was performed to induce acute hepatic failure. 7
In this manner 112 transplantations were performed. The perioperative survival rate was 90% and the 6-week survival rate was 80%. Six weeks after operation, the native liver regenerated, showing an increase in weight from 2.3&#177;0.8 g to 9.8&#177;1 g. At this time, the graft&#8217;s weight decreased from 3.3&#177;0.8 g to 2.3&#177;0.8 g.
We were able to obtain promising long-term results in terms of graft morphology and function. HALT with flow-regulated PVA reliably bridges acute hepatic failure until the native liver regenerates.

Auxiliary liver transplantation provides a temporary support in acute hepatic failure, until regeneration of the failing liver. The heterotopic auxiliary liver transplantation (HALT) with portal vein arterialization (PVA) renders sufficient liver function. We developed an analogous technique in the rat, to examine the influence of the portal vein arterialization on the morphology and function of the graft.

Hétérotopique auxiliaire Rat Liver Transplantation avec un débit régulé veine porte artérialisation dans l&#39;insuffisance hépatique aiguë

In acute hepatic failure auxiliary liver transplantation is an interesting alternative approach. The aim is to provide a temporary support until the ...

Method of Direct Segmental Intra-hepatic Delivery Using a Rat Liver Hilar Clamp Model

Major hepatic surgery with inflow occlusion, and liver transplantation, necessitate a period of warm ischemia, and a period of reperfusion leading to ischemia/reperfusion (I/R) injury with myriad negative consequences. Potential I/R injury in marginal organs destined for liver transplantation contributes to the current donor shortage secondary to a decreased organ utilization rate. A significant need exists to explore hepatic I/R injury in order to mediate its impact on graft function in transplantation. Rat liver hilar clamp models are used to investigate the impact of different molecules on hepatic I/R injury. Depending on the model, these molecules have been delivered using inhalation, epidural infusion, intraperitoneal injection, intravenous administration or injection into the peripheral superior mesenteric vein. A rat liver hilar clamp model has been developed for use in studying the impact of pharmacologic molecules in ameliorating I/R injury. The described model for rat liver hilar clamp includes direct cannulation of the portal supply to the ischemic hepatic segment via a side branch of the portal vein, allowing for direct segmental hepatic delivery. Our approach is to induce ischemia in the left lateral and median lobes for 60 min, during which time the substance under study is infused. In this case, pegylated-superoxide dismutase (PEG-SOD), a free radical scavenger, is infused directly into the ischemic segment. This series of experiments demonstrates that infusion of PEG-SOD is protective against hepatic I/R injury. Advantages of this approach include direct injection of the molecule into the ischemic segment with consequent decrease in volume of distribution and reduction in systemic side effects.

A unique rat liver hilar clamp model was developed for studying the impact of pharmacologic molecules in ameliorating ischemia-reperfusion injury. This model includes direct cannulation of the portal supply to the ischemic liver segment via a branch of the portal vein, allowing for direct hepatic delivery.

Méthode de Direct segmentaire livraison intra-hépatique L&#39;utilisation d&#39;un modèle hilaire de foie de rat Clamp

Major hepatic surgery with inflow occlusion, and liver transplantation, necessitate a period of warm ischemia, and a period of reperfusion leading to ...

Re-Arterialized Rat Partial Liver Transplantation with an in vivo Vessel-Oriented 70% Hepatectomy

Split liver transplantation and living liver donor liver transplantation were developed in the clinic to utilize liver organs in a more efficient manner. To better understand the mechanism behind these surgical procedures, a rat partial liver transplantation (PLTx) model was established for relevant surgical studies. Because of the complexity of the rat PLTx model, a protocol with detailed descriptions is required. An article published previously reported a protocol in which ex vivo hepatectomy was used to achieve 50% rat PLTx. In contrast to this protocol, we introduced a re-arterialized PLTx with an in vivo 70% hepatectomy. An updated vessel-oriented hepatectomy was incorporated into the rat PLTx to refine the microsurgical procedure. The portal veins and hepatic arteries of the left lateral lobe and the median lobe were individually dissected and ligated before removal of the liver parenchyma, thereby decreasing the probability of bleeding in the remnant liver stump. Furthermore, an end-to-side vessel anastomosis between the common hepatic artery and the enlarged proper hepatic artery was introduced to re-arterialize the hepatic artery. By using this end-to-side vessel anastomosis technique, the diameter of the anastomosis was enlarged, thereby decreasing the difficulty of hand suture and maintaining a high rate of anastomotic patency. Moreover, the cuff anastomosis of the infrahepatic vena cava was slightly modified. A section of circumferential liver parenchyma around the vena cava of a recipient was preserved during cuff anastomosis to maintain the three-dimensional shape of the vascular lumen. This section of liver parenchyma was removed after completing the anastomosis. With this modification, the step involving placement of stay sutures was omitted, thereby further shortening the cuff anastomosis time. By using this protocol of rat PLTx, a low liver enzyme level, an intact liver lobular architecture and a high survival rate were achieved after microsurgery.

Re-Arterialized Rat Partial Liver Transplantation with an in vivo Vessel-Oriented 70% Hepatectomy

Here, a protocol involving re-arterialized rat partial liver transplantation is presented. Specifically, 70% liver was resected in vivo by using an updated technique of vessel-oriented hepatectomy. The hepatic artery was reconstructed in an end-to-side manner. The cuff technique was modified to shorten the anastomosis time of the infrahepatic vena cava.

Re-artérialisé Transplantation de foie partielle de Rat in vivo axée sur le navire 70 % hépatectomie

Split liver transplantation and living liver donor liver transplantation were developed in the clinic to utilize liver organs in a more efficient manner. ...

A Rat Model of Orthotopic Liver Transplantation Using a Novel Magnetic Anastomosis Technique for Suprahepatic Vena Cava Reconstruction

The rat model of orthotopic liver transplantation (OLT) is essential for transplant research. It is a very sophisticated animal model and requires a steep learning curve. The introduction of the cuff technique for anastomosis of the portal vein (PV) and infrahepatic vena cava (IHVC) has significantly simplified the transplant procedure in rats. However, due to the short anterior wall of the recipients' suprahepatic vena cava (SHVC), the cuff technique is very difficult to use for the reconstruction of the SHVC. Most researchers in this field still use the hand-suture technique for SHVC reconstruction, which makes it the bottleneck step in rat orthotopic liver transplantation. The magnetic anastomosis technique (i.e., magnamosis) is a method of connecting two vessels using the attractive force between two magnets. Our recent study has shown that the magnetic anastomosis technique is superior to the hand-suture technique for SHVC reconstruction in rats. In this article, we show a step-by-step protocol for SHVC reconstruction in rats using the novel magnetic anastomosis technique. In this model, the reconstruction of the PV and IHVC was performed by the standard cuff technique, while the reconstruction of the bile duct (BD) was performed by a stent technique. The hepatic re-arterialization was not performed. The magnetic anastomosis technique made SHVC reconstruction much easier and significantly shortened the anphepatic phase. After a reasonable learning curve, even researchers without advanced microsurgical skills can produce reliable and reproducible results using this rat model of OLT.

The reconstruction of the suprahepatic vena cava (SHVC) remains a difficult step in rat orthotopic liver transplantation. In this article, we show a step-by-step protocol for SHVC reconstruction in rats using a novel magnetic anastomosis technique.

Un modèle de Rat de la Orthotopic Transplantation hépatique en utilisant une Technique nouvelle anastomose magnétique pour la Reconstruction de veine sus-hépatique

The rat model of orthotopic liver transplantation (OLT) is essential for transplant research. It is a very sophisticated animal model and requires a steep ...

Orthotopic Rat Kidney Transplantation: A Novel and Simplified Surgical Approach

Kidney transplantation offers increased survival rates and improved quality of life for patients with end-stage renal disease, as compared to any type of renal replacement therapy. Over the past few decades, the rat kidney transplantation model has been used to study the immunological phenomena of rejection and tolerance. This model has become an indispensable tool to test new immunomodulatory pharmaceuticals and regimens prior to proceeding with expensive preclinical large animal studies.
This protocol provides a detailed overview of how to reliably perform orthotopic kidney transplantation in rats. This protocol includes three distinctive steps that increase the probability of success: perfusion of the donor kidney by flushing through the portal vein and the use of a cuff system to anastomose the renal veins and ureters, thereby decreasing cold and warm ischemia times. Using this technique, we have achieved survival rates beyond 6 months with normal serum creatinine in animals with syngeneic or tolerant kidney transplants. Depending on the aim of the study, this model can be modified by pre- or posttransplant treatments to study the acute, chronic, cellular, or antibody-mediated rejection. It is a reproducible, reliable, and cost-effective animal model to study different aspects of kidney transplantation.

The purpose of this manuscript and protocol is to explain and demonstrate in detail the surgical procedure of orthotopic kidney transplantation in rats. This method is simplified to achieve the correct perfusion of the donor kidney and shorten the reperfusion time by using the venous and ureteral cuff anastomosis technique.

Greffe orthotopique de rein de rat: une approche chirurgicale nouvelle et simplifiée

Kidney transplantation offers increased survival rates and improved quality of life for patients with end-stage renal disease, as compared to any type of ...

Generation of a Rat Model of Acute Liver Failure by Combining 70% Partial Hepatectomy and Acetaminophen

Acute liver failure (ALF) is a clinical condition caused by various etiologies resulting in the loss of metabolic, biochemical, synthesizing, and detoxifying functions of the liver. In most irreversible liver damage cases, orthotropic liver transplant (OLT) remains the only available treatment. To study the therapeutic potential of a treatment for ALF, its prior testing in an animal model of ALF is essential. In the current study, an ALF model in rats was developed by combining 70% partial hepatectomy (PHx) and injections of acetaminophen (APAP) that provides a therapeutic window of 48 h. The median and left lateral lobes of the liver were removed to excise 70% of the liver mass and APAP was given 24 h postsurgically for 2 days. Survival in ALF-induced animals was found to be severely decreased. The development of ALF was confirmed by altered serum levels of the enzymes alanine amino transferase (ALT), aspartate amino transferase (AST), alkaline phosphatase (ALP); changes in prothrombin time (PT); and assessment of the international normalized ratio (INR). Study of the gene expression profile by qPCR revealed an increase in expression levels of genes involved in apoptosis, inflammation, and in the progression of liver injury. Diffused degeneration of hepatocytes and infiltration of immune cells was observed by histological evaluation. The reversibility of ALF was confirmed by the restoration of survival and serum levels of ALT, AST, and ALP after intrasplenic transplantation of syngeneic healthy rat hepatocytes. This model presents a reliable alternative to the available ALF animal models to study the pathophysiology of ALF as well as to evaluate the potential of a novel therapy for ALF. The use of two different approaches also makes it possible to study the combined effect of physical and drug-induced liver injury. The reproducibility and feasibility of current procedure is an added benefit of the model.

The acute liver failure animal model developed in the current study presents a feasible alternative for the study of potential therapies. The current model employs the combined effect of physical and drug-induced hepatic injury and provides a suitable time window to study the potential of novel therapies.

Génération d'un modèle de rat de l'échec aigu de foie en combinant 70% hepatectomy partiel et acétaminophène

Acute liver failure (ALF) is a clinical condition caused by various etiologies resulting in the loss of metabolic, biochemical, synthesizing, and ...

Reduced Complications after Arterial Reconnection in a Rat Model of Orthotopic Liver Transplantation

The rat orthotopic liver transplantation (OLT) model is a powerful tool to study acute and chronic rejection. However, it is not a complete representation of human liver transplantation due to the absence of arterial reconnection. Described here is a modified transplantation procedure that includes the incorporation of hepatic artery (HA) reconnection, leading to a marked improvement in transplant outcomes. With a mean anhepatic time of 12 min and 14 s, HA reconnection results in improved perfusion of the transplanted liver and an increase in long-term recipient survival from 37.5% to 88.2%. This protocol includes the use of 3D-printed cuffs and holders to connect the portal vein and infrahepatic inferior vena cava. It can be implemented for studying multiple aspects of liver transplantation, from immune response and infection to technical aspects of the procedure. By incorporating a simple and practical method for arterial reconnection using a microvascular technique, this modified rat OLT protocol closely mimics aspects of human liver transplantation and will serve as a valuable and clinically relevant research model.

The goal of this study is to modify the rat orthotopic liver transplant model to better represent human liver transplantation and improve recipient survival. The presented method reestablishes hepatic arterial inflow by connecting the donor liver&#39;s common hepatic artery to the recipient liver&#39;s proper hepatic artery.

Complications réduites après reconnexion artérielle dans un modèle de rat de transplantation orthotopique de foie

The rat orthotopic liver transplantation (OLT) model is a powerful tool to study acute and chronic rejection. However, it is not a complete representation ...

Left Lung Orthotopic Transplantation in a Juvenile Porcine Model for ESLP

Lung transplantation is the gold-standard treatment for end-stage lung disease, with over 4,600 lung transplantations performed worldwide annually. However, lung transplantation is limited by a shortage of available donor organs. As such, there is high waitlist mortality. Ex situ lung perfusion (ESLP) has increased donor lung utilization rates in some centers by 15%-20%. ESLP has been applied as a method to assess and recondition marginal donor lungs and has demonstrated acceptable short- and long-term outcomes following transplantation of extended criteria donor (ECD) lungs. Large animal (in vivo) transplantation models are required to validate ongoing in vitro research findings. Anatomic and physiologic differences between humans and pigs pose significant technical and anesthetic challenges. An easily reproducible transplant model would permit the&#160;in vivo&#160;validation of current ESLP strategies and the preclinical evaluation of various interventions designed to improve donor lung function. This protocol describes a porcine model of orthotopic left lung allotransplantation. This includes anesthetic and surgical techniques, a customized surgical checklist, troubleshooting, modifications, and the benefits and limitations of the approach.

This protocol describes a juvenile porcine model of orthotopic left lung allotransplantation designed for use with ESLP research. Focus is made on anesthetic and surgical techniques, as well as critical steps and troubleshooting.

Transplantation orthotopique du poumon gauche dans un modèle porcin juvénile pour l’ESLP

Lung transplantation is the gold-standard treatment for end-stage lung disease, with over 4,600 lung transplantations performed worldwide annually. ...