Pris en charge par les Instituts nationaux de la santé accorde R01-AA015614, R01-AA014973, T32-AA014127 et K12-GM088021. Les auteurs remercient Samantha L. Blomquist pour l&#39;assistance technique et les Drs. Kevin Caldwell et Donald Partridge pour évaluer critique du manuscrit et de la vidéo.

Toutes les procédures d&#39;animaux ont été approuvés par l&#39;Université du Nouveau Mexique Sciences-santé Centre institutionnel de protection des animaux et l&#39;utilisation Comité. 1. Assemblée Chambre de vapeur <ol><li> Feuilles coupe en polycarbonate avec une scie circulaire ou une scie sauteuse pour les dimensions indiquées dans la vidéo pour le haut, en bas, devant, derrière, sur les côtés et la porte (figure 1 et tableau 1). </li><li> Avec une scie sauteuse ou circulaire, couper une ouverture de 8 pouces de haut par 16 pouces de large dans le milieu de la face avant. </li><li> Mesurer et marquer les trous de la charnière de piano sur le 18 pouces par 10 feuille de polycarbonate de pouce qui va devenir la porte de la chambre. </li><li> Dans la porte, percez contre évier trous avec un foret de 5/16 de pouce de forage, et avec une mèche de 3/16 de pouce, percez le trou pour les vis. Assurez-vous de percer des trous contre l&#39;évier à l&#39;intérieur de la porte pour les têtes de vis. </li><li> Préparer les feuilles de polycarbonate pour le soudage. </li><li> Assemblez vientnt, les panneaux arrières et latérales sur le panneau de fond en utilisant souder # 16. </li><li> Sceller toutes les lacunes entre les panneaux de souder # 16. </li><li> Fixez le panneau supérieur avec à souder # 16. </li><li> Utiliser des brides de barres ou manuels lourds à tenir tout en place, tandis que les soudures guérir. </li><li> Attacher une 1 pouce par un morceau de polycarbonate de 12 pouces sur la face avant 1 pouce au-dessous de l&#39;ouverture pour la fixation de la charnière de porte. </li><li> Attendre au moins 24 heures pour souder à guérir. </li><li> Couper 2 morceaux de tuyaux PER de 12 pouces de long et 1 morceau de longue tuyaux PER de 1 pouce. </li><li> Avec une mèche de 5/16, percer un trou dans chacun des tubes de PEX 12 pouces environ 1 à 2 pouces d&#39;une extrémité. </li><li> Fixez 2 x 12 pouces tuyaux PER à un connecteur en T 3/8 pouces avec les trous situés hors du connecteur. </li><li> Boucher les extrémités ouvertes du tube PEX 3/8 pouces bouchons. </li><li> Fixez la charnière de piano à la face avant et la porte à l&#39;aide 4-40 des vis et écrous. </li><li> Utilisation de la porte en tant que guide, mark les trous nécessaires à la charnière à piano sur l&#39;entretoise 1 pouce sur la face avant de la chambre. </li><li> Avec une mèche de 3/16 de pouce, percez les trous dans le panneau avant de la charnière piano. </li><li> Fixez la porte et la charnière de piano sur le panneau avant à l&#39;aide 4-40 des vis et écrous. </li><li> Assembler les pinces à genouillère comme le montre la vidéo avec une rondelle et un écrou de part et d&#39;autre de la branche latérale. </li><li> Mark et foret 3/16 trous de pouce pour la genouillère sur le panneau avant et attachent genouillère avec 4-40 des vis et écrous. </li><li> Ajouter 3/8 pouces joints à boudin en caoutchouc à l&#39;intérieur de la porte. </li><li> Avec un peu de forage ennuyeux 5/8 de pouce, percer un trou dans le centre du panneau supérieur pour le port d&#39;entrée. </li><li> Percez un trou de 1/2 pouce de fond / centre du panneau arrière de l&#39;orifice de sortie. </li><li> Assembler l&#39;orifice de sortie en poussant la partie filetée de la 3/8 pouce adaptateurs traversant la paroi à travers la paroi arrière de la chambre à vapeur dans le trou d&#39;orifice de sortie. Fixez l&#39;écrou dul&#39;intérieur de la chambre à maintenir en place. </li><li> Retirez la protection de feuilles de polycarbonate. </li><li> Fixer la pièce de tuyaux PER de 1 pouce au connecteur en T et forcer le tube PEX à travers le trou dans la partie supérieure de la chambre de l&#39;intérieur. </li><li> Fixez un coude à 90 3/8 de pouce vers le haut de la tuyaux PER de 1 pouce de l&#39;extérieur. REMARQUE: Percez un trou de 1/2 pouce dans la porte et insérer un joint cloisons 1/2 pouce dans le trou. </li><li> Répétez les étapes 1-22 pour l&#39;air que la chambre de contrôle. </li></ol> 2. Rack et de l&#39;Assemblée Air livraison <ol><li> Si vous placez les chambres sur le chariot / support mentionné dans la liste des matériaux, assembler le panier selon les instructions du fabricant. </li><li> Avec des noix et des boulons de rechange, attachez un morceau de polycarbonate de la ferraille à la crémaillère de tenir les régulateurs de débit d&#39;air. </li><li> N&#39;importe où sur la pièce de polycarbonate, marquer et percer 3/4 trous de pouce pour les régulateurs de débit d&#39;air ferraille et attacher les régulateurs avec les écrousfourni. </li><li> Fixez 3/8 pouces à travers les murs adaptateur pour les ports des régulateurs de débit d&#39;air d&#39;entrée et de sortie. </li><li> Assemblez le ballon de l&#39;éthanol avec la pierre d&#39;aération, # 8 bouchon et la libération rapide en ligne connecteurs. </li><li> Utilisation de 3/8 de pouce de tube TYGON, connecter les régulateurs de débit de la pompe à air et le ballon de l&#39;éthanol comme le montre la figure 1. </li><li> Pour la seule chambre air, attacher l&#39;orifice de sortie du régulateur de débit d&#39;air à l&#39;entrée 3/8 de pouce 90 coude avec des tubes en TYGON 3/8 de pouce, comme indiqué sur la figure 1. </li></ol><img alt="Figure 1" fo:content-width="5in" src="/files/ftp_upload/51839/51839fig1highres.jpg" width="500" /> Figure 1. Représentation schématique de la configuration des chambres de vapeur. Un connecteur en T est relié à la pompe à air à faible bruit. Un côté du connecteur en T est connecté directement à un régulateur de débit d&#39;air pour l&#39;air de la chambre uniquement en phase vapeur. Les autres side est divisé à nouveau et fixée à 2 régulateurs de débit d&#39;air différents, l&#39;un pour l&#39;air et l&#39;autre pour l&#39;éthanol. La chambre à air est relié directement au régulateur comme indiqué. Pour la chambre de vapeur d&#39;éthanol, un régulateur de débit d&#39;air est reliée à la pierre de l&#39;aérateur immergé dans de l&#39;éthanol liquide dans la fiole de filtration. L&#39;orifice du bras latéral du récipient de filtre est reliée à la sortie du régulateur d&#39;air, comme indiqué. La vapeur d&#39;éthanol fusionné et de l&#39;air est alors reliée à l&#39;entrée de la chambre de vapeur d&#39;éthanol. Les tubes de sortie (non représentés) sont connectés à une sortie de ventilation de la pièce. 3. Essai Chambers et de la vapeur d&#39;ajuster les niveaux de l&#39;éthanol <ol><li> Ajouter 600 ml d&#39;éthanol 190 proof dans le flacon de filtre, insérer la pierre d&#39;aération, et raccorder le tube à l&#39;entrée de la branche latérale du ballon. </li><li> Fermer les portes de la chambre et tourner sur la pompe à air. </li><li> Régler les régulateurs de débit d&#39;air de telle sorte que la moitié environ autant d&#39;air s&#39;écoule à travers le liquide comme de l&#39;alcool de l&#39;air est mélangé avec. Adjust le seul écoulement d&#39;air de l&#39;air à l&#39;écoulement combiné de l&#39;alcool et de l&#39;air de la chambre de l&#39;éthanol. </li><li> Permettre aux chambres à s&#39;équilibrer pendant au moins 30 min avant de mesurer la concentration en éthanol de l&#39;air. </li><li> Mesurer la concentration en éthanol de l&#39;air en extrayant l&#39;air de 5 ml avec une aiguille 18G et une seringue de 60 ml à travers le septum. Diluer l&#39;échantillon avec de l&#39;air de la chambre en tirant le piston jusqu&#39;à 60 ml (01h12 dilution). Mesurer le niveau de l&#39;éthanol de l&#39;air en utilisant un alcootest conformément aux instructions du fabricant. La dilution de l&#39;air de la chambre est nécessaire pour atteindre les niveaux de vapeur d&#39;alcool à l&#39;intérieur de la plage de détection de l&#39;alcootest. NOTE: Si vous utilisez différents niveaux d&#39;exposition à l&#39;alcool la dilution peut être nécessaire d&#39;ajuster. </li><li> Comme point de départ, régler les régulateurs de débit d&#39;air que nécessaire pour atteindre une concentration en alcool de l&#39;air de l&#39;ordre de 4,5 à 5 g / dl (g d&#39;alcool vaporisé par dl de l&#39;air). </li></ol> 4. L&#39;Elevage <ol><li> les femmes de la maison de Groupe C578BL / 6 souris (vieux 2-3 mois) pendant au moins 1 semaine à synchroniser les cycles ovariens. </li><li> Maison individuelle mâles C57BL / 6 (vieux 2-5 mois) pendant au moins 2 semaines. </li><li> Après la synchronisation, mettre une seule femelle avec un seul mâle pour 5 jours pour permettre l&#39;accouplement. </li><li> Après l&#39;accouplement, les mâles et supprimer individuellement les femmes de la maison et placez-les dans des chambres. </li></ol> 5. Pré-et post-natal exposition éthanol vapeur <ol><li> Exposer barrages enceintes à la vapeur d&#39;éthanol pendant 4 heures par jour à partir de 10 heures au cours du cycle de lumière (lumière allumée de 6 heures-18 heures), sauf le jour de la naissance pour éviter chiot mort. </li><li> Peser barrages jour de gestation (G) 5, G13-G14, G18 et G20 à surveiller la grossesse; literie a été modifié le jour que les femmes ont été pesés à minimiser la manipulation. </li><li> Chaque jour remplacer la nourriture pour les groupes d&#39;éthanol exposée pour éviter la consommation de pellets avec toute l&#39;éthanol absorbé en eux. </li><li> Le jour de l&#39;naissance ne pas exposer les animaux. Après la naissance d&#39;exposer les femelles et les petits pour 4 heures par jour à partir de 10 heures à partir de P1-P12. </li><li> Peser chiots sur P2, P8, P12, P25 et; et changer la literie sur P8 et P12 pour minimiser la manipulation supplémentaire. </li><li> Immédiatement après la dernière exposition (P12), transférer les cages à une chambre standard de logement des animaux. </li></ol>

Les auteurs n&#39;ont rien à révéler.

Ici, nous décrivons en détail les méthodes pour la construction de chambres d&#39;inhalation de vapeurs. Les matériaux et les outils nécessaires pour construire les chambres sont disponibles à partir d&#39;un certain nombre de fournisseurs commerciaux et les étapes de la construction des chambres sont relativement simples. Le système que nous décrivons ici ne contient pas les vannes de ligne de contrôle pour prévenir le refoulement et le mixage. Nous n&#39;avons pas pu mesurer toute l&#39;éthanol détectable...

Boire pendant la grossesse peut nuire au fœtus, causant des altérations persistantes dans de nombreux organes et systèmes qui réduisent de manière significative la qualité de vie pour les personnes touchées et leurs familles. On estime qu&#39;environ 10-30% des femmes boivent pendant la grossesse aux États-Unis, avec 1-8% de boire dans un 1,2 motif de frénésie. La gamme des effets produits par l&#39;exposition à l&#39;éthanol au cours du développement du fœtus est collectivement connu sous le nom de troubles du spectre de l&#39;alcoolisation foetale (ETCAF). Des estimations récentes indiquent que ETCAF est un problème majeur de santé publique avec une prévalence aussi élevée que 2-5% aux États-Unis 3. La manifestation la plus grave de FASDs est le syndrome d&#39;alcoolisation fœtale (SAF), qui se caractérise par un retard de croissance, des anomalies cranio-faciales, et des déficits neurocomportementaux, y compris les troubles d&#39;apprentissage. La prévalence du SAF a été estimée à 0,2-0,7% aux États-Unis 3. Les traitements actuellement disponibles pour FASDs sont que partiellement efficaceset le développement de traitements plus efficaces est limitée par la mauvaise compréhension des fondements moléculaires et cellulaires de ce spectre complexe de troubles. Les données des anomalies congénitales nationales Prevention Study (NBDPS) indiquent que les femmes enceintes boivent plus souvent au cours du 1 er trimestre, avant la grossesse a été détectée, suivie par l&#39;abstinence durant les derniers stades de gestation 2. Le NBDPS également constaté que le deuxième modèle le plus courant de la consommation d&#39;éthanol pendant la gestation implique potable dans tous les trimestres de la grossesse 2. Les raisons en sont le manque de sensibilisation sur les effets potentiellement nocifs de l&#39;exposition du fœtus à l&#39;éthanol (même à faibles doses), l&#39;accès limité à des soins prénatals, l&#39;histoire positive pour les troubles neuropsychiatriques, et l&#39;abus de dépendance ou à l&#39;éthanol 4. Fait intéressant, le NBDPS indiqué que le troisième modèle le plus courant de la consommation impliqué l&#39;abstinence pendant la 1 <sup&gt; Ère et 2 ème trimestres suivis par le secteur au cours de la 3 ème trimestre, quand on suppose souvent que l&#39;alcool est sûr parce que l&#39;organogenèse a été presque complétée. Cependant, le 3 ème trimestre est une période de forte sensibilité à des lésions du système nerveux induite par l&#39;éthanol-parce que c&#39;est une période où les circuits neuronaux subissent profond raffinement 2. Le NBDPS également identifié d&#39;autres modèles, moins fréquentes de la consommation d&#39;alcool qui se produisent pendant la grossesse, y compris la consommation tout au long de la 1 ère et 2 ème trimestres suivis par l&#39;abstinence pendant la 3 e trimestre 2. Dans une tentative pour modéliser les différents modes de consommation d&#39;éthanol observés chez les femmes enceintes, un certain nombre de paradigmes de développement d&#39;exposition à l&#39;éthanol ont été établies au moyen de diverses espèces animales, des rats et des souris étant 5,6 plus courante. La durée de la grossesse chez ces animaux généralement lasct environ 3 semaines, ce qui correspond à la 1 ère et 2 ème trimestres de la grossesse humaine. De nombreuses études sur des rongeurs ont évalué l&#39;impact de différentes doses et les modes d&#39;exposition à l&#39;éthanol au cours de cette période. Des exemples de procédés fréquemment utilisés pour administrer de l&#39;éthanol à des souris et des rats enceintes comprennent l&#39;administration par l&#39;intermédiaire d&#39;une alimentation de 7,8, l&#39;addition d&#39;éthanol à l&#39;eau de boisson 9,10, boire volontaire des solutions sucrées 11 saccharine, gavage gastrique 12, 13 l&#39;inhalation des vapeurs de liquides , et sous-cutanée ou injection intrapéritonéale 14. Les résultats de ces études ont récapitulé plusieurs des déficits observés chez l&#39;homme avec FASDs, démontrant que l&#39;exposition durant les premiers stades de la grossesse est suffisante pour endommager les circuits neuronaux dans le cerveau (revue dans 6,15). Des expériences avec des rongeurs ont également démontré que l&#39;exposition au cours de l&#39;équivalent de la 3 ème </sup&gt; Trimestre de la grossesse humaine, ce qui correspond à peu près aux 1-2 premières semaines de vie postnatale chez le rat et la souris, peut altérer de manière significative le développement du cerveau. L&#39;exposition au cours de cette période a été modélisé par l&#39;administration de l&#39;éthanol à des rats ou des souris néonatales. L&#39;éthanol a été administré à ces animaux en utilisant une variété de méthodes, y compris par l&#39;intermédiaire de l&#39;alimentation par gastrostomie chez les animaux élevés artificiellement, 16-18 intubation intra-gastrique 19, 20 injection sous-cutanée, l&#39;inhalation de vapeurs et 21,22. Ces études ont démontré de manière convaincante que la poussée de croissance du cerveau est une période de grande vulnérabilité aux effets sur le développement de l&#39;éthanol 6. Comme mentionné ci-dessus, de boire pendant tous les trimestres de la grossesse est un motif commun de la consommation d&#39;éthanol chez les femmes 2. Cependant, relativement peu d&#39;études ont évalué l&#39;impact de ce type d&#39;exposition en utilisant des modèles animaux. Certaines de ces études ont pris Advantage des animaux de grande taille où la 3ème trimestre équivalent se produit in utero au lieu de la période néonatale, comme dans le cas des rats et des souris. Ces modèles animaux comprennent les primates non humains, les moutons 23,24 et 25 à 27. Cependant, ces modèles animaux n&#39;ont pas été largement utilisé dans la recherche de FASDs, en partie, à cause du coût élevé et la nécessité pour les établissements de soins spécialisés. Rongeurs ont été le plus souvent utilisé pour caractériser l&#39;effet de tout trimestre exposition à l&#39;éthanol sur le développement foetal 5. Les cobayes ont été particulièrement avantageuse à cet égard compte tenu de leur vaste développement prénatal et similitudes dans la maturation du cerveau à celle des humains 28,29. Avec cobayes, il a été possible de caractériser l&#39;effet de l&#39;exposition à l&#39;éthanol in utero qui comprend la période de développement équivalent de la troisième trimestre humaine 3. Le coût relativement élevé de ces animaux, ainsi que la durée relativement longue de leur grossesse(~ 67 jours), a limité leur utilisation à quelques laboratoires travaillant sur la recherche ETCAF. En raison de leur rapport coût-efficacité et une large utilisation dans la recherche biomédicale, les chercheurs ont utilisé des rats pour modéliser l&#39;exposition à l&#39;éthanol pendant tous les trimestres de la grossesse. Dans les études initiales, les rats ont été exposés pendant la grossesse par les régimes alimentaires liquides suivies par l&#39;administration d&#39;éthanol par gastrostomie à élevés artificiellement les nouveau-nés (jours après la naissance (P) 1-10) résultant en des niveaux de production d&#39;éthanol dans le sang de pointe (BEC) dans les barrages de 0,08 g / dl et dans les chiots 0,16 g / dl. Ce paradigme a provoqué des modifications durables dans la myélinisation du nerf optique et réduit le nombre de fibres gliales Bergmann dans le cervelet 30-32. De même, Maier et collaborateurs utilisant des conditions d&#39;élevage artificiels administrés éthanol aux barrages de rats enceintes de manière excessive comme par intubation intragastrique suivie par l&#39;administration néonatale pendant une partie de la 3 ème trimestre équivalent (P4-9) 33,34. PBEC maternelle et chiot EAK ont été de 0,3 g / dl à la fois jour de gestation 20 et P6. Cette exposition paradigme de tout-trimestre a entraîné un retard de croissance était significativement supérieure à celle observée chez les petits exposés pendant des périodes sélectionnées de gestation 33. De plus, les rats exposés à de l&#39;éthanol au cours de l&#39;équivalent de tous les trimestres de la grossesse ont présenté une réduction dans le nombre de Purkinje du cervelet et les cellules granulaires qui était supérieure à celle observée chez les animaux exposés pendant 34 autres périodes. La réduction du nombre de cellules de l&#39;hippocampe ont également été signalés avec ce paradigme, mais ces effets semblent être principalement une conséquence de l&#39;exposition au cours de la 3 ème trimestre équivalent 35. Une méthode qui implique l&#39;administration d&#39;éthanol par gavage intragastrique pour les rats et les souris enceintes néonatale a également été utilisé pour modéliser toute exposition de trimestre 36. Cette méthode, qui a abouti à CAE de 0,13 g / dl dans les barrages (de jour de gestation 17) et 0,24 g / dl chez les petits P6, lon induitealtérations g durables dans les niveaux de neurotransmetteurs monoamines dans l&#39;hippocampe et l&#39;hypothalamus, et une expression accrue d&#39;ADN méthyltransférases de méthyle et de CpG protéine 2 de liaison de l&#39;hippocampe 37,38. L&#39;utilisation d&#39;un paradigme d&#39;exposition similaire (BEC = 0,14 à 0,2 g / dl dans les barrages et 0,2 g / dl chez les petits), Gil-Mohapel et al. 39 a détecté une augmentation du nombre de nouveaux neurones immatures dans le gyrus denté de rats adultes que peut représenter un mécanisme de compensation pour une lésion neuronale induite par l&#39;éthanol ou une altération de la maturation des neurones adultes de souche. Les enquêteurs ont également tenté de modéliser toute exposition trimestre de l&#39;éthanol en exposant barrages par les régimes alimentaires liquides ou l&#39;eau potable durant la grossesse et l&#39;allaitement 9,40. Cependant, l&#39;utilité de l&#39;exposition des chiots par le lait de leur mère est limitée car elle se traduit généralement dans les CEB faible chiot (par exemple, de 0,002 à 0,05 g / dl; 41,42). Les souris ont également été utilisés extensvement à caractériser les effets de l&#39;exposition à l&#39;éthanol de développement. Ce modèle animal de nombreuses actions des forces décrites ci-dessus pour le modèle animal de rat, avec l&#39;avantage supplémentaire que de nombreuses souches de souris génétiquement modifiées sont disponibles 5. Souris ont été utilisés avec succès pour caractériser les effets de l&#39;éthanol au cours de la 1 ère, 2 ème ou 3 ème trimestres de la grossesse 43,44. Cependant, l&#39;impact de toute exposition de trimestre sur ces animaux n&#39;a pas été bien caractérisée, car il est techniquement plus difficile à exposer des souris pendant l&#39;équivalent de tous les trimestres de la grossesse humaine. Par exemple, l&#39;élevage artificiel et gavage gastrique, qui ont été utilisés avec succès chez le rat, nécessitent des procédures plus spécialisées dans les souris 45. Au meilleur de notre connaissance, une seule étude à ce jour a tenté d&#39;étudier l&#39;effet de toute exposition trimestre de l&#39;éthanol en utilisant des souris; ces animaux ont été exposés à une solution d&#39;éthanol dans de l&#39;eau potable During grossesse et l&#39;allaitement 46. BEC maternels étaient de 0,07 g / dl et chiot BEC n&#39;ont pas été déterminées, mais devrait être une fraction de ceux dans les barrages. Ici, nous décrivons un nouveau modèle pour l&#39;exposition tout trimestre éthanol de souris où l&#39;alcool est administré à deux barrages enceintes et les nouveau-nés par des chambres d&#39;inhalation de vapeurs. chambres de vapeur ont été construits sur la base d&#39;une conception précédente 47. Nous fournissons des instructions détaillées sur la façon de construire les chambres d&#39;inhalation et d&#39;appliquer les procédures d&#39;exposition. Nous fournissons également des informations sur les CAE qui peuvent être obtenus et l&#39;impact de l&#39;exposition sur la survie des nouveau-nés et de la croissance.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="636">
	<tbody>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:320px;">Item</td>
			<td style="width:180px;">Company</td>
			<td style="width:72px;">Cat #</td>
			<td style="width:64px;">Qty</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Polycarbonate 1/4&#34; clear 48&#34; x 24&#34;</td>
			<td>McMaster-Carr</td>
			<td>8574K23</td>
			<td>10</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Foam Rubber bulb seal 3/8&#34;w x 7/32&#34;h&#160;</td>
			<td>McMaster-Carr</td>
			<td>93085K67</td>
			<td>10ft</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Weld-on #16</td>
			<td>McMaster-Carr</td>
			<td>7515A11</td>
			<td>3</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Piano hinge 12&#34; long</td>
			<td>McMaster-Carr</td>
			<td>1658A11</td>
			<td>2 x 1ft</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Hold-down toggle clamps standard</td>
			<td>McMaster-Carr</td>
			<td>5126A26</td>
			<td>8</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">PEX tubing 1/2&#34;</td>
			<td>McMaster-Carr</td>
			<td>51275K88</td>
			<td>10ft</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Barbed Tee tube fitting (Black) Pkg 10</td>
			<td>McMaster-Carr</td>
			<td>5463K608</td>
			<td>1</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Barbed plug fitting (Black) Pkg 10</td>
			<td>McMaster-Carr</td>
			<td>5462K79</td>
			<td>1</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Barbed Elbow tube fitting (Black) Pkg 10</td>
			<td>McMaster-Carr</td>
			<td>5463K596</td>
			<td>1</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">3/8&#34; Through-Wall Adapters, Tube to Threaded Pipe</td>
			<td>McMaster-Carr</td>
			<td>5463K851</td>
			<td>1</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Phillips Machine screw 4-40</td>
			<td>McMaster-Carr</td>
			<td>91772A112</td>
			<td>1</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Machine screw hex nut 4-40</td>
			<td>McMaster-Carr</td>
			<td>90480A005</td>
			<td>1</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Panel-mount flowmeter 2-20</td>
			<td>McMaster-Carr</td>
			<td>41945K76</td>
			<td>3</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">FLASK, FILTER 1000ML 6/PACK</td>
			<td>VWR</td>
			<td>89001-800</td>
			<td>2</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Precision Seal Septa</td>
			<td>VWR</td>
			<td>89084-490</td>
			<td>1</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">VWR Black Rubber Stopper #8 1-hole</td>
			<td>VWR</td>
			<td>59581-367</td>
			<td>1</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">TUBE TYGON R3603 3/8X9/16 50&#39;</td>
			<td>VWR</td>
			<td>89068-556</td>
			<td>1</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">TUBE TYGON R3603 1/4X11/16 50&#39;</td>
			<td>VWR</td>
			<td>89068-502</td>
			<td>1</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Aerator Stone P2120</td>
			<td>VWR</td>
			<td>32573-007</td>
			<td>1</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">3/8&#34; T-connectors Pk of 20</td>
			<td>VWR</td>
			<td>46600-060</td>
			<td>1</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">VWR Disconnectors tapered Pk of 10</td>
			<td>VWR</td>
			<td>46600-110</td>
			<td>1</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">3/8 Hose Barb valved in-line coupling</td>
			<td>Colder Products Company</td>
			<td>HFCD17612</td>
			<td>1</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Air pump medium capacity</td>
			<td>LMI Manufacturers</td>
			<td>DB60L</td>
			<td>1</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Nexelate Wire Shelving 36&#34;W X 24&#34;D X 63&#34;H</td>
			<td>Global industrial</td>
			<td>T9A990135</td>
			<td>1</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Stem Casters Set of (4) 5&#34; Polyurethane Wheel</td>
			<td>Global industrial</td>
			<td>T9A500591</td>
			<td>1</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Breathalyzer Alco-Sensor III</td>
			<td>Intoximeters, Inc.</td>
			<td>ASIII</td>
			<td>1
			<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="636">
				<colgroup>
					<col />
					<col />
					<col />
					<col />
				</colgroup>
				<tbody>
					<tr height="20">
						<td height="20" style="height:20px;width:320px;">Item</td>
						<td style="width:180px;">Company</td>
						<td style="width:72px;">Cat #</td>
						<td style="width:64px;">Qty</td>
					</tr>
					<tr height="20">
						<td height="20" style="height:20px;">Polycarbonate 1/4&#34; clear 48&#34; x 24&#34;</td>
						<td>McMaster-Carr</td>
						<td>8574K23</td>
						<td>10</td>
					</tr>
					<tr height="20">
						<td height="20" style="height:20px;">Foam Rubber bulb seal 3/8&#34;w x 7/32&#34;h&#160;</td>
						<td>McMaster-Carr</td>
						<td>93085K67</td>
						<td>10ft</td>
					</tr>
					<tr height="20">
						<td height="20" style="height:20px;">Weld-on #16</td>
						<td>McMaster-Carr</td>
						<td>7515A11</td>
						<td>3</td>
					</tr>
					<tr height="20">
						<td height="20" style="height:20px;">Piano hinge 12&#34; long</td>
						<td>McMaster-Carr</td>
						<td>1658A11</td>
						<td>2 x 1ft</td>
					</tr>
					<tr height="20">
						<td height="20" style="height:20px;">Hold-down toggle clamps standard</td>
						<td>McMaster-Carr</td>
						<td>5126A26</td>
						<td>8</td>
					</tr>
					<tr height="20">
						<td height="20" style="height:20px;">PEX tubing 1/2&#34;</td>
						<td>McMaster-Carr</td>
						<td>51275K88</td>
						<td>10ft</td>
					</tr>
					<tr height="20">
						<td height="20" style="height:20px;">Barbed Tee tube fitting (Black) Pkg 10</td>
						<td>McMaster-Carr</td>
						<td>5463K608</td>
						<td>1</td>
					</tr>
					<tr height="20">
						<td height="20" style="height:20px;">Barbed plug fitting (Black) Pkg 10</td>
						<td>McMaster-Carr</td>
						<td>5462K79</td>
						<td>1</td>
					</tr>
					<tr height="20">
						<td height="20" style="height:20px;">Barbed Elbow tube fitting (Black) Pkg 10</td>
						<td>McMaster-Carr</td>
						<td>5463K596</td>
						<td>1</td>
					</tr>
					<tr height="20">
						<td height="20" style="height:20px;">3/8&#34; Through-Wall Adapters, Tube to Threaded Pipe</td>
						<td>McMaster-Carr</td>
						<td>5463K851</td>
						<td>1</td>
					</tr>
					<tr height="20">
						<td height="20" style="height:20px;">Phillips Machine screw 4-40</td>
						<td>McMaster-Carr</td>
						<td>91772A112</td>
						<td>1</td>
					</tr>
					<tr height="20">
						<td height="20" style="height:20px;">Machine screw hex nut 4-40</td>
						<td>McMaster-Carr</td>
						<td>90480A005</td>
						<td>1</td>
					</tr>
					<tr height="20">
						<td height="20" style="height:20px;">Panel-mount flowmeter 2-20</td>
						<td>McMaster-Carr</td>
						<td>41945K76</td>
						<td>3</td>
					</tr>
					<tr height="20">
						<td height="20" style="height:20px;">FLASK, FILTER 1000ML 6/PACK</td>
						<td>VWR</td>
						<td>89001-800</td>
						<td>2</td>
					</tr>
					<tr height="20">
						<td height="20" style="height:20px;">Precision Seal Septa</td>
						<td>VWR</td>
						<td>89084-490</td>
						<td>1</td>
					</tr>
					<tr height="20">
						<td height="20" style="height:20px;">VWR Black Rubber Stopper #8 1-hole</td>
						<td>VWR</td>
						<td>59581-367</td>
						<td>1</td>
					</tr>
					<tr height="20">
						<td height="20" style="height:20px;">TUBE TYGON R3603 3/8X9/16 50&#39;</td>
						<td>VWR</td>
						<td>89068-556</td>
						<td>1</td>
					</tr>
					<tr height="20">
						<td height="20" style="height:20px;">TUBE TYGON R3603 1/4X11/16 50&#39;</td>
						<td>VWR</td>
						<td>89068-502</td>
						<td>1</td>
					</tr>
					<tr height="20">
						<td height="20" style="height:20px;">Aerator Stone P2120</td>
						<td>VWR</td>
						<td>32573-007</td>
						<td>1</td>
					</tr>
					<tr height="20">
						<td height="20" style="height:20px;">3/8&#34; T-connectors Pk of 20</td>
						<td>VWR</td>
						<td>46600-060</td>
						<td>1</td>
					</tr>
					<tr height="20">
						<td height="20" style="height:20px;">VWR Disconnectors tapered Pk of 10</td>
						<td>VWR</td>
						<td>46600-110</td>
						<td>1</td>
					</tr>
					<tr height="20">
						<td height="20" style="height:20px;">3/8 Hose Barb valved in-line coupling</td>
						<td>Colder Products Company</td>
						<td>HFCD17612</td>
						<td>1</td>
					</tr>
					<tr height="20">
						<td height="20" style="height:20px;">Air pump medium capacity</td>
						<td>LMI Manufacturers</td>
						<td>DB60L</td>
						<td>1</td>
					</tr>
					<tr height="20">
						<td height="20" style="height:20px;">Nexelate Wire Shelving 36&#34;W X 24&#34;D X 63&#34;H</td>
						<td>Global industrial</td>
						<td>T9A990135</td>
						<td>1</td>
					</tr>
					<tr height="20">
						<td height="20" style="height:20px;">Stem Casters Set of (4) 5&#34; Polyurethane Wheel</td>
						<td>Global industrial</td>
						<td>T9A500591</td>
						<td>1</td>
					</tr>
					<tr height="20">
						<td height="20" style="height:20px;">Breathalyzer Alco-Sensor III</td>
						<td>Intoximeters, Inc.</td>
						<td>ASIII</td>
						<td>1</td>
					</tr>
				</tbody>
			</table>
			</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

construction of vapor chambers used to expose mice to alcohol during the equivalent of all three trimesters of human development

L&#39;exposition à l&#39;alcool pendant le développement peut entraîner une constellation d&#39;anomalies morphologiques et comportementales qui sont collectivement connus comme des troubles causés par l&#39;alcoolisation fœtale (ETCAF). A la fin la plus sévère du spectre est le syndrome d&#39;alcoolisation fœtale (SAF), caractérisé par un retard de croissance, une dysmorphie cranio-faciale, et les déficits neurocomportementaux. Des études sur des modèles animaux, y compris les rongeurs, ont permis d&#39;élucider de nombreux mécanismes moléculaires et cellulaires impliqués dans la physiopathologie de l&#39;ETCAF. administration de l&#39;éthanol à des rongeurs enceintes a été utilisé pour modéliser l&#39;exposition humaine au cours des premier et deuxième trimestres de la grossesse. Troisième trimestre de la consommation d&#39;éthanol chez l&#39;homme a été modélisée à l&#39;aide rongeurs nouveau-nés. Cependant, quelques études sur des rongeurs ont caractérisé l&#39;effet de l&#39;exposition à l&#39;éthanol pendant l&#39;équivalent de trois trimestres de la grossesse humaine, un modèle d&#39;exposition qui est commun chez les femmes enceintes. Ici, nous montrons comment construire des chambres de vapeur de facilement omatériaux btainable qui peuvent chacune accueillir jusqu&#39;à six cages de souris standard. Nous décrivons un paradigme de la chambre de vapeur qui peut être utilisé pour modéliser une exposition à l&#39;éthanol, avec un minimum de manipulation, pendant les trois trimestres. Nos études montrent que les barrages enceintes développées tolérance métabolique importante à l&#39;éthanol. Cependant, les souris néonatale n&#39;a pas développé la tolérance métabolique et le nombre de fœtus, le poids du fœtus, le poids du placenta, le nombre de chiots / portée, le nombre de morts chiots / portée, et du poids des petits n&#39;ont pas été significativement affectée par l&#39;exposition à l&#39;éthanol. Un avantage important de ce modèle est son applicabilité à des études sur des souris génétiquement modifiées. De plus, ce paradigme minimise la manipulation des animaux, un facteur de confusion important dans la recherche d&#39;alcoolisme foetal.

La figure 2A montre que les souris enceintes et les enfants nouveau-nés ont été exposés à des concentrations de vapeur d&#39;éthanol relativement stables dans les chambres. Celles-ci vont entre 4-6 g / dl. Figure 2B montre les BEC obtenus chez les souris enceintes en fonction du temps. CAE ont été mesurées en utilisant un alcool déshydrogénase standard basé d&#39;essai 48. Au G5, CAE a augmenté rapidement à ~ 60 mM de 2 heures après le début de l&#39;expositio...

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Construction of Vapor Chambers Used to Expose Mice to Alcohol During the Equivalent of all Three Trimesters of Human Development

Nous démontrons la construction des chambres à vapeur de l&#39;alcool à l&#39;aide de matériaux facilement disponibles qui abritent simultanément 6 cages de souris. Nous décrivons en outre leur utilisation dans un modèle de souris de l&#39;exposition d&#39;alcoolisation fœtale équivalent à tous les trois trimestres de la grossesse humaine. Ce paradigme expose des animaux pendant la gestation et après la naissance 1-12 jours.

Construction des chambres de vapeur utilisée pour exposer des souris à l&#39;alcool pendant l&#39;équivalent de toutes trois trimestres de développement humain

Exposure to alcohol during development can result in a constellation of morphological and behavioral abnormalities that are collectively known as Fetal ...

construction-vapor-chambers-used-to-expose-mice-to-alcohol-during

Research

JoVE Journal

Medicine

14.6K vues.  University of New Mexico Health Sciences Center.  Nous démontrons la construction des chambres à vapeur de l'alcool à l'aide de matériaux facilement disponibles qui abritent simultanément 6 cages de souris. Nous décrivons en outre leur utilisation dans un modèle de souris de l'exposition d'alcoolisation fœtale équivalent à tous les trois trimestres de la grossesse humaine. Ce paradigme expose des animaux pendant la gestation et après la naissance 1-12 jours. 

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Human Internal Mammary Artery (IMA) Transplantation and Stenting: A Human Model to Study the Development of In-Stent Restenosis

Preclinical in vivo research models to investigate pathobiological and pathophysiological processes in the development of intimal hyperplasia after vessel stenting are crucial for translational approaches1,2.
The commonly used animal models include mice, rats, rabbits, and pigs3-5. However, the translation of these models into clinical settings remains difficult, since those biological processes are already studied in animal vessels but never performed before in human research models6,7. In this video we demonstrate a new humanized model to overcome this translational gap. The shown procedure is reproducible, easy, and fast to perform and is suitable to study the development of intimal hyperplasia and the applicability of diverse stents.
This video shows how to perform the stent technique in human vessels followed by transplantation into immunodeficient rats, and identifies the origin of proliferating cells as human.

Human Internal Mammary Artery IMA Transplantation and Stenting: A Human Model to Study the Development of In-Stent Restenosis

This video shows a model to study the development of intimal hyperplasia after stent deployment using a human vessel (IMA) in an immunodeficient rat model.

Human artère mammaire interne (IMA) à la transplantation et stenting: un modèle humain pour étudier le développement de la resténose intra-stent

Preclinical in vivo research models to investigate pathobiological and pathophysiological processes in the development of intimal hyperplasia after vessel ...

Recherche

Médecine

The Measurement and Treatment of Suppression in Amblyopia

Amblyopia, a developmental disorder of the visual cortex, is one of the leading causes of visual dysfunction in the working age population. Current estimates put the prevalence of amblyopia at approximately 1-3%1-3, the majority of cases being monocular2. Amblyopia is most frequently caused by ocular misalignment (strabismus), blur induced by unequal refractive error (anisometropia), and in some cases by form deprivation.
Although amblyopia is initially caused by abnormal visual input in infancy, once established, the visual deficit often remains when normal visual input has been restored using surgery and/or refractive correction. This is because amblyopia is the result of abnormal visual cortex development rather than a problem with the amblyopic eye itself4,5 . Amblyopia is characterized by both monocular and binocular deficits6,7 which include impaired visual acuity and poor or absent stereopsis respectively. The visual dysfunction in amblyopia is often associated with a strong suppression of the inputs from the amblyopic eye under binocular viewing conditions8. Recent work has indicated that suppression may play a central role in both the monocular and binocular deficits associated with amblyopia9,10 .
Current clinical tests for suppression tend to verify the presence or absence of suppression rather than giving a quantitative measurement of the degree of suppression. Here we describe a technique for measuring amblyopic suppression with a compact, portable device11,12 . The device consists of a laptop computer connected to a pair of virtual reality goggles. The novelty of the technique lies in the way we present visual stimuli to measure suppression. Stimuli are shown to the amblyopic eye at high contrast while the contrast of the stimuli shown to the non-amblyopic eye are varied. Patients perform a simple signal/noise task that allows for a precise measurement of the strength of excitatory binocular interactions. The contrast offset at which neither eye has a performance advantage is a measure of the "balance point" and is a direct measure of suppression. This technique has been validated psychophysically both in control13,14 and patient6,9,11 populations.
In addition to measuring suppression this technique also forms the basis of a novel form of treatment to decrease suppression over time and improve binocular and often monocular function in adult patients with amblyopia12,15,16 . This new treatment approach can be deployed either on the goggle system described above or on a specially modified iPod touch device15.

Amblyopia is a developmental disorder of the visual cortex that is often accompanied by strong suppression of one eye. We present a new technique for measuring and treating interocular suppression in patients with amblyopia that can be deployed using virtual reality goggles or a portable iPod Touch device.

La mesure et le traitement de répression dans l&#39;amblyopie

Amblyopia, a developmental disorder of the visual cortex, is one of the leading causes of visual dysfunction in the working age population. Current ...

A Phenotyping Regimen for Genetically Modified Mice Used to Study Genes Implicated in Human Diseases of Aging

Age-related diseases are becoming increasingly prevalent and the burden continues to grow as our population ages. Effective treatments are necessary to lessen the impact of debilitating conditions but remain elusive in many cases. Only by understanding the causes and pathology of diseases associated with aging, can scientists begin to identify potential therapeutic targets and develop strategies for intervention. The most common age-related conditions are neurodegenerative disorders such as Parkinson's disease and blindness. Age-related macular degeneration (AMD) is the leading cause of blindness in the elderly. Genome wide association studies have previously identified loci that are associated with increased susceptibility to this disease and identified two regions of interest: complement factor H (CFH) and the 10q26 locus, where the age-related maculopathy susceptibility 2 (ARMS2) and high-temperature requirement factor A1 (HtrA1) genes are located. CFH acts as a negative regulator of the alternative pathway (AP) of the complement system while HtrA1 is an extracellular serine protease. ARMS2 is located upstream of HtrA1 in the primate genome, although the gene is absent in mice. To study the effects of these genes, humanized knock-in mouse lines of Cfh and ARMS2, knockouts of Cfh, HtrA1, HtrA2, HtrA3 and HtrA4 as well as a conditional neural deletion of HtrA2 were generated. Of all the genetically engineered mice produced only mice lacking HtrA2, either systemically or in neural tissues, displayed clear phenotypes. In order to examine these mice thoroughly and systematically, an initial phenotyping schedule was established, consisting of a series of tests related to two main diseases of interest: AMD and Parkinson's. Genetically modified mice can be subjected to appropriate experiments to identify phenotypes that may be related to the associated diseases in humans. A phenotyping regimen with a mitochondrial focus is presented here alongside representative results from the tests of interest.

A reverse-genetics approach to understanding gene families associated with human disease is presented, using mouse as a model system, and the subsequent mouse phenotyping schedule is described. Because mice defective in a gene of interest, HtrA2, manifested Parkinsonian symptoms, the phenotyping regimen is focused on identifying neurological defects.

A phénotypage Regimen pour des souris génétiquement modifiées utilisées pour étudier les gènes impliqués dans les maladies humaines du vieillissement

Age-related diseases are becoming increasingly prevalent and the burden continues to grow as our population ages. Effective treatments are necessary to ...

Contractility Measurements of Human Uterine Smooth Muscle to Aid Drug Development

Discovery and characterization of novel pharmaceutical compounds or biochemical probes rely on robust and physiologically relevant assay systems. We describe methods to measure ex vivo myometrium contractility. This assay can be used to investigate factors and molecules involved in the modulation of myometrial contraction and to determine their excitatory or inhibitory actions, and hence their therapeutic potential in vivo. Biopsies are obtained from women undergoing cesarean section delivery with informed consent. Fine strips of myometrium are dissected, clipped and attached to a force transducer within 1 mL organ baths superfused with physiological saline solution at 37 &#176;C. Strips develop spontaneous contractions within 2&#8211;3 h under set tension and remain stable for many hours (&#62;6 h). Strips can also be stimulated to contract such as by the endogenous hormones, oxytocin and vasopressin, which cause concentration-dependent modulation of contraction frequency, force and duration, to more closely resemble contractions in labor. Hence, the effect of known and novel drug leads can be tested on spontaneous and agonist-induced contractions.
This protocol specifically details how this assay can be used to determine the potency of known and novel agents by measuring their effects on various parameters of human myometrial contraction. We use the oxytocin- and V1a receptor antagonists, atosiban and SR49059 as examples of known compounds which inhibit oxytocin- and vasopressin-induced contractions, and demonstrate how this method can be used to complement and validate pharmacological data obtained from cell-based assays to aid drug development. The effects of novel agonists in comparison to oxytocin and vasopressin can also be characterized. Whilst we use the example of the oxytocin/ vasopressin system, this method can also be used to study other receptors and ion channels that play a role in uterine contraction and relaxation to advance the understanding of human uterine physiology and pathophysiology.

This article describes experimental protocols to study ex vivo contractions of human myometrium and their application in drug discovery. This technique is used to improve the understanding of myometrial physiology and pathophysiology as well as to validate pharmacological data from novel research probes or drug leads.

Mesures de contractilité du Human Muscle lisse utérin à l’aide le développement de médicaments

Discovery and characterization of novel pharmaceutical compounds or biochemical probes rely on robust and physiologically relevant assay systems. We ...

A Clinical Trial Assessing the Safety, Efficacy, and Delivery of Olive-Oil-Based Three-Chamber Bags for Parenteral Nutrition

Limited evidence exists to precisely estimate efficacy and safety differences between parenteral nutrition (PN) prepared using olive-oil-based three-chamber bags (3CBs) and soybean-oil-based compounded bags (CoBs) in hospitalized adult patients. We designed a multicenter, randomized, prospective, open-label, noninferiority protocol to compare the efficacy, safety, and distribution of olive-oil-based 3CBs and soybean-oil-based CoB formulations in adult Chinese patients requiring PN during surgical intervention. Subjects were randomized to receive either one of the study treatments using an interactive voice or web-based recognition system in accordance with the randomization code. Randomization was further stratified based on the study site and surgical category. Both treatment groups received similar amounts of calories and protein. In addition, the two study treatments contained a similar composition of the amino-acid component. The only difference between the two PN formulations was the lipid constitution. The duration of administration of study treatments was a minimum of 5 days up to a maximum of 14 days after the surgical procedure. The primary efficacy endpoint was serum prealbumin levels on day 5 of the study. Noninferiority was proved if the anti-log of the lower bound of the 95% confidence interval (CI) of the treatment difference was at least 0.80. Other efficacy measures included treatment preparation time; duration to achieve tolerability of oral nutrition; associated infectious complications; length of hospitalization; and laboratory assessment of markers of nutrition, inflammation, metabolism, and oxidative stress. A total of 458 patients were enrolled in the study. The results showed that olive-oil-based 3CBs were non-inferior to soybean-based CoBs, besides being well tolerated. The infection rate was found to be significantly lower in the olive-oil-based 3CB group. Thus, this study may be used as a reference for future research on lipid emulsion and 3CBs.

Here, we present a protocol for a study comparing the efficacy, safety, and delivery of olive-oil-based 3CB and soybean-oil-based CoB formulations in adults requiring parenteral nutrition. The results revealed that olive-oil-based 3CBs is non-inferior and well tolerated compared to soybean formulations.

Un essai clinique évaluant l'innocuité, l'efficacité et la livraison de sacs à trois chambres à base d'huile d'olive pour la nutrition parentérale

Limited evidence exists to precisely estimate efficacy and safety differences between parenteral nutrition (PN) prepared using olive-oil-based ...

Psychophysical Tracking Method to Assess Taste Detection Thresholds in Children, Adolescents, and Adults: The Taste Detection Threshold (TDT) Test

This paper describes a two-alternative, forced-choice, staircase, tracking procedure, called the Taste Detection Threshold (TDT) test, that provides a reliable measure of sweet, salty, and umami taste detection thresholds from childhood to adulthood. Advantages of the method include procedures that are identical for children and adults, thus allowing the determination of age-related and individual differences in taste perception, if any, and tasks that can be completed in a relatively short time frame, do not rely on continuous attention or require memorization, control for subjective response biases, and minimize the impact of language development. After a 1 hour fast, participants are presented with pairs of solutions; in each pair, one solution is water, and the other solution contains varying concentrations of the tastant.
Using a whole-mouth tasting method, participants taste each solution (without swallowing and with rinsing between tastings) and then point to the solution with a taste or that tastes different from water. The concentration of the stimulus in the subsequent pair increases after a single incorrect response and decreases after two consecutive correct responses. A reversal occurs when the concentration sequence changes direction. The task is deemed completed after the occurrence of four reversals, provided there are a maximum of two dilution steps between two successive reversals, and the series of reversals do not form an ascending pattern. These additional criteria ensure greater reliability in outcomes. The TDT is then calculated as the geometric mean of the concentrations of the four reversals. This method has real-world relevance as it provides information on a dimension of taste perception that is independent of hedonics, and that can change with aging and certain disease states, making it a valuable psychophysical test.

Psychophysical Tracking Method to Assess Taste Detection Thresholds in Children, Adolescents, and Adults: The Taste Detection Threshold TDT Test

Psychophysical tools measure the functionality of the taste system for both research and health assessment purposes. This paper describes a method to measure taste detection thresholds that can determine the lowest concentration of sucrose, sodium chloride, or monosodium glutamate that can be tasted by individuals as young as 6 years.

Méthode de suivi psychophysique pour évaluer les seuils de détection du goût chez les enfants, les adolescents et les adultes: le test du seuil de détection du goût (TDT)

This paper describes a two-alternative, forced-choice, staircase, tracking procedure, called the Taste Detection Threshold (TDT) test, that provides a ...

A Non-Invasive Method for Generating the Cyclic Loading-Induced Intra-Articular Cartilage Lesion Model of the Rat Knee

The pathophysiology of primary osteoarthritis (OA) remains unclear. However, a specific subclassification of OA in relatively younger age groups is likely correlated with a history of articular cartilage damage and ligament avulsion. Surgical animal models of OA of the knee play an important role in understanding the onset and progression of post-traumatic OA and aid in the development of novel therapies for this disease. However, non-surgical models have been recently considered to avoid traumatic inflammation that could affect the evaluation of the intervention. 
In this study, an intra-articular cartilage lesion rat model induced by in vivo cyclic compressive loading was developed, which allowed researchers to (1) determine the optimal magnitude, speed, and duration of load that could cause focal cartilage damage; (2) assess post-traumatic spatiotemporal pathological changes in chondrocyte vitality; and (3) evaluate the histological expression of destructive or protective molecules that are involved in the adaptation and repair mechanisms against joint compressive loads. This report describes the experimental protocol for this novel cartilage lesion in a rat model.

Here, we present the cyclic loading-induced intra-articular cartilage lesion model of the rat knee, generated by 60 cyclic compressions over 20 N, resulting in damage to the femoral condylar cartilage in rats.

Méthode non invasive pour générer le modèle de lésion cartilagineuse intra-articulaire induite par la charge cyclique du genou du rat

The pathophysiology of primary osteoarthritis (OA) remains unclear. However, a specific subclassification of OA in relatively younger age groups is likely ...

Manipulation standardisée du Tuina pour l’arthrose du genou chez le rat

Tuina Manipulation to Reduce Inflammation and Cartilage Loss in Knee Osteoarthritis Rats

Clinical trials suggest that Tuina manipulation is effective in treating knee osteoarthritis (KOA), while further studies are required to discover its mechanism. Therefore, the manipulation of animal models of knee osteoarthritis is critical. This protocol provides a standard process for Tuina manipulation on KOA rats and a preliminary exploration of the mechanism of Tuina for KOA. The press and kneading manipulation method (a kind of Tuina manipulation that refers to pressing and kneading the specific area of the body surface) is applied on 5 acupoints around the knee joint of rats. The force and frequency of the manipulation were standardized by finger pressure recordings, and the position of the rat during manipulation is described in detail in the protocol. The effect of manipulation can be measured by pain behavior tests and microscopic findings in synovial and cartilage. KOA rats showed significant improvement in pain behavior. The synovial tissue inflammatory infiltration was reduced in the Tuina group, and the expression of tumor necrosis factor (TNF)-&#945; was significantly lower. Compared to the control group, chondrocyte apoptosis was less in the Tuina group. This study provides a standardized protocol for Tuina manipulation on KOA rats and preliminary proof that the therapeutic effects of Tuina may be related to reducing synovial inflammation and delayed chondrocyte apoptosis.

Pleins feux sur l’auteur : Comprendre le mécanisme de manipulation du tuina chez le rat 

We present a protocol for Tuina manipulation performed on plaster-immobilized-induced knee osteoarthritis rats. Based on the preliminary results, it suggested that the efficacy of the method relied on the reduction of inflammation and cartilage loss.

Manipulation du tuina pour réduire l’inflammation et la perte de cartilage chez les rats souffrant d’arthrose du genou

Clinical trials suggest that Tuina manipulation is effective in treating knee osteoarthritis (KOA), while further studies are required to discover its ...