Ce protocole permet d’explorer comment l’état interne ou la personnalité d’un poisson zèbre influence la réponse d’orientation aux indices provenant de l’environnement tels que les courants d’eau ou les champs magnétiques. Cette technique est utilisée pour observer l’impact des facteurs internes et des indices environnementaux sur l’orientation du poisson zèbre. Cependant, il peut également être appliqué à une grande variété de conceptions expérimentales.
Cette méthode pourrait fournir un aperçu de l’écologie comportementale de la recherche en biologie des capteurs. Et est l’espèce flexible de sorte qu’il convient à tout animal aquatique qui nage activement. Nous vous conseillons que, lorsque vous effectuez les expériences, vous vous familiarisez avec le comportement de l’animal que vous avez l’intention d’utiliser et avec la façon de minimiser le stress animal.
Pour la sélection de personnalité dans le poisson zèbre recueillir des poissons individuels à l’aide d’un bécher de 250 millilitres dans un filet pour les déplacer dans un réservoir de transfert et de transférer le poisson sur le côté sombre du réservoir de sélection de la personnalité. Après une heure d’acclimatation, ouvrez la porte coulissante et permettez aux personnes qui sortent du trou d’explorer le bon côté du réservoir pendant 10 minutes. À la fin de la période d’exploration, recueillir délicatement le poisson dans deux conteneurs séparés, la collecte du poisson proactif du bon côté lumineux et après cinq minutes supplémentaires le poisson réactif de la boîte sombre.
Pour mettre en place un champ magnétique avec manipulation unidimensionnelle du champ magnétique, gardez le tunnel ouvert et allumez l’unité de puissance et le magnétomètre. Placez une sonde magnétique reliée à un compteur Tesla à gaz à l’intérieur du tunnel et vérifiez la tension nécessaire pour obtenir la valeur de champ magnétique choisie le long de l’axe principal du tunnel. Déconnectez ensuite la sonde et connectez le tunnel d’écoulement à l’appareil de natation.
Pour configurer un champ magnétique avec manipulation tridimensionnelle du champ magnétique, allumez l’ordinateur, convertisseur numérique à analogique en bobines et réglez le champ magnétique choisi sur les axes x, y, z. Placez ensuite le tunnel au centre de l’ensemble de paires Helmholtz. Lorsque le champ magnétique de ce choix a été mis en place, sélectionnez un à cinq poissons pour le test rhéotactic.
Transférez le poisson dans le tunnel, réglez le débit dans le tunnel à 4,5 litres par minute et allumez la pompe. Assurez-vous de fermer la vanne de sortie avant de sentir le tunnel avec de l’eau et de transférer le poisson et de l’ouvrir avant de mettre le plancher à droite. Après que les animaux se sont acclimatés là dans le tunnel de natation pendant une heure, commencer à enregistrer le comportement des poissons dans le tunnel et commencer l’étape sage augmenter le débit selon le protocole expérimental choisi.
Le même tunnel de natation avec la bobine enlevée, peut être placé au centre de l’ensemble de paires Helmholtz. À la fin de l’expérience rheotaxis, prendre des photos de poissons individuels dans une chambre métrique amorphe et ouvrir les photos en image J.Notez le sexe de l’animal. Le poisson zèbre mâle est mince et a tendance à jaunâtre, tandis que les femelles sont plus arrondies et ont tendance à avoir des colorants bleus et blancs.
Ensuite, cliquez sur analyser et définir l’échelle. Pour définir l’échelle de l’image en centimètres, en utilisant l’échelle de la caméra comme référence et avec l’outil de ligne segmenté sélectionné, tracez une ligne de la pointe du museau au pentacle dorloté pour mesurer la longueur standard ou à la pointe de la queue pour la longueur totale. Cliquez ensuite analyser et mesurer et enregistrer la longueur linéaire de l’animal en centimètres.
Pour suivre l’activité du poisson zèbre dans le tunnel, ouvrez le logiciel d’analyse vidéo et de modélisation approprié. Cliquez sur Fichier, Importation et vidéo et ouvrez l’une des vidéos et cliquez sur le système de coordonnées pour définir les unités de longueur en centimètres et les unités de temps, en secondes. Cliquez sur les axes de coordonnées et réglez le système de référence pour suivre la position du poisson au fil du temps avec l’axe x le long du tunnel, en fixant l’origine au coin inférieur du mur à la sortie d’eau.
Cliquez sur suivre nouveau dans l’étalonnage pour définir l’échelle et suivre nouveau point à la masse, pour commencer à suivre un poisson à la fois. A avancé la vidéo manuellement à une demi-seconde, cinq intervalles d’image et de marquer l’heure et la position de l’animal à chaque tour en amont en aval et à chaque tour en aval en amont. À la fin de chaque session de suivi, sélectionnez les valeurs X et temps de la table.
Cliquez à droite sur les données et cliquez sur les données de copie en toute précision. Enregistrez ensuite les valeurs de temps et x de toutes les positions de rotation d’un fichier de feuille de calcul de modèle. Calculer le temps total en amont et en aval, ainsi que les valeurs de l’indice rhéotactic et les pourcentages pour chaque étape complète.
Dans cette expérience représentative, après une période d’acclimation d’une heure dans le tunnel comme démontré, un spectacle à la fois a été enregistré vidéo tout en nageant dans le tunnel dans le courant d’eau a été accéléré avec une augmentation stepwise du débit pendant sept étapes. Au cours de ces essais, le champ magnétique a été contrôlé dans une dimension. Pendant le temps suivi, les termes de chaque poisson à chaque débit ont été mis en évidence et utilisés comme points de référence pour calculer l’indice rhéotactic de chaque poisson à chaque vitesse.
Lorsque l’indice rhéotactic est supérieur à 50% et indique que l’animal a eu une réponse rhéotactic positive correspondant à une prédominance de la natation en amont, un indice rhéotactic pas sensiblement différent de 50% indique une absence d’une réponse rhéotactic. La transformation de signe d’arc des valeurs moyennes de pourcentage d’indice rhéotactic des cinq poissons dans cette expérience a démontré une augmentation sigmoïde de la valeur d’index rhéotactic quand la vitesse de l’eau augmente, permettant la quantification des rhéotaxis de poisson zèbre utilisant une méthode mathématique simple. À partir de ces courbes, il est visible que sous des champs magnétiques de directions différentes, le rhéotactic sensible des poissons proactifs n’est pas affecté et la réponse des deux groupes expérimentaux est représentée par la même courbe.
D’autre part, les poissons réactifs modifient l’orientation rhéotatique en fonction du champ magnétique et la réponse est représentée par des courbes significativement différentes. Rappelez-vous qu’il s’agit d’une expérience comportementale et le comportement des poissons peut être affecté par le stress. La manipulation et le transfert du poisson peuvent être délicats.
Alors, entraînez-vous avant les expériences. Cette technique magnétique rhéotactic nous a permis d’explorer davantage les effets de la personnalité sur la sensibilité magnétale chez le poisson zèbre et les autres vertébrés aquatiques et invertébrés.
