Bu protokol, bir zebra balığının iç durumunun veya kişiliğinin su akıntıları veya manyetik alanlar gibi çevreden gelen ipuçlarına verilen oryantasyon tepkisini nasıl etkilediğinin araştırılmasına olanak sağlar. Bu teknik, hem iç faktörlerin hem de çevresel ipuçlarının zebra balığı yönelimini nasıl etkilediğini gözlemlemek için kullanılır. Ancak, aynı zamanda deneysel tasarımlar geniş bir yelpazede uygulanabilir.
Bu yöntem, sensör biyolojisi araştırmalarının davranışsal ekolojisi hakkında bilgi sağlayabilir. Ve türler esnektir, bu yüzden aktif olarak yüzen her su hayvanı için uygundur. Deneylerde performans sergiledikten sonra, kullanmayı planladığınız hayvanın davranışlarına ve hayvan stresini nasıl en aza indirdiğinize aşina olmanızı öneriyoruz.
Zebra balıkkişilik seçimi için bir transfer tankı içine taşımak ve kişilik seçim tankı karanlık tarafına balık aktarmak için bir net 250 mililitrelik bir beher kullanarak bireysel balık toplamak. Bir saatlik alışma dan sonra sürgülü kapıyı açın ve delikten çıktığınız kişilerin tankın parlak tarafını 10 dakika boyunca keşfetmelerine izin verin. Keşif döneminin sonunda, yavaşça iki ayrı kaplarda balık toplamak, parlak taraftan proaktif balık toplama ve ek beş dakika sonra karanlık kutudan reaktif balık.
Tek boyutlu manyetik alan manipülasyonu ile bir manyetik alan kurmak için, tünel açık tutmak ve güç ünitesi ve manyetometre açın. Tünelin içine tesla metre gazına bağlı bir manyetik prob yerleştirin ve tünelin ana ekseni boyunca seçilen manyetik alan değerini elde etmek için gereken gerilimi doğrulayın. Daha sonra sondanın bağlantısını kesip akış tünelini yüzme cihazına bağlayın.
Üç boyutlu manyetik alan manipülasyonu ile bir manyetik alan kurmak için, bobin sürücüleri analog dönüştürücü bilgisayar, dijital açın ve x, y, z eksenleri üzerinde seçilen manyetik alan ayarlayın. Sonra Helmholtz çiftleri seti merkezine tünel yerleştirin. Bu seçimin manyetik alanı kurulduğunda, reotaktik testi için bir ila beş balık seçin.
Tüneldeki balıkları transfer edin, tüneldeki akış hızını dakikada 4,5 litreye ayarlayın ve pompayı açın. Tüneli suyla hissetmeden önce çıkış vanasını kapatıp balığı transfer edip zemini doğru ayarlamadan önce açtığından emin olun. Hayvanlar yüzme tünelinde bir saat boyunca alıştıktan sonra, tünel içindeki balıkların davranışlarını kaydetmeye başlayın ve seçilen deneysel protokole göre akış hızını artırarak adıma başlayın.
Bobin kaldırıldı ile aynı yüzme tüneli, Helmholtz çiftleri seti merkezine yerleştirilebilir. Rheotaxis deneyinin sonunda, amorf metrik odasında tek tek balıkların fotoğraflarını çekin ve resimdeki fotoğrafları açın J.Note hayvanın cinsiyetini. Erkek zebra balığı ince ve sarımsı olma eğilimindedir, dişiler daha yuvarlak ve mavi ve beyaz renklendirme eğilimindedir.
Ardından, çözümle ve ölçek ayarlayın tıklatın. Görüntünün ölçeğini yüz santimetre olarak ayarlamak için, kamera ölçeğini referans olarak ve seçilen parçalı çizgi aracıyla, standart uzunluğu ölçmek için çıkış ucundan şımarık pentacle'a veya toplam uzunluk için kuyruk ucuna bir çizgi çizin. Ardından Analiz et ve hayvanın doğrusal uzunluğunu santimetre olarak ölçüp kaydet'i tıklatın.
Tünel içindeki zebra balığı etkinliğini izlemek için uygun video analizi ve modelleme yazılım programını açın. Dosya, İçe ve videoya tıklayın ve videolardan birini açın ve uzunluk birimlerini santimetreye ve zaman birimlerini saniyeye ayarlamak için koordinat sistemini tıklatın. Koordinat eksenlerini tıklatın ve tünel boyunca x ekseni ile zaman içinde balığın konumunu izlemek için referans sistemini ayarlayın, su çıkışında duvarın alt köşesinde kökeni ayarı.
Bir seferde bir balığı izlemeye başlamak için ölçeği ayarlamak ve yeni kütle noktasını izlemek için kalibrasyonda yeni yi izleyin'i tıklatın. Videoyu yarım saniye, beş kare aralıklarla el ile ilerletin ve her yukarı akım dönüşünde ve her yukarı akış yukarı dönüşte hayvanın zamanını ve konumunu işaretleyin. Her izleme oturumunun sonunda tablodan X ve saat değerlerini seçin.
Verilere sağ tıklayın ve verileri tam hassasiyetle kopyala'yı tıklatın. Ardından, şablon elektronik tablo dosyasındaki tüm tornalama konumlarının zaman değerlerini ve x değerlerini kaydedin. Toplam yukarı ve aşağı akış süresini ve reotaktik dizinin değerlerini ve her tam adım için yüzdeleri hesaplamak için.
Bu temsili deneyde, tünelde bir saatlik alışma süresinden sonra, tünelde yüzerken bir eritilmiş bir gösteri kaydedildi ve yedi adımboyunca akış hızında adım adım artış kaydedildi. Bu çalışmalar sırasında manyetik alan tek bir boyutta kontrol edildi. İzlenen süre boyunca, her balığın her akış hızındaki terimleri vurgulandı ve her balığın reotaktik indeksini her tam hızda hesaplamak için referans noktası olarak kullanıldı.
Reotaktik indeks %50'nin üzerinde olduğunda ve hayvanın upstream yüzme prevalansına karşılık gelen pozitif bir reotaktik yanıtı olduğunu gösterdiğinde, %50'den önemli ölçüde farklı olmayan bir reotaktik indeks reotaktik yanıtın olmadığını gösterir. Bu deneydeki beş balığın ortalama reotaktik indeks yüzde değerlerinin ark işareti dönüşümü, su hızı arttığında reotaktik indeks değerinde sigmoidal bir artış olduğunu göstererek, basit bir matematiksel yöntemle zebrabalığı reotaksilerinin sayısallaştırılmasına olanak sağladı. Bu eğrilerden, farklı yönlerden manyetik alanlar altında, proaktif balıkların reotaktik duyarlılığının etkilenmediği ve iki deney grubundaki yanıtın aynı eğri ile temsil edildiği görülmektedir.
Öte yandan, reaktif balıklar manyetik alana göre reotaktik yönünü değiştirir ler ve yanıt önemli ölçüde farklı eğrilerle temsil edilir. Bunun bir davranışsal deney olduğunu ve balık davranışının stresten etkilenebileceğini unutmayın. Balıkları elleme ve aktarma zor olabilir.
Deneylerden önce kendini eğit. Bu reotactic manyetik teknik bize daha fazla zebra balığı ve diğer su omurgalı ve omurgasızlarda mıknatısduyarlılık üzerinde kişilik etkilerini keşfetmek için izin verdi.
