La collecte de tissus pour les tests de dépistage de la rage présente des dangers évidents et apparents. Le technicien doit utiliser les méthodes les plus sûres disponibles et porter l’équipement de protection individuelle approprié. Ces protocoles fournissent des techniques d’autopsie sécuritaires sans utiliser d’outils électriques ou de scies, minimisant la production d’aérosols.
Le protocole grand animal peut également être exécuté sur le terrain. L’utilisation de la méthode de récupération des échantillons de gros animaux sur le terrain élimine le défi de transporter une tête animale pesant plus de 45 kilogrammes au laboratoire. La méthode des gros animaux est similaire au protocole européen de récupération de l’échantillon d’encéphalopathie spongiforme transmissible et peut être utilisée pour toute enquête utilisant le tronc cérébral et le cervelet.
Pour récupérer le cervelet et le tronc cérébral par la méthode ventrale, placez le côté ventral de l’échantillon vers le haut avec le nez dirigé distally vers l’arrière de l’armoire de biosécurité. Tenant un maillet orthopédique dans la main dominante et un ciseau de conseiller dans l’autre main, placez le ciseau à un angle de 45 degrés avec le point d’angle au ciseau dans l’ouverture en forme de V entre le côté droit des os temporels et occipital. Frapper le dessus du ciseau avec le maillet jusqu’à ce que les deux os se séparent.
Et faire une coupe à côté de l’os basisphenoid. Séparez les os temporels et occipital sur le côté gauche du spécimen comme juste démontré. Et utilisez le ciseau pour plier la région V du crâne vers le bas pour exposer toute la zone rhombencéphale du cerveau.
Ensuite, utilisez des ciseaux et des forceps pour enlever le tronc cérébral et le cervelet, en enlevant les morceaux de tissu restants du crâne au besoin. Si l’échantillon ne permet pas la position de récupération ventrale de l’échantillon dorsally, avec le nez dirigé distally vers l’arrière de l’armoire de biosécurité. Et utiliser une tenacula tumorale pour saisir le muscle temporal gauche avec les dents de la tenacula.
Pressez la poignée pour verrouiller les dents autour du tissu et utilisez un couteau à découper pointu pour couper le muscle temporal jusqu’à l’os. Faites pivoter le spécimen à 180 degrés avec la tenacula et le couteau et répétez l’incision sur le muscle temporal opposé pour exposer le crâne. Remettre la tête à son orientation d’origine et placer le ciseau à un angle de 45 degrés avec le point d’angle au ciseau au centre du crâne à la jonction des os pariétals et intrapariétals.
Et frapper le haut du ciseau avec le maillet jusqu’à ce qu’une ouverture horizontale est faite sur la moitié supérieure du crâne à l’os pariétal. Faites pivoter le spécimen à 180 degrés et faites une ouverture de l’autre côté du crâne comme nous venons de le démontrer. Placez la tête au besoin pour insérer le point du ciseau dans l’extrémité de la première coupe à un angle de 90 degrés à l’ouverture horizontale et frapper le ciseau jusqu’à ce que l’ouverture atteigne l’os occipital.
Rouler le spécimen pour faire une ouverture sur l’os occipital opposé de la même manière. Les ouvertures dans le crâne devraient ressembler à un U.Insert à l’envers les dents de la tenacula dans le crâne au fond de la vous et tirer l’os vers l’arrière pour exposer l’extrémité caudale du cerveau et le cervelet. Ensuite, utilisez des ciseaux comme une pelle pour indiscrets sur l’ensemble du cervelet de l’intérieur de la cavité.
Et utiliser des forceps tissulaires pour taquiner le tronc cérébral des contre-hommes. Pour la récupération du cervelet et du tronc cérébral des grands animaux, placez le spécimen de façon à ce que la partie dorsale du crâne soit en contact avec la surface de l’autopsie. Avec la partie caudale du crâne et le magnum foramen face à l’avant de l’armoire de biosécurité.
Saisissez le tronc cérébral avec des forceps. Insérez autant que possible un couteau à talons aiguilles modifié dans le magnum foramen entre la moelle épinière et les méninges rachidiens et parcourez autour de la moelle épinière pour séparer le cervelet et le tronc cérébral des méninges rachidiens. Puis, tirez la tige hors des contre-hommes avec des forceps.
Lorsque le couteau a été inséré à travers le magnum foramen, inclinez doucement la lame pour suivre le long du crâne autant que possible et insérez une spatule ou un couteau en métal avec une poignée assez longue pour atteindre sous le cerveau dans l’espace entre le tissu neuronal et les méninges spinales. Sondez autour du cervelet pour s’assurer que les connexions aux méninges spinales ont été rompues. Lorsque les méninges ont été complètement sectionnées avancer la spatule rostrally et dorsalement pour ramasser le cervelet.
Puis ramasser le cervelet avec la spatule. Tous les échantillons terrestres soumis avec des crânes entre le 31 janvier 2019 et le 28 février 2019 avaient des informations concernant la présence d’un cou et la méthode d’autopsie collectée. Pendant ce temps, 170 têtes ont été nécrosées avec 18 espèces représentées.
52 % ont été correctement décapités. Le reste avait au moins une vertèbre attachée, y compris trois spécimens de corps entier. La méthode ventrale a été utilisée 75% du temps.
De ce nombre, des cous étaient présents sur 49. Trois grands animaux ont été soumis et, dans deux cas, le protocole sur les gros animaux a été utilisé. Un écureuil a été soumis avec un crâne écrasé et tout simplement couper la peau a exposé le tissu cérébral de sorte qu’aucune des méthodes démontrées ont été utilisés.
Les tissus utilisés pour fabriquer des diapositives de microscopie et ou extraits de méthodes moléculaires lors du traitement de plusieurs animaux évitent la contamination croisée en utilisant de nouveaux instruments de gants et une zone de travail propre. Soyez prudent lors de l’exécution de ces protocoles car les spécimens peuvent être infectés par le virus de la rage ou d’autres maladies zoonotiques. Notez que des objets pointus peuvent également être présents dans les spécimens.
