Cette vidéo montrera la technique de dissection et les repères anatomiques pertinents pour le ganglion pelvien principal et les nerfs autonomes associés dans le rat mâle et femelle. La première dissection est montrée pour le côté gauche d’un rat mâle immédiatement post mortem. Accédez à l’abdomen et au bassin par une incision ventrale de midline.
Déplacez doucement les organes abdominaux d’un côté à l’aide de forceps ou d’applicateurs à pointe de coton. Notez l’emplacement des lobes ventraux de la prostate et de la vessie urinaire. Déplacez la vésicule séminale vers le côté contralatéral.
Coupez les déférents de vas pour fournir un meilleur accès à la zone qui survole le ganglion. À partir de ce point de la dissection, le tissu ne doit pas sécher afin de garder le tissu humide avec salin physiologique. Pour visualiser le ganglion, dégagez soigneusement les tissus près et en survolant le ganglion.
Si nécessaire, utilisez un rétracteur pour garder le champ de dissection dégagé. Enlever un agrégat voisin de tissu adipeux et ouvrir le fascia latéral du bassin. Identifiez le nerf pelvien en visualisant la veine iliaque interne et c’est la branche fine projetant vers le ganglion pelvien principal et la vessie.
Cette branche est parallèle et parfois encastrée dans le nerf pelvien, puis traverse le ganglion. Placez délicatement de fines forceps inclinés sous le nerf pelvien et faites glisser les forceps le long pour le libérer des tissus environnants. Il peut également être possible d’isoler le nerf pelvien du petit vaisseau parallèle à lui.
Identifiez le nerf caverneux en suivant le nerf pelvien jusqu’à sa jonction avec le ganglion, puis suivez le nerf caverneux pendant qu’il traverse la prostate, puis caudally vers les corps caverneux du pénis. Identifiez où le nerf hypogastrique rejoint le ganglion à ce bord crânien après avoir voyagé le long de l’uretreteur. Identifiez le ganglion pelvien majeur et confirmez l’emplacement de chaque nerf principal.
Identifier les nerfs accessoires au bord ventral du ganglion se projetant vers les voies urinaires et reproductrices. Pour enlever le ganglion pelvien majeur avec ses nerfs associés, glissez doucement des forceps entre le ganglion et la prostate fondamentale en prenant soin de ne pas percer la mince capsule de la prostate. Effacer toute connexion finale avec les tissus environnants, puis couper chaque nerf.
Déplacez le ganglion avec ses nerfs à la solution appropriée pour votre expérience et de confirmer que chacun des nerfs principaux sont intacts. La deuxième dissection est montrée pour le côté gauche d’un rat femelle immédiatement post mortem. Déplacez doucement les organes abdominaux d’un côté en notant l’emplacement de la corne utérine, de la vessie urinaire et du rectum.
Couper les vaisseaux ovariens et utérin et rétracter la corne utérine. Entrez dans l’espace péritonéal et dégagez doucement un agrégat de tissu adipeux situé près du col utérin. Identifier la paroi latérale du col utérin juste caudale à sa jonction avec les cornes utérine.
Cette région est le principal point de repère pour définir l’emplacement majeur du ganglion pelvien sur l’axe rostrocaudal de l’animal. Retirez soigneusement tout tissu qui empêche une vue complète des structures neuronales tout en évitant les dommages aux principaux vaisseaux. Identifier le nerf pelvien en trouvant la veine iliaque interne et sa branche fine se projetant vers le ganglion pelvien majeur et la vessie.
Cette branche est parallèle et parfois encastrée dans le nerf pelvien puis transverse le ganglion. Identifiez le nerf hypogastrique où il rejoint le ganglion à son bord crânien après avoir voyagé le long de l’uretretrique. Identifiez le nerf caverneux en suivant le nerf pelvien jusqu’à sa jonction avec le ganglion, puis suivez le nerf caverneux alors qu’il se déplace caudally le long de la paroi latérale du col de l’utérus vers le vagin.
Les nerfs accessoires sont difficiles à voir, mais projettaient de l’aspect médial du ganglion pelvien majeur. Enfin, identifiez le ganglion pelvien majeur et confirmez l’emplacement de chaque nerf majeur. Pour enlever le ganglion pelvien majeur avec ses nerfs associés, glissez doucement des forceps entre le ganglion et le col de l’utérus sous-jacent et perturbez toutes les connexions entre le ganglion et le col de l’utérus.
Effacer toutes les connexions finales avec les tissus environnants pour les longueurs de nerfs nécessaires pour l’expérience, puis couper chaque nerf. Déplacez le ganglion avec ses nerfs à la solution appropriée pour votre expérience et de confirmer que chacun des nerfs principaux sont intacts. Un exemple de la structure pelvienne majeure de ganglion est illustré ici montrant plusieurs dispositifs des ganglions formaldéhyde-fixés utilisant l’immunohistochimie conventionnelle.
Cette image montre l’ensemble du ganglion pelvien majeur avec ses nerfs associés visualisés comme une monture entière pleine épaisseur. Cette image montre une cryosection immunolabeled pour démontrer les neurones noradrenergic par leur expression de l’hydroxylase de tyrosine. Cette image montre des neurones cholinergiques visualisés par leur expression de synthase neuronale d’oxyde nitrique.
En conclusion, ce protocole et les schémas connexes fournissent aux chercheurs intéressés par la fonction viscérale pelvienne les outils pour identifier et disséquer le ganglion pelvien majeur chez les rats mâles et femelles. Ces compétences peuvent être appliquées à de nombreux types de manipulation expérimentale in vitro et in vivo.
