Это видео покажет технику вскрытия и соответствующие анатомические ориентиры для основных тазовых ганглий и связанных с ними вегетативных нервов у мужской и женской крысы. Первое вскрытие показано для левой стороны мужской крысы немедленно посмертно. Доступ к брюшной полости и таза через брюшной разрез средней линии.
Аккуратно переместите органы брюшной полости в одну сторону с помощью типсов или хлопчатобумажных аппликаторов. Обратите внимание на расположение желудочных долей предстательной железы и мочевого пузыря. Перемести семенную везикулу на контралатерацию.
Отрежьте vas deferens для того чтобы обеспечить более лучший доступ к зоне overlying ganglion. С этого момента вскрытия, ткань не должна высыхать, поэтому держать ткань влажной с физиологическим солевым раствором. Чтобы визуализировать ганглия, тщательно очистить ткани вблизи и чрезмерно ganglion.
При необходимости используйте ретрактор, чтобы очистить поле вскрытия. Удалите близлежащий агрегат жировой ткани и откройте боковой фасции таза. Определить тазового нерва путем визуализации внутренней подвихов вены, и это тонкая ветвь проецирования к основным тазовых ганглий и мочевого пузыря.
Эта ветвь проходит параллельно, а иногда и встроенные в тазового нерва, то пересекает ганглий. Аккуратно поместите тонко наконечником угловые миппы под тазовый нерв и сдвиньте типсы вместе, чтобы освободить его от окружающих тканей. Также возможно изолировать тазовый нерв от небольшого сосуда, испехаемого параллельно ему.
Определите кавернозный нерв, следуя тазового нерва к его стыку с ганглия затем следовать кавернозных нерва, как он путешествует по предстательной железе, а затем caudally к кавернозных тел пениса. Определите, где гипогастрический нерв присоединяется к ганглия на этом черепном краю после путешествия рядом с мочеточником. Определите основные тазовых ганглий и подтвердить расположение каждого крупного нерва.
Определите вспомогательные нервы на брюшной кромке ганглия, проецирующаяся на мочевыводящих и репродуктивных путей. Для удаления основных тазовых ганглиев с связанными с ним нервами, осторожно слайд миппы между ганглия и основной предстательной железы быть осторожным, чтобы не прокол тонкой капсулы простаты. Очистить любые окончательные связи с окружающими тканями затем сократить каждый нерв.
Переместите ганглия своими нервами к соответствующему решению для вашего эксперимента и подтвердите, что каждый из основных нервов цел. Второе вскрытие показано для левой стороны самки крысы немедленно посмертно. Аккуратно переместите органы брюшной полости в одну сторону, уявив расположение рога матки, мочевого пузыря и прямой кишки.
Вырезать яичников и матки сосудов и втягивать рога матки. Введите брюшное пространство и аккуратно очистить совокупность жировой ткани, расположенной вблизи шейки матки. Определите боковой стенки шейки матки просто caudal к его стыку с рогами матки.
Этот регион является основной вехой для определения основных тазовых ганглиев расположение на розтрокоудальной оси животного. Тщательно удалите любую ткань, которая препятствует полному зрения нервных структур, избегая при этом повреждения крупных сосудов. Определите тазовый нерв, найдя внутреннюю подвиховую вену и ее тонкую ветвь, проецируемую на основной тазовый ганглий и мочевой пузырь.
Эта ветвь проходит параллельно, а иногда и встроенные в тазового нерва, то поперечные ганглий. Определите гипогастрический нерв, где он присоединяется к ганглия на его черепной кромке после путешествия рядом с мочеточником. Определите кавернозный нерв, следуя тазового нерва к его стыку с ганглия затем следовать кавернозных нерва, как он путешествует caudally вдоль боковой стенки шейки матки к вагине.
Аксессуар нервы трудно увидеть, но проект из медиальной аспект основных тазовых ганглий. Наконец, определить основные тазовых ганглий и подтвердить расположение каждого крупного нерва. Чтобы удалить основные тазовые ганглии с связанными нервами, осторожно слайд миппы между ганглием и основной шейки матки и нарушить любые связи между ганглием и шейки матки.
Очистить любые окончательные связи с окружающими тканями для длины нервов, необходимых для эксперимента затем сократить каждый нерв. Переместите ганглия своими нервами к соответствующему решению для вашего эксперимента и подтвердите, что каждый из основных нервов цел. Пример основных тазовых ганглий структуры иллюстрируется здесь показаны несколько особенностей формальдегида фиксированной ганглиев с использованием обычной иммуногистохимии.
На этом снимке показан весь крупный тазовый ганглий с связанными с ним нервами, визуализированные как полная толщина целого крепления. На этом снимке показана криозная иммунолабеля, чтобы продемонстрировать норадренергические нейроны своим выражением гидроксилазы тирозина. На этом снимке показаны холинергические нейроны, визуализированные их экспрессией нейрональной синтазы оксида азота.
В заключение, этот протокол и связанные с ним схемы предоставляют исследователям, заинтересованным в тазовой висцеральной функции с инструментами для выявления и вскрытия основных тазовых ганглиев у мужчин и женщин крыс. Эти навыки могут быть применены ко многим типам in vitro и in vivo экспериментальных манипуляций.
