Bu video diseksiyon tekniği ve büyük pelvik ganglion ve erkek ve kadın sıçan ilişkili otonom sinirler için ilgili anatomik işaretleri gösterecektir. İlk diseksiyon hemen postmortem bir erkek sıçan sol tarafı için gösterilir. Ventral orta hat kesisi ile karın ve pelvis erişin.
Karın organlarını forceps veya pamuk uçlu aplikatörler kullanarak yavaşça bir tarafa taşıyın. Prostat bezi ve idrar kesesi ventral lobların yerini unutmayın. Seminal vezikülün karşı tarafına doğru hareket ettirin.
Ganglion örten alana daha iyi erişim sağlamak için vas deferens kesin. Diseksiyonun bu noktasından itibaren doku kurumamalı, bu yüzden fizyolojik tuzlu ile dokuyu nemli tutun. Ganglion görselleştirmek için, dikkatle yakın ve ganglion örten dokuları temizleyin.
Gerekirse, diseksiyon alanını açık tutmak için bir retraktör kullanın. Yağ dokusunun yakındaki bir toplam çıkarın ve pelvis lateral fasya açın. Dahili iliak ven görselleştirerek pelvik sinir tanımlayın ve büyük pelvik ganglion ve mesane doğru projekting ince dal.
Bu dal paralel çalışır ve bazen pelvik sinir içinde gömülü sonra ganglion geçer. Hafifçe pelvik sinir altında ince uçlu açılı forceps yerleştirin ve çevreleyen doku onu kurtarmak için birlikte forceps slayt. Pelvik siniri ona paralel çalışan küçük damardan izole etmek de mümkün olabilir.
Ganglion ile kavşak için pelvik sinir izleyerek kavernöz sinir tanımlayın sonra prostat boyunca seyahat ve daha sonra caudally penisin kavernöz organları doğru kavernöz sinir izleyin. Hipogastrik sinir üreter yanında seyahat ettikten sonra bu kranial kenarında ganglion birleştirir nerede belirleyin. Büyük pelvik ganglion belirlemek ve her büyük sinir yerini doğrulamak.
Ganglion ventral kenarında idrar ve üreme yolları doğru yansıtılan aksesuar sinirleri tanımlayın. Ilişkili sinirler ile büyük pelvik ganglion kaldırmak için, yavaşça ganglion ve altta yatan prostat bezi arasında forseps slayt prostat ince kapsül delinmeye dikkat ediliyor. Çevreleyen dokular ile herhangi bir son bağlantıları temizleyin sonra her sinir kesti.
Deneyiniz için uygun çözüm için sinirleri ile ganglion taşıyın ve ana sinirlerin her bozulmamış olduğunu onaylayın. İkinci diseksiyon hemen öldükten sonra bir dişi sıçan ın sol tarafı için gösterilir. Hafifçe rahim boynuzu, idrar kesesi ve rektum yerini belirterek bir tarafa karın organları hareket ettirin.
Yumurtalık ve rahim damarları kesin ve rahim boynuzu geri. Periton boşluğuna girin ve rahim ağzı yakınında bulunan yağ dokusunun toplamını hafifçe temizleyin. Rahim örbüxünün lateral duvarını sadece rahim boynuzları ile kavşak için kaudal tanımlayın.
Bu bölge, hayvanın rostrokaudal eksenindeki büyük pelvik ganglion yerini tanımlamak için temel bir dönüm noktasıdır. Büyük damarlara zarar vermemek için nöral yapıların tam görünümünü engelleyen tüm dokuları dikkatlice çıkarın. Internal iliac ven ve büyük pelvik ganglion ve mesane doğru yansıtılan ince dalı bularak pelvik sinir tanımlayın.
Bu dal paralel çalışır ve bazen pelvik sinir içinde gömülü sonra ganglion enine. Üreterin yanında seyahat ettikten sonra hipogastrik siniri kafatası kenarında ganglion'a katıldığı yeri belirleyin. Ganglion ile kavşak için pelvik sinir izleyerek kavernöz sinir belirleyin sonra vajinaya doğru serviks lateral duvar boyunca caudally seyahat gibi kavernöz sinir izleyin.
Aksesuar sinirler görmek zor ama büyük pelvik ganglion medial açıdan proje. Son olarak, büyük pelvik ganglion belirlemek ve her büyük sinir yerini onaylamak. Ilişkili sinirler ile büyük pelvik ganglion kaldırmak için, yavaşça ganglion ve altta yatan serviks arasında forseps slayt ve ganglion ve serviks arasındaki bağlantıları bozabilir.
Deney için gerekli sinirlerin uzunlukları için çevreleyen dokular ile herhangi bir son bağlantıları temizleyin sonra her sinir kesti. Deneyiniz için uygun çözüm için sinirleri ile ganglion taşıyın ve ana sinirlerin her bozulmamış olduğunu onaylayın. Majör pelvik ganglion yapısına bir örnek burada geleneksel immünohistokimya kullanarak formaldehit-sabit gangglia çeşitli özellikleri gösteren gösterilmiştir.
Bu görüntü tam kalınlıkta bütün montaj olarak görselleştirilmiş ilişkili sinirler ile tüm büyük pelvik ganglion gösterir. Bu görüntü tirozin hidroksilaz onların ekspresyonu ile noradrenerjik nöronlar göstermek için etiketli bir kriyokesit immünoksiyon gösterir. Bu görüntü nöronal nitrik oksit synthase kendi ifadesi ile görselleştirilmiş kolinerjik nöronlar gösterir.
Sonuç olarak, bu protokol ve ilgili şemalar erkek ve dişi sıçanlarda majör pelvik ganglion belirlemek ve incelemek için araçlar ile pelvik visseral fonksiyon ilgilenen araştırmacılar sağlar. Bu beceriler in vitro ve in vivo deneysel manipülasyon birçok türde uygulanabilir.
