Cette méthode permet l’isolement fonctionnel des unités motrices individuelles dans la manipulation des masses d’animaux expérimentaux. Le principal avantage de cette technique est l’enregistrement des potentiels de force et d’action des unités motrices individuelles de type physiologique identifié. Le professeur Jan Celichowski, chef du département de neurobiologie, aidera à démontrer la procédure.
Commencez par couper la peau le long de la colonne vertébrale, du sacrum jusqu’aux vertèbres thoraciques, avec des ciseaux émoussés. Identifiez la vertèbre S1 comme le segment le plus bas. Ensuite, coupez et enlevez les muscles longissimus, et les processus épineux des vertèbres L6 à L2.
Utilisez des rongeurs fins pour enlever les processus transversaux de L6 à L2, et effectuer une laminectomie sur les segments L6 à L2 pour exposer les segments lombaires de la moelle épinière couverts par le dura mater. À l’aide de ciseaux pointus, couper la moelle épinière et les racines dorsales et ventrales au segment des vertèbres L2, niveau à la limite supérieure de la laminectomie. Placez de petits morceaux de mousse de gel sec pour arrêter le saignement.
Ensuite, utilisez des ciseaux émoussés pour faire un câlin longitudinal sur le côté postérieur du membre postérieur du membre arrière gauche, du tendon d’Achille à la hanche. Localiser le fossa popliteal à l’arrière de l’articulation du genou, qui est couvert par le muscle femoris biceps, et faire une tasse entre la partie antérieure et postérieure de ce muscle. Se déplaçant vers le haut, couper les deux têtes du biceps femoris tout le chemin à la hanche pour exposer le nerf sciatique.
À l’aide de forceps et de ciseaux contondants, séparez le latéral de la tête médiale du muscle gastrocnemius et coupez l’insertion distale du muscle gastrocnemius médial. Identifiez le gastrocnemius médial ou le nerf de MG, puis utilisez des forceps et des ciseaux pour couper toutes les garanties restantes du nerf sciatique comprenant des garanties aux biceps postérieurs et au semitendinosus. Élevé une ligature non élastique à travers le tendon d’Achille et faire trois noeuds.
Ensuite, faire une incision de deux centimètres dans la peau et le tissu conjonctif sous-jacent le long du côté antérieur du membre arrière gauche pour une mobilisation avec un clan du milieu. Fixer le membre arrière gauche en mettant une pince en acier sur le tibia. Placez le rat dans un cadre réglable sur mesure.
Tirez les volets de la peau autour de la laminectomie avec quatre ligatures. Et les suture au cadre afin de former une piscine pour l’huile de paraffine sur la moelle épinière exposée. Utilisez un Dumont 55 forceps pour soulever le dura mater à l’intersection de la moelle épinière.
Ensuite, coupez-le caudally jusqu’à l’os sacré et rétractez-le. Séparez les racines dorsales et ventrales gauches et droites à des niveaux successifs à l’avec une tige de verre émoussée. Remplissez la piscine sur la moelle épinière d’huile chaude de paraffine, couvrant les racines ventrales et dorsales exposées.
Placez le rat sur une plaque d’aluminium sur mesure avec une piscine pour ses membres postérieurs, relié au système de chauffage en boucle fermée. Fixez la pince sur le membre arrière gauche avec la barre métallique pour l’immobiliser. Fixez la colonne vertébrale en mettant des pinces d’acier à l’os sacré et à la vertèbre L1.
Puis connecter le muscle gastrocnemius médial gauche avec la ligature non élastique au transducteur de force via le tendon d’Achille. Insérez un fil d’argent bipolaire ou une électrode à travers la partie centrale du muscle, perpendiculaire à son long axe, et remplissez la chambre pour les membres postérieurs avec de l’huile de paraffine chaude pour couvrir le muscle gastrocnemius médial. Étirer le muscle opéré à une tension passive de 100 millinewton, contrôlée par le transducteur de force.
Ensuite, utilisez des ciseaux émoussés pour faire une incision de deux centimètres dans la peau du membre arrière droit, et insérez une électrode de fil d’argent pour être utilisé comme électrode de référence. Placez et fixez une plaque de métal isolée sur mesure au-dessus des racines vertébrales exposées. Mettre les paires gauches de racines ventrales et dorsales sur l’assiette.
Et ajouter de la solution saline à la piscine formée par la peau autour de la laminectomie. Placez un fil d’argent stimulant l’électrode sur les racines vertébrales exposées, puis placez un pôle positif de trois millimètres au-dessus de la plaque dans l’huile, et le pôle négatif dans la solution saline. Stimulez les racines ventrales avec des impulsions rectangulaires électriques, évoquant la contraction des muscles.
Utilisez une paire de forceps Dumont 55 et des loupes pour diviser les racines ventrales L5 ou L4 en faisceaux très fins d’axones. Placez un de ces faisceaux sur une électrode de fil argenté et stimulez-le pour observer l’activité d’une seule unité motrice. En augmentant progressivement l’intensité du stimulus, identifiez une seule unité motrice sur la base du caractère évoqué de la contraction de secousse et du stimulus potentiel d’action.
Les paramètres des contractions des unités motrices et des potentiels d’action peuvent être calculés à l’aide d’enregistrements lorsque des conditions stables d’enregistrement sont assurées. Un enregistrement représentatif de la secousse unique d’une unité motrice rapide est montré ici. Les plateaux supérieurs montrent le potentiel d’action de l’unité motrice.
Le délai entre la livraison de stimulus et l’apparition du potentiel d’action de l’unité motrice est dû au temps de conduction de la racine ventrale au muscle. Un enregistrement représentatif de la force non fusionnée de tétanos d’une unité motrice rapide et d’un train de potentiels d’action d’unité de moteur sont montrés ici avec les positions de temps des stimulus appliqués. Avant d’essayer cette procédure, gardez à l’esprit que la division de la racine ventrale en filaments minces nécessite une certaine formation et l’expérience.
