La restriction du moment de la prise alimentaire est apparue comme une intervention prometteuse pour atténuer les maladies métaboliques induites par l’alimentation. Ce protocole détaille la construction et l’utilisation d’un système efficace, construit en interne, pour mesurer et manipuler l’apport alimentaire rythmique chez la souris. Le principal avantage du système est qu’il s’agit d’un système peu coûteux et efficace qui peut être construit en utilisant des matériaux abordables, tout en étant convivial.
Ce système peut être utilisé pour nourrir les souris selon différents régimes alimentaires, tels que ad libitum, limité dans le temps ou arythmique, et peut incorporer un régime riche en graisses pour étudier leurs effets sur la physiologie. Pour commencer, procurez-vous quatre morceaux de feuilles de PVC de 0,25 pouce. Coupez et collez les quatre morceaux de PVC pour obtenir la base.
Ensuite, ouvrez la minuterie pour retirer la fiche et établissez une connexion à l’aide d’une rallonge standard ou d’un cordon électrique. Placez la minuterie sur la base en PVC pour l’aligner avec les trous percés et fixez-la à l’aide de vis de 1,5 pouce. Percez quatre trous sur le dessus de la minuterie et fixez des vis de 0,75 pouce pour maintenir le récipient alimentaire à huit compartiments.
Utilisez une cage à souris d’une largeur supérieure à 4,5 pouces et coupez un trou de 4,5 pouces au fond de la cage à l’aide d’une scie à trou. Ensuite, fabriquez un distributeur de nourriture à l’aide d’un organisateur de bijoux de quatre pouces et huit compartiments. Coupez le bord du récipient de manière à ce qu’il s’insère bien dans le tuyau.
Utilisez un bouchon de tuyau en PVC de quatre pouces et percez un trou correspondant à la taille d’un seul compartiment de distributeur pour créer une ouverture qui n’expose qu’un seul des huit compartiments à la fois. Une fois que toutes les cages sont installées, la configuration finale est prête. Pour faciliter le transport, prenez trois morceaux de tuyau en PVC de 0,25 pouce, percez un trou de 0,625 pouce au centre de deux morceaux et collez-les ensemble.
Ensuite, passez un tuyau en PVC de 0,625 pouce à travers eux. Des gobelets alimentaires peuvent ensuite être empilés sur cet assemblage. Évaluez les minuteries avant d’introduire les souris en branchant l’installation sur les prises de courant.
Placez un morceau de nestlet dans un compartiment à une heure enregistrée et surveillez la position du nestlet six heures plus tard pour vous assurer que la minuterie tourne rapidement. Transférez la souris dans la salle expérimentale et acclimatez-la à l’ensemble de cycles lumière-obscurité, comme décrit dans le manuscrit. Notez le poids de la souris avant de la loger individuellement dans les cages d’alimentation et assurez-vous que la souris a un accès ad libitum à l’eau, à la litière et aux nideaux.
Ajoutez 1,5 gramme de nourriture dans les huit compartiments de la gobelette d’alimentation et placez la tasse d’alimentation sur la minuterie. Ensuite, placez le couvercle sur la gobelette d’alimentation, de sorte qu’un seul compartiment soit exposé. Quatre compartiments représentent des points diurnes et les quatre autres représentent des points nocturnes.
Changez la nourriture tous les jours à la même heure et comptez le nombre de granulés restants dans chaque compartiment pour calculer la quantité de nourriture consommée. Surveillez le profil d’alimentation pendant une semaine pour obtenir un profil d’alimentation de base des souris nourries ad libitum et pour le régime restreint de nuit. Après trois à sept jours de régime ad libitum, mettez la souris sur un régime de transition en réduisant progressivement le nombre de granulés dans les compartiments de jour.
Surveillez l’apport alimentaire pendant deux semaines après que la souris s’est adaptée au régime restreint de nuit. Pendant cette période, ajustez la quantité de nourriture donnée à chaque souris pour mieux convenir à sa consommation alimentaire totale. Pesez la souris à la fin des deux semaines pour surveiller tout changement de poids dû au régime alimentaire.
Après une semaine de régime ad libitum, calculez la consommation alimentaire quotidienne moyenne et la quantité de nourriture à fournir dans chaque compartiment, comme décrit dans le manuscrit. Obtenez une alimentation arythmique en veillant à ce que les souris reçoivent une quantité égale de nourriture dans les huit compartiments tout au long de la journée. Ensuite, mettez les souris sur un régime de transition en réduisant progressivement la quantité de nourriture donnée par compartiment, sur trois à cinq jours, pour abolir tout rythme de prise alimentaire.
Pendant le régime arythmique, ajustez la nourriture quotidiennement pour vous assurer que les souris ne laissent que quelques granulés et obtiennent la bonne quantité de nourriture. Faites les ajustements décrits dans le manuscrit. Pour surveiller tout changement de poids dû au régime alimentaire, pesez la souris à la fin des deux semaines.
Le profil d’alimentation indique que les souris de type sauvage nourries avec du chow ad libitum normal mangent environ 75% de leur nourriture pendant la nuit. Les souris nourries ad libitum avec un régime riche en graisses ont mangé plus de nourriture au cours des deux premiers jours d’exposition, probablement en raison de la nouveauté du régime riche en graisses. L’apport alimentaire quotidien moyen toutes les trois heures.
La moyenne et le pourcentage d’apport alimentaire pendant la journée et la nuit pour les souris nourries avec un régime normal en chow ou riche en graisses étaient comparables. Les souris mâles ont montré un gain de poids significatif après une semaine de régime ad libitum normal et riche en graisses. Les souris qui sont passées à un régime restreint la nuit ont mangé leurs calories quotidiennes totales uniquement la nuit, sans diminuer de manière significative l’apport calorique pendant les trois à cinq premières semaines.
Les souris qui sont passées à un régime arythmique ont consommé leurs calories quotidiennes totales en quantités égales tout au long de la journée, ce qui a considérablement freiné leur rythme alimentaire quotidien. Les souris ont montré un gain de poids après le régime alimentaire restreint et arythmique de nuit. La chose la plus importante à retenir lors de l’utilisation de ce système d’alimentation est de s’assurer que les minuteries fonctionnent correctement tout au long de l’expérience.
En utilisant ce système d’alimentation, les chercheurs peuvent personnaliser la livraison des aliments en fonction de leurs besoins, ce qui pourrait éventuellement les aider à répondre aux questions sur les effets des horaires variés des repas sur la santé et la maladie.
