음식 섭취 시기를 제한하는 것은 식이요법으로 인한 대사 질환을 약화시키기 위한 유망한 개입으로 부상했습니다. 이 프로토콜은 생쥐의 리드미컬한 음식 섭취량을 측정하고 조작하기 위해 사내에 구축된 효율적인 시스템의 구축 및 사용에 대해 자세히 설명합니다. 이 시스템의 가장 큰 장점은 저렴한 재료를 사용하여 구축할 수 있는 동시에 사용자 친화적이라는 것입니다.
이 시스템은 임의, 시간 제한 또는 부정맥 일정과 같은 다양한 섭식 요법에 따라 마우스를 먹이는 데 사용할 수 있으며 생리학에 미치는 영향을 연구하기 위해 고지방 식단을 통합할 수 있습니다. 시작하려면 0.25인치 PVC 시트 4장을 조달하십시오. 4 개의 PVC 조각을 자르고 접착하여 받침대를 얻습니다.
그런 다음 타이머를 열어 플러그를 뽑고 표준 연장 또는 전기 코드를 사용하여 연결하십시오. 타이머를 PVC 베이스에 놓고 구멍을 뚫고 1.5인치 나사를 사용하여 고정합니다. 타이머 상단에 4개의 구멍을 뚫고 0.75인치 나사를 고정하여 8칸 식품 용기를 고정합니다.
너비가 4.5인치보다 큰 마우스 케이지를 사용하고 구멍 톱을 사용하여 케이지 바닥에 4.5인치 구멍을 자릅니다. 그런 다음 4인치, 8칸 보석 정리함을 사용하여 음식 디스펜서를 만드십시오. 파이프에 잘 맞도록 용기의 가장자리를 자릅니다.
4인치 PVC 파이프 캡을 사용하고 단일 디스펜서 구획의 크기에 해당하는 구멍을 잘라 한 번에 8개의 구획 중 하나만 노출시키는 개구부를 만듭니다. 모든 케이지가 설정되면 최종 설정이 준비됩니다. 더 쉽게 운반 할 수 있도록 0.25 인치 PVC 파이프 3 개를 가져 와서 두 조각의 중앙에 0.625 인치 구멍을 뚫고 함께 붙입니다.
그런 다음 0.625인치 PVC 파이프를 통과시킵니다. 그런 다음 이 어셈블리에 음식 컵을 쌓을 수 있습니다. 설정을 전원 콘센트에 연결하여 마우스를 도입하기 전에 타이머를 평가합니다.
기록 된 시간에 한 구획에 네슬렛 조각을 놓고 6 시간 후에 네슬렛의 위치를 모니터링하여 타이머가 즉시 돌아가는지 확인하십시오. 마우스를 실험실로 옮기고 원고에 설명 된대로 명암주기 세트에 적응시킵니다. 피더 케이지에 개별적으로 수용하기 전에 마우스 무게를 기록하고 마우스가 물, 침구 및 네슬렛에 자유롭게 접근할 수 있는지 확인합니다.
피더 컵의 8개 칸 모두에 1.5g의 음식을 추가하고 피더 컵을 타이머에 놓습니다. 그런 다음 피더 컵에 뚜껑을 씌워 하나의 구획 만 노출되도록합니다. 4개의 구획은 주간 지점을 나타내고 나머지 4개는 야간 지점을 나타냅니다.
매일 같은 시간에 음식을 바꾸고 각 구획에 남아있는 펠릿 수를 세어 소비되는 음식의 양을 계산하십시오. 일주일 동안 먹이 프로필을 모니터링하여 임의로 먹이를 먹인 마우스와 야간 제한 식단에 대한 기본 섭식 프로필을 얻습니다. 3 내지 7일간의 임의식이요법 후, 마우스를 하루 구획 내의 펠릿의 수를 점진적으로 감소시킴으로써 전환 식이에 놓는다.
마우스가 야간 제한 요법에 적응한 후 2주 동안 음식 섭취를 모니터링합니다. 이 기간 동안 총 음식 소비량에 더 잘 맞도록 각 마우스에게 제공되는 음식의 양을 조정하십시오. 섭식 요법으로 인한 체중 변화를 모니터링하기 위해 2주 말에 마우스의 체중을 측정합니다.
일주일간의 임의식이 요법 후, 원고에 설명 된대로 평균 일일 음식 소비량과 각 구획에 제공 될 음식의 양을 계산하십시오. 생쥐가 하루 종일 8 개의 구획 모두에서 동일한 양의 음식을 섭취하도록하여 부정맥 수유를 달성하십시오. 그런 다음 음식 섭취의 리듬을 없애기 위해 3-5 일에 걸쳐 구획 당 제공되는 음식의 양을 점진적으로 줄임으로써 생쥐를 전환 식단에 넣으십시오.
부정맥 식단을 하는 동안 쥐가 몇 알만 남기고 적절한 양의 음식을 섭취할 수 있도록 매일 음식을 조절하십시오. 원고에 설명된 대로 조정하십시오. 수유 요법으로 인한 체중 변화를 모니터링하려면 2 주 말에 마우스의 체중을 측정하십시오.
먹이 프로파일은 정상적인 차우 임의를 먹인 야생형 마우스가 밤 동안 음식의 약 75%를 먹는다는 것을 나타냅니다. 고지방 식단을 임의로 먹인 쥐는 노출 첫 이틀 동안 더 많은 음식을 먹었는데, 이는 아마도 고지방 식단의 참신함 때문일 것입니다. 3 시간마다 일일 평균 음식 섭취량.
정상적인 차우 또는 고지방 식단을 먹인 쥐의 낮과 밤 동안의 음식 섭취량의 평균과 비율은 비슷했습니다. 수컷 마우스는 임의로 정상적인 차우와 고지방 식이를 한 지 1주일 후에 상당한 체중 증가를 보였다. 야간 제한 식단으로 전환한 쥐는 처음 3-5주 동안 칼로리 섭취량을 크게 줄이지 않고 밤에만 총 일일 칼로리를 섭취했습니다.
부정맥 식단으로 전환한 쥐는 하루 종일 동일한 양의 총 일일 칼로리를 섭취하여 일일 음식 섭취 리듬을 극적으로 약화시켰습니다. 마우스는 야간 제한 및 부정맥 섭식 요법 후에 체중 증가를 보였다. 이 공급 시스템을 사용할 때 기억해야 할 가장 중요한 것은 타이머가 실험 전반에 걸쳐 적절하게 작동하는지 확인하는 것입니다.
이 수유 시스템을 사용하여 연구자들은 요구 사항에 따라 음식 배달을 맞춤화할 수 있으며, 이는 결국 다양한 식사 시간이 건강과 질병에 미치는 영향에 대한 질문에 답하는 데 도움이 될 수 있습니다.
