Quantification des modifications post-traductionnelles des histones globales à l’aide de la cytométrie en flux intranucléaire dans la microglie cérébrale isolée de souris

Notre recherche vise à comprendre les mécanismes de régulation fondamentaux qui contrôlent l’expression des gènes dans le cerveau, et nous nous intéressons particulièrement à la façon dont la perturbation de ces mécanismes contribue aux troubles neurodéveloppementaux et neuropsychiatriques. Nous nous concentrons sur la compréhension de la façon dont les facteurs de risque génétiques et environnementaux se combinent pour altérer la fonction cellulaire et produire des troubles du comportement. Ce protocole comprend des méthodes de criblage à haut débit des modifications des histones dans la microglie isolée, ce qui nous permet de passer au crible des dizaines de modifications épigénétiques différentes avant de nous engager dans le séquençage à haut débit et les études de suivi fonctionnel.

Notre protocole fournit des mesures des modifications de l’histo globale similaires à celles de la parcelle occidentale. Cependant, notre technique est à la fois plus rapide, nécessite moins de cellules d’entrée, est plus quantitative et peut être multiplexée.