שיטה חדשה עבור גרימת התנהגות כמו דיכאון אצל חולדות

Summary

פרוטוקול זה מתאר מודל חדש שבאמצעותו חולדות בריא יכול חוזה דיכאון על נתון periodthrough הדבקה על ידי חשיפה כרונית בלתי צפויות הדגיש חולדות (CUS).

Abstract

דכאון מדבק הוא תופעה עדיין כדי להיות מזוהים באופן מלא, זה נובע אין מספיק חומר על הנושא. כרגע, יש פורמט קיים לא ללמוד את המנגנון של פעולה, מניעה, בלימה, וטיפול של דכאון מדבק. מטרתו של מחקר זה, לכן, היה להקים את המודל החייתי הראשון של דכאון מדבק.

חולדות בריא יכול חוזה התנהגויות דיכאון אם נחשפים חולדות מדוכא. דיכאון הנגרמת בחולדות על ידי העמדת אותם מספר מניפולציות של מתח כרוני בלתי צפויות (CUS) מעל 5 שבועות, כמפורט בפרוטוקול. מבחן העדפה סוכרוז מוצלחת אישר את התפתחות דיכאון אצל החולדות. העכברושים החשופים CUS היו בכלוב ואז עם תמים החולדות מהקבוצה הדבקה (1 תמים עכברוש/2 מדוכא חולדות בכלוב) למשך 5 שבועות נוספים. 30 קבוצות חברתיות נוצרו משילוב של החשופים CUS עכברים וחולדות תמים.

פרוטוקול זה דיכאון המוצע-המחלה בבעלי חיים מורכב בעיקר מגורים משותפים החשופים CUS ובריא של חולדות למשך 5 שבועות. כדי להבטיח כי שיטה זו פועלת, סדרה של בדיקות מתבצעות - קודם, הבדיקה העדפה סוכרוז על גרימת דיכאון חולדות, ואז, ההעדפה סוכרוז לבדוק, לצד שדה פתוח ובדיקות בכפייה-לשחות בסוף התקופה כיוון. לאורך כל הניסוי, חולדות מקבלים תגים, מוחזרים תמיד לכלובים שלהם לאחר כל ניסוי.

כמה מגבלות לשיטה זו הם ההבדלים חלש שנרשם בין ניסיוני ושליטה בקבוצות הבדיקה העדפה סוכרוז ואת התוצאה טראומטית בלתי הפיך של הבדיקה כפייה השחיה. אלה עשויים להיות שווה לשקול להתאמה לאנשים לפני כל יישום העתידי של הפרוטוקול. בכל זאת, בעקבות את הניסוי, תמים חולדות פיתח הדבקה דיכאון לאחר 5 שבועות של שיתוף באותו הכלוב עם העכברושים CUS החשופים.

Introduction

בדיקות שבוצעו בתקופה האחרונה הראו כי מחלות פסיכיאטריות יכול להיות בקלות להתפשט אנשים בריאים באמצעות הדבקה¹. במקרה זה, הוא הנקרא הדבקה חברתית, היא התפשטה דרך להשפיע, הגישה או התנהגות. פעולה זו דורשת רק אחד אדם מדוכא לקיים אינטראקציה עם אחד או אנשים בריאים יותר, ובכך להקל על השיתוף של רגש. יחסים חברתיות הם ומכאן מרכיב חשוב מאוד של מצב רוח, כפי שהם מגדירים את העברת רגשות מאדם אחד לשני, בדרך של חיקוי, "הדבקה רגשית". מסגרות זמן עבור מדבקת ייכנסו לתוקף משתנים², באופן בלתי נמנע בהתאם לחומרת הרגש ואת כוח ההתנגדות של המטופל.

ההשלכות משמעותית של הדבקה רגשית הבטיחו כי מחקרים שנעשו בעבר בעיקר התמקדו בהיבטים שליליים. התוצאה של תופעות שליליות הבטיחו הדבקה דיכאון קיבל תשומת לב עצומה, עם מחקרים המראים כי ההתפשטות דיכאון מגביר את הסבירות של המשפחות והחברים של אדם מדוכא מפגין התנהגויות דיכאון^{3 , 4 , 5 , 6}.

ישנן סיבות הן אישי והן כלכלית להתמודדות עם דיכאון. זה נפוץ גורם תחלואה; שכיחותה שלמים בין 13.3% 17.1 ארה ב⁷. הקבצים ארגון הבריאות העולמי להראות כי דיכאון הוא הרביעי ברשימת המחלות גלובלית עם נטל גדול, המתרחשים אצל אנשים מכל המינים, הגילאים, רקעים חברתיים, ויש מידה של גרימת בריאות לקויה, להשפיע על היכולת לתקשר עם אחרים^8,9,10,11, וגרימת נכות עודף^12,13. חיים 850,000 מוערך לאיבוד על התאבדות דיכאון לכל בן¹⁴. חולים הם בדרך כלל מרשם תרופות נוגדות דיכאון או מומלץ לעבור טיפול קוגניטיבי-התנהגותי. Treatmentshelp האלה, כ- 60-80% מהחולים. עם זאת, התמודדות עם המחלה עדיין מהווה בעיה גדולה; טיפול זה אינו זמין לכל המטופלים מדוכא. למי לקבל טיפול, חלקם סובלים תופעות לוואי, בעוד אחרים גרוע לציית להנחיות¹⁵. מספר החולים מתנגדת לטיפול הוא עד כ-40%¹⁴. עם דיכאון, הכלכלה סובלת לעיתים קרובות בצורה של טיפולים יקרים, ירידה בכוח העבודה, ואת הפנסיה המוקדמת¹⁶. אובדן השנתית המשוערת של 44 מיליארד דולר בארצות הברית נגרמת על ידי דיכאון, החשבונאי כמעט מחצית הפרודוקטיביות האבודה של המדינה¹⁷. טיפולים יקרים דורש זהירות לטיפול רפואי, אשר כרוך מגוון של הוצאות רפואיות מוגברת מחייבת בציפייה לתוצאות בלתי רצויות, כמו גם עניים בתגובה לטיפול¹⁸.

לא כשעליתי על פני במודל חיה כבר מוכח ללמוד את מנגנון דיכאון-הדבקה, שלה מניעה וטיפול, פרוטוקול בעלי חיים היפותטי זה שימש בפעם הראשונה. הוא מציע כי דרך כיוון החשופים CUS חולדות, עכברים בריאים נוטים לבטא התנהגויות דיכאון. המטרה העיקרית של הניסוי הזה היה להקים הליך מעבדה זה הדגיש את ההעברה של דיכאון, באמצעות הדבקה, מ החשופים CUS חולדות הבריאים. בשלב הבא, תוצאות הוערכו כדי לקבוע אם הדיכאון-הדבקה היה מוגבל רק תסמיני דיכאון, או אם זה היה קשור להפרעות מצב רוח אחרות, כגון חרדה. המטרה הסופית של הניסוי היא לקרבו אלינו יותר להבין את המנגנון של דיכאון-הדבקה במירוץ כדי לפתח גישות טיפוליות חדשות¹⁹.

Protocol

ההליך הבא נערך על פי ההמלצות של הצהרת הלסינקי לטוקיו, ההנחיות לשימוש של ניסויים בבעלי חיים של הקהילה האירופית. הניסויים היו גם אושרה על ידי הוועדה אכפת לי חיה באוניברסיטת בן-גוריון בנגב.

1. הכנת חולדות בהליך ניסיוני

הערה: לקבלת ההליך ניסיוני, בחר חולדות ספראג-Dawley זכר עם אין פתולוגיה עבירה, כל אחד במשקל בין 300, 350 גרם.

1. בית שלושה עכברים לכל כלוב, עם האוכל, מים זמינים ad libitum, ולאפשר לפחות שבועיים של הסתגלות, לסירוגין בין 12 שעות של אור יום 12 שעות החושך.
2. לפני תחילתן של הניסוי, לבדוק את כל העכברושים לנוכחות של התנהגויות כמו דיכאון באמצעות 3-ביום מבחן העדפה סוכרוז (עיין שלב 4).
3. חולדות תכלול שנתפסות להצגת התנהגויות כמו דיכאון ואת אלה שוכנו בכלובים אותו ככזה חולדות, כדי למנוע התפשטות אפשרית של דיכאון לא מושפע חולדות לפני הניסוי החלה קודם, לחסל חולדות חיובית עבור דיכאון; לאחר מכן, לחסל חולדות מוחזקים בכלובים אותו כמו החולדות מדוכא.
4. אם יש צורך, אל תכלול חולדות נוספים באקראי כדי ליצור קבוצות הסופי של חולדות 60 לניסוי. דיכאון, חולדות 30 עבור הקבוצה הדבקה ו 30 קבוצת הביקורת ratsforthe.
5. לתייג חולדות (באמצעות מדבקות ממוספרות), לאורך כל ההליכים ניסיוני. באופן זמני העברת חולדות לכלובים יחיד במהלך הניסויים (באותו חדר, מחזור כהה CUS, סוכרוז ו בדיקות שדה פתוח, ו חדרים שונים, מחזור כהה עבור הבדיקה בכפייה-לשחות, לאחד גורמי (עיין 2.1.7)) ולהחזיר להם ir קבוצות חברתיות המקורי בסוף.

2. נוהל אינדוקציה של דיכאון אצל חולדות

הערה: על מנת לגרום לדיכאון, נושא העכברושים 60 בקבוצה החשופים CUS מספר מניפולציות של CUS חמישה שבועות²⁰.

1. לחשוף חולדות מדי יום על כל 2 של לחצים 7 הבאים, בסדר אקראי; על הלחץ אחת במהלך היום, והשני בלילה, למשך 5 שבועות רצופים.
   1. בית העכברושים בקבוצות (חולדות 6, במקום שלוש הרגיל, לכל כלוב עבור 18 h);
   2. מקום החולדות בכלוב מוטה (45° לאורך הציר האנכי עבור 3 h);
   3. לשלול העכברושים של מזון (18 שעות);
   4. לשלול העכברושים של מים (18 שעות) ולא לחשוף אותן ריקות בקבוקי מים מיד לאחר תקופה של חוסר מים חריפה (1h);
   5. . מקום החולדות בכלוב מצעים רטובים (עם 300 מ ל מים נשפך על המצעים) 8 שעות (מחזור לילה);
   6. לחשוף חולדות תאורה רציפה (24 שעות) וביטל מחזור/כהה (12 שעות) פעמיים בשבוע;
   7. מקום העכברושים בסביבה חמה (40° C, 5 דק ' - מחזור לילה), עם מכשיר אחר ששימשו כדי להגביר את החום.
2. לאשר את התפתחות דיכאון על ידי ביצוע מבחן העדפה סוכרוז (עיין שלב 4).
   הערה: ניתן להשהות את הפרוטוקול לאחר כל השלבים לעיל. בנוסף, אם כל התנהגות חריגה מוצגת על-ידי כל עכברוש, ואז, לחסל את העכברוש עכברוש אחרים זה אולי הושפעו על ידי העכברוש בלתי יציבה.

3. ההליך להקמת דיכאון-הדבקה בחולדות תמים

1. להקים קבוצות חברתיות עם חולדות החשופים CUS (60) 30 וקבוצות דיכאון-הדבקה (30):
   1. בית שני עכברושים CUS חשופים לכל כלוב בכלובים שונים 30.
   2. הוסף עכבר אחד מהקבוצה דיכאון-הדבקה לכלוב כל המכיל שני CUS - חשופים חולדות.
2. לאפשר כיוון במשך 5 שבועות , בתנאים רגילים, עם אוכל ומים זמינים ad libitum.
3. לאחר 5 שבועות של חיים בצוותא, נושא כל מקבץ אל העדפה סוכרוז, שדה פתוח, כפה-לשחות בדיקות לפי הסדר המוצג באיור1.

4. מבחן העדפה סוכרוז²¹

1. במהלך מחזור כהה, מקם את החולדות בכלובים בודדים באותו חדר כמו הדיור.
2. במקום בקבוק של 100 מ ל 1% (w/v) סוכרוז פתרון בכלוב כל במשך 24 שעות ביממה, לאפשר הסתגלות.
3. הסר את הבקבוקים, לשלול את החולדות של מזון ומים עבור 12 שעות.
4. מקום שני בקבוקים, אחד המכיל 100 מ של פתרון סוכרוז (1%, w/v), והשני, 100 מ של מים מהברז בכלוב כל במשך 4 שעות.
5. להקליט את עוצמת הקול (ב מ ל) של סוכרוז נצרך פתרון והן מים ולאחר לחשב את הזיקה סוכרוז להעדפה כדלקמן:
   

5. בדיקת שדה פתוח

הערה: ניסוי השדה הפתוח סטנדרטי משמש בדרך כלל כדי להעריך התנהגויות גינקולוגיות גישוש, כמו חרדה, ותגובות התנהגותיות נוביטם מעבדה חיות^{22, 23}. בדיקה זו גם הוכח כדי לנתח התנהגויות דיכאון²⁴. ניסוי השדה פתוח בוחן שני פרמטרים מנוגדות; הפחד של המכרסמים הבהיר זוהר במרכז השדה נגד רצונם הבעה לקראת חידוש. כאשר חרדה, מכרסמים נוטים להימנע גילוי, תישארי שם על ידי הקירות (thigmotaxis). חרדה זו נקבעת לפי מידת הסב את השדה המרכזי מוארים. במגרש הפתוח, המורכב תיבה אקריליק הרקובות שחור (120 ס"מ × 60 ס"מ × 60 ס מ), מחולק החלק המרכזי (25%) ואת שאר תיבת (75%). מבחן זה מתקיים באותו חדר כמו דיור במהלך מחזור כהה. מצלמת וידאו, הושעו כ- 200 ס מ מעל השדה, משמש עבור הקלטה בשטח פתוח מבחן^{22, 23}.

1. לנקות את המנגנון עם 5% אלכוהול לפני כניסתה של כל בעל חיים. מקם את החולדה בפינת המגרש מופנות לקיר.
2. לתעד את ההתנהגות של החולדה עם מצלמת וידאו במשך 5 דקות.
3. לנתח את הקלטות שלאחר מהפרמטרים הבאים: נסיעות סך מרחק, מהירות בחלק המרכזי של שדה, וכן הזמן המושקע בחלק המרכזי של השדה.

6. מבחן בכפייה-לשחות

הערה: העיקרון של הבדיקה כפייה השחיה הוא מבוסס על העובדה כי כאשר חולדות נאלצים לשחות בחלל סגור, הם בסופו של דבר לוותר ולהישאר משותק, מדי פעם עובר את גופם על מנת למנוע את תביעתן^{21, 23}. בשל הזוועה המנגנון כבר התאספו, בדיקה זו התבצע בחדר שונה במהלך מחזור כהה.

1. עבור habituation, למקם את העכברוש גליל זכוכית (100 ס מ בגובה 40 ס מ קוטר, עמוק 40 ס"מ) המכיל מים בטמפרטורת החדר, במשך 15 דקות לשחות. הפעלה.
2. הסר את העכברוש הצילינדר, יבש עם מגבות נייר ומניחים בתוך כלוב חמים למשך 15 דקות.
3. להחזיר את החולדה בכלוב (המקורי) הביתה;
   הערה: הפרוטוקול אפשר לעצור כאן. כמו כן, אם כל עכברוש במהלך המבחן הזה טובע, תוציא את זה החוצה מיד
4. למחרת, לצלם את מפגש 5-מין לשחות וניתוח שלאחר הקלטות של הפרמטרים הבאים: פקקת, טיפוס על הפרשה.

תוצאות

הבדיקה העדפה סוכרוז: לאחר חשיפת חולדות 5 שבועות של CUS עבור אינדוקציה של דיכאון, ואז לאחר מכן חשיפת עכברים בריאים לעכברושים CUS החשופים למשך 5 שבועות נוספים, שתי קבוצות של חולדות מוצגים כמו דיכאון behaviorsat בסוף הניסוי (איור 2). הראיות של התנהגות זו נראתה בההעדפה מופחתת של ...

Discussion

על פי התוצאות המתקבלות עם היישום של פרוטוקול זה, עכברים בריאים, כמו בני אדם, הושפעו לרעה חולדות מדוכא כאשר שוכנו יחד על פני תקופה ארוכה. החולדות contagiously מדוכא הושפעו על ידי עמיתיהם מדוכא כבר לאחר חמישה שבועות של חיים בצוותא, הקמת מודל נפרדים בעלי חיים דיכאון-המחלה בפעם הראשונה. מחקר קודמות ע?...

Materials

Name	Company	Catalog Number	Comments
Rat Cages	Techniplast	2000P	Conventional housing for rodents. Was used for housing rats throughout the experiment
Water	-	-	Common tap water used througout the experiment at different stages
Purina Chow	Purina	5001	Rodent laboratory chow given to rats, mice and hamster is a life-cycle nutrition that has been used in biomedical researc for over 5 decades. Provided to rats ad libitum in this experiment
Bottles	Techniplast	ACBT0262SU	150 ml bottles filled with 100 ml of water and 100 ml 1%(w/v) sucrose solution
Black lusterless perspex box	-	-	(120 cm × 60 cm × 60 cm), divided into a 25% central zone and the surrounding border zone
Video Camera	Canon	-	Digital video camera for high definition recording of rat behavior under open field test
Alcohol	Pharmacy	-	99% pharmaceutical alcohol diluted to 5% and used for lceaning the open field test box before the introduction of each rat
Glass cylinder	-	-	100 cm tall, 40 cm in diameter, and 40 cm deep cylinder used for carrying out the forced swim test
Paper towels	Pharmacy	-	Dry towels used for keeping rats dry after immersing them in water
Bold markers	-	-	Common bold markers used for labeling rats