Une nouvelle méthode pour induire un comportement de type dépression chez le rat

Résumé

Ce protocole décrit un nouveau modèle par lequel des rats sains peuvent contracter la dépression pendant une période donnée, periodthrough contagion en cas d’exposition à chronique imprévisible a insisté sur des rats (CUS).

Résumé

La dépression contagieuse est un phénomène qui reste encore à être pleinement reconnu et cela résulte de l’insuffisance de matériel sur le sujet. Pour l’instant, il n’y a aucune mise en forme existante pour étudier le mécanisme d’action, de prévention, de confinement et de traitement de la dépression contagieuse. Le but de cette étude, était par conséquent, d’établir le premier modèle animal de la dépression contagieuse.

Des rats sains peuvent contracter des comportements dépressifs si exposé à des rats déprimés. La dépression est induite chez les rats en les soumettant à plusieurs manipulations d’un stress chronique imprévisible (CUS) pendant 5 semaines, tel que décrit dans le protocole. Un essai de préférence de saccharose réussie a confirmé le développement de la dépression chez les rats. Les rats exposés à la CUS ont été ensuite mis en cage avec des rats naïfs du groupe contagion (naïve 1 rat/2 déprimé rats dans une cage) pendant 5 semaines supplémentaires. 30 groupes sociaux ont été créés par la combinaison des rats exposés à la CUS et des rats naïfs.

Ce protocole proposé dépression-contagion chez les animaux consiste principalement des rats exposés au CUS et sains qui cohabitent pendant 5 semaines. Pour s’assurer que cette méthode fonctionne, une série de tests sont effectués - tout d’abord, le test de préférence de saccharose sur induisant la dépression chez le rat, la préférence de saccharose Testez ensuite, aux côtés du terrain dégagé et de baignade forcée des tests à la fin de la période de cohabitation. Tout au long de l’expérience, les rats reçoivent des étiquettes et sont toujours retournées à leurs cages après chaque essai.

Quelques limites à cette méthode sont les faibles différences enregistrées entre l’expérimental et le contrôle des groupes dans le test de préférence de saccharose et l’issue traumatique irréversible de l’épreuve de nage forcée. Ce peuvent être utile d’envisager pour les qualités avant toute application future du protocole. Néanmoins, après l’expérience, les rats naïfs développé dépression contagion après 5 semaines de partager la même cage avec les rats exposés à la CUS.

Introduction

Essais effectués ces derniers temps ont suggéré que les maladies psychiatriques pourraient s’étendre facilement à des individus sains par contagion¹. Dans ce cas, il s’appelle contagion sociale et se répand dans l’affect, d’attitude ou de comportement. Il suffit d’une personne déprimée pour interagir avec un ou plus des individus en bonne santé, ce qui facilite le partage de l’émotion. Les relations sociales sont donc un élément très important de l’humeur, car ils définissent le transfert des émotions d’un individu à l’autre, par le biais de mimétisme et « contagion émotionnelle ». Délais pour la contagion prenne effet varier², inévitablement selon la sévérité de l’émotion et la force de résistance du destinataire.

Les conséquences importantes de la contagion émotionnelle ont veillé à ce que les études faites dans le passé principalement axé sur les aspects négatifs. Le résultat des effets négatifs assurée dépression de contagion a reçu une attention considérable, les études montrant que la dépression de contagion augmente la probabilité de familles et d’amis d’une personne dépressive présentant des comportements dépressifs^{3 , 4 , 5 , 6}.

Il y a des raisons personnelles et économiques pour lutter contre la dépression. Elle provoque souvent la morbidité ; et l’incidence de sa durée de vie est entre 13,3 et 17,1 % dans les États-Unis⁷. Les dossiers de l’Organisation mondiale de la santé montrent que la dépression est quatrième sur la liste des maladies mondiales avec des charges énormes, qui se produisent chez les personnes de tous sexes, âges, milieux sociaux et est également capable d’infliger une mauvaise santé, ayant une incidence sur la capacité d’interagir avec d’autres^8,9,10,11et causant excès handicap^12,13. 850 000 vies sont estimées à se perdre au suicide dépression chaque année¹⁴. Les patients sont généralement prescrits des médicaments d’antidépresseur ou conseillés de subir une thérapie cognitivo-comportementale. Ces treatmentshelp environ 60-80 % des patients. Cependant, traitant de la maladie continue de poser un gros problème ; traitement n’est pas disponible pour tous les patients déprimés. Pour ceux qui reçoivent le traitement, certains souffrent d’effets secondaires, tandis que d’autres mal conformes aux lignes directrices¹⁵. Le nombre de patients résistants au traitement est à environ 40 %¹⁴. Avec la dépression, l’économie a fréquemment souffert sous la forme de traitement coûteux, une diminution de la main-d'œuvre et les préretraites¹⁶. Une perte annuelle estimée de $ 44 milliards aux États-Unis est causée par la dépression, presque la moitié du pays perte de productivité¹⁷. Le traitement coûteux nécessite une attention médicale minutieuse, qui subit une série de hausse des coûts médicaux et nécessite de l’anticipation de résultats indésirables, mais aussi de mauvaise réponse au traitement¹⁸.

Ayant ne pas tombez sur un modèle animal déjà éprouvé pour étudier le mécanisme de la dépression-contagion, la prévention et le traitement, ce protocole animaux hypothétique a été utilisé pour la première fois. Il suggère que par le biais de cohabitation avec les rats exposés à la CUS, des rats en bonne santé ont tendance à exprimer des comportements dépressifs. L’objectif principal de cette expérience était d’établir une procédure de laboratoire qui a mis en évidence le transfert de la dépression, par contagion, de rats exposés à la CUS à celles qui sont saines. Ensuite, les résultats ont été évalués afin de déterminer si la dépression-contagion ne se limitait qu’aux symptômes de dépression, ou si elle était liée à d’autres troubles de l’humeur, tels que l’anxiété. Le but ultime de l’expérience consiste à se rapprocher afin de mieux comprendre le mécanisme de la dépression-contagion dans la course pour développer de nouvelles approches thérapeutiques¹⁹.

Protocole

La procédure suivante a été réalisée conformément aux recommandations de la déclaration d’Helsinki et de Tokyo et les lignes directrices pour l’utilisation des animaux d’expérimentation de la Communauté européenne. Les expériences ont également été approuvées par le Comité de protection de l’Animal à l’Université Ben Gourion du Néguev.

1. préparation des Rats de la procédure expérimentale

Remarque : Pour la procédure expérimentale, sélectionnez les rats Sprague-Dawley mâles sans pathologie patente, chacun pesant entre 300 et 350 g.

1. Maison trois rats par cage, avec chow et eau disponible ad libitum et permettent au moins de deux semaines d’adaptation, alternant entre 12 h de lumière et 12 h d’obscurité.
2. Avant le démarrage de l’expérience, tester tous les rats de la présence de comportements dépressifs ressemblant à l’aide d’un 3 jours test de préférence de saccharose (voir étape 4).
3. Exclure les rats qui sont perçues pour afficher des comportements de type dépressifs et ceux qui sont logés dans la même cage comme tel des rats, afin d’éviter la propagation éventuelle de la dépression aux rats affectés avant que l’expérience a commencé tout d’abord, éliminer les rats ayant un test positif pour dépression ; puis, éliminer les rats qui sont logés dans des cages de mêmes que les rats déprimés.
4. Si nécessaire, exclure les rats supplémentaires au hasard pour créer des groupes de 60 rats pour l’expérience de dépression finales, 30 rats pour le groupe de la contagion et un groupe témoin ratsforthe 30.
5. Tag des rats (à l’aide d’autocollants numérotés), tout au long des procédures expérimentales. Temporairement transférer des rats aux cages unique au cours des expériences (dans la même pièce et le cycle foncé de CUS, saccharose et d’essais et dans une autre pièce et cycle foncé pour le test de nage forcée et parmi les facteurs de stress (voir 2.1.7)) et de les renvoyer à la groupes sociaux originaux de l’IR à la fin.

2. la procédure pour l’Induction de la dépression chez les Rats

Remarque : Afin d’inciter la dépression, sous réserve des 60 rats dans le groupe exposé à la CUS plusieurs manipulations de la CUS pour cinq semaines²⁰.

1. Exposer des rats par jour pour tout 2 des 7 stresseurs suivants, dans un ordre aléatoire ; à un agent stressant durant la journée et à l’autre pendant la nuit, pendant 5 semaines consécutives.
   1. Maison les rats dans les groupes (six rats, au lieu des trois habituelles, par cage pour 18 h) ;
   2. Placez les rats dans une cage inclinée (45° sur l’axe vertical pour 3 h) ;
   3. Priver les rats de la nourriture (18 h) ;
   4. Priver les rats d’eau (18 h) et de les exposer à des bouteilles d’eau vides immédiatement après une période de privation d’eau aiguë (1 h) ;
   5. Placer les rats dans une cage de litière humide (avec 300 mL d’eau déversé dans la litière) pendant 8 h (cycle nuit) ;
   6. Exposer les rats à éclairage continu (24h) et inversé le cycle lumière/obscurité (12 h) deux fois par semaine ;
   7. Placez les rats dans un environnement chaud (40° C, 5 min - cycle nuit), avec un autre appareil servant à augmenter la chaleur.
2. Confirmer le développement de la dépression en effectuant un test de préférence de saccharose (voir étape 4).
   Remarque : Le protocole peut être suspendu après chacune des étapes ci-dessus. En outre, si un comportement aberrant est montré par n’importe quel rat, puis, éliminer le rat et toute autre rat qui pourrait avoir été touché par le rat erratique.

3. la procédure d’établissement de dépression-Contagion chez les Rats naïfs

1. Mettre en place 30 groupes sociaux sur des rats de la CUS-exposés (60) et dépression-contagion (30) :
   1. Maison deux CUS chez les rats exposés par cage dans 30 cages différentes.
   2. Ajouter un rat du groupe dépression-contagion à chaque cage contenant deux CUS - exposé des rats.
2. Cohabitation pendant 5 semaines , dans des conditions normales, avec chow et eau disponible ad libitum.
3. Après 5 semaines de cohabitation, objet de tous les groupes à la préférence de saccharose, plein champ et de baignade forcée des tests dans l’ordre indiqué dans la Figure 1.

4. la préférence de saccharose tester²¹

1. Au cours du cycle foncé, placez les rats dans des cages individuelles dans la même pièce que le logement.
2. Placez une bouteille de 100 mL de solution de saccharose 1 % (p/v) dans chaque cage pendant 24 h et permettant l’adaptation.
3. Enlever les bouteilles et priver les rats de la nourriture et l’eau pendant 12 h.
4. Placer deux bouteilles, un contenant de 100 mL de solution de saccharose (1 %, p/v) et l’autre, 100 mL d’eau du robinet, dans chaque cage pendant 4 h.
5. Noter le volume (en mL) de solution sucrée consommée tant l’eau et calculer l’affinité à la préférence de saccharose comme suit :
   

5. les essais de plein champ

Remarque : Le test standard de plein champ est utilisé pour évaluer les comportements locomoteurs, exploratoires et anxiété-like et les réactions comportementales à la nouveauté en laboratoire animaux^{22, 23}. Cet essai a également été montré pour analyser les comportements dépressifs²⁴. Le test de plein champ examine deux paramètres adverses ; peur des rongeurs pour la lumière qui brille au centre du champ contre leur volonté expressive vers la nouveauté. Lorsqu’il est anxieux, les rongeurs ont tendance à éviter la découverte et séjour mis par les murs (thigmotaxie). Cette anxiété est déterminée par le degré de conjurer le champ central lumineuse. Le champ Ouvrir, constitué d’une boîte noire d’acrylique tachée (120 cm × 60 cm × 60 cm), est divisé en la partie centrale (25 %) et le reste de la boîte (75 %). Ce test se déroule dans la même pièce que le logement pendant le cycle de sombre. Une caméra vidéo, suspendue environ 200 cm au-dessus du champ, sert à enregistrer le champ ouvert test^{22, 23}.

1. Nettoyez l’appareil avec 5 % d’alcool avant l’introduction de chaque animal. Place le rat dans le coin du champ ouvert face au mur.
2. Enregistrer le comportement du rat avec une caméra vidéo pendant 5 min.
3. Analyser les enregistrements des paramètres suivants : distance totale parcourue, la vitesse dans la partie centrale du champ et le temps passé dans la partie centrale du champ.

6. le Test de baignade forcée

Remarque : Le principe de l’épreuve de nage forcée est basée sur le fait que lorsque des rats sont obligés de nager dans un espace confiné, ils finissent par abandonnent et restent immobiles, déplaçant parfois leurs corps afin d’éviter la noyade de^{21, 23}. En raison de l’énormité de l’appareil déjà assemblé, ce test a été effectué dans l’autre pièce pendant le cycle de sombre.

1. Pour l’accoutumance, placez le rat dans un cylindre de verre (100 cm de haut, 40 cm de diamètre et 40 cm de profondeur) contenant de l’eau à température ambiante, pendant une 15 min, séance de natation.
2. Retirez le rat de la bouteille, sécher avec des serviettes en papier et les placer dans une cage chaude pendant 15 minutes.
3. Retour le rat dans sa cage (original) maison ;
   Remarque : Le protocole peut être suspendu ici. En outre, si un rat dans le cadre de cet essai se noie, sortez-le immédiatement.
4. Le lendemain, filmer une séance de natation 5 min et d’analyser les enregistrements des paramètres suivants : immobilité, escalade et la défécation.

Résultats

Le test de préférence de saccharose : Après exposant des rats à 5 semaines de la CUS pour l’induction de la dépression et puis par la suite exposer des rats sains pour les rats exposés à la CUS pendant un autre 5 semaines, les deux ensembles de rats affichent behaviorsat dépressifs comme la fin de l’expérience (Figure 2). La preuve de ce comportement a été observée dans la préférence réduite pour le sucrose par les rats déprimés, après CUS (65 ± 2,8 %...

Discussion

Selon les résultats obtenus avec l’application du présent protocole, des rats en bonne santé, comme les humains, ont été contrariés par les rats déprimés lorsqu’ils sont logés ensemble sur une longue période. Les rats simplement déprimés ont été touchés par leurs homologues déjà déprimés après cinq semaines de cohabitation, établissant un modèle distinct dépression animale-contagion pour la première fois. Une étude antérieure avec des porcs a également proposé des lois émotionnels partag?...

matériels

Name	Company	Catalog Number	Comments
Rat Cages	Techniplast	2000P	Conventional housing for rodents. Was used for housing rats throughout the experiment
Water	-	-	Common tap water used througout the experiment at different stages
Purina Chow	Purina	5001	Rodent laboratory chow given to rats, mice and hamster is a life-cycle nutrition that has been used in biomedical researc for over 5 decades. Provided to rats ad libitum in this experiment
Bottles	Techniplast	ACBT0262SU	150 ml bottles filled with 100 ml of water and 100 ml 1%(w/v) sucrose solution
Black lusterless perspex box	-	-	(120 cm × 60 cm × 60 cm), divided into a 25% central zone and the surrounding border zone
Video Camera	Canon	-	Digital video camera for high definition recording of rat behavior under open field test
Alcohol	Pharmacy	-	99% pharmaceutical alcohol diluted to 5% and used for lceaning the open field test box before the introduction of each rat
Glass cylinder	-	-	100 cm tall, 40 cm in diameter, and 40 cm deep cylinder used for carrying out the forced swim test
Paper towels	Pharmacy	-	Dry towels used for keeping rats dry after immersing them in water
Bold markers	-	-	Common bold markers used for labeling rats