A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.
Method Article
פרוטוקול נמוכים המורכב ניתוח טביעת רגל ותלייה תיבת הבדיקה לאחר ריסון מתח הוא שימושי עבור הערכת הפרעות תנועה של העכבר מודל.
הפרעה בהליכה לעתים קרובות נצפית בחולים עם הפרעות תנועה דגמים העכבר משמש לטיפול בהפרעות תנועה, והרצתי ניתוח הוא מבחן התנהגותי חשוב כדי לקבוע אם העכברים לחקות את הסימפטומים של המטופלים. חסרונות המנוע הם לעיתים קרובות המושרה על ידי מתח כאשר אין פנוטיפ המוטורית הספונטנית נצפית במודלים העכבר. לכן, והרצתי ניתוח ואחריו מתח הטעינה יהיה שיטה רגישה להערכת של פנוטיפ מנוע במודלים של העכבר. עם זאת, החוקרים מול הדרישה של מכשירים יקרים כדי לקבל תוצאות כמותיות באופן אוטומטי והרצתי ניתוח הליכה. עבור מתח, מתח טעינה על ידי שיטות פשוטות ללא מנגנוני יקר הדרושים עבור הלם חשמלי והכריחו פועל הוא רצוי. לכן, אנו מציגים את פרוטוקול נמוכים ופשוט המורכב ניתוח טביעת רגל עם נייר ודיו, תלוי תיבת הבדיקה להעריך המוטורית, מתח טעינה המוגדר על-ידי ריסון עם צינור חרוטי. הגירעונות מנוע של עכברים אותרו בהצלחה על ידי פרוטוקול זה.
הפרעות תנועה מוגדרים הפרעות של מערכת העצבים מראה של עודף או במחסור של תנועות רצוניות או אוטומטית1. בפרט, הפרעה בהליכה מתועדת בתדירות גבוהה בקרב חולים עם התנועה הפרעות2,3,4. לכן, והרצתי ניתוח הוא מבחן ההתנהגות מתאימים עבור האימות של מודלים חייתיים של הפרעות תנועה. בעכברים, הילוך אוטומטי ניתוחים בוצעו להליכה-מהירות טבעית5 ו במהירויות מתכוונן על-ידי הליכון6,7. ניתוחים אלה מספקים תוצאות כמותיות של דהירה באופן אוטומטי. שיטה חלופית לזהות הפרעה בהליכה זה נקרא ניתוח טביעת רגל. לאחר תיוג שהסוליות של כפות הרגליים עם דיו, עכברים ללכת על נייר, העקבות מנותחים. בתחילה, וזלין, אבקת פחם שימשו כדי להמחיש את טביעת רגל8ולאחר מכן הוחלפו דיו על נייר פוליגרף9 ומפתח הצילומי על נייר הצילום10. שיטה זולה יותר פחות רעיל באמצעות דיו ונייר מכל השיטות האחרות נשאר עד היום11. ניתוח טביעת רגל הוא פחות יקר לעומת ניתוח אוטומטיות5,6,7 , יהיה שימושי כדי להעריך את הפרעות תנועה במודלים של העכבר של החוקרים ללא קרנות מחקר שופע .
התליה תיבת הבדיקה הוא סוג של ארבע בדיקות תלוי של האיבר, באמצעות תיל מהכלוב המכסה12 , חוט רשת שינוי מסך13. התיבה תהיה מכשירים עם מכסה רשת rotatable בראש תיבת לאורך סרגל מרכז. בנוסף ניתוח הילוך, הבדיקה ניתן בזול ובקלות לבצע. לכן, ערכנו התליה תיבת הבדיקה להעריך כוח אחיזה ושיווי משקל, בנוסף לניתוח טביעת רגל של פרוטוקול זה.
מתח גורם הסימפטומים של התנועה הפרעות14,15. חסרונות המנוע לעתים קרובות שנגזרות לחצים כרוניים מספר גם כאשר אין פנוטיפ המוטורית הספונטנית נצפית במודלים העכבר התנועה הפרעת16,17,18. איפוק הוא אחת השיטות הנפוצות עבור מתח טעינה בעכברים, כי החיה אינה פיזית הנפגעת19 , עלות פחות לעומת שיטות אחרות כגון הלם חשמלי עם מכשיר ייעודי והכריח פועל עם שימוש של הליכון. הריסון על ידי צינור, אשר מבוצע על ידי כליאת עכבר צינור חרוטי מחזיק 50 מ ל, היא קלה יותר מאשר שיטות אחרות כגון חוט רשת שינוי מסננת האיבר בדוחק, עטיפה של חיה עם גזה (שנסקרה20). בנייר זה, אנו מסכמים את הפרוטוקולים של טביעת הרגל ניתוח ואת תיבת תלוי מבחן לאחר ריסון על ידי צינור. פרוטוקול זה יעזור לנו להשתמש בעכבר מודלים של הפרעות תנועה ללא פנוטיפ מנוע ספונטנית.
Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.
כל הניסויים נערכו בצורה הומאנית. מוסדיים חיות ניסוי הוועדה של jichi ב רפואי האוניברסיטה אישרה את המחקר. המחקר נערך לפי תקנה המוסדי חיות ניסוי, מנחה בסיסי עבור נכונה התנהגות של חיות ניסוי ופעילויות הקשורות מוסדות מחקר אקדמיים תחת הסמכות השיפוטית של MEXT של יפן. עכברים בשימוש פרוטוקול זה היה כפי שתוארה לעיל21.
1. תלוי תיבת הבדיקה
2. ניתוח טביעת רגל
הערה: בעקבות התיבה תלוי מבחן, לבצע ניתוח טביעת רגל.
3. איפוק מתח טעינה
4. ניסיוני לוח זמנים (איור 4):
Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.
העכברים זכר משפחתית ולא משפחתית הטרוזיגוטיים של Atp1a3 (Atp1a3+ −) כי הם המודל העכבר עבור התחלה מהירה פוקאלית parkinsonism פראי-סוג הארנבונים מאותה שימשו ב פרוטוקול זה. Atp1a3+ − הראה נמוך באופן משמעותי פסיעה אורכים של forelimb ו- hindlimb יותר מאלה של סוג בר-גיל (
Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.
ניתוח טביעת רגל ואת תיבת תלוי לבדוק מבחנים התנהגותיים פשוט וזול בתפקוד המוטורי של עכברים. הפנוטיפים neurobehavioral במספר דגמים העכבר זוהו בהצלחה על ידי בדיקות אלה. לדוגמה, קוצר אורך צעד נוירודגנרטיביות24, אורך מוגברת של פסיעה סימטרית תסמונת אטקסיה טלנגיאקטזיה25, אורך מו...
Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.
המחברים אין לחשוף.
עבודה זו נתמכה על ידי KAKENHI JSPS (יפן האגודה לקידום המדע ע) (מענק הסיוע עבור C מחקר מדעי), להעניק מספר 18K 07373 (בחיי) וה סובסידיות עבור אוניברסיטאות פרטיות.
Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.
Name | Company | Catalog Number | Comments |
Hanging box | O’hara & Co. | http://ohara-time.co.jp/products/wire-hanging-test/ | |
Marking pen | ZEBRA | MO-120-MC-BK | |
Goal box | O’hara & Co. | http://ohara-time.co.jp/products/balanced-beam-test/ | Accessory for apparatus of balanced beam test |
Boxes | O’hara & Co. | - | Side wall of runway |
Black ink | Shin-asahi | - | |
Red ink | Maruyamakogyo | BC-6 | |
Disposable Petri Dish | Corning | 351008 | Petri dishes (35 mm in diameter) |
Askul Multipaper Super White J Monochrome A3 | Askul | 701-712 | White paper (29.7 cm x 42 cm x 0.09mm) |
50 mL Conical tube | Corning | 430829 | |
Square drill | KAKURI Corporation | DIY FACTORY (K32-0313) |
Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.
Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article
Request PermissionThis article has been published
Video Coming Soon
Copyright © 2025 MyJoVE Corporation. All rights reserved