A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.
Method Article
פיתוח ובדיקה של מכשירים אנדווסקולריים לטיפול במפרצת תוך גולגולתית הם עדיין בעלי חשיבות רבה. רוב דגמי המפרצת המשמשים כיום מפספסים את המאפיינים החשובים של דופן מנוונת עורקית או את ההמודינמיקה של ביפורקציה אמיתית. לכן, שמנו לנו למטרה לעצב מודל חדש של ביפורקציה של נרתיק עורקי בארנבים.
טיפול אנדווסקולרי במפרצות תוך גולגולתיות צבר חשיבות בעשורים האחרונים, וכתוצאה מכך יש צורך מוגבר בבדיקת מכשירים אנדווסקולריים. מודלים של בעלי חיים המכבדים את תנאי הקיר הריאולוגיים, המודינמיים והמפרצות מוצדקים מאוד. לכן, מטרת המחקר הנוכחי הייתה לתכנן טכניקה כירורגית חדשנית מתוקננת וניתנת לשחזור כדי ליצור מפרצות ביפורקציה של כיס עורקים אוטולוגי עם תנאי דופן לא מותאמים ומשתנים בארנבים.
מפרצות ביפורקציה נוצרו על ידי אנסטומוזה מקצה לקצה של ימין בעורק הצוואר המשותף השמאלי, ושניהם שימשו כעורקי אב לשקית העורקים, שנתפרה באופן מיקרו-כירורגי. השתלים נלקחו מעורק הצוואר המשותף הימני הפרוקסימלי, בין אם עבור קבוצת הבקרה (n = 7, השתלה מחדש אוטולוגית מיידית) או שונתה (n = 7, דגירה עם 100 יחידות בינלאומיות אלסטאז במשך 20 דקות לפני השתלה מחדש אוטולוגית). פאוץ' ועורק האב נשלטו על ידי אנגיוגרפיה פלואורסצנטית מיד לאחר הבריאה. במעקב (28 ימים), כל הארנבים עברו אנגיוגרפיה משופרת בתהודה מגנטית ואנגיוגרפיה פלואורסצנטית ואחריה קצירת מפרצת, הערכה מקרוסקופית והיסטולוגית.
בסך הכל נותחו 16 נקבות ארנבות לבנות מניו זילנד. שתי חיות מתו בטרם עת. במעקב, 85.72% מכלל המפרצות נותרו פטנט. שתי הקבוצות חשפו עלייה בגודל המפרצת לאורך זמן; זה היה בולט יותר בקבוצת הביקורת (6.48 ± 1.81 מ"מ3 בזמן היצירה לעומת 19.85 ± 6.40 מ"מ3 במעקב, p = 0.037) מאשר בקבוצה ששונתה (8.03 ± 1.08 מ"מ3 בזמן היצירה לעומת 20.29 ± 6.16 מ"מ3 במעקב, p = 0.054).
הממצאים שלנו מדגימים את הלימותו של מודל ארנב חדש זה המאפשר יצירת מפרצות ביפורקציה עם תנאי דופן שונים בגישה מיקרו-כירורגית. בהתחשב בפטנסיות המצוינת לטווח הארוך ובתכונה של צמיחת מפרצת לאורך זמן, מודל זה עשוי לשמש ככלי חשוב להערכה פרה-קלינית של טיפולים אנדווסקולריים חדשניים.
דימום תת-עכבישי הנובע מקרע במפרצת תוך גולגולתית (IA) יכול להיות נשלט ביעילות על ידי טכניקות חסימה אנדווסקולריות או מיקרו-כירורגיות 1,2,3,4. טיפולים אנדווסקולריים שונים, כדי להתגבר על המגבלה העיקרית של הישנות IA לאחר סליל, צברו חשיבות בעשורים האחרונים ויצרו צורך מוגבר בבדיקת מכשירים אנדווסקולריים. כדי לבחון את גישות הטיפול החדשניות הללו, מודלים מתאימים של בעלי חיים המכבדים תכונות ריאולוגיות, המודינמיקה ותנאי דופן מפרצת מוצדקים מאוד 5,6,7. בהקשר זה, מחקרים קליניים כמו גם פרה-קליניים כבר חשפו את התפקיד החשוב של תנאי דופן המפרצת לגבי קרע מפרצת והישנות לאחר חסימה, במיוחד תוך התמקדות באובדן תאי קיר 7,8,9.
עד כה, מפרצות ניסיוניות בארנבים נוצרו לרוב על ידי גדם עורק קרוטיד מצוי (CCA) דגירה של אלסטאז או על ידי שקיות ורידיות שנתפרו לתוך ביפורקציה מלאכותית של CCA. 10,11,12,13,14,15,16 לפיכך, מודל ביפורקציה של כיס עורקי אמיתי מעולם לא תואר.
מטרת המחקר הייתה לתכנן טכניקה בטוחה, מהירה וסטנדרטית ליצירה מיקרו-כירורגית של מפרצות ביפורקציה עם תנאי דופן שונים במודל ארנב (איור 1). זה הושג על ידי תפירת שקיות עורקים שלא שונו ושונו לתוך bifurcation מלאכותי שנוצר של שני CCAs.
כל הטיפול הווטרינרי בוצע בהתאם להנחיות המוסדיות (כל הניסויים אושרו על ידי הוועדה המקומית לטיפול בבעלי חיים בקנטון ברן, שוויץ (BE 108/16)) ונערכו תחת פיקוחו של רופא מרדים וטרינרי מוסמך. הנחיות ה-ARRIVE ועקרונות ה-3R נשמרו בקפדנותעל פי 17,18.
הערה: אחסן את כל בעלי החיים בטמפרטורת חדר של 22 \u201224 צלזיוס (°C) ולשמור על מחזור אור/חושך של 12 שעות (שעה). ספק גישה חופשית למים, לכדורים ולדיאטת חציר ad libitum בכל פעם. ניתוחים סטטיסטיים בוצעו באמצעות מבחן וילקוקסון-מאן-וויטני-יו הלא פרמטרי. ערך הסתברותי (p) של ≤ 0.05 נחשב למשמעותי.
1. השלב הקדם-כירורגי
2. שלב כירורגי – שלב I
3. השפלת כיס העורקים
4. שלב כירורגי – שלב II
5. השלב הפוסט-כירורגי
בעקבות סדרת פיילוט של שבעה בעלי חיים, בסך הכל 16 בעלי חיים נכללו בפרוטוקול הניסוי. שני בעלי חיים מתו בטרם עת ולכן לא נכללו בניתוח הסופי (12.5% תמותה). בחישוב של 14 בעלי חיים, שיעור המפרצת המיידית במהלך אנגיוגרפיה פלואורסצנטית היה 71.43% בשניהם, קבוצת הביקורת והשינוי. ארבע מפרצות היו צריכות להיפתח מ?...
המחקר שלנו מדגים את ההיתכנות של יצירת מודל מפרצת ביפורקציה אמיתי עם תנאי קיר שונים בארנבים. בסך הכל, 14 נקבות ארנבות לבנות מניו זילנד עם משקל ממוצע של 3.7 ± 0.09 ק"ג וגיל ממוצע של 112 ± 3 ימים נכללו במחקר. 85.72% מכלל המפרצות נשארו פטנטיות במהלך מעקב לאחר 28 ימים. שני בעלי חיים מתו בטרם עת (12.5% תמותה).
עבודה זו נתמכה על ידי קרנות המחקר של מועצת המחקר, Kantonsspital Aarau, Aarau, שוויץ וקרן המדע הלאומית השוויצרית SNF (310030_182450). המחברים הם האחראים הבלעדיים על העיצוב וההתנהלות של המחקר המוצג ומצהירים על היעדר אינטרסים מתחרים.
המחברים מודים לאולגיקה בסלאק וקיי נטלבק על תמיכתם המצוינת וסיועם הטכני בשלב הפרי-אופרטיבי ולאלסנדרה ברגאדנו, DVM, PhD, על הפיקוח המסור על בריאות בעלי החיים לטווח הארוך.
Name | Company | Catalog Number | Comments |
3-0 resorbable suture | Ethicon Inc., USA | VCP428G | |
4-0 non-absorbable suture | B. Braun, Germany | G0762563 | |
6-0 non-absorbable suture | B. Braun, Germany | C0766070 | |
9-0 non-absorbable suture | B. Braun, Germany | G1111140 | |
Adrenaline | Amino AG | 1445419 | any generic |
Amiodarone | Helvepharm AG | 5078567 | any generic |
Anesthesia machine | Dräger | any other | |
Aspirin | Sanofi-Aventis (Suisse) SA | 622693 | any generic |
Atropine | Labatec Pharma SA | 6577083 | any generic |
Bandpass filter blue | Thorlabs | FD1B | any other |
Bandpass filter green | Thorlabs | FGV9 | any other |
Bipolar forceps | any other | ||
Bicycle spotlight | any other | ||
Biemer vessel clip (2 x) | B. Braun Medical AG, Aesculap, Switzerland | FD560R | temporary |
Bispectral index (neonatal) | any other | ||
Blood pressure cuff (neonatal) | any other | ||
Clamoxyl | GlaxoSmithKline AG | 758808 | any generic |
Dexmedetomidine | Ever Pharma | 136740-1 | any generic |
Electrocardiogram electrodes | any other | ||
Elastase | Sigma Aldrich | 45125 | any generic |
Ephedrine | Amino AG | 1435734 | any generic |
Esmolol | OrPha Swiss GmbH | 3284044 | any generic |
Fentanyl (intravenous use) | Janssen-Cilag AG | 98683 | any generic |
Fentanyl (transdermal) | Mepha Pharma AG | 4008286 | any generic |
Fluoresceine | Curatis AG | 5030376 | any generic |
Fragmin | Pfizer PFE Switzerland GmbH | 1906725 | any generic |
Glyco | any generic | ||
Heating pad | any other | ||
Isotonic sodium chloride solution (0.9%) | Fresenius KABI | 336769 | any generic |
Ketamine | Pfizer | 342261 | any generic |
Laboratory shaker | Stuart | SRT6 | any other |
Lidocaine | Streuli Pharma AG | 747466 | any generic |
Longuettes | any other | ||
Metacam | Boehringer Ingelheim | P7626406 | any generic |
Methadone | Streuli Pharma AG | 1084546 | any generic |
Microtubes | any other | ||
Micro needle holder | any other | ||
Midazolam | Accord Healthcare AG | 7752484 | any generic |
Needle holder | any other | ||
O2-Face mask | any other | ||
Operation microscope | Wild Heerbrugg | any other | |
Papaverine | Bichsel | any generic | |
Prilocaine-lidocaine creme | Emla | any generic | |
Propofol | B. Braun Medical AG, Switzerland | any generic | |
Pulse oxymeter | any generic | ||
Rectal temperature probe (neonatal) | any other | ||
Ropivacaine | Aspen Pharma Schweiz GmbH | 1882249 | any generic |
Scalpell | Swann-Morton | 210 | any other |
Small animal shaver | any other | ||
Smartphone | any other | ||
Soft tissue forceps | any other | ||
Soft tissue spreader | any other | ||
Stainless steel sponge bowls | any other | ||
Sterile micro swabs | any other | ||
Stethoscope | any other | ||
Straight and curved micro-forceps | any other | ||
Straight and curved micro-scissors | any other | ||
Straight and curved forceps | any other | ||
Surgery drape | any other | ||
Surgical scissors | any other | ||
Syringes 1 ml, 2ml and 5 ml | any other | ||
Tris-Buffer | Sigma Aldrich | 93302 | any generic |
Vascular clip applicator | B. Braun, Germany | FT495T | |
Vein and arterial catheter 22 G | any generic | ||
Vitarubin | Streuli Pharma AG | 6847559 | any generic |
Yasargil titan standard clip (2 x) | B. Braun Medical AG, Aesculap, Switzerland | FT242T | temporary |
Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article
Request PermissionThis article has been published
Video Coming Soon
Copyright © 2025 MyJoVE Corporation. All rights reserved