È necessario avere un abbonamento a JoVE per visualizzare questo. Accedi o inizia la tua prova gratuita.
Method Article
Lo sviluppo e la sperimentazione di dispositivi endovascolari per il trattamento dell'aneurisma intracranico è ancora di grande importanza. La maggior parte dei modelli di aneurisma utilizzati oggi mancano delle importanti caratteristiche di una parete degenerata arteriosa o dell'emodinamica di una vera biforcazione. Pertanto, abbiamo mirato a progettare un nuovo modello di biforcazione della sacca arteriosa nei conigli.
Il trattamento endovascolare per gli aneurismi intracranici ha acquisito importanza negli ultimi decenni, di conseguenza vi è una maggiore necessità di testare i dispositivi endovascolari. I modelli animali che rispettano le condizioni reologiche, emodinamiche e della parete dell'aneurisma sono altamente garantiti. Pertanto, lo scopo del presente studio era quello di progettare una nuova tecnica chirurgica standardizzata e riproducibile per creare aneurismi di biforcazione della sacca arteriosa autologa con condizioni della parete non modificate e modificate nei conigli.
Gli aneurismi di biforcazione sono stati creati dall'anastomosi end-to-side dell'arteria carotide comune destra sulla sinistra, entrambi che fungono da arterie madri per la sacca arteriosa, che è stata cucita microchirurgicamente. Gli innesti sono stati prelevati dall'arteria carotide comune destra prossimale, sia per il gruppo di controllo (n = 7, reimpianto autologo immediato) che modificato (n = 7, incubato con 100 unità internazionali di elastasi per 20 minuti prima del reimpianto autologo). La pervietà della sacca e dell'arteria genitore è stata controllata mediante angiografia a fluorescenza immediatamente dopo la creazione. Al follow-up (28 giorni), tutti i conigli sono stati sottoposti ad angiografia a risonanza magnetica potenziata a contrasto e angiografia a fluorescenza seguita da raccolta di aneurisma, valutazione macroscopica e istologica.
Un totale di 16 femmine di conigli bianchi neozelandesi sono stati operati. Due animali sono morti prematuramente. Al follow-up, l'85,72% di tutti gli aneurismi è rimasto brevetto. Entrambi i gruppi hanno rivelato un aumento delle dimensioni dell'aneurisma nel tempo; questo era più pronunciato nel gruppo di controllo (6,48 ± 1,81 mm3 al momento della creazione contro 19,85 ± 6,40 mm3 al follow-up, p = 0,037) che nel gruppo modificato (8,03 ± 1,08 mm3 al momento della creazione vs. 20,29 ± 6,16 mm3 al follow-up, p = 0,054).
I nostri risultati dimostrano l'adeguatezza di questo nuovo modello di coniglio che consente la creazione di aneurismi di biforcazione con diverse condizioni della parete in un approccio microchirurgico. Data l'eccellente pervietà a lungo termine e la proprietà della crescita dell'aneurisma nel tempo, questo modello può servire come uno strumento importante per la valutazione preclinica di nuove terapie endovascolari.
L'emorragia subaracnoidea derivante dalla rottura dell'aneurisma intracranico (IA) può essere efficacemente controllata con tecniche di occlusione endovascolare o microchirurgica 1,2,3,4. Diverse terapie endovascolari, per superare la principale limitazione della recidiva di IA dopo l'avvolgimento, hanno acquisito importanza negli ultimi decenni generando una maggiore necessità di testare i dispositivi endovascolari. Per testare questi nuovi approcci terapeutici, modelli animali appropriati che rispettino le proprietà reologiche, l'emodinamica e le condizioni della parete dell'aneurisma sono altamente giustificati 5,6,7. In questo contesto, studi clinici e preclinici hanno già rivelato l'importante ruolo delle condizioni della parete dell'aneurisma per quanto riguarda la rottura dell'aneurisma e la recidiva dopo l'occlusione, concentrandosi in particolare sulla perdita di cellule murali 7,8,9.
Finora, gli aneurismi sperimentali nei conigli sono stati spesso creati da ceppi dell'arteria carotide comune incubata dall'elastasi (CCA) o da sacche venose suturate in una biforcazione artificiale CCA. 10,11,12,13,14,15,16 Pertanto, non è mai stato descritto un vero modello di biforcazione della sacca arteriosa.
Lo scopo di questo studio era quello di progettare una tecnica sicura, veloce e standardizzata per la creazione microchirurgica di aneurismi di biforcazione con diverse condizioni di parete in un modello di coniglio (Figura 1). Ciò è stato ottenuto suturando sacchetti arteriosi non modificati e modificati in una biforcazione artificiale creata di entrambi i CCA.
Tutte le cure veterinarie sono state eseguite in conformità con le linee guida istituzionali (tutti gli esperimenti sono stati approvati dal Comitato locale per la cura degli animali del Cantone di Berna, Svizzera (BE 108/16)) e condotti sotto la supervisione di un anestesista veterinario certificato dal consiglio. Le linee guida ARRIVE e i principi 3R sono stati rigorosamenteseguiti 17,18.
NOTA: Ospitare tutti gli animali a una temperatura ambiente di 22\u201224 Celsius (°C) e mantenere un ciclo luce/buio di 12 ore (h). Fornire accesso gratuito a dieta ad acqua, pellet e fieno ad libitum ogni volta. Le analisi statistiche sono state eseguite utilizzando il test wilcoxon-Mann-Whitney-U non parametrico. Un valore di probabilità (p) di ≤ 0,05 è stato considerato significativo.
1. Fase prechirurgica
2. Fase chirurgica – Fase I
3. Degradazione arteriosa della sacca
4. Fase chirurgica – Fase II
5. Fase postchirurgica
A seguito di una serie pilota di sette animali, in totale 16 animali sono stati inclusi nel protocollo sperimentale. Due animali sono morti prematuramente e sono stati quindi esclusi dall'analisi finale (mortalità del 12,5%). Calcolato su 14 animali, il tasso di pervietà immediata dell'aneurisma durante l'angiografia a fluorescenza è stato del 71,43% sia nel gruppo di controllo che in quello modificato. Quattro aneurismi hanno dovuto essere riaperti con evacuazione consecutiva del trombo e dopo una ripetuta angiografi...
Il nostro studio dimostra la fattibilità della creazione di un vero modello di aneurisma di biforcazione con diverse condizioni di parete nei conigli. Complessivamente, nello studio sono state incluse 14 femmine di conigli bianchi neozelandesi con un peso medio di 3,7 ± 0,09 kg e un'età media di 112 ± 3 giorni. L'85,72% di tutti gli aneurismi è rimasto brevetto durante un follow-up a 28 giorni. Due animali sono morti prematuramente (12,5% di mortalità).
Studi precedenti hanno suggerito u...
Questo lavoro è stato sostenuto dai fondi di ricerca del Consiglio della ricerca, Kantonsspital Aarau, Aarau, Svizzera e dal Fondo nazionale svizzero per la ricerca scientifica FNS (310030_182450). Gli autori sono gli unici responsabili della progettazione e della conduzione dello studio presentato e non dichiarano interessi concorrenti.
Gli autori ringraziano Olgica Beslac e Kay Nettelbeck per l'ottimo supporto e l'assistenza tecnica durante la fase peri-operatoria e Alessandra Bergadano, DVM, PhD, per la supervisione dedicata della salute animale a lungo termine.
Name | Company | Catalog Number | Comments |
3-0 resorbable suture | Ethicon Inc., USA | VCP428G | |
4-0 non-absorbable suture | B. Braun, Germany | G0762563 | |
6-0 non-absorbable suture | B. Braun, Germany | C0766070 | |
9-0 non-absorbable suture | B. Braun, Germany | G1111140 | |
Adrenaline | Amino AG | 1445419 | any generic |
Amiodarone | Helvepharm AG | 5078567 | any generic |
Anesthesia machine | Dräger | any other | |
Aspirin | Sanofi-Aventis (Suisse) SA | 622693 | any generic |
Atropine | Labatec Pharma SA | 6577083 | any generic |
Bandpass filter blue | Thorlabs | FD1B | any other |
Bandpass filter green | Thorlabs | FGV9 | any other |
Bipolar forceps | any other | ||
Bicycle spotlight | any other | ||
Biemer vessel clip (2 x) | B. Braun Medical AG, Aesculap, Switzerland | FD560R | temporary |
Bispectral index (neonatal) | any other | ||
Blood pressure cuff (neonatal) | any other | ||
Clamoxyl | GlaxoSmithKline AG | 758808 | any generic |
Dexmedetomidine | Ever Pharma | 136740-1 | any generic |
Electrocardiogram electrodes | any other | ||
Elastase | Sigma Aldrich | 45125 | any generic |
Ephedrine | Amino AG | 1435734 | any generic |
Esmolol | OrPha Swiss GmbH | 3284044 | any generic |
Fentanyl (intravenous use) | Janssen-Cilag AG | 98683 | any generic |
Fentanyl (transdermal) | Mepha Pharma AG | 4008286 | any generic |
Fluoresceine | Curatis AG | 5030376 | any generic |
Fragmin | Pfizer PFE Switzerland GmbH | 1906725 | any generic |
Glyco | any generic | ||
Heating pad | any other | ||
Isotonic sodium chloride solution (0.9%) | Fresenius KABI | 336769 | any generic |
Ketamine | Pfizer | 342261 | any generic |
Laboratory shaker | Stuart | SRT6 | any other |
Lidocaine | Streuli Pharma AG | 747466 | any generic |
Longuettes | any other | ||
Metacam | Boehringer Ingelheim | P7626406 | any generic |
Methadone | Streuli Pharma AG | 1084546 | any generic |
Microtubes | any other | ||
Micro needle holder | any other | ||
Midazolam | Accord Healthcare AG | 7752484 | any generic |
Needle holder | any other | ||
O2-Face mask | any other | ||
Operation microscope | Wild Heerbrugg | any other | |
Papaverine | Bichsel | any generic | |
Prilocaine-lidocaine creme | Emla | any generic | |
Propofol | B. Braun Medical AG, Switzerland | any generic | |
Pulse oxymeter | any generic | ||
Rectal temperature probe (neonatal) | any other | ||
Ropivacaine | Aspen Pharma Schweiz GmbH | 1882249 | any generic |
Scalpell | Swann-Morton | 210 | any other |
Small animal shaver | any other | ||
Smartphone | any other | ||
Soft tissue forceps | any other | ||
Soft tissue spreader | any other | ||
Stainless steel sponge bowls | any other | ||
Sterile micro swabs | any other | ||
Stethoscope | any other | ||
Straight and curved micro-forceps | any other | ||
Straight and curved micro-scissors | any other | ||
Straight and curved forceps | any other | ||
Surgery drape | any other | ||
Surgical scissors | any other | ||
Syringes 1 ml, 2ml and 5 ml | any other | ||
Tris-Buffer | Sigma Aldrich | 93302 | any generic |
Vascular clip applicator | B. Braun, Germany | FT495T | |
Vein and arterial catheter 22 G | any generic | ||
Vitarubin | Streuli Pharma AG | 6847559 | any generic |
Yasargil titan standard clip (2 x) | B. Braun Medical AG, Aesculap, Switzerland | FT242T | temporary |
Richiedi autorizzazione per utilizzare il testo o le figure di questo articolo JoVE
Richiedi AutorizzazioneThis article has been published
Video Coming Soon