ניתוח עקומת גדילה חיידקית והיישומים הסביבתיים שלה

Overview

מקור: מעבדות של ד"ר איאן פפר וד"ר צ'ארלס גרבה - אוניברסיטת אריזונה
הפגנה סופרת: לואיזה איקנר

חיידקים הם בין צורות החיים הנפוצות ביותר על פני כדור הארץ. הם נמצאים בכל מערכת אקולוגית וחיוניים לחיי היומיום. לדוגמה, חיידקים משפיעים על מה שאנשים אוכלים, שותים ונושמים, ולמעשה יש יותר תאים חיידקיים בגוף של האדם מאשר תאים יונקים. בגלל החשיבות של חיידקים, עדיף לחקור מינים מסוימים של חיידקים במעבדה. כדי לעשות זאת, חיידקים גדלים בתנאים מבוקרים בתרבות טהורה, כלומר רק סוג אחד של חיידק נמצא בחשבון. חיידקים גדלים במהירות בתרבית טהורה, ומספר התאים גדל באופן דרמטי בפרק זמן קצר. על ידי מדידת קצב הגידול באוכלוסיית התאים לאורך זמן, יש לפתח "עקומת גדילה". זה חשוב כאשר שואפים לנצל או לחסן מספרים ידועים של בידוד חיידקי, למשל כדי לשפר את צמיחת הצמח, להגדיל את ההתכלות של אורגנים רעילים, או לייצר אנטיביוטיקה או מוצרים טבעיים אחרים בקנה מידה תעשייתי.

Procedure

1. אוסף עליקוטים של תרבות חיידקים

  1. יום אחד לפני איסוף נקודות זמן הצמיחה, לחסן 20 מ"ל של ציר סויה טריפטיאז (TSB) בינוני בבקבוקון 50 מ"ל עם E. coli.
  2. דגירה לילה ב 27 °C (5 °F). תקופת דגירה ארוכה יחסית זו גורמת לאוכלוסיית שלב נייחת מסוג בר E. coli של כ 109 CFU / mL.
  3. למחרת, להשתמש 100 μL של התרבות המוכנה כדי לחסן 250 מ"ל של TSB (בבקבוק 500 מ"ל). מערבבים היטב.  הסר aliquot 5-mL ומקרר מיד ב 4 °C (5 °F). זוהי נקודת זמן T = 0 או T0, ועליה להכיל כ- 4 x 105

Log in or to access full content. Learn more about your institution’s access to JoVE content here

Results

לאחר ניסוי ציפוי דילול סדרתי, הנתונים הבאים הושגו. בתחילת הצמיחה המעריכית המיועדת כאן כזמן t = 0, הריכוז הראשוני של תאי חיידקים הוא 1,000 CFU / mL. בזמן t = 6 שעות, ריכוז התאים הוא 16,000 CFU / מ"ל.

עכשיו, X = 2n x 0

איפה: X0 = ריכוז ראשוני של תאים = 1,000 CFU / מ"ל
X = ...

Log in or to access full content. Learn more about your institution’s access to JoVE content here

Application and Summary

ידע על קינטיקה של גדילה חיידקית ומספר חיידקים במדיום תרבית חשוב הן מבחינה מחקרית והן מבחינה מסחרית. במחקר, לעתים קרובות זה קריטי לדעת את מספר החיידקים במדגם, כך שניתן לשכפל את הניסוי, אם יהיה צורך, עם אותם מספרים בדיוק. לדוגמה, במהלך ניסויים שבהם inoculants חיידקים מתווספים לחלקת אדמה, מינימום ש?...

Log in or to access full content. Learn more about your institution’s access to JoVE content here

Tags

Skip to...

0:00

Overview

1:15

Principles of Bacterial Growth Curve Analysis

3:46

Collection of Bacterial Culture Aliquots

5:09

Serial Dilution Plating to Quantify Bacteria

7:19

Counting Colonies and Calculating Mean Generation Time

9:31

Applications

11:50

Summary

Videos from this collection:

article

Now Playing

ניתוח עקומת גדילה חיידקית והיישומים הסביבתיים שלה

Environmental Microbiology

294.6K Views

article

קביעת תכולת הלחות בקרקע

Environmental Microbiology

357.3K Views

article

טכניקה אספטית במדעי הסביבה

Environmental Microbiology

125.3K Views

article

כתמי גרם של חיידקים ממקורות סביבתיים

Environmental Microbiology

98.2K Views

article

הדמיית מיקרואורגניזמים קרקע באמצעות מצג שקופיות מגע ומיקרוסקופיה

Environmental Microbiology

41.8K Views

article

פטריות נלאמנטיות

Environmental Microbiology

55.5K Views

article

הפקת דנ"א קהילתי ממושבות חיידקים

Environmental Microbiology

28.6K Views

article

זיהוי מיקרואורגניזמים סביבתיים עם תגובת שרשרת פולימראז ואלקטרופורזה ג'ל

Environmental Microbiology

44.1K Views

article

ניתוח RNA של דגימות סביבתיות באמצעות RT-PCR

Environmental Microbiology

40.1K Views

article

כימות מיקרואורגניזמים סביבתיים ווירוסים באמצעות qPCR

Environmental Microbiology

47.6K Views

article

ניתוח איכות מים באמצעות אורגניזמים מחוון

Environmental Microbiology

29.2K Views

article

בידוד חיידקים צואתיים מדגימות מים על ידי סינון

Environmental Microbiology

39.0K Views

article

זיהוי בקטריופאג'ים בדגימות סביבתיות

Environmental Microbiology

40.4K Views

article

פולחן ופירום חיידקים מדגימות קרקע

Environmental Microbiology

182.6K Views

article

1 200 אצות באמצעות מתודולוגיה של Culturable

Environmental Microbiology

13.6K Views

JoVE Logo

Privacy

Terms of Use

Policies

Research

Education

ABOUT JoVE

Copyright © 2025 MyJoVE Corporation. All rights reserved