נתמך על ידי NIH 1P01HL089407-01A1 (לורנס, PI), בעלי חיים Core, NIH 1 HL080962 K01-01A2 (מאיירס, PI).

1. עכבר פרוצדורות הרדמה <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בעלי חיים יוסרו מן הכלוב שלהם והניחו בתא טרום ניתוחית בהרדמה אינדוקציה לזירוז גז 2% isoflurane ו 100% חמצן בקצב זרימה של 0.5 ליטר לדקה (מאדה מבוקר). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> עכברים הם מסומם בחדר אינדוקציה הרדמה, להסיר קאמרית הבטן הגחון הוא מגולח עם קוצץ חשמלי, או לשמור בתוך החדר אם מקריח שיער משמש (1 דקות). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אמנם עדיין תחת סדציה, הם שקלו, העיניים משומנים עם משחה עיניים סטרילי, ואז הניח על מכשיר מים חמים במחזור חימום recumbancy הגב תחת הרדמה כללית עם חרוט האף באמצעות isoflurane וחמצן. בשלב זה בשיעור מופחת חמצן 0.2 ליטר לדקה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הבטן הוא ריסס עם פתרון chlorhexidine (diacetate chlorhexidine הוא bacterialcidal במהירות קבועה) וקינח עם גזה סטרילית שלוש פעמים או עד אתר כירורגי נקי. </li></ol> 2. עכבר מיקרו כירורגי ונהלים Recovery <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חתך קו האמצע הגחוני (2 ס&quot;מ) הוא עשה עם איריס מספריים דרך העור ואת דופן הבטן לחשוף את הבטן. 2x2 סטרילית ספוגה מלח גזה משמש כדי לשקף את המעיים אל הצד השמאלי של החיה. עוצר העכבר לשים להדמיה מקום המאפשר של נחות הווריד הנבוב (IVC). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בשלב זה, isoflurane מצטמצם לרמת התחזוקה של 2% ושיעור חמצן נשאר 0.2 ליטר לדקה עד סוף ההליך הכירורגי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> דיסקציה בלאנט הוא הקל באמצעות ספוגית המוליך סטרילית עדינה במיוחד איריס מעוקל half מלקחיים רקמות. יש להקפיד בטיפול ברקמות העכבר כי הם שבירים מאוד. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> סניפי כל צד IVC, מן הוורידים כליות אל הסתעפות הכסל, הם ligated עם 7-0 לא מגיב התפרים prolene. ענפים חזרה נשאר פטנט. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ב-IVC מודל אלקטרוליטי (EIM), מחט 25 גרם נירוסטה, המצורפת חוטי נחושת מצופה כסף (KY-30-1-GRN, Electrospec, דובר, ניו ג&#39;רזי) מוכנס לתוך החשוף הזנב IVC, (איור 1) ואת מיקומו על הקיר הקדמי (האנודה). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חוט נוסף הוא מושתל מתחת לעור השלמת מעגל (קטודה). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הנוכחי של 250 μAmps מעל 15 דקות היה מיושם באמצעות S48 גראס גל מרובע ממריץ ויחידת זרם קבוע (טכנולוגיות דשא, Astro-Med, Inc, West Warwick, RI). התוצאות הנוכחיות ישיר להיווצרות של מוצרים רעילים של אלקטרוליזה כי לשחוק את פני האנדותל של IVC לקידום סביבה thrombogenic היווצרות פקיק הבאים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאחר 15 דקות, המחט מוסרת ו ספוגית כותנה מוחזק בעדינות את האזור כדי למנוע דימום במגע </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אצל בעלי חיים מזויפים, המחט ממוקם לתוך IVC והוציאו אז, ללא יישום של הנוכחי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> האתר laparotomy סגור באופן דו שכבה. המעבדה שלנו משתמשת 5-0 vicryl, תפר סינתטיים, דפוס מתמשך כדי לסגור את דופן הבטן. דבק דבק העור משמש כדי לסגור את העור. אין תפרים חיצוניים להסרה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> עכברים הם התאוששו אז בכלוב עכבר בודדים, נצפו מקרוב שלאחר הניתוח (45 דקות עד 2 שעות) תחת מנורת חימום (מרחק 24 דקות סנטימטרים ספורים כלוב), ואז חזר יחידות דיור המקורי שלהם. משככי כאבים ואנטי דלקתיים יכולים לשמש אם זה לא מפריע מטרת המחקר. ההצדקה המדעית לעכב בתרופות לשיכוך כאבים, וטרינרי, ואישור ICUCA נדרשים. המעבדה שלנו מצא כי עצירות ,0.05-0 0.1 מ&quot;ג / ק&quot;ג SQ הוא משכך כאבים לפני ואחרי הניתוח מצוין עכברים. בנוסף, לידוקאין ב 4mg/kg (0.4 מ&quot;ל / ק&quot;ג של פתרון 1%) יכול להיות חדורים באתר חתך כאשר משככי כאבים מערכתית עשויה לבלבל תוצאות הניסוי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אנחנו בדרך כלל לא חווים שלאחר הניתוח תופעות לוואי בשל DVT. עם זאת, תופעות לוואי שלאחר הניתוח יכול לכלול השפעות המוות הרדמה ספונטנית, איבוד דם כירורגית, ו paresis חלקית עקב הטראומה עצב. בעלי חיים הם איטיים כדי להתאושש יכול להיות מוזן נוטריה ג&#39;ל או לח האוכל מונח על הרצפה של הכלוב כדי להקל על ההתאוששות של החיה. בעלי חיים עם סיבוכים שלאחר הניתוח לנתק צריך להיות מורדמים אנושי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בנקודת זמן מוקצה, המתת החסד מבוצעת אנושי בהתאם להמלצות שנקבעו על ידי הנחיות איגוד הרפואה האמריקני וטרינרית על המתת חסד של מכרסמים. </li></ol> 3. נציג תוצאות EIM הוא מודל לצורות פקיק בנוכחות של זרימת דם רציפה. התמונות הבאות מציגות פרמטרים נחקר במודל זה רומן. <img src="/files/ftp_upload/2737/2737fig1.jpg" alt="איור 1" /> איור 1 באזור אנטומי שבו definesthe ב 25 גרם נירוסטהמחט, חוט נחושת המחובר כסף מצופה (KY-30-1-GRN, Electrospec, דובר, ניו ג&#39;רזי) מוכנס. שים לב הצומת הלימפה קיים כמעט ומסייע כציון דרך כדי למצוא את IVC הזנב. <img src="/files/ftp_upload/2737/2737fig2.jpg" alt="איור 2" /> איור 2: משקל פקיק 2 ימים לאחר EIM של זנים שונים. כצפוי, משקל פקיק היה נמוך ב PAI-1 עכברים KO ו גדול קרישיות יתר דלתא CT עכברים (^ CT). <img src="/files/ftp_upload/2737/2737fig3.jpg" alt="איור 3" /> איור 3: מסיסים P-selectin, יצרנית של פקקת ורידים עמוקה, נמדדה זנים שונים. הרמות הנמוכות ביותר נמצאו PAI-1 עכברים KO ואילו את הרמות הגבוהות ביותר נמצאו אצל עכברים דלתא קרישיות יתר CT. <img src="/files/ftp_upload/2737/2737fig4.jpg" alt="איור 4" /> איור 4 הקשר בין משקל פקיק מסיס ו-P-selectin נמצא זנים שונים. יש לציין, בקבוצה שהפיק את גודל פקיק קצר, מסיסים P-selectin זוהה היה הנמוך ביותר (PAI-1 עכברים KO). בקבוצת שהפיק את גודל פקיק הגדולה ביותר, מסיס P-selectin זוהה היה הגבוה ביותר (קרישיות יתר דלתא CT). <img src="/files/ftp_upload/2737/2737fig5.jpg" alt="איור 5" /> איור 5: על מנת להפגין נוכחות של זרימת דם, אולטרסאונד בוצע בעכברים שעברו EIM. איור 5 מראה את אולטרסאונד שבוצעו עכבר 2 ימים לאחר EIM. לאחר מכן הדגימה היה הקציר. שים לב כי צורת פקיק מציע היווצרות פקיק בנוכחות זרימה

<ol>
	<li>Diaz, J. A., Hawley, A. E., Alvarado, C. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Thrombogenesis+with+continuous+blood+flow+in+the+inferior+vena+cava.+A+novel+mouse+model.">Thrombogenesis with continuous blood flow in the inferior vena cava. A novel mouse model.</a> Thromb Haemost. 104, 366-375 (2010).</li><li>Eitzman, D. T., Westrick, R. J., Nabel, E. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Plasminogen+activator+inhibitor-1+and+vitronectin+promote+vascular+thrombosis+in+mice.">Plasminogen activator inhibitor-1 and vitronectin promote vascular thrombosis in mice.</a> Blood. 95, 577-580 (2000).</li><li>Myers, D., Farris, D., Hawley, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Selectins+influence+thrombosis+in+a+mouse+model+of+experimental+deep+venous+thrombosis.">Selectins influence thrombosis in a mouse model of experimental deep venous thrombosis.</a> J Surg Res. 108, 212-221 (2002).</li><li>Myers, D. D., Hawley, A. E., Farris, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=P-selectin+and+leukocyte+microparticles+are+associated+with+venous+thrombogenesis.">P-selectin and leukocyte microparticles are associated with venous thrombogenesis.</a> J Vasc Surg. 38, 1075-1089 (2003).</li><li>Pierangeli, S. S., Barker, J. H., Stikovac, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+human+IgG+antiphospholipid+antibodies+on+an+in+vivo+thrombosis+model+in+mice.">Effect of human IgG antiphospholipid antibodies on an in vivo thrombosis model in mice.</a> Thromb Haemost. 71, 670-674 (1994).</li><li>Pierangeli, S. S., Liu, X. W., Barker, J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Induction+of+thrombosis+in+a+mouse+model+by+IgG,+IgM+and+IgA+immunoglobulins+from+patients+with+the+antiphospholipid+syndrome.">Induction of thrombosis in a mouse model by IgG, IgM and IgA immunoglobulins from patients with the antiphospholipid syndrome.</a> Thromb Haemost. 74, 1361-1367 (1995).</li></ol>

אין ניגודי אינטרסים הכריז.

העכבר הוא כלי מעולה עבור מחקר בניסויים vivo. לפיכך, פיתוח של מודלים העכבר מקרוב לחקות מחלות או מצבים פתולוגיים הדרושים. מספר פקקת ורידים מודלים העכבר שימשו במחקר DVT כולל: פוטו (2), קיפאון (3-4) וטראומה מכני (5-6). עם זאת, אף אחד מן המודלים האלה משתמשים גירוי האנדותל הפנימי ליצור פקיק בנוכחות של זרימת דם רציפה. EIM, באמצעות גירוי אלקטרוליטי בתוך IVC, מקדם thrombogenesis ורידי ידי הפעלת אנדותל בנוכחות של זרימת הדם (1). זה פשוט מבחינה טכנית, לשחזור בקלות יש שיעור הישרדות גבוה (99%). למרות העובדה כי זרם חשמלי המשמש ליצירת אלקטרוליזה, חום לא נוצר (1). המודל EIM מקרוב המדמה DVT קליניים, ולכן משמש ככלי חשוב לחקר מנגנונים פנימיים של היווצרות ברזולוציה פקיק ו. המודל EIM שימושי גם לקידום גישות טיפוליות חדשות כנגד מחלת פקקת.

<table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><th> שם מגיב </th><th> חברה </th><th> מספר קטלוגי </th><th> הערות (אופציונלי) </th></tr><tr><td> DMEM </td><td> Invitrogen </td><td> ABCD1234 </td><td></td></tr></tbody></table>

electrolytic inferior vena cava model (eim) of venous thrombosis

במודלים של בעלי חיים משמשים תפקיד חיוני פקקת עמוקה מחקר (DVT) ורידי כדי ללמוד היווצרות פקיק, ברזולוציה פקיק ולבחון תרכובות טיפולית פוטנציאל (1). תרכובות חדשות כדי להיות מנוצל לטיפול ומניעת DVT נמצאים כעת בשלבי פיתוח. מסירת פוטנציאל תרכובות אנטגוניסט טיפולית וריד פקוק מושפע כבר בעייתי. בהקשר של יישומים טיפולית, מודל המשתמשת חלקית קיפאון ובעקביות מייצר thrombi בתוך וריד מרכזי הוקם לאחרונה. אלקטרוליטי נחותים הווריד הנבוב Model (EIM) היא במודל עכבר של DVT המאפשר היווצרות פקיק בנוכחות של זרימת דם רציפה. מודל זה מאפשר סוכני טיפולית להיות בקשר עם פקיק באופן דינמי, הוא רגיש יותר מאשר דגמים אחרים של DVT (1). בנוסף, מודל זה פקקת מקרוב המדמה מצבים קליניים של היווצרות פקיק והוא אידיאלי ללמוד תא האנדותל ורידי ההפעלה, הגירה ליקוציט, thrombogenesis ורידי, וכן כדי לבחון יישומים טיפולית (1). המודל EIM היא פשוטה מבחינה טכנית, לשחזור בקלות, יוצר עקבי בגדלים thrombi ומאפשר מדגם גדול (כלומר פקיק קיר וריד) אשר נדרש למטרות אנליטיות.

Watch this Scientific Journal Video about Electrolytic Inferior Vena Cava Model EIM of Venous Thrombosis at JoVE.com

Electrolytic Inferior Vena Cava Model EIM of Venous Thrombosis

אינדוקציה אלקטרוליטי של הפעלת האנדותל אל פני השטח הפנימי של תוצאות הנבוב נחותים קאווה להיווצרות סוג ורידי פקיק עקב הפעלת האנדותל בדם קיפאון חלקי, שני מרכיבים של השלישיה של וירצ&#39;וב.

אלקטרוליטי נחותים הווריד הנבוב Model (EIM) של פקקת ורידים

Animal models serve a vital role in deep venous thrombosis (DVT) research in order to study thrombus formation, thrombus resolution and to test potential ...

electrolytic-inferior-vena-cava-model-eim-of-venous-thrombosis

Research

JoVE Journal

Medicine

Electrolytic Inferior Vena Cava Model (EIM) of Venous Thrombosis

17.0K Views.  University of Michigan. אינדוקציה אלקטרוליטי של הפעלת האנדותל אל פני השטח הפנימי של תוצאות הנבוב נחותים קאווה להיווצרות סוג ורידי פקיק עקב הפעלת האנדותל בדם קיפאון חלקי, שני מרכיבים של השלישיה של וירצ'וב.

Video: Electrolytic Inferior Vena Cava Model EIM of Venous Thrombosis

Mouse Complete Stasis Model of Inferior Vena Cava Thrombosis

Venous thromboembolism (VTE) includes both deep vein thrombosis (DVT) and pulmonary embolism (PE). In the United States (U.S.), the high morbidity and mortality rates make VTE a serious health concern 1-2. After heart disease and stroke, VTE is the third most common vascular disease 3. In the U.S. alone, there is an estimated 900,000 people affected each year, with 300,000 deaths occurring annually 3. A reliable in vivo animal model to study the mechanisms of this disease is necessary.
The advantages of using the mouse complete stasis model of inferior vena cava thrombosis are several. The mouse model allows for the administration of very small volumes of limited availability test agents, reducing costs dramatically. Most promising is the potential for mice with gene knockouts that allow specific inflammatory and coagulation factor functions to be delineated. Current molecular assays allow for the quantitation of vein wall, thrombus, whole blood, and plasma for assays. However, a major concern involving this model is the operative size constraints and the friability of the vessels. Also, due to the small IVC sample weight (mean 0.005 grams) it is necessary to increase animal numbers for accurate statistical analysis for tissue, thrombus, and blood assays such as real-time polymerase chain reaction (RT-PCR), western blot, enzyme-linked immunosorbent (ELISA), zymography, vein wall and thrombus cellular analysis, and whole blood and plasma assays 4-8.
The major disadvantage with the stasis model is that the lack of blood flow inhibits the maximal effect of administered systemic therapeutic agents on the thrombus and vein wall.

The mouse complete stasis model of inferior vena cava thrombosis yields quantifiable amounts of vein wall tissue and thrombus. It has proven useful for evaluating interactions between the vein wall and the occlusive thrombus and in assessing the progression from acute to chronic inflammation.

עכבר דגם השלם הקיפאון של פקקת נחותים הווריד הנבוב

Venous thromboembolism (VTE) includes both deep vein thrombosis (DVT) and pulmonary embolism (PE).  In the United States (U.S.), the high morbidity and ...

Implantation of Inferior Vena Cava Interposition Graft in Mouse Model

Biodegradable scaffolds seeded with bone marrow mononuclear cells (BMCs) are often used for reconstructive surgery to treat congenital cardiac anomalies. The long-term clinical results showed excellent patency rates, however, with significant incidence of stenosis. To investigate the cellular and molecular mechanisms of vascular neotissue formation and prevent stenosis development in tissue engineered vascular grafts (TEVGs), we developed a mouse model of the graft with approximately 1 mm internal diameter. First, the TEVGs were assembled from biodegradable tubular scaffolds fabricated from a polyglycolic acid nonwoven felt mesh coated with &#949;-caprolactone and L-lactide copolymer. The scaffolds were then placed in a lyophilizer, vacuumed for 24 hr, and stored in a desiccator until cell seeding. Second, bone marrow was collected from donor mice and mononuclear cells were isolated by density gradient centrifugation. Third, approximately one million cells were seeded on a scaffold and incubated O/N. Finally, the seeded scaffolds were then implanted as infrarenal vena cava interposition grafts in C57BL/6 mice. The implanted grafts demonstrated excellent patency (&#62;90%) without evidence of thromboembolic complications or aneurysmal formation. This murine model will aid us in understanding and quantifying the cellular and molecular mechanisms of neotissue formation in the TEVG.

To improve our knowledge of cellular and molecular neotissue formation, a murine model of the TEVG was recently developed. The grafts were implanted as infrarenal vena cava interposition grafts in C57BL/6 mice. This model achieves similar results to those achieved in our clinical investigation, but over a far shortened time-course.

השתלה של וריד נבוב חציצת שתל נחותה בעכבר דגם

Biodegradable scaffolds seeded with bone marrow mononuclear cells (BMCs) are often used for reconstructive surgery to treat congenital cardiac anomalies. ...

Ferric Chloride-induced Thrombosis Mouse Model on Carotid Artery and Mesentery Vessel

Severe thrombosis and its ischemic consequences such as myocardial infarction, pulmonary embolism and stroke are major worldwide health issues. The ferric chloride injury is now a well-established technique to rapidly and accurately induce the formation of thrombi in exposed veins or artery of small and large diameter. This model has played a key role in the study of the pathophysiology of thrombosis, in the discovery and validation of novel antithrombotic drugs and in the understanding of the mechanism of action of these new agents. Here, the implementation of this technique on a mesenteric vessel and carotid artery in mice is presented. The method describes how to label circulating leukocytes and platelets with a fluorescent dye and to observe, by intravital microscopy on the exposed mesentery, their accumulation at the injured vessel wall which leads to the formation of a thrombus. On the carotid artery, the occlusion caused by the clot formation is measured by monitoring the blood flow with a Doppler probe.

The FeCl3 induced thrombosis model in mice is described herein. A method to monitor thrombus growth by intravital microscopy observation on a mesenteric vessel and by blood flow measurement in the carotid artery is presented.

פקקת עכבר דגם על עורק ראשי וכלי לפדר מושרה כלוריד Ferric

Severe thrombosis and its ischemic consequences such as myocardial infarction, pulmonary embolism and stroke are major worldwide health issues. The ferric ...

Patch Angioplasty in the Rat Aorta or Inferior Vena Cava

Pericardial patches are commonly used in vascular surgery to close vessels. To facilitate studies of the neointimal hyperplasia that forms on the patch, we developed a rat model of patch angioplasty that can be used in either a vein or an artery, creating a patch venoplasty or a patch arterioplasty, respectively. Technical aspects of this model are discussed. The infra-renal IVC or aorta are dissected and then clamped proximally and distally. A 3 mm venotomy or arteriotomy is performed in the infrarenal inferior vena cava or aorta of 6 to 8 week-old Wistar rats. A bovine pericardial patch (3 mm x 1.5 mm x 0.6 mm) is then used to close the site using a 10-0 nylon suture. Compared to arterial patches, venous patches show increased neointimal thickness on postoperative day 7. This novel model of pericardial patch angioplasty can be used to examine neointimal hyperplasia on vascular biomaterials, as well as to compare the differences between the arterial and venous environments.

We have established a model of pericardial patch angioplasty that can be used in either small-diameter veins or arteries. This model can be used to compare venous and arterial neointimal hyperplasia formation.

תיקון אנגיופלסטיקה בחולדת אב העורקים או נחות Vena Cava

Pericardial patches are commonly used in vascular surgery to close vessels. To facilitate studies of the neointimal hyperplasia that forms on the patch, ...

A Rat Model of Orthotopic Liver Transplantation Using a Novel Magnetic Anastomosis Technique for Suprahepatic Vena Cava Reconstruction

The rat model of orthotopic liver transplantation (OLT) is essential for transplant research. It is a very sophisticated animal model and requires a steep learning curve. The introduction of the cuff technique for anastomosis of the portal vein (PV) and infrahepatic vena cava (IHVC) has significantly simplified the transplant procedure in rats. However, due to the short anterior wall of the recipients' suprahepatic vena cava (SHVC), the cuff technique is very difficult to use for the reconstruction of the SHVC. Most researchers in this field still use the hand-suture technique for SHVC reconstruction, which makes it the bottleneck step in rat orthotopic liver transplantation. The magnetic anastomosis technique (i.e., magnamosis) is a method of connecting two vessels using the attractive force between two magnets. Our recent study has shown that the magnetic anastomosis technique is superior to the hand-suture technique for SHVC reconstruction in rats. In this article, we show a step-by-step protocol for SHVC reconstruction in rats using the novel magnetic anastomosis technique. In this model, the reconstruction of the PV and IHVC was performed by the standard cuff technique, while the reconstruction of the bile duct (BD) was performed by a stent technique. The hepatic re-arterialization was not performed. The magnetic anastomosis technique made SHVC reconstruction much easier and significantly shortened the anphepatic phase. After a reasonable learning curve, even researchers without advanced microsurgical skills can produce reliable and reproducible results using this rat model of OLT.

The reconstruction of the suprahepatic vena cava (SHVC) remains a difficult step in rat orthotopic liver transplantation. In this article, we show a step-by-step protocol for SHVC reconstruction in rats using a novel magnetic anastomosis technique.

מודל עכברוש של Orthotopic השתלת כבד בטכניקה השקה מגנטיים חדשניים עבור שחזור הנבוב Suprahepatic

The rat model of orthotopic liver transplantation (OLT) is essential for transplant research. It is a very sophisticated animal model and requires a steep ...

Ferric Chloride-induced Canine Carotid Artery Thrombosis: A Large Animal Model of Vascular Injury

Occlusive arterial thrombosis leading to cerebral ischemic stroke and myocardial infarction contributes to ~13 million deaths every year globally. Here, we have translated a vascular injury model from a small animal into a large animal (canine), with slight modifications that can be used for pre-clinical screening of prophylactic and thrombolytic agents. In addition to the surgical methods, the modified protocol describes the step-by-step methods to assess carotid artery canalization by angiography, detailed instructions to process both the brain and carotid artery for histological analysis to verify carotid canalization and cerebral hemorrhage, and specific parameters to complete an assessment of downstream thromboembolic events by utilizing magnetic resonance imaging (MRI). In addition, specific procedural changes from the previously well-established small animal model necessary to translate into a large animal (canine) vascular injury are discussed.

Here, we present the modifications necessary to a well characterized and commonly used small animal ferric chloride-induced (FeCl3) carotid artery injury model for use in a large animal vascular injury model. The resulting model can be utilized for pre-clinical trial assessment of both prophylactic and thrombolytic pharmacological and mechanical interventions.

פקקת הברזל ותחמוצת כלוריד-induced הכלבי העורק הראשי: דגם בעל חיים גדול של פגיעה בכלי הדם

Occlusive arterial thrombosis leading to cerebral ischemic stroke and myocardial infarction contributes to ~13 million deaths every year globally. Here, ...

Isometric Contractility Measurement of the Mouse Mesenteric Artery Using Wire Myography

The wire myograph technique is used to assess the contractility of vascular smooth muscles in response to depolarization, GPCR agonists/inhibitors and drugs. It is widely used in many studies on the physiological functions of vascular smooth muscle, the pathogenesis of vascular diseases such as hypertension, and the development of smooth muscle relaxant drugs. The mouse is a widely used model animal with a large pool of disease models and genetically modified strains. We introduced this method to measure the isometric contraction of mouse mesenteric artery in detail. A 1.4-mm segment of mouse mesenteric resistance artery was isolated and mounted on a myograph chamber by passing two steel wires through its lumen. After equilibration and normalization steps, the vessel segment was potentiated by a high-K+ solution twice prior to the contraction assay. As an example of the application of this method in drug development, we measured the relaxant effect of a novel natural substance, neoliensinine, isolated from a Chinese herb, embryos of the lotus seed (Nelumbo nucifera Gaertn.) on mouse mesenteric arteries. The vessel segments mounted on the myograph chamber were stimulated with a high-K+ solution. When the force tension reached a stable sustained phase, cumulative doses of neoliensinine were added to the chamber. We found that neoliensinine had a dose-dependent relaxant effect on smooth muscle contraction, thus suggesting that it bears potential activity against hypertension. In addition, as the vessel segment can survive at least 4 hours after mounting and maintain contractility induced by the high-K+ solution for many times, we suggest that the wire myograph system may be used for the time-consuming process of drug screening.

The wire myograph technique is used to investigate vascular smooth muscle functions and screen new drugs. We report a detailed protocol for measuring the isometric contractility of the mouse mesenteric artery and for screening new relaxants of vascular smooth muscle.

Contractility איזומטרי מדידה של עורק מצע המעי העליון העכבר באמצעות חוט Myography

The wire myograph technique is used to assess the contractility of vascular smooth muscles in response to depolarization, GPCR agonists/inhibitors and ...

Murine Model of Central Venous Stenosis using Aortocaval Fistula with an Outflow Stenosis

Central venous stenosis is an important entity contributing to arteriovenous fistula (AVF) failure. A murine AVF model was modified to create a partial ligation of the inferior vena cava (IVC) in the outflow of the fistula, mimicking central venous stenosis. Technical aspects of this model are introduced. The aorta and IVC are exposed, following an abdominal incision. The infra-renal aorta and IVC are dissected for proximal clamping, and the distal aorta is exposed for puncture. The IVC at the midpoint between the left renal vein and the aortic bifurcation is carefully dissected to place an 8-0 suture beneath the IVC. After clamping the aorta and IVC, an AVF is created by puncturing the infra-renal aorta through both walls into the IVC with a 25 G needle, followed by ligating a 22 G intra-venous (IV) catheter and IVC together. The catheter is then removed, creating a reproducible venous stenosis without occlusion. The aorta and IVC are unclamped after confirming primary hemostasis. This novel model of central vein stenosis is easy to perform, reproducible, and will facilitate studies on AVF failure.

An aortocaval fistula was created by puncturing the murine infra-renal aorta through both walls into the inferior vena cava and was followed by creation of a stenosis in its outflow via partial ligation of the inferior vena cava. This reproducible model can be used to study central venous stenosis.

מודל מורנה של היצרות הורידים המרכזית באמצעות Aortocaval פיסטולה עם היצרות זרימה יוצאת

Central venous stenosis is an important entity contributing to arteriovenous fistula (AVF) failure. A murine AVF model was modified to create a partial ...

Image Acquisition Method for the Sonographic Assessment of the Inferior Vena Cava

Over the past several decades, clinicians have incorporated several applications of diagnostic point-of-care ultrasound (POCUS) into medical decision-making. Among the applications of POCUS, imaging the inferior vena cava (IVC) is practiced by a wide variety of specialties, such as nephrology, emergency medicine, internal medicine, critical care, anesthesiology, pulmonology, and cardiology. Although each specialty uses IVC data in slightly different ways, most medical specialties, at minimum, attempt to use IVC data to make predictions about intravascular volume status. While the relationship between IVC sonographic data and intravascular volume status is complex and highly context-dependent, all clinicians should collect the sonographic data in standardized ways to ensure repeatability. This paper describes standardized IVC image acquisition including patient positioning, transducer selection, probe placement, image optimization, and the pitfalls and limitations of IVC sonographic imaging.&#160;This paper also describes the commonly performed anterior IVC long-axis view and three other views of the IVC that can each provide helpful diagnostic information when the anterior long-axis view is difficult to obtain or interpret.

Point-of-care ultrasound evaluation of the inferior vena cava (IVC) is commonly utilized to identify, among other things, the volume status. Imaging should be performed systematically to ensure repeatability. This manuscript reviews the methods and pitfalls of sonographic IVC examination.

שיטת רכישת תמונה להערכה סונוגרפית של הווריד הנבוב התחתון

Over the past several decades, clinicians have incorporated several applications of diagnostic point-of-care ultrasound (POCUS) into medical ...

Point-Of-Care Ultrasound Screening for Proximal Lower Extremity Deep Venous Thrombosis

Acute lower extremity deep venous thrombosis (DVT) is a serious vascular disorder that requires accurate and early diagnosis to prevent life-threatening sequelae. While whole leg compression ultrasound with color and spectral Doppler is commonly performed in radiology and vascular labs, point-of-care ultrasound (POCUS) is becoming more common in the acute care setting. Providers appropriately trained in focused POCUS can perform a rapid bedside examination with high sensitivity and specificity in critically ill patients. This paper describes a simplified yet validated approach to POCUS by describing a three-zone protocol for lower extremity DVT POCUS image acquisition. The protocol explains the steps in obtaining vascular images at six compression points in the lower extremity. Beginning at the level of the proximal thigh and moving distally to the popliteal space, the protocol guides the user through each of the compression points in a stepwise manner: from the common femoral vein to the femoral and deep femoral vein bifurcation, and, finally, to the popliteal vein. Further, a visual aid is provided that may assist providers during real-time image acquisition. The goal in presenting this protocol is to help make proximal lower extremity DVT exams more accessible and efficient for POCUS users at the patient&#39;s bedside.

Traditionally, lower extremity deep venous thrombosis (DVT) is diagnosed by radiology-performed venous duplex ultrasound. Providers appropriately trained in focused point-of-care ultrasound (POCUS) can perform a rapid bedside examination with high sensitivity and specificity in critically ill patients. We describe the scanning technique for focused POCUS DVT lower extremity examination.

בדיקת אולטרסאונד נקודתית לפקקת ורידים עמוקה בגפיים התחתונות הפרוקסימליות

Acute lower extremity deep venous thrombosis (DVT) is a serious vascular disorder that requires accurate and early diagnosis to prevent life-threatening ...