נתמך על ידי NIH 1P01HL089407-01A1 (לורנס, PI), בעלי חיים Core, NIH 1 HL080962 K01-01A2 (מאיירס, PI).

1. עכבר פרוצדורות הרדמה <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בעלי חיים יוסרו מן הכלוב שלהם והניחו בתא טרום ניתוחית בהרדמה אינדוקציה לזירוז גז 2% isoflurane ו 100% חמצן בקצב זרימה של 0.5 ליטר לדקה (מאדה מבוקר). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> עכברים הם מסומם בחדר אינדוקציה הרדמה, להסיר קאמרית הבטן הגחון הוא מגולח עם קוצץ חשמלי, או לשמור בתוך החדר אם מקריח שיער משמש (1 דקות). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אמנם עדיין תחת סדציה, הם שקלו, העיניים משומנים עם משחה עיניים סטרילי, ואז הניח על מכשיר מים חמים במחזור חימום recumbancy הגב תחת הרדמה כללית עם חרוט האף באמצעות isoflurane וחמצן. בשלב זה בשיעור מופחת חמצן 0.2 ליטר לדקה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הבטן הוא ריסס עם פתרון chlorhexidine (diacetate chlorhexidine הוא bacterialcidal במהירות קבועה) וקינח עם גזה סטרילית שלוש פעמים או עד אתר כירורגי נקי. </li></ol> 2. עכבר מיקרו כירורגי ונהלים Recovery <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חתך קו האמצע הגחוני (2 ס&quot;מ) הוא עשה עם איריס מספריים דרך העור ואת דופן הבטן לחשוף את הבטן. 2x2 סטרילית ספוגה מלח גזה משמש כדי לשקף את המעיים אל הצד השמאלי של החיה. עוצר העכבר לשים להדמיה מקום המאפשר של נחות הווריד הנבוב (IVC). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בשלב זה, isoflurane מצטמצם לרמת התחזוקה של 2% ושיעור חמצן נשאר 0.2 ליטר לדקה עד סוף ההליך הכירורגי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> דיסקציה בלאנט הוא הקל באמצעות ספוגית המוליך סטרילית עדינה במיוחד איריס מעוקל half מלקחיים רקמות. יש להקפיד בטיפול ברקמות העכבר כי הם שבירים מאוד. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> סניפי כל צד IVC, מן הוורידים כליות אל הסתעפות הכסל, הם ligated עם 7-0 לא מגיב התפרים prolene. ענפים חזרה נשאר פטנט. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ב-IVC מודל אלקטרוליטי (EIM), מחט 25 גרם נירוסטה, המצורפת חוטי נחושת מצופה כסף (KY-30-1-GRN, Electrospec, דובר, ניו ג&#39;רזי) מוכנס לתוך החשוף הזנב IVC, (איור 1) ואת מיקומו על הקיר הקדמי (האנודה). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חוט נוסף הוא מושתל מתחת לעור השלמת מעגל (קטודה). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הנוכחי של 250 μAmps מעל 15 דקות היה מיושם באמצעות S48 גראס גל מרובע ממריץ ויחידת זרם קבוע (טכנולוגיות דשא, Astro-Med, Inc, West Warwick, RI). התוצאות הנוכחיות ישיר להיווצרות של מוצרים רעילים של אלקטרוליזה כי לשחוק את פני האנדותל של IVC לקידום סביבה thrombogenic היווצרות פקיק הבאים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאחר 15 דקות, המחט מוסרת ו ספוגית כותנה מוחזק בעדינות את האזור כדי למנוע דימום במגע </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אצל בעלי חיים מזויפים, המחט ממוקם לתוך IVC והוציאו אז, ללא יישום של הנוכחי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> האתר laparotomy סגור באופן דו שכבה. המעבדה שלנו משתמשת 5-0 vicryl, תפר סינתטיים, דפוס מתמשך כדי לסגור את דופן הבטן. דבק דבק העור משמש כדי לסגור את העור. אין תפרים חיצוניים להסרה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> עכברים הם התאוששו אז בכלוב עכבר בודדים, נצפו מקרוב שלאחר הניתוח (45 דקות עד 2 שעות) תחת מנורת חימום (מרחק 24 דקות סנטימטרים ספורים כלוב), ואז חזר יחידות דיור המקורי שלהם. משככי כאבים ואנטי דלקתיים יכולים לשמש אם זה לא מפריע מטרת המחקר. ההצדקה המדעית לעכב בתרופות לשיכוך כאבים, וטרינרי, ואישור ICUCA נדרשים. המעבדה שלנו מצא כי עצירות ,0.05-0 0.1 מ&quot;ג / ק&quot;ג SQ הוא משכך כאבים לפני ואחרי הניתוח מצוין עכברים. בנוסף, לידוקאין ב 4mg/kg (0.4 מ&quot;ל / ק&quot;ג של פתרון 1%) יכול להיות חדורים באתר חתך כאשר משככי כאבים מערכתית עשויה לבלבל תוצאות הניסוי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אנחנו בדרך כלל לא חווים שלאחר הניתוח תופעות לוואי בשל DVT. עם זאת, תופעות לוואי שלאחר הניתוח יכול לכלול השפעות המוות הרדמה ספונטנית, איבוד דם כירורגית, ו paresis חלקית עקב הטראומה עצב. בעלי חיים הם איטיים כדי להתאושש יכול להיות מוזן נוטריה ג&#39;ל או לח האוכל מונח על הרצפה של הכלוב כדי להקל על ההתאוששות של החיה. בעלי חיים עם סיבוכים שלאחר הניתוח לנתק צריך להיות מורדמים אנושי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בנקודת זמן מוקצה, המתת החסד מבוצעת אנושי בהתאם להמלצות שנקבעו על ידי הנחיות איגוד הרפואה האמריקני וטרינרית על המתת חסד של מכרסמים. </li></ol> 3. נציג תוצאות EIM הוא מודל לצורות פקיק בנוכחות של זרימת דם רציפה. התמונות הבאות מציגות פרמטרים נחקר במודל זה רומן. <img src="/files/ftp_upload/2737/2737fig1.jpg" alt="איור 1" /> איור 1 באזור אנטומי שבו definesthe ב 25 גרם נירוסטהמחט, חוט נחושת המחובר כסף מצופה (KY-30-1-GRN, Electrospec, דובר, ניו ג&#39;רזי) מוכנס. שים לב הצומת הלימפה קיים כמעט ומסייע כציון דרך כדי למצוא את IVC הזנב. <img src="/files/ftp_upload/2737/2737fig2.jpg" alt="איור 2" /> איור 2: משקל פקיק 2 ימים לאחר EIM של זנים שונים. כצפוי, משקל פקיק היה נמוך ב PAI-1 עכברים KO ו גדול קרישיות יתר דלתא CT עכברים (^ CT). <img src="/files/ftp_upload/2737/2737fig3.jpg" alt="איור 3" /> איור 3: מסיסים P-selectin, יצרנית של פקקת ורידים עמוקה, נמדדה זנים שונים. הרמות הנמוכות ביותר נמצאו PAI-1 עכברים KO ואילו את הרמות הגבוהות ביותר נמצאו אצל עכברים דלתא קרישיות יתר CT. <img src="/files/ftp_upload/2737/2737fig4.jpg" alt="איור 4" /> איור 4 הקשר בין משקל פקיק מסיס ו-P-selectin נמצא זנים שונים. יש לציין, בקבוצה שהפיק את גודל פקיק קצר, מסיסים P-selectin זוהה היה הנמוך ביותר (PAI-1 עכברים KO). בקבוצת שהפיק את גודל פקיק הגדולה ביותר, מסיס P-selectin זוהה היה הגבוה ביותר (קרישיות יתר דלתא CT). <img src="/files/ftp_upload/2737/2737fig5.jpg" alt="איור 5" /> איור 5: על מנת להפגין נוכחות של זרימת דם, אולטרסאונד בוצע בעכברים שעברו EIM. איור 5 מראה את אולטרסאונד שבוצעו עכבר 2 ימים לאחר EIM. לאחר מכן הדגימה היה הקציר. שים לב כי צורת פקיק מציע היווצרות פקיק בנוכחות זרימה

<ol>
	<li>Diaz, J. A., Hawley, A. E., Alvarado, C. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Thrombogenesis+with+continuous+blood+flow+in+the+inferior+vena+cava.+A+novel+mouse+model.">Thrombogenesis with continuous blood flow in the inferior vena cava. A novel mouse model.</a> Thromb Haemost. 104, 366-375 (2010).</li><li>Eitzman, D. T., Westrick, R. J., Nabel, E. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Plasminogen+activator+inhibitor-1+and+vitronectin+promote+vascular+thrombosis+in+mice.">Plasminogen activator inhibitor-1 and vitronectin promote vascular thrombosis in mice.</a> Blood. 95, 577-580 (2000).</li><li>Myers, D., Farris, D., Hawley, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Selectins+influence+thrombosis+in+a+mouse+model+of+experimental+deep+venous+thrombosis.">Selectins influence thrombosis in a mouse model of experimental deep venous thrombosis.</a> J Surg Res. 108, 212-221 (2002).</li><li>Myers, D. D., Hawley, A. E., Farris, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=P-selectin+and+leukocyte+microparticles+are+associated+with+venous+thrombogenesis.">P-selectin and leukocyte microparticles are associated with venous thrombogenesis.</a> J Vasc Surg. 38, 1075-1089 (2003).</li><li>Pierangeli, S. S., Barker, J. H., Stikovac, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+human+IgG+antiphospholipid+antibodies+on+an+in+vivo+thrombosis+model+in+mice.">Effect of human IgG antiphospholipid antibodies on an in vivo thrombosis model in mice.</a> Thromb Haemost. 71, 670-674 (1994).</li><li>Pierangeli, S. S., Liu, X. W., Barker, J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Induction+of+thrombosis+in+a+mouse+model+by+IgG,+IgM+and+IgA+immunoglobulins+from+patients+with+the+antiphospholipid+syndrome.">Induction of thrombosis in a mouse model by IgG, IgM and IgA immunoglobulins from patients with the antiphospholipid syndrome.</a> Thromb Haemost. 74, 1361-1367 (1995).</li></ol>

אין ניגודי אינטרסים הכריז.

העכבר הוא כלי מעולה עבור מחקר בניסויים vivo. לפיכך, פיתוח של מודלים העכבר מקרוב לחקות מחלות או מצבים פתולוגיים הדרושים. מספר פקקת ורידים מודלים העכבר שימשו במחקר DVT כולל: פוטו (2), קיפאון (3-4) וטראומה מכני (5-6). עם זאת, אף אחד מן המודלים האלה משתמשים גירוי האנדותל הפנימי ליצור פקיק בנוכחות של זרימת דם רציפה. EIM, באמצעות גירוי אלקטרוליטי בתוך IVC, מקדם thrombogenesis ורידי ידי הפעלת אנדותל בנוכחות של זרימת הדם (1). זה פשוט מבחינה טכנית, לשחזור בקלות יש שיעור הישרדות גבוה (99%). למרות העובדה כי זרם חשמלי המשמש ליצירת אלקטרוליזה, חום לא נוצר (1). המודל EIM מקרוב המדמה DVT קליניים, ולכן משמש ככלי חשוב לחקר מנגנונים פנימיים של היווצרות ברזולוציה פקיק ו. המודל EIM שימושי גם לקידום גישות טיפוליות חדשות כנגד מחלת פקקת.

<table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><th> שם מגיב </th><th> חברה </th><th> מספר קטלוגי </th><th> הערות (אופציונלי) </th></tr><tr><td> DMEM </td><td> Invitrogen </td><td> ABCD1234 </td><td></td></tr></tbody></table>

electrolytic inferior vena cava model (eim) of venous thrombosis

במודלים של בעלי חיים משמשים תפקיד חיוני פקקת עמוקה מחקר (DVT) ורידי כדי ללמוד היווצרות פקיק, ברזולוציה פקיק ולבחון תרכובות טיפולית פוטנציאל (1). תרכובות חדשות כדי להיות מנוצל לטיפול ומניעת DVT נמצאים כעת בשלבי פיתוח. מסירת פוטנציאל תרכובות אנטגוניסט טיפולית וריד פקוק מושפע כבר בעייתי. בהקשר של יישומים טיפולית, מודל המשתמשת חלקית קיפאון ובעקביות מייצר thrombi בתוך וריד מרכזי הוקם לאחרונה. אלקטרוליטי נחותים הווריד הנבוב Model (EIM) היא במודל עכבר של DVT המאפשר היווצרות פקיק בנוכחות של זרימת דם רציפה. מודל זה מאפשר סוכני טיפולית להיות בקשר עם פקיק באופן דינמי, הוא רגיש יותר מאשר דגמים אחרים של DVT (1). בנוסף, מודל זה פקקת מקרוב המדמה מצבים קליניים של היווצרות פקיק והוא אידיאלי ללמוד תא האנדותל ורידי ההפעלה, הגירה ליקוציט, thrombogenesis ורידי, וכן כדי לבחון יישומים טיפולית (1). המודל EIM היא פשוטה מבחינה טכנית, לשחזור בקלות, יוצר עקבי בגדלים thrombi ומאפשר מדגם גדול (כלומר פקיק קיר וריד) אשר נדרש למטרות אנליטיות.

Watch this Scientific Journal Video about Electrolytic Inferior Vena Cava Model EIM of Venous Thrombosis at JoVE.com

Electrolytic Inferior Vena Cava Model EIM of Venous Thrombosis

אינדוקציה אלקטרוליטי של הפעלת האנדותל אל פני השטח הפנימי של תוצאות הנבוב נחותים קאווה להיווצרות סוג ורידי פקיק עקב הפעלת האנדותל בדם קיפאון חלקי, שני מרכיבים של השלישיה של וירצ&#39;וב.

אלקטרוליטי נחותים הווריד הנבוב Model (EIM) של פקקת ורידים

Animal models serve a vital role in deep venous thrombosis (DVT) research in order to study thrombus formation, thrombus resolution and to test potential ...

electrolytic-inferior-vena-cava-model-eim-of-venous-thrombosis

Research

JoVE Journal

Medicine

Electrolytic Inferior Vena Cava Model (EIM) of Venous Thrombosis

17.0K Views.  University of Michigan. אינדוקציה אלקטרוליטי של הפעלת האנדותל אל פני השטח הפנימי של תוצאות הנבוב נחותים קאווה להיווצרות סוג ורידי פקיק עקב הפעלת האנדותל בדם קיפאון חלקי, שני מרכיבים של השלישיה של וירצ'וב.

Video: Electrolytic Inferior Vena Cava Model EIM of Venous Thrombosis

Microsurgical Venous Pouch Arterial-Bifurcation Aneurysms in the Rabbit Model: Technical Aspects

For ruptured human cerebral aneurysms endovascular embolization has become an equivalent alternative to aneurysm clipping.1 However, large clinical trials have shown disappointing long-term results with unacceptable high rates of aneurysm recanalization and delayed aneurysm rupture.2 To overcome these problems, animal experimental studies are crucial for the development of better endovascular devices.3-5
Several animal models in rats, rabbits, canines and swine are available.6-8 Comparisons of the different animal models showed the superiority of the rabbit model with regard to hemodynamics and comparability of the coagulation system and cost-effectiveness.9-11 
The venous pouch arterial bifurcation model in rabbits is formed by a venous pouch sutured into an artificially created true bifurcation of both common carotid arteries (CCA). The main advantage of this model are true bifurcational hemodynamics.12 The major drawbacks are the sofar high microsurgical technical demands and high morbidity and mortality rates of up to 50%.13 These limitations have resulted in less frequent use of this aneurysm model in the recent years. These shortcomings could be overcome with improved surgical procedures and modified peri- and postoperative analgetic management and anticoagulation.14-16 Our techniques reported in this paper demonstrate this optimized technique for microsurgical creation of arterial bifurcation aneurysms.

An optimized technique for the microsurgical creation of arterial bifurcation aneurysms mimicking bifurcation human cerebral aneurysms is described. A venous pouch is sutured into an artificially created true bifurcation of both common carotid arteries. Facilitated microsurgical techniques and aggressive postoperative anticoagulation and analgesia lead to minimized morbidity rates and high aneurysm patency rates.

Microsurgical ורידי עורקי פאוץ-הסתעפות מפרצת במודל הארנב: היבטים טכניים

For ruptured human cerebral aneurysms endovascular embolization has become an equivalent alternative to aneurysm clipping.1 However, large clinical trials ...

Mouse Complete Stasis Model of Inferior Vena Cava Thrombosis

Venous thromboembolism (VTE) includes both deep vein thrombosis (DVT) and pulmonary embolism (PE). In the United States (U.S.), the high morbidity and mortality rates make VTE a serious health concern 1-2. After heart disease and stroke, VTE is the third most common vascular disease 3. In the U.S. alone, there is an estimated 900,000 people affected each year, with 300,000 deaths occurring annually 3. A reliable in vivo animal model to study the mechanisms of this disease is necessary.
The advantages of using the mouse complete stasis model of inferior vena cava thrombosis are several. The mouse model allows for the administration of very small volumes of limited availability test agents, reducing costs dramatically. Most promising is the potential for mice with gene knockouts that allow specific inflammatory and coagulation factor functions to be delineated. Current molecular assays allow for the quantitation of vein wall, thrombus, whole blood, and plasma for assays. However, a major concern involving this model is the operative size constraints and the friability of the vessels. Also, due to the small IVC sample weight (mean 0.005 grams) it is necessary to increase animal numbers for accurate statistical analysis for tissue, thrombus, and blood assays such as real-time polymerase chain reaction (RT-PCR), western blot, enzyme-linked immunosorbent (ELISA), zymography, vein wall and thrombus cellular analysis, and whole blood and plasma assays 4-8.
The major disadvantage with the stasis model is that the lack of blood flow inhibits the maximal effect of administered systemic therapeutic agents on the thrombus and vein wall.

The mouse complete stasis model of inferior vena cava thrombosis yields quantifiable amounts of vein wall tissue and thrombus. It has proven useful for evaluating interactions between the vein wall and the occlusive thrombus and in assessing the progression from acute to chronic inflammation.

עכבר דגם השלם הקיפאון של פקקת נחותים הווריד הנבוב

Venous thromboembolism (VTE) includes both deep vein thrombosis (DVT) and pulmonary embolism (PE).  In the United States (U.S.), the high morbidity and ...

Quantitative Analysis and Characterization of Atherosclerotic Lesions in the Murine Aortic Sinus

Atherosclerosis is a disease of the large arteries and a major underlying cause of myocardial infarction and stroke. Several different mouse models have been developed to facilitate the study of the molecular and cellular pathophysiology of this disease. In this manuscript we describe specific techniques for the quantification and characterization of atherosclerotic lesions in the murine aortic sinus and ascending aorta. The advantage of this procedure is that it provides an accurate measurement of the cross-sectional area and total volume of the lesion, which can be used to compare atherosclerotic progression across different treatment groups. This is possible through the use of the valve leaflets as an anatomical landmark, together with careful adjustment of the sectioning angle. We also describe basic staining methods that can be used to begin to characterize atherosclerotic progression. These can be further modified to investigate antigens of specific interest to the researcher. The described techniques are generally applicable to a wide variety of existing and newly created dietary and genetically-induced models of atherogenesis.

We describe procedures to quantify and characterize atherosclerotic lesions in mouse models using precision sectioning of the aortic sinus and ascending aorta combined with histochemical and immunohistochemical analysis.

Atherosclerosis is a disease of the large arteries and a major underlying cause of myocardial infarction and stroke. Several different mouse models have ...

Implantation of Inferior Vena Cava Interposition Graft in Mouse Model

Biodegradable scaffolds seeded with bone marrow mononuclear cells (BMCs) are often used for reconstructive surgery to treat congenital cardiac anomalies. The long-term clinical results showed excellent patency rates, however, with significant incidence of stenosis. To investigate the cellular and molecular mechanisms of vascular neotissue formation and prevent stenosis development in tissue engineered vascular grafts (TEVGs), we developed a mouse model of the graft with approximately 1 mm internal diameter. First, the TEVGs were assembled from biodegradable tubular scaffolds fabricated from a polyglycolic acid nonwoven felt mesh coated with &#949;-caprolactone and L-lactide copolymer. The scaffolds were then placed in a lyophilizer, vacuumed for 24 hr, and stored in a desiccator until cell seeding. Second, bone marrow was collected from donor mice and mononuclear cells were isolated by density gradient centrifugation. Third, approximately one million cells were seeded on a scaffold and incubated O/N. Finally, the seeded scaffolds were then implanted as infrarenal vena cava interposition grafts in C57BL/6 mice. The implanted grafts demonstrated excellent patency (&#62;90%) without evidence of thromboembolic complications or aneurysmal formation. This murine model will aid us in understanding and quantifying the cellular and molecular mechanisms of neotissue formation in the TEVG.

To improve our knowledge of cellular and molecular neotissue formation, a murine model of the TEVG was recently developed. The grafts were implanted as infrarenal vena cava interposition grafts in C57BL/6 mice. This model achieves similar results to those achieved in our clinical investigation, but over a far shortened time-course.

השתלה של וריד נבוב חציצת שתל נחותה בעכבר דגם

Biodegradable scaffolds seeded with bone marrow mononuclear cells (BMCs) are often used for reconstructive surgery to treat congenital cardiac anomalies. ...

Orthotopic Injection of Breast Cancer Cells into the Mammary Fat Pad of Mice to Study Tumor Growth.

Breast cancer growth can be studied in mice using a plethora of models. Genetic manipulation of breast cancer cells may provide insights into the functions of proteins involved in oncogenic progression or help to discover new tumor suppressors. In addition, injecting cancer cells into mice with different genotypes might provide a better understanding of the importance of the stromal compartment. Many models may be useful to investigate certain aspects of disease progression but do not recapitulate the entire cancerous process. In contrast, breast cancer cells engraftment to the mammary fat pad of mice better recapitulates the location of the disease and presence of the proper stromal compartment and therefore better mimics human cancerous disease. In this article, we describe how to implant breast cancer cells into mice orthotopically and explain how to collect tissues to analyse the tumor milieu and metastasis to distant organs. Using this model, many aspects (growth, angiogenesis, and metastasis) of cancer can be investigated simply by providing a proper environment for tumor cells to grow.

Cancer is a complex disease that is influenced by the tissue surrounding the tumor as well as local pro- and anti-inflammatory mediators. Therefore, orthotropic injection models, rather than subcutaneous models may be useful to study cancer progression in a manner that better mimics human pathology.

הזרקת orthotopic של תאי סרטן השד לחלב שומן Pad של עכברים לחקר התפתחות גידול.

Breast cancer growth can be studied in mice using a plethora of models. Genetic manipulation of breast cancer cells may provide insights into the ...

Ferric Chloride-induced Thrombosis Mouse Model on Carotid Artery and Mesentery Vessel

Severe thrombosis and its ischemic consequences such as myocardial infarction, pulmonary embolism and stroke are major worldwide health issues. The ferric chloride injury is now a well-established technique to rapidly and accurately induce the formation of thrombi in exposed veins or artery of small and large diameter. This model has played a key role in the study of the pathophysiology of thrombosis, in the discovery and validation of novel antithrombotic drugs and in the understanding of the mechanism of action of these new agents. Here, the implementation of this technique on a mesenteric vessel and carotid artery in mice is presented. The method describes how to label circulating leukocytes and platelets with a fluorescent dye and to observe, by intravital microscopy on the exposed mesentery, their accumulation at the injured vessel wall which leads to the formation of a thrombus. On the carotid artery, the occlusion caused by the clot formation is measured by monitoring the blood flow with a Doppler probe.

The FeCl3 induced thrombosis model in mice is described herein. A method to monitor thrombus growth by intravital microscopy observation on a mesenteric vessel and by blood flow measurement in the carotid artery is presented.

פקקת עכבר דגם על עורק ראשי וכלי לפדר מושרה כלוריד Ferric

Severe thrombosis and its ischemic consequences such as myocardial infarction, pulmonary embolism and stroke are major worldwide health issues. The ferric ...

Ferric Chloride-induced Murine Thrombosis Models

Arterial thrombosis (blood clot) is a common complication of many systemic diseases associated with chronic inflammation, including atherosclerosis, diabetes, obesity, cancer and chronic autoimmune rheumatologic disorders. Thrombi are the cause of most heart attacks, strokes and extremity loss, making thrombosis an extremely important public health problem. Since these thrombi stem from inappropriate platelet activation and subsequent coagulation, targeting these systems therapeutically has important clinical significance for developing safer treatments. Due to the complexities of the hemostatic system, in vitro experiments cannot replicate the blood-to-vessel wall interactions; therefore, in vivo studies are critical to understand pathological mechanisms of thrombus formation. To this end, various thrombosis models have been developed in mice. Among them, ferric chloride (FeCl3) induced vascular injury is a widely used model of occlusive thrombosis that reports platelet activation and aggregation in the context of an aseptic closed vascular system. This model is based on redox-induced endothelial cell injury, which is simple and sensitive to both anticoagulant and anti-platelets drugs. The time required for the development of a thrombus that occludes blood flow gives a quantitative measure of vascular injury, platelet activation and aggregation that is relevant to thrombotic diseases. We have significantly refined this FeCl3-induced vascular thrombosis model, which makes the data highly reproducible with minimal variation. Here we describe the model and present representative data from several experimental set-ups that demonstrate the utility of this model in thrombosis research.

We report a refined procedure of the ferric chloride (FeCl3)-induced thrombosis models on carotid and mesenteric artery as well as vein, characterized efficiently using intravital microscopy to monitor time to occlusive thrombi formation.

מי כלוריד-induced Ferric מודלים פקקת Murine

Arterial thrombosis (blood clot) is a common complication of many systemic diseases associated with chronic inflammation, including atherosclerosis, ...

Patch Angioplasty in the Rat Aorta or Inferior Vena Cava

Pericardial patches are commonly used in vascular surgery to close vessels. To facilitate studies of the neointimal hyperplasia that forms on the patch, we developed a rat model of patch angioplasty that can be used in either a vein or an artery, creating a patch venoplasty or a patch arterioplasty, respectively. Technical aspects of this model are discussed. The infra-renal IVC or aorta are dissected and then clamped proximally and distally. A 3 mm venotomy or arteriotomy is performed in the infrarenal inferior vena cava or aorta of 6 to 8 week-old Wistar rats. A bovine pericardial patch (3 mm x 1.5 mm x 0.6 mm) is then used to close the site using a 10-0 nylon suture. Compared to arterial patches, venous patches show increased neointimal thickness on postoperative day 7. This novel model of pericardial patch angioplasty can be used to examine neointimal hyperplasia on vascular biomaterials, as well as to compare the differences between the arterial and venous environments.

We have established a model of pericardial patch angioplasty that can be used in either small-diameter veins or arteries. This model can be used to compare venous and arterial neointimal hyperplasia formation.

תיקון אנגיופלסטיקה בחולדת אב העורקים או נחות Vena Cava

Pericardial patches are commonly used in vascular surgery to close vessels. To facilitate studies of the neointimal hyperplasia that forms on the patch, ...

A Rat Model of Orthotopic Liver Transplantation Using a Novel Magnetic Anastomosis Technique for Suprahepatic Vena Cava Reconstruction

The rat model of orthotopic liver transplantation (OLT) is essential for transplant research. It is a very sophisticated animal model and requires a steep learning curve. The introduction of the cuff technique for anastomosis of the portal vein (PV) and infrahepatic vena cava (IHVC) has significantly simplified the transplant procedure in rats. However, due to the short anterior wall of the recipients' suprahepatic vena cava (SHVC), the cuff technique is very difficult to use for the reconstruction of the SHVC. Most researchers in this field still use the hand-suture technique for SHVC reconstruction, which makes it the bottleneck step in rat orthotopic liver transplantation. The magnetic anastomosis technique (i.e., magnamosis) is a method of connecting two vessels using the attractive force between two magnets. Our recent study has shown that the magnetic anastomosis technique is superior to the hand-suture technique for SHVC reconstruction in rats. In this article, we show a step-by-step protocol for SHVC reconstruction in rats using the novel magnetic anastomosis technique. In this model, the reconstruction of the PV and IHVC was performed by the standard cuff technique, while the reconstruction of the bile duct (BD) was performed by a stent technique. The hepatic re-arterialization was not performed. The magnetic anastomosis technique made SHVC reconstruction much easier and significantly shortened the anphepatic phase. After a reasonable learning curve, even researchers without advanced microsurgical skills can produce reliable and reproducible results using this rat model of OLT.

The reconstruction of the suprahepatic vena cava (SHVC) remains a difficult step in rat orthotopic liver transplantation. In this article, we show a step-by-step protocol for SHVC reconstruction in rats using a novel magnetic anastomosis technique.

מודל עכברוש של Orthotopic השתלת כבד בטכניקה השקה מגנטיים חדשניים עבור שחזור הנבוב Suprahepatic

The rat model of orthotopic liver transplantation (OLT) is essential for transplant research. It is a very sophisticated animal model and requires a steep ...

Ferric Chloride-induced Canine Carotid Artery Thrombosis: A Large Animal Model of Vascular Injury

Occlusive arterial thrombosis leading to cerebral ischemic stroke and myocardial infarction contributes to ~13 million deaths every year globally. Here, we have translated a vascular injury model from a small animal into a large animal (canine), with slight modifications that can be used for pre-clinical screening of prophylactic and thrombolytic agents. In addition to the surgical methods, the modified protocol describes the step-by-step methods to assess carotid artery canalization by angiography, detailed instructions to process both the brain and carotid artery for histological analysis to verify carotid canalization and cerebral hemorrhage, and specific parameters to complete an assessment of downstream thromboembolic events by utilizing magnetic resonance imaging (MRI). In addition, specific procedural changes from the previously well-established small animal model necessary to translate into a large animal (canine) vascular injury are discussed.

Here, we present the modifications necessary to a well characterized and commonly used small animal ferric chloride-induced (FeCl3) carotid artery injury model for use in a large animal vascular injury model. The resulting model can be utilized for pre-clinical trial assessment of both prophylactic and thrombolytic pharmacological and mechanical interventions.

פקקת הברזל ותחמוצת כלוריד-induced הכלבי העורק הראשי: דגם בעל חיים גדול של פגיעה בכלי הדם

Occlusive arterial thrombosis leading to cerebral ischemic stroke and myocardial infarction contributes to ~13 million deaths every year globally. Here, ...