מחקר זה היה חלק מ&quot; הפיתוח של טכניקות תפוקה גבוהה לדגימות בשר לצמצם את פער phenomic לתכונות באיכות משתנים בבחירת סיוע סמן &quot;, בסיס פרויקט החקלאות והאגרו מזון קנדה. הסיוע המיומן של יחידת בשר בקר וצוות לעיבוד בשר במרכז מחקר Lacombe כולם החשוב ביותר. המחברים גם רוצים להודות לסיוע הטכני המסור של כריסטין רבידג&#39;-ויד, פראן קוסטלו, גליניס Croken ורונה Thacker.

1. אוסף סטייק <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לדירוג הבא ב24 שעות - 48 שעות שלאחר הטבח, שריר longissimus (או סוף בית החזה ו / או lumborum) יוסר מפגרי בקר ונאסף לניתוח איכות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> השריר גזוז של שומן תת עורי ואת הריבוע. השריר אז הוא חתך לתוך 2.5 ס&quot;מ (1 ב) סטייקים בעקבות בטיחות ופרוטוקולי טיפול במזון. בעקבות החיתוך של סטייקים בודדים, תוויות מתאימות (מספר בעלי חיים, בצד, מיקום שרירים, או שעה) ממוקמות על סטייק בהתאמה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> סטייקים אז הם מוכנים לאחסון. אם הם יישארו טריים, הם ממוקמים על מגש ונלקחו לגריל. אם לא ניתן לבשל את הסטייקים טריים באופן מיידי, הם צריכים להיות מכוסים בפלסטיק עד בישול יכול להתחיל, כדי למנוע התייבשות. אם סטייקים יש ליישון במקרר, או קפוא, במשקל נרשם לשני מקומות עשרוניים לפני שיוצב בתואר ראשון ואקום חבילה בלתי חדיר חמצןגרם ואטום באמצעות מכונת אריזת ואקום. סטייקים ממוקמים אז במקומות האחסון לטווח הארוך שלהם בהתאמה. </li></ol> 2. נוהל בישול <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אם המדגם הוקפא, להסיר מהמקפיא ומניח במקרר 4 מעלות צלזיוס להפשיר לילה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ביום של בישול, גריל פתוח אח מראש לחום עד 210 מעלות צלזיוס במשך בישול מדגם, ולהכין את המערכת לוגר טמפרטורה ומחשב על ידי הוספת צמדים תרמיים לשקעים של מכשיר הסריקה. משמנים את הגריל עם ירקות קיצור כ -10 דקות לפני הבישול מתחיל. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לפני שמתחיל לבשל, ​​להסיר הסטייקים מהמקרר. הסר את המדגם מאריזתה ותמחה לחות עודפת מסטייק עם מגבת נייר. רשום את משקל הגלם של סטייק לשתי ספרות אחרי הנקודה עשרונית. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכנס תרמי לנקודת האמצע של סטייק לאורך ציר האורך שלה. להתחיל בסריקה תרמי להקליט נתונים בישול. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הנחסטייקים על הגריל, שמירה במקביל תרמי למשטח הבישול השטוח של סטייק והגריל. אם הבדיקה לא נשמר במקביל, זה יכול לגרום לקריאות טמפרטורה פסולות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לבשל סטייקים לטמפרטורה פנימית של 35.5 מעלות צלזיוס, ולאחר מכן להתהפך לדוגמא וממשיכה לבשל לטמפרטורה פנימית סופית של 71 ° C. ברגע שהטמפרטורה הפנימית היא 71 מעלות צלזיוס, להסיר הדגימה מהגריל ולמשוך את הצמד תרמי מסטייק. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אם משקל בישול הוא רצוי, לאפשר סטייק להתקרר מעט (1-2 דקות), ולאחר מכן למחוק את המדגם עם מגבת נייר כדי להסיר את הלחות עודפת ולשקול מדגם לשתי ספרות אחרי הנקודה עשרונית. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אם הנתונים של בישול נדרשים, לשמור את נתוני הסריקה התרמיים. </li></ol> 3. התאמת זווית והכנת מדגם <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בעוד המדגם הוא עדיין חם מהגריל, לעשות חתך 1 - 2 ס&quot;מ מהקצה הלטרלי של סטייק כדי ליצור קצה מרובע. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> סעיף 5 ס&quot;מ על פני ערייןה של סטייק מוכנה באמצעות &#39;תיבת שינוי גודל מדגם&#39; עם סכין חריץ ב5 ס&quot;מ, במקביל לקיצוץ המקורי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכיוון של זווית סיב השריר ניתן למדוד על ידי הצבת מד זווית על פני השטח החתך בסכין של סטייק. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> תיבת חיתוך הזווית משתנה תוגדר לאחר מכן לזווית המתאימה של המדגם על ידי הזזה של צלחת המתכת התחתונה מותאמת אישית עם החורים התחתונים עבור מנחה את סכין הלהב הכפול. הדק את הידיות כדי לאבטח את צלחת המתכת הנמוכה בזווית המתאימה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הנח את סעיף 5 ס&quot;מ של סטייק לאזור החיתוך של תיבת חיתוך הזווית משתנה, כך שכיוון סיבי השריר הוא במקביל לזווית של סכין הלהב הכפול. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> סכין הלהב הכפול משמש כדי לחתוך פרוסה 1 ס&quot;מ על פני החתיכה לחתוך בעבר 5 ס&quot;מ, כך להבטיח כי הסכין יעבור דרך כל המדגם בזווית המתאימה. כאשר הנחת סטייק, לוודא שהוא נוגע בקצה של האזור הקרוב ביותר לחיתוךמשתמש, כתנועת חיתוך ימשוך את הסטייק לכיוון המשתמש. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לחתוך, הכנס את סכין הלהב הכפול לתוך תיבת החיתוך ולמשוך את הסכין כדי לחתוך את הבשר לרצועת 1 ס&quot;מ. כדי למנוע קריעה של הבשר, ישתמש בתנועת ניסור קלה בזמן שמושך את הסכין כלפי המשתמש. שמור על להבי הסכינים נגד קצה אחד של צלחת המדריך לשמור על פרופורציות חיתוך שווה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> התוצאה צריכה להיות פרוסה עבה חמה, 1 ס&quot;מ באורך 5 ס&quot;מ, עם הסיבים פועלים במקביל באופן עקבי לפרוסה. פרוסה זה משמש לאחר מכן לניתוח כוח גזירת פרוסת המרקם בבשר. </li></ol> 4. ניתוח כוח גזירה <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כדי לקבוע ניתוח כוח גזירה, פרוסת גזירת כוח הפרוטוקול (SSF) משתמש ב1 ס&quot;מ על 5 ס&quot;מ פרוסה שהושגו עם תיבת חיתוך הזווית משתנה. באמצעות מכונה מנתח מרקם עם להב פרוסת גזירה שטוח, הניתוח מבוצע על פרוסה החמה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכן את מנתח המרקם עם תא מטען 50 ק&quot;ג וסטמרחק הגזירה עד 48 מ&quot;מ, עם ראש צלב מהירות של 500 מ&quot;מ / דקה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הגזירה מתבצעת פעם אחת, בניצב לסיבי השריר כדי לספק ניתוח מדויק של כוח המרבי הנדרש לגזירת הסיבים בפרוסה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ברגע שהפרוסה כבר טעון לחלוטין במרכז השדה, לשמור ולהקליט את הנתונים. </li></ol>

<ol>
	<li>Jayasooriya, S. D., Torley, P. J., D'Arcy, B. R., Bhandari, B. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+high+power+ultrasound+and+ageing+on+the+physical+properties+of+bovine+Semitendinosus+and+Longissimus+muscles.">Effect of high power ultrasound and ageing on the physical properties of bovine Semitendinosus and Longissimus muscles.</a> Meat Science. 75, 628-639 (2007).</li><li>Koohmaraie, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Muscle+proteinases+and+meat+aging.">Muscle proteinases and meat aging.</a> Meat Science. 36, 93-104 (1994).</li><li>Lepetit, J., Culioli, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanical+properties+of+meat.">Mechanical properties of meat.</a> Meat Science. 36, 203-237 (1994).</li><li>Honikel, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reference+methods+supported+by+OECD+and+their+use+in+Mediterranean+meat+products.">Reference methods supported by OECD and their use in Mediterranean meat products.</a> Food Chemistry. 59, 573-582 (1997).</li><li>Monin, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Recent+methods+for+predicting+quality+of+whole+meat.">Recent methods for predicting quality of whole meat.</a> Meat Science. 49, S231-S243 (1998).</li><li>Shackelford, S., Wheeler, T., Koohmaraie, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluation+of+slice+shear+force+as+an+objective+method+of+assessing+beef+longissimus+tenderness.">Evaluation of slice shear force as an objective method of assessing beef longissimus tenderness.</a> Journal of Animal Science. 77, 2693-2699 (1999).</li><li>Ju&#225;rez, M., Hui, Y. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Beef+Texture+and+Juiciness.">Beef Texture and Juiciness.</a> Handbook of meat and meat processing. , 177-206 (2012).</li><li>Kerth, C. R., Montgomery, J. L., Lansdell, J. L., Ramsey, C. B., Miller, M. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Shear+gradient+in+longissimus+steaks.">Shear gradient in longissimus steaks.</a> Journal of Animal Science. 80, 2390-2395 (2002).</li><li>Janz, J. A. M., Aalhus, J. L., Dugan, M. E. R., Price, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+mapping+method+for+the+description+of+Warner-Bratzler+shear+force+gradients+in+beef+Longissimus+thoracis+et+lumborum+and+Semitendinosus.">A mapping method for the description of Warner-Bratzler shear force gradients in beef Longissimus thoracis et lumborum and Semitendinosus.</a> Meat Science. 72, 79-90 (2006).</li><li>Derington, A. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Relationships+of+slice+shear+force+and+Warner-Bratzler+shear+force+of+beef+strip+loin+steaks+as+related+to+the+tenderness+gradient+of+the+strip+loin.">Relationships of slice shear force and Warner-Bratzler shear force of beef strip loin steaks as related to the tenderness gradient of the strip loin.</a> Meat Science. 88, 203-208 (2011).</li><li>Shackelford, S. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Slice+Shear+Force.">Slice Shear Force.</a> Beef Facts. , (2009).</li><li>Henrickson, R. L., Mjoseth, J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tenderness+variation+in+two+bovine+muscles.">Tenderness variation in two bovine muscles.</a> Journal of Animal Science. 23, 325-331 (1964).</li><li>Ju&#225;rez, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantifying+the+relative+contribution+of+ante-+and+post-mortem+factors+to+the+variability+in+beef+texture.">Quantifying the relative contribution of ante- and post-mortem factors to the variability in beef texture.</a> Animal. FirstView, 1-10 (2012).</li><li>Shanks, B. C., Wulf, D. M., Maddock, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Technical+note:+The+effect+of+freezing+on+Warner-Bratzler+shear+force+values+of+beef+longissimus+steaks+across+several+postmortem+aging+periods.">Technical note: The effect of freezing on Warner-Bratzler shear force values of beef longissimus steaks across several postmortem aging periods.</a> Journal of Animal Science. 80, 2122-2125 (2002).</li><li>Lawrence, T. E., King, D. A., Obuz, E., Yancey, E. J., Dikeman, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluation+of+electric+belt+grill,+forced-air+convection+oven,+and+electric+broiler+cookery+methods+for+beef+tenderness+research.">Evaluation of electric belt grill, forced-air convection oven, and electric broiler cookery methods for beef tenderness research.</a> Meat Science. 58, 239-246 (2001).</li><li>Aalhus, J., Ju&#225;rez, M., Aldai, N., Uttaro, B., Dugan, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Meat+preparation+and+eating+quality.">Meat preparation and eating quality.</a> , 1058-1063 (2009).</li><li>Sa&#241;udo, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effects+of+slaughter+weight,+breed+type+and+ageing+time+on+beef+meat+quality+using+two+different+texture+devices.">The effects of slaughter weight, breed type and ageing time on beef meat quality using two different texture devices.</a> Meat Science. 66, 925-932 (2004).</li></ol>

יש לנו מה למסור.

תיבת מתכוונן הזווית מבטיחה להב SSF תמיד המזמרה סיבי שריר בזווית ניצב אמיתית, ולא כ בניצב שיכול לקרות עם חתך 45 זווית של ° 8 קבוע. היישום של תיבת חיתוך הזווית משתנה מאפשר לתיאורים מדויקים יותר של כוח הגזירה המקסימאלי במדגם, וזה על בסיס זה של שיפור טכניקות ניתוח איכות...

רגישות היא אחת התכונות החשובות ביותר באיכות בשר 1. חוסר עקביות בעדינות בשר זוהה כאחת מהבעיות העיקריות שעומדות בפני תעשיית הבשר 2. הבדיקה וורנר-Bratzler גזירת כוח (WBSF), המתאפיינת בבור משולש בצלחת גזירה דווקא במכונה, היא השיטה הנפוצה ביותר בשימוש כדי לציין בשר רגישות חושית 3,4, כפי שהיא בשיטה שסייעה ללא ספק הוכיח את הטוב ביותר מתאם עם ציוני פנל חושיים לקשיחות בשר 5. עם זאת, את פרוסת גזירת כוח הפרוטוקול (SSF) הפך טכניקה חשובה לניתוח מרקם שרירים ורגישות 6, כחלופה לWBSF הפרוטוקול הסטנדרטי 7. זה מועיל במקרים שבם ניתוח מהיר או מספר גבוה של דגימות צריכים להיות מעובד. לSSF, רק אחד ליבה נלקחת מסטייק כאשר הוא עדיין חם, לעומת הליבות מרובות (3-6) שנלקחו בדרך כלל סטייק האחוריאה 24 שעות של קירור לWBSF 6. פרוסה אחת מזה, SSF מנתח את המרקם הממוצע של כל סטייק 8, כפי שהוא כבר נמצא כי רגישות משתנה בין הצדדים המדיאלי לרוחב לשל סטייק 9, עם המרכז ואמצע סטייקים שיש הייצוג הטוב ביותר עבור ממוצע WBSF . הנפילה לSSF היא שבתוך סטייק, מרוחב לצדדים המדיאלי, יש וריאציה בערכי כוח הגזירה 9, עם זאת, על ידי שימוש בתיבת שינוי גודל באופן עקבי כדי להפוך את סעיפי 5 ס&quot;מ, זה עשוי להפחית את השונות שיכולים לבוא מלהשתמש במקטעים של סטייק שונים. עם זאת, מאז כמה סטייקים בגדלים שונים, פרוסת 5 ס&quot;מ עלולה להתרחש במקומות שונים על סטייק, דבר העלול להשפיע על ערכי כוח גזירה 10. מצד השני, תיבת החיתוך המקורית שנועדה להשיג את הסעיף כדי להיות מנותחים בפרוטוקול SSF מאפשרת רק 2 זוויות קבועות, 45 ° ו -90 °, עם זאת, שרירמשנה את האורינטציה של סיבים בתוך סטייקים, ובתוך השריר 11. אקלפורד ו12 וילר אמרו כי זווית longissimus הממוצעת הייתה 43.8 מעלות, שהיו קרוב ל -45 מעלות, ולכן ייחשב כמתאים כאשר דגימות שנאספו מתמיד באותו מיקום. עם זאת, Derington et al. דיווח 11 מגוון בזווית של סיבי השריר לאורך longissimus בין 33.1 ° 53.9 ° ו. לכן, כאשר, למטרות מחקר, כמה סטייקים מאותה החיה צריכים להיות מנותחים, הקצאה כל זוויות סיבים או 45 מעלות או 90 ° פוטנציאליים מפחית את הדיוק. השימוש בתיבת זווית חיתוך משתנה עשויה לספק תיאור מדויק יותר של כוח גזירה מרבי, כפי שיש את היכולת למדוד ולהתאים את זווית החיתוך מאפשר לפרוסה כדי להפעיל באופן עקבי במקביל עם סיבי השריר.

<table border="1">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Name of equipment</td>
			<td>Company</td>
			<td>Catalogue number</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vacuum Packager</td>
			<td>Koch Equipment, Kansas City, MO, USA</td>
			<td>Model UV2100</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vacuum bags</td>
			<td>Winpak Ltd., Winnipeg, MB, Canada</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Thermocouples and Scanning Device</td>
			<td>Agilent / Hewlett Packard, Santa Clara, CA, USA</td>
			<td>34970A Data Acquisition Switch Unit</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Grill</td>
			<td>Garland Commercial Ranges Ltd., Mississauga, ON, Canada</td>
			<td>Model ED-30-B</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Crisco Vegetable Shortening</td>
			<td>The J.M. Smucker Company, Orrville, OH, USA</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sample sizing box</td>
			<td>G-R Manufacturing Co., Manhattan, KS, USA</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Angle adjustable box</td>
			<td>Innovation Centre, Red Deer College, Red Deer, AB, Canada</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Texture Analyzer Machine</td>
			<td>Texture Technologies, Hamilton, MA, USA</td>
			<td>Model TA-XT Plus</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Load Cell, 50 kg</td>
			<td>Texture Technologies, Hamilton, MA, USA</td>
			<td>TA-XT Plus</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>USDA Warner-Bratzler knife w/guillotine block</td>
			<td>Texture Technologies, Hamilton, MA, USA</td>
			<td>TA-7</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Flat rectangle Blade for Slice Shear Force</td>
			<td>Texture Technologies, Hamilton, MA, USA</td>
			<td>TA-7C</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

introducing an angle adjustable cutting box for analyzing slice shear force in meat

מחקרים מצביעים על זווית הסיבים של שריר longissimus יכולה להשתנות, תלוי במיקום בתוך סטייק וברחבי השריר. במקום להשתמש ב45 ° המקורי הקבוע או 90 ° זווית חיתוך לבדיקת כוח גזירה, יכולה להיות מותאמת בתיבת זווית חיתוך משתנה כל כך הזוויות של הסכינים מתאימות לזווית הסיבים של כל דגימה. בתוך 2 דקות לאחר הבישול לטמפרטורה פנימית של 71 מעלות צלזיוס בגריל פתוח אח נקבע על 210 מעלות צלזיוס, 1 ס&quot;מ על 5 ס&quot;מ ליבה נחתך מסטייק, במקביל לכיוון סיבי שריר, באמצעות 2 להבי סכינים להגדיר 1 ס&quot;מ זה מזה. ליבה חמה זה נתונה אז פורסים שאר חיל הפרוטוקול (SSF) כדי להעריך את מרקם בשר. השימוש בתיבת זווית החיתוך משתנה ופרוטוקול SSF מספק ייצוג מדויק של כוח הגזירה המרבי, כפי שסיבי שריר פרוס והם מקבילים באופן עקבי. לכן, תיבת חיתוך הזווית משתנה, בשילוב עם פרוטוקול SSF, יכולה לשמש כגבוהה הטכניקת roughput להעריך במדויק את הבשר רכה במקומות של השרירים longissimus שונים, באופן פוטנציאלי, בשרירים אחרים.

שוורי בשר מסחריים מוגמר שלושים ואחת נטבחו והפגרים שלהם (528-601 ק&quot;ג) פוצלו. על מנת ליצור גיוון ברגישות, צדדים הנכונים היו מאוחסנים באופן מיידי ברמה של 2 מעלות צלזיוס, ואילו צד השמאל הוחזקו ב10 מעלות צלזיוס במשך 3 שעות ולאחר מכן בשעה 2 ° C. את שרירי longissimus מצד ימני ושמאל?...

Watch this Scientific Journal Video about Introducing an Angle Adjustable Cutting Box for Analyzing Slice Shear Force in Meat at JoVE.com

Introducing an Angle Adjustable Cutting Box for Analyzing Slice Shear Force in Meat

כוח גזירת פרוסה הוא שיטת הפניה לניתוח מרקם בשר. באמצעות תיבת חיתוך מתכווננת זווית יכול להגדיל את הדיוק שלו למטרות מחקר. התוצאות ממקומות שונים בתוך<em&gt; Longissimus</em&gt; שריר להראות קורלציה גבוהה עם מתודולוגיה כוח הגזירה וורנר-Bratzler והסתגלות פוטנציאל גבוהה לשרירים שונים.

היכרות עם תיבת חיתוך מתכוונן זווית לניתוח כוח גזירה פרוסת בשר

Research indicates the fibre angle of the longissimus muscle can vary, depending upon location within a steak and throughout the muscle. Instead of using ...

introducing-an-angle-adjustable-cutting-box-for-analyzing-slice-shear

Research

JoVE Journal

Biology

12.8K Views.  Agriculture and Agri-Food Canada. כוח גזירת פרוסה הוא שיטת הפניה לניתוח מרקם בשר. באמצעות תיבת חיתוך מתכווננת זווית יכול להגדיל את הדיוק שלו למטרות מחקר. התוצאות ממקומות שונים בתוך Longissimus שריר להראות קורלציה גבוהה עם מתודולוגיה כוח הגזירה וורנר-Bratzler והסתגלות פוטנציאל גבוהה לשרירים שוני...

Video: Introducing an Angle Adjustable Cutting Box for Analyzing Slice Shear Force in Meat

Organotypic Slice Culture of E18 Rat Brains

Organotypic slice cultures from embryonic rodent brains are widely used to study brain development. While there are often advantages to an in-vivo system, organotypic slice cultures allow one to perform a number of manipulations that are not presently feasible in-vivo. To date, organtotypic embryonic brain slice cultures have been used to follow individual cells using time-lapse microscopy, manipulate the expression of genes in the ganglionic emanances (a region that is hard to target by in-utero electroporation), as well as for pharmacological studies. In this video protocol we demonstrate how to make organotypic slice cultures from rat embryonic day 18 embryos. The protocol involves dissecting the embryos, embedding them on ice in low melt agarose, slicing the embedded brains on the vibratome, and finally plating the slices onto filters in culture dishes. This protocol is also applicable in its present form to making organotypic slice cultures from different embryonic ages for both rats and mice. 

פורסים תרבות Organotypic של E18 מוח החולדה

Organotypic slice cultures from embryonic rodent brains are widely used to study brain development. While there are often advantages to an in-vivo system, ...

Whole-cell Recordings of Light Evoked Excitatory Synaptic Currents in the Retinal Slice

We use the whole-cell patch clamp technique to study the synaptic circuitry that underlies visual information processing in the retina. In this video, we will guide you through the process of performing whole-cell recordings of light evoked currents of individual cells in the retinal slice preparation. We use the aquatic tiger salamander as an animal model. We begin by describing the dissection of the eye and show how slices are mounted for electrophysiological recordings. Once the slice is placed in the recording chamber, we demonstrate how to perform whole-cell voltage clamp recordings. We then project visual stimuli onto the photoreceptors in the slice to elicit light-evoked current responses. During the recording we perfuse the slice with pharmacological agents, whereby an 8-channel perfusion system allows us to quickly switch between different agents.  The retinal slice preparation is widely used for patch clamp recordings in the retina, in particular to study amacrine or bipolar cells, which are not accessible in a whole-mount preparation.

This video shows the process of whole-cell voltage clamp recordings in the retinal slice of the aquatic tiger salamander. We demonstrate the preparation of the slice as well as how to perform patch clamp recordings during visual stimulation of the retina.

שלמות התא הקלטות של אור עורר זרמים Synaptic מעוררים פורסים את רשתית

We use the whole-cell patch clamp technique to study the synaptic circuitry that underlies visual information processing in the retina. In this video, we ...

Identifying Targets of Human microRNAs with the LightSwitch Luciferase Assay System using 3'UTR-reporter Constructs and a microRNA Mimic in Adherent Cells

MicroRNAs (miRNAs) are important regulators of gene expression and play a role in many biological processes. More than 700 human miRNAs have been identified so far with each having up to hundreds of unique target mRNAs. Computational tools, expression and proteomics assays, and chromatin-immunoprecipitation-based techniques provide important clues for identifying mRNAs that are direct targets of a particular miRNA. In addition, 3'UTR-reporter assays have become an important component of thorough miRNA target studies because they provide functional evidence for and quantitate the effects of specific miRNA-3'UTR interactions in a cell-based system. To enable more researchers to leverage 3'UTR-reporter assays and to support the scale-up of such assays to high-throughput levels, we have created a genome-wide collection of human 3'UTR luciferase reporters in the highly-optimized LightSwitch Luciferase Assay System. The system also includes synthetic miRNA target reporter constructs for use as positive controls, various endogenous 3'UTR reporter constructs, and a series of standardized experimental protocols.
Here we describe a method for co-transfection of individual 3'UTR-reporter constructs along with a miRNA mimic that is efficient, reproducible, and amenable to high-throughput analysis.

Identifying Targets of Human microRNAs with the LightSwitch Luciferase Assay System using 3&#039;UTR-reporter Constructs and a microRNA Mimic in Adherent Cells

MicroRNAs (miRNAs) are important regulators of gene expression and have been shown to play a role in numerous biological processes. To better understand miRNA-UTR interactions, we have created a genome-wide collection of 3 UTR luciferase reporters paired with a novel luciferase gene and assay reagent, the LightSwitch system.

זיהוי מטרות של רנ&quot;א האדם עם מערכת Assay בלוציפראז LightSwitch באמצעות 3&#39;UTR-הכתב בונה microRNA מחקים בתאים חסיד

MicroRNAs (miRNAs) are important regulators of gene expression and play a role in many biological processes.  More than 700 human miRNAs have been ...

A Method for Selecting Structure-switching Aptamers Applied to a Colorimetric Gold Nanoparticle Assay

Small molecules provide rich targets for biosensing applications due to their physiological implications as biomarkers of various aspects of human health and performance. Nucleic acid aptamers have been increasingly applied as recognition elements on biosensor platforms, but selecting aptamers toward small molecule targets requires special design considerations. This work describes modification and critical steps of a method designed to select structure-switching aptamers to small molecule targets. Binding sequences from a DNA library hybridized to complementary DNA capture probes on magnetic beads are separated from nonbinders via a target-induced change in conformation. This method is advantageous because sequences binding the support matrix (beads) will not be further amplified, and it does not require immobilization of the target molecule. However, the melting temperature of the capture probe and library is kept at or slightly above RT, such that sequences that dehybridize based on thermodynamics will also be present in the supernatant solution. This effectively limits the partitioning efficiency (ability to separate target binding sequences from nonbinders), and therefore many selection rounds will be required to remove background sequences. The reported method differs from previous structure-switching aptamer selections due to implementation of negative selection steps, simplified enrichment monitoring, and extension of the length of the capture probe following selection enrichment to provide enhanced stringency. The selected structure-switching aptamers are advantageous in a gold nanoparticle assay platform that reports the presence of a target molecule by the conformational change of the aptamer. The gold nanoparticle assay was applied because it provides a simple, rapid colorimetric readout that is beneficial in a clinical or deployed environment. Design and optimization considerations are presented for the assay as proof-of-principle work in buffer to provide a foundation for further extension of the work toward small molecule biosensing in physiological fluids.

A protocol is provided to select structure-switching aptamers for small molecule targets based on a tunable stringency magnetic bead selection method. Aptamers selected with structure-switching properties are beneficial for assays that require a conformational change to signal the presence of a target, such as the described gold nanoparticle assay.

שיטה לבחירת Aptamers מיתוג מבנה יישומית לColorimetric זהב Nanoparticle Assay

Small molecules provide rich targets for biosensing applications due to their physiological implications as biomarkers of various aspects of human health ...

qPCRTag Analysis - A High Throughput, Real Time PCR Assay for Sc2.0 Genotyping

The Synthetic Yeast Genome Project (Sc2.0) aims to build 16 designer yeast chromosomes and combine them into a single yeast cell. To date one synthetic chromosome, synIII1, and one synthetic chromosome arm, synIXR2, have been constructed and their in vivo function validated in the absence of the corresponding wild type chromosomes. An important design feature of Sc2.0 chromosomes is the introduction of PCRTags, which are short, re-coded sequences within open reading frames (ORFs) that enable differentiation of synthetic chromosomes from their wild type counterparts. PCRTag primers anneal selectively to either synthetic or wild type chromosomes and the presence/absence of each type of DNA can be tested using a simple PCR assay. The standard readout of the PCRTag assay is to assess presence/absence of amplicons by agarose gel electrophoresis. However, with an average PCRTag amplicon density of one per 1.5 kb and a genome size of ~12 Mb, the completed Sc2.0 genome will encode roughly 8,000 PCRTags. To improve throughput, we have developed a real time PCR-based detection assay for PCRTag genotyping that we call qPCRTag analysis. The workflow specifies 500 nl reactions in a 1,536 multiwell plate, allowing us to test up to 768 PCRTags with both synthetic and wild type primer pairs in a single experiment.

Designer chromosomes of the Synthetic Yeast Genome project, Sc2.0, can be distinguished from their native counterparts using a PCR-based genotyping assay called PCRTagging, which has a presence/absence endpoint. Here we describe a high-throughput real time PCR detection method for PCRTag genotyping.

qPCRTag ניתוח - תפוקה גבוהה, בזמן אמת PCR Assay עבור Genotyping Sc2.0

The Synthetic Yeast Genome Project (Sc2.0) aims to build 16 designer yeast chromosomes and combine them into a single yeast cell. To date one synthetic ...

Design and Development of Aptamer&#8211;Gold Nanoparticle Based Colorimetric Assays for In-the-field Applications

The design and development of an aptamer&#8211;gold nanoparticle (AuNP) colorimetric assay for the detection of small molecules for in-the-field applications was examined. Target selective AuNP based color assays have been developed in controlled proof-of-concept laboratory settings. However, these schemes have not been exerted to a point of failure to determine their practical use beyond laboratory settings. This work describes a generic approach to design, develop, and troubleshoot an aptamer-AuNP colorimetric assay for small molecule analytes and using the assay for in-the-field settings. The assay is advantageous because adsorbed aptamers passivate the nanoparticle surfaces and provide a means to reduce and eliminate false positive responses to non-target analytes. Transitioning this system to practical uses required defining not only the shelf-life of the aptamer-AuNP assay, but establishing methods and procedures for extending the long-term storage capabilities. Also, one of the recognized concerns with colorimetric readout is the burden placed on analysts to accurately identify often subtle changes in color. To lessen the responsibility on analysts in the field, a color analysis protocol was designed to perform the color identification duties without the need for performing this task on laboratory grade equipment. The method for creating and testing the data analysis protocol is described. However to understand and influence the design of adsorbed aptamer assays, the interactions associated with the aptamer, target, and AuNPs require further study. The knowledge gained could lead to tailoring aptamers for improved functionality.

The design and development of an aptamer&#8211;gold nanoparticle colorimetric assay for the detection of small molecules for in-the-field applications was examined. Additionally, a smart-device colorimetric application (app) was validated and long-term storage of the assay was established for use in the field.

עיצוב ופיתוח של מבוסס Nanoparticle Aptamer-זהב מדד-צבע מבחנים עבור יישומי in-the-השדה

The design and development of an aptamer&#8211;gold nanoparticle (AuNP) colorimetric assay for the detection of small molecules for in-the-field ...

The Assembly and Application of 'Shear Rings': A Novel Endothelial Model for Orbital, Unidirectional and Periodic Fluid Flow and Shear Stress

Deviations from normal levels and patterns of vascular fluid shear play important roles in vascular physiology and pathophysiology by inducing adaptive as well as pathological changes in endothelial phenotype and gene expression. In particular, maladaptive effects of periodic, unidirectional flow induced shear stress can trigger a variety of effects on several vascular cell types, particularly endothelial cells. While by now endothelial cells from diverse anatomic origins have been cultured, in-depth analyses of their responses to fluid shear have been hampered by the relative complexity of shear models (e.g., parallel plate flow chamber, cone and plate flow model). While these all represent excellent approaches, such models are technically complicated and suffer from drawbacks including relatively lengthy and complex setup time, low surface areas, requirements for pumps and pressurization often requiring sealants and gaskets, creating challenges to both maintenance of sterility and an inability to run multiple experiments. However, if higher throughput models of flow and shear were available, greater progress on vascular endothelial shear responses, particularly periodic shear research at the molecular level, might be more rapidly advanced. Here, we describe the construction and use of shear rings: a novel, simple-to-assemble, and inexpensive tissue culture model with a relatively large surface area that easily allows for a high number of experimental replicates in unidirectional, periodic shear stress studies on endothelial cells.

The Assembly and Application of &#039;Shear Rings&#039;: A Novel Endothelial Model for Orbital, Unidirectional and Periodic Fluid Flow and Shear Stress

Different levels and patterns of fluid shear are known to modulate endothelial gene expression, phenotype and susceptibility to disease. We discuss the assembly and use of 'shear rings': a model that produces unidirectional, periodic shear stress patterns. Shear rings are simple to assemble, economical and can produce high cell yields.

האסיפה והיישום של &#39;טבעות Shear&#39;: מודל האנדותל חדשני Orbital, חד-כיוונית תקופתית נוזלי זרימת מתח שאר

Deviations from normal levels and patterns of vascular fluid shear play important roles in vascular physiology and pathophysiology by inducing adaptive as ...

Detecting and Characterizing Protein Self-Assembly In Vivo by Flow Cytometry

Protein self-assembly governs protein function and compartmentalizes cellular processes in space and time. Current methods to study it suffer from low-sensitivity, indirect read-outs, limited throughput, and/or population-level rather than single-cell resolution. We designed a flow cytometry-based single methodology that addresses all of these limitations: Distributed Amphifluoric FRET or DAmFRET. DAmFRET detects and quantifies protein self-assemblies by sensitized emission FRET in vivo, enables deployment across model systems-from yeast to human cells-and achieves sensitive, single-cell, high-throughput read-outs irrespective of protein localization or solubility.

This article describes a FRET-based flow cytometry protocol to quantify protein self-assembly in both S. cerevisiae and HEK293T cells.

גילוי ואפיון הרכבה עצמית של חלבון בVivo על-ידי הזרמת הקיטומטל

Protein self-assembly governs protein function and compartmentalizes cellular processes in space and time. Current methods to study it suffer from ...

Automated Charting of the Visual Space of Housefly Compound Eyes

This paper describes the automatic measurement of the spatial organization of the visual axes of insect compound eyes, which consist of several thousands of visual units called ommatidia. Each ommatidium samples the optical information from a small solid angle, with an approximate Gaussian-distributed sensitivity (half-width on the order of 1&#730;) centered around a visual axis. Together, the ommatidia gather the visual information from a nearly panoramic field of view. The spatial distribution of the visual axes thus determines the eye's spatial resolution. Knowledge of the optical organization of a compound eye and its visual acuity is crucial for quantitative studies of neural processing of the visual information. Here we present an automated procedure for mapping a compound eye's visual axes, using an intrinsic, in vivo optical phenomenon, the pseudopupil, and the pupil mechanism of the photoreceptor cells. We outline the optomechanical setup for scanning insect eyes and use experimental results obtained from a housefly, Musca domestica, to illustrate the steps in the measurement procedure.

The protocol here describes the measurement of the spatial organization of the visual axes of housefly eyes, mapped by an automatic device, using the pseudopupil phenomenon and the pupil mechanism of the photoreceptor cells.

תרשימים אוטומטיים של המרחב החזותי של העיניים המורכבות של Housefly

This paper describes the automatic measurement of the spatial organization of the visual axes of insect compound eyes, which consist of several thousands ...

Collection and Long-Term Maintenance of Leaf-Cutting Ants (Atta) in Laboratory Conditions

Ants are one of the most biodiverse groups of animals on the planet and inhabit different environments. The maintenance of ant colonies in controlled environments enables an enriched comprehension of their biology that can contribute to applied research. This practice is usually employed in population control studies of species that cause economic loss, such as Atta ants. To cultivate their mutualistic fungus, these leaf-cutting ants collect leaves and for this are considered agricultural pests widely distributed throughout the American continent. They are highly socially organized and inhabit elaborated underground nests composed of a variety of chambers. Their maintenance in a controlled environment depends on a daily routine of several procedures and frequent care that are described here. It starts with the collection of queens during the reproductive season (i.e., nuptial flight), which are then individually transferred to plastic containers. Due to the high mortality rate of queens, a second collection can be carried out about 6 months after the nuptial flight, when incipient nests with developed fungus wad are excavated, hand-picked, and placed in plastic containers. In the laboratory, leaves are daily provided to established colonies, and ant-produced waste is weekly removed along with remaining dry plant material. As the fungus garden keeps growing, colonies are transferred to different types of containers according to the experimental purpose. Leaf-cutting ant colonies are placed in interconnected containers, representing the organizational system with functional chambers built by those insects in nature. This setup is ideal to monitor factors such as waste amount, fungus garden health, and the behavior of workers and queen. Facilitated data collection and more detailed observations are considered the greatest advantage of keeping ant colonies in controlled conditions.

Collection and Long-Term Maintenance of Leaf-Cutting Ants Atta in Laboratory Conditions

Here, a protocol is described to successfully collect and maintain healthy Atta (Hymenoptera: Formicidae) ant colonies in laboratory conditions. Additionally, different nest types and configurations are detailed together with possible experimental procedures.

איסוף ותחזוקה ארוכת טווח של נמלים חותכות עלים (Atta) בתנאי מעבדה

Ants are one of the most biodiverse groups of animals on the planet and inhabit different environments. The maintenance of ant colonies in controlled ...