This work was supported by the National Institute on Alcohol Abuse and Alcoholism (RO1 AA014925 awarded to Dr. Patricia H. Janak at University of California, San Francisco, CA, USA), Fonds de recherche du Quebec &#8211; Sant&#233; (NC) and the Natural Sciences and Engineering Research Council (NC, 387224-2010). The open-access publication of this article was made possible by sponsorship from Med Associates Inc.

<ol>
	<li>Field, M., Duka, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cues+paired+with+a+low+dose+of+alcohol+acquire+conditioned+incentive+properties+in+social+drinkers.">Cues paired with a low dose of alcohol acquire conditioned incentive properties in social drinkers.</a> Psychopharmacology (Berl). 159, 325-334 (2002).</li><li>Litt, M. D., Cooney, N. L., Morse, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reactivity+to+alcohol-related+stimuli+in+the+laboratory+and+in+the+field:+predictors+of+craving+in+treated+alcoholics).">Reactivity to alcohol-related stimuli in the laboratory and in the field: predictors of craving in treated alcoholics).</a> Addiction. 95, 889-900 (2000).</li><li>Pomerleau, O. F., Fertig, J., Baker, L., Cooney, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reactivity+to+alcohol+cues+in+alcoholics+and+non-alcoholics:+implications+for+a+stimulus+control+analysis+of+drinking.">Reactivity to alcohol cues in alcoholics and non-alcoholics: implications for a stimulus control analysis of drinking.</a> Addict Behav. 8, 1-10 (1983).</li><li>Sinha, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=New+findings+on+biological+factors+predicting+addiction+relapse+vulnerability.">New findings on biological factors predicting addiction relapse vulnerability.</a> Curr Psychiatry Rep. 13, 398-405 (2011).</li><li>Conklin, C. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Environments+as+cues+to+smoke:+implications+for+human+extinction-based+research+and+treatment.">Environments as cues to smoke: implications for human extinction-based research and treatment.</a> Exp Clin Psychopharmacol. 14, 12-19 (2006).</li><li>Conklin, C. A., Robin, N., Perkins, K. A., Salkeld, R. P., McClernon, F. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Proximal+versus+distal+cues+to+smoke:+the+effects+of+environments+on+smokers'+cue-reactivity.">Proximal versus distal cues to smoke: the effects of environments on smokers' cue-reactivity.</a> Exp Clin Psychopharmacol. 16, 207-214 (2008).</li><li>Janak, P. H., Chaudhri, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+potent+effect+of+environmental+context+on+relapse+to+alcohol-seeking+after+extinction.">The potent effect of environmental context on relapse to alcohol-seeking after extinction.</a> Open Addict J. 3, 76-87 (2010).</li><li>Chaudhri, N., Sahuque, L. L., Cone, J. J., Janak, P. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reinstated+ethanol-seeking+in+rats+is+modulated+by+environmental+context+and+requires+the+nucleus+accumbens+core.">Reinstated ethanol-seeking in rats is modulated by environmental context and requires the nucleus accumbens core.</a> Eur J Neurosci. 28, 2288-2298 (2008).</li><li>Chaudhri, N., Sahuque, L. L., Janak, P. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Context-induced+relapse+of+conditioned+behavioral+responding+to+ethanol+cues+in+rats.">Context-induced relapse of conditioned behavioral responding to ethanol cues in rats.</a> Biol Psychiatry. 64, 203-210 (2008).</li><li>Crombag, H. S., Shaham, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Renewal+of+drug+seeking+by+contextual+cues+after+prolonged+extinction+in+rats.">Renewal of drug seeking by contextual cues after prolonged extinction in rats.</a> Behav Neurosci. 116, 169-173 (2002).</li><li>Fuchs, R. A., Eaddy, J. L., Su, Z. I., Bell, G. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Interactions+of+the+basolateral+amygdala+with+the+dorsal+hippocampus+and+dorsomedial+prefrontal+cortex+regulate+drug+context-induced+reinstatement+of+cocaine-seeking+in+rats.">Interactions of the basolateral amygdala with the dorsal hippocampus and dorsomedial prefrontal cortex regulate drug context-induced reinstatement of cocaine-seeking in rats.</a> Eur J Neurosci. 26, 487-498 (2007).</li><li>Marchant, N. J., Hamlin, A. S., McNally, G. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lateral+hypothalamus+is+required+for+context-induced+reinstatement+of+extinguished+reward+seeking.">Lateral hypothalamus is required for context-induced reinstatement of extinguished reward seeking.</a> J Neurosci. 29, 1331-1342 (2009).</li><li>Zironi, I., Burattini, C., Aicardi, G., Janak, P. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Context+is+a+trigger+for+relapse+to+alcohol.">Context is a trigger for relapse to alcohol.</a> Behav Brain Res. 167, 150-155 (2006).</li><li>Sciascia, J. M., Mendoza, J., Chaudhri, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Blocking+dopamine+D1-like+receptors+attenuates+context-induced+renewal+of+Pavlovian-conditioned+alcohol-seeking+in+rats.">Blocking dopamine D1-like receptors attenuates context-induced renewal of Pavlovian-conditioned alcohol-seeking in rats.</a> Alcohol Clin Exp Res. 38, 418-427 (2014).</li><li>Chaudhri, N., Woods, C. A., Sahuque, L. L., Gill, T. M., Janak, P. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Unilateral+inactivation+of+the+basolateral+amygdala+attenuates+context-induced+renewal+of+Pavlovian-conditioned+alcohol-seeking.">Unilateral inactivation of the basolateral amygdala attenuates context-induced renewal of Pavlovian-conditioned alcohol-seeking.</a> Eur J Neurosci. 38, 2751-2761 (2013).</li><li>Chaudhri, N., Sahuque, L. L., Schairer, W. W., Janak, P. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Separable+roles+of+the+nucleus+accumbens+core+and+shell+in+context-+and+cue-induced+alcohol-seeking.">Separable roles of the nucleus accumbens core and shell in context- and cue-induced alcohol-seeking.</a> Neuropsychopharmacology. 35, 783-791 (2010).</li><li>Sparks, L. M., Sciascia, J. M., Ayorech, Z., Chaudhri, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vendor+differences+in+alcohol+consumption+and+the+contribution+of+dopamine+receptors+to+Pavlovian-conditioned+alcohol-seeking+in+Long-Evans+rats.">Vendor differences in alcohol consumption and the contribution of dopamine receptors to Pavlovian-conditioned alcohol-seeking in Long-Evans rats.</a> Psychopharmacology (Berl). 231, 753-764 (2014).</li><li>Simms, J. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intermittent+access+to+20%+ethanol+induces+high+ethanol+consumption+in+Long-Evans+and+Wistar+rats.">Intermittent access to 20% ethanol induces high ethanol consumption in Long-Evans and Wistar rats.</a> Alcohol Clin Exp Res. 32, 1816-1823 (2008).</li><li>Wise, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Voluntary+ethanol+intake+in+rats+following+exposure+to+ethanol+on+various+schedules.">Voluntary ethanol intake in rats following exposure to ethanol on various schedules.</a> Psychopharmacologia. 29, 203-210 (1973).</li><li>Bouton, M. E., Westbrook, R. F., Corcoran, K. A., Maren, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Contextual+and+temporal+modulation+of+extinction:+behavioral+and+biological+mechanisms.">Contextual and temporal modulation of extinction: behavioral and biological mechanisms.</a> Biol Psychiatry. 60, 352-360 (2006).</li><li>Pavlov, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Conditioned reflexes: an investigation of the physiological activity of the cerebral cortex. , (1927).</li><li>Gibbon, J., Baldock, M. D., Locurto, C., Gold, L., Terrace, H. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Trial+and+intertrial+durations+in+autoshaping.">Trial and intertrial durations in autoshaping.</a> J Exp Psychol Anim Behav Process. 3, 264-284 (1977).</li><li>Holland, P. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=CS-US+interval+as+a+determinant+of+the+form+of+Pavlovian+appetitive+conditioned+responses.">CS-US interval as a determinant of the form of Pavlovian appetitive conditioned responses.</a> J Exp Psychol Anim Behav Process. 6, 155-174 (1980).</li><li>Stein, L., Sidman, M., Brady, J. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Some+effects+of+two+temporal+variables+on+conditioned+suppression.">Some effects of two temporal variables on conditioned suppression.</a> J Exp Anal Behav. 1, 153-162 (1958).</li><li>Coleman, D. A., Hemmes, N. S., Brown, B. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Relative+durations+of+conditioned+stimulus+and+intertrial+interval+in+conditioned+suppression.">Relative durations of conditioned stimulus and intertrial interval in conditioned suppression.</a> J Exp Anal Behav. 46, 51-66 (1986).</li><li>Schwarz-Stevens, K. S., Cunningham, C. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pavlovian+conditioning+of+heart+rate+and+body+temperature+with+morphine:+effects+of+CS+duration.">Pavlovian conditioning of heart rate and body temperature with morphine: effects of CS duration.</a> Behav Neurosci. 107, 1039-1048 (1993).</li><li>Palm, S., Roman, E., Nylander, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Differences+in+voluntary+ethanol+consumption+in+Wistar+rats+from+five+different+suppliers.">Differences in voluntary ethanol consumption in Wistar rats from five different suppliers.</a> Alcohol. 45, 607-614 (2011).</li><li>Gauvin, D. V., Moore, K. R., Holloway, F. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Do+rat+strain+differences+in+ethanol+consumption+reflect+differences+in+ethanol+sensitivity+or+the+preparedness+to+learn.">Do rat strain differences in ethanol consumption reflect differences in ethanol sensitivity or the preparedness to learn.</a> Alcohol. 10, 37-43 (1993).</li><li>Goodwin, F. L., Amit, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Relative+taste+thresholds+for+ethanol,+saccharin,+and+quinine+solutions+in+three+strains+of+rats+nonselected+for+ethanol:+a+comparative+study.">Relative taste thresholds for ethanol, saccharin, and quinine solutions in three strains of rats nonselected for ethanol: a comparative study.</a> Exp Clin Psychopharmacol. 8, 216-224 (2000).</li><li>Goodwin, F. L., Bergeron, N., Amit, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Differences+in+the+consumption+of+ethanol+and+flavored+solutions+in+three+strains+of+rats.">Differences in the consumption of ethanol and flavored solutions in three strains of rats.</a> Pharmacol Biochem Behav. 65, 357-362 (2000).</li><li>Wilson, A. W., Neill, J. C., Costall, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Strain+differences+in+ethanol+preference+and+reinforced+behaviour:+a+comparison+of+two-bottle+choice+and+operant+self-administration+paradigms.">Strain differences in ethanol preference and reinforced behaviour: a comparison of two-bottle choice and operant self-administration paradigms.</a> Behav Pharmacol. 8, 37-46 (1997).</li><li>Yap, C. S., Richardson, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Extinction+in+the+developing+rat:+an+examination+of+renewal+effects.">Extinction in the developing rat: an examination of renewal effects.</a> Dev Psychobiol. 49, 565-575 (2007).</li><li>Carew, M. B., Rudy, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Multiple+functions+of+context+during+conditioning:+a+developmental+analysis.">Multiple functions of context during conditioning: a developmental analysis.</a> Dev Psychobiol. 24, 191-209 (1991).</li><li>Chaudhri, N., Sahuque, L. L., Janak, P. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ethanol+seeking+triggered+by+environmental+context+is+attenuated+by+blocking+dopamine+D1+receptors+in+the+nucleus+accumbens+core+and+shell+in+rats.">Ethanol seeking triggered by environmental context is attenuated by blocking dopamine D1 receptors in the nucleus accumbens core and shell in rats.</a> Psychopharmacology (Berl). 207, 303-314 (2009).</li></ol>

כל הליכי הניסוי אושרו על ידי ועדת האתיקה למחקר בבעלי חיים באוניברסיטת קונקורדיה והנם בהתאם להנחיות מהמועצה הקנדית על טיפול בבעלי חיים. פרסום הגישה הפתוחה של מאמר זה התאפשר בזכות חסות של מד Associates בע&quot;מ

תוצאות מהליך זה עולים כי גירויים סביבתיים בדידים שאופן שיגרתי מלווים משלוח אלכוהול יכולים לרכוש את היכולת לנהוג התנהגות שוחרת אלכוהול. הם גם מראים כי גירויים קונטקסטואליים הקשורים לזמינותו או היעדריו של אלכוהול לפני יכולים להדריך התנו תגובות התנהגותיות לרמזים אלכוהול חזוי בדידים. שלבים קריטיים בפרוטוקול הקשרים במשימה הנוכחית לשלב גירויים שהם חיצוניים לחולדה. עם זאת, מדינת interoceptive של העכברוש בבדיקה יכולה גם להוות &quot;הקשר&quot; שיכול להשפיע על חידוש 20. לכן חשוב להרגיל חולדות לכל נהלים שעלולים להתרחש לפני בדיקת ההתחדשות ולשנות את מצב interoceptive, כמו microinfusions תוך גולגולתי או זריקות מערכתיות. יתר על כן, התרגלות לmicroinfusions או זריקות מערכתיות צריכה להתנהל לפני שתי ההכחדה וPDT שלessions, כדי למנוע נהלים כאלה מלהפוך קשורים בשלב מסוים אחד של הניסוי. פרמטרים זמניים, כגון משך CS, מרווח CS-US, ומרווח intertrial (ITI), כבר מזמן ידועים להשפיע מותנים להגיב במגוון של פרדיגמות אוויר 21-26. באופן דומה, פרמטרים של זמן עשויים להשפיע על ההתבוננות בהשפעת החידוש בהליך שלנו. כל קבוצה של פרמטרים אחרים מאלה שצוינו בפרוטוקול חייבת להיות מאומתת במחקרי טייס ניסוי לפני שתמשיך להעסיק אותם בחקירות גדולות יותר. שינויים ופתרון בעיות המחקר קודם שנעשה מצא כי הכמות של אתנול שחולדות לצרוך בכלוב בבית יכולה להשתנות כפונקציה של הספק שממנו החולדות נרכשות 17,27. ספק הוא אפוא שיקול חשוב עבור שלב זה של המחקר. בדומה לכך, הבחירה של מתח חולדה צריכה להיות שותףnsidered בזהירות, שכן יש דיווחים רבים על הבדלי מתח בצריכת אתנול 28-31. העבודה קודמת בפרדיגמה אוויר מרתיעה הראתה כי הגיל ההתפתחותי של חולדות משפיע על התצפית של התחדשות של תגובת פחד מותנית הפבלובית 32. חוסר השפעת התחדשות בחולדות צעירות מאוד (צעיר יותר מיום הלידה 20) כבר הציע להיות בשל קידוד לקוי של מידע קונטקסטואלי 33. הגיל ההתפתחותי של חולדות שישמשו בהליך הנוכחי ולכן צריך להילקח בחשבון. חידוש הפבלובית אלכוהול התנהגות מסוימת לקבלה מותנית נצפה כאשר 10% 9,16, 15% 14, או 20% 15 פתרונות אתנול שמשו במהלך גישת אתנול כלוב בבית ושלבי PDT של הניסוי. חוקרים יכולים להשתמש בכל ריכוזים של אתנול אלה לצורך הקמת הליך זה בLaboratories. במהלך הרכישה של הכשרת אפליה הפבלובית זה חשוב לבדוק יציאות נוזל לאחר כל פגישה, כדי להבטיח שכל אתנול שנמסר כבר נצרך. השארת חולדות בתאי האוויר ל10 נוספות - 15 דקות לאחר כל פגישה ניתן לעשות זאת בשלב מוקדם בPDT לעודד צריכה של כל אתנול שלא צרך במהלך הפגישה. מספר החולדות עוזבים אתנול unconsumed בנמלים צריך לקטון PDT מתקדם. אם עד סוף חולדות PDT הם או (א) לא לצרוך את כל אתנול ו / או (ב) אינו מגיב ל+ CS אז צריכים להיות ירד נושאים אלה מהמחקר. רוב החולדות באופן מהימן להגיב יותר ל+ CS מאשר CS-. עם זאת, כמה חולדות עשויות להגיב ברמות גבוהות לשניהם הרמזים, ובכך לא הראו סימנים ברורות של אפליה. חולדות שמראות גבוהות מגיבות לשניהם + CS וCS- במהלך PDT לא ירד מהמחקר. מניסיוננו, נושאים אלה להראות אפליה מדהימהבמהלך הפגישה הראשונה הכחדה בהיעדר אתנול, המצביעה על כך הרמות גבוהות שלהם להגיב לCS- במהלך PDT מונעות על ידי הנוכחות של אתנול בנמל הנוזל. נושאים אלה נוטים גם להראות השפעות חידוש חזקות. מגבלות של ההליך בגלל מבחן החידוש מתבצע בהעדר אתנול, ערכי יציאה מותנים שהושרו על ידי + CS להפחית בהדרגה על פני פגישת המבחן. לפיכך, הסכום הכולל של התנהגות שנוצר במבחן, שכנגדה ניתן להעריך שינויים מושרה בניסוי, הוא נמוך למדי. כי במשימה זו מגיבה נוטה להיות גבוהה יותר בתחילת לעומת סוף פגישת הבדיקה, חשוב לבחון את ההשפעות של מניפולציות ניסיוני על מותנה להגיב על בסיס ניסוי על ידי משפט. כניסות לקיבול הנוזלים לספק המידה תלויה העיקרית במשימה זו. עם זאת, כניסת יציאה שגויה עלולה להיות registered אם בעל חיים הוא מספיק קרוב לקיבול הנוזלים כדי לשבור את קרן אינפרא אדום על פני פתיחת נמל הנוזל עם השפם שלו. בעוד תגובות נדירות, שגויות הן ברורות כמו עלייה דרמטית בנמל כולל ערכים ביחס לנושא של ההתנהגות במפגשים קודמים. צילום וידאו בעלי החיים יקל על זיהוי של תגובות שגויות אפשריות, ולאפשר לניתוחים מדויקים יותר של ההתנהגויות הוצגו על ידי החולדות בכל אימון ובדיקה. משמעות של טכניקה ביחס לשיטות קיימות / אלטרנטיביות חידוש מושרה הקשר של סמים התנהגות מסוימות לקבלת מידה רבה למד באמצעות משימת אוויר אינסטרומנטלי שבו המשתנה התלוי העיקרי הוא תגובה אופרנטית, כגון מנוף לחץ 8,34 או האף לתקוע 12. בהליך הנוכחי, התגובה מחפש סמים היא &quot;גישה מותנית&quot; ליציאת הנוזלים שהושרה על ידי מצגות של+ CS. תגובה זו סבירה שנרכשה באמצעות למידה הפבלובית, המהווה את תהליך הלמידה שמתווך את היווצרותם של קשרים בין גירויים הסביבתיים וההשפעות תרופתי של תרופות של התעללות בבני אדם. יישומים עתידיים משימה זו יכולה להיות בשימוש בשילוב עם neuropharmacology, כימיה של מוח optogenetics וללמוד את המנגנונים העצביים המעורבים בחידוש מושרה הקשר של מיזוג הפבלובית שוחר אלכוהול התנהגות 16. בנוסף, מנגנונים התנהגותיים ועצביים המסדירים את הרכישה והכחדה של מיזוג הפבלובית אלכוהול התנהגות מסוימת לקבלה יכולים להיחקר. לבסוף, משימה זו יכולה לשמש כדי לחקור מניפולציות של הכחדה שעלולה למנוע התחדשות, כיוון חשוב למחקר translational נועד להקטין את ההשפעה של תרופה קשורה הקשרים סביבתיים בתגובתיות לרמזים חזוי תרופה לאחר טיפול בחשיפת האות בaddi האנושיCTS.

נותר מפוכח הוא אתגר משמעותי העומד בפני אנשים הסובלים מהפרעות שימוש באלכוהול. התנזרות היא זמן של פגיעות להשפעה התנהגותית, פסיכולוגית ופיזיולוגית של גירויים סביבתיים שאופן שיגרתי מלווים שימוש באלכוהול, אשר יכול, באמצעות אוויר הפבלובית, להיות קשור עם שהכרות 1,2. חשיפה לרמזים חזוי אלכוהול יכולה לעורר תגובה מותנית כמו כמיהה אלכוהול, אשר עשוי לקדם התנהגויות שוחרות אלכוהול המאפשרות 3,4 הישנות. הרצפים הסטריאוטיפיים של התנהגות שיובילו לצריכת אלכוהול יכולים לגרום לסוגים מסוימים של גירויים שחוו באופן מיידי באופן שיגרתי לפני ההשפעות התרופתית של צריכת אלכוהול. לדוגמא, למראה, ריח והטעם של אלכוהול הם מאפיינים חושיים של אלכוהול שאופן מהימן להקדים שיכרון. בנוסף לרמזים כאלה, המכונים פרוקסימה &#39;הבדידה&#39; או &#39;הרמזים &#39;l, הקשרים סביבתיים שבו תרופות משמשות באופן קבוע יכולה גם לעורר תשוקה 5,6. חשיפה למיקומים פיזיים שבו סמים בעבר בשימוש ולכן עשוי להיות גורם קריטי להישנות 7. מודלים של בעלי החיים פותחו כדי לחקור את המנגנונים העצביים המתווכים את ההשפעה של הקשרים הקשורים לסמים בסמי התנהגות מסוימות לקבלה 8-13. ההליך המתואר במסמך זה מאפשר לחקירה כמה הקשרים הקשורים לצריכת אלכוהול יכולים לווסת שוחר אלכוהול התנהגות שהושרה על ידי אות בדידה, אלכוהול חזויה הפבלובית. הכשרת אפליה הפבלובית מתנהלת בהקשר סביבתי ספציפי, שבו חולדות מאומנים התנהגותית להבחין בין שני גירויים שמיעתיים מותנים, + CS שהוא זיווג עם אלכוהול, וCS- שאינו. לאחר מכן מפגשי הכחדה מתבצעים בהקשר אחר, שבו מגיב לCS+ מפחית כתוצאה מאלכוהול נמנעת. בהמשך לכך, reexposure ל, הקשר אימון הפבלובית האלכוהול קשור מפעיל עלייה סלקטיבית בהתנהגות שוחרת אלכוהול שהושרו על ידי + CS, ללא שינוי בתגובה לCS-. תוצאה זו, שיש לנו לשכפל 9,14-16 באופן עקבי, מרחיבה ממצאים מהליכי האוויר סייעו שבהקשרי תרופה כבר נמצאו כדי לעורר את ההתחדשות של תגובות אופרנטית הקשורים למשלוח הסמים 10,13.

<table><tbody><tr><td>Heavy-duty utility cart</td><td>Rubbermaid</td><td>#4520-88</td><td>Used to transport rats in their home cage from the colony room to the behavior room or other facilities</td></tr><tr><td>Rats, Long-Evans</td><td>Harlan</td><td></td><td>Rats weighed 220-240 g on arrival</td></tr><tr><td>Ohaus scale</td><td>Fisher</td><td>#S402421</td><td>For weighing rats; tare the bottom of a plastic container first, then put the rat in it to weigh it</td></tr><tr><td>Beta-chips, aspen</td><td>Harlan</td><td>#7090A</td><td>Bedding for home cage</td></tr><tr><td>Nylabone</td><td>Bio-Serv</td><td>#K3580</td><td>Enrichment provided in the home cage</td></tr><tr><td>Autoclavable rodent chow</td><td>Agribrands, Charles River</td><td>#5075</td><td>For feeding rats</td></tr><tr><td>Wire bar cage lid</td><td>Ancare</td><td>#R20SS2B</td><td>Custom made with two slots for&amp;nbsp; bottles</td></tr><tr><td>Cage bottom</td><td>Ancare</td><td>#R20PC</td><td>To house rats</td></tr><tr><td>Stoppers</td><td>Ancare</td><td>#8.5</td><td>Rubber stoppers to occlude opening in water bottles &amp;amp; graduated cylinders; goes with ball point sipper tubes&amp;nbsp;</td></tr><tr><td>Ball point tubes, 1.5&quot; length</td><td>Ancare</td><td>#TD-99</td><td>Inserted in stoppers, enables rats to drink from water bottles and graduated cylinders</td></tr><tr><td>Water bottles</td><td>Ancare</td><td>#FSPC8HT</td><td>473 ml (16 oz) capacity, needs to be occluded with stopper</td></tr><tr><td>Graduated cylinders, 100 ml</td><td>Fisher</td><td>#0300741</td><td>To contain ethanol during alcohol exposure in the home cage; spouted end needs to be cut off to enable occlusion with stoppers</td></tr><tr><td>Mettler scale</td><td>Mettler Toledo</td><td>#MS6001S</td><td>For weighing water bottles and ethanol cylinders</td></tr><tr><td>Polyethylene tubing, 1/32&quot; inner diameter,&amp;nbsp; 1/32&quot; wall thickness, 3/32&quot; outside diameter</td><td>Fisher</td><td>#14-169-1A</td><td>To connect 20 ml ethanol syringe to fluid port</td></tr><tr><td>Needle, 18 g, 1.5&quot; length</td><td>Fisher</td><td>#B305199</td><td>To connect polyethylene tubing to ethanol syringes; needs to be filed</td></tr><tr><td>Syringes, 20 ml, Luer-Lok non-sterile</td><td>Fisher</td><td>#1482316J</td><td>To contain ethanol on the fluid pumps; needs to be connected to the polyethylene tubing by a 18 G 1 1/2 needle</td></tr><tr><td>Syringes, 60 ml, Luer-Lok non-sterile</td><td>Fisher</td><td>#14-820-11</td><td>To flush polyethylene tubing after PDT sessions</td></tr><tr><td>Single speed syringe pump, 3.33 rpm</td><td>Med Associates Inc.</td><td>#ENV-018MD</td><td>To hold 20 ml ethanol syringes and deliver ethanol</td></tr><tr><td>Fluid port</td><td>Med Associates Inc.</td><td>#ENV-254-CB</td><td>To enable ethanol delivery during PDT sessions; connected to ethanol syringes with polyethylene tubing</td></tr><tr><td>Port entry infrared detector</td><td>Med Associates Inc.</td><td>#ENV-215M</td><td>Fixed on both sides of&amp;nbsp; fluid port; need 2 per fluid port</td></tr><tr><td>Houselight, 28 V, 100 mA</td><td>Med Associates Inc.</td><td>#ENV-135M</td><td>Provides general lighting in conditioning chamber</td></tr><tr><td>Clicker module</td><td>Med Associates Inc.</td><td>#ENV-225SM</td><td>Auditory stimulus for conditioning chamber</td></tr><tr><td>White noise generator with speaker</td><td>Med Associates Inc.</td><td>#PHM-100</td><td>Auditory stimulus for conditioning chamber</td></tr><tr><td>Bar floor</td><td>Med Associates Inc.</td><td>#ENV-009A-GF</td><td>To go with modular test chamber</td></tr><tr><td>Bench coat, absorbent</td><td>VWR</td><td>#89126-790</td><td>Absorbent paper to put in metal tray, needs to be cut to fit the metal tray</td></tr><tr><td>Polycarbonate sheet, 1/8&quot; thick, 12-5/8&quot; x 10&quot;</td><td>Johnston Plastics</td><td>#30102515</td><td>To make smooth transparent floor insert used for context 1. Needs to be cut in 11.5&quot; x 12.25&quot; pieces</td></tr><tr><td>Aluminium sheet perforated, 0.063&quot; thick, 48&quot; x 96&quot;, 0.250&quot; holes x 0.375&quot; centers</td><td>Anica Steel</td><td></td><td>To make perforated floor insert used for context 2. Needs to be cut in 11.5&quot; x 12.25&quot; pieces</td></tr><tr><td>Black cardboard, 0.053&quot; thick, 28&quot; x 44&quot;</td><td>Omer DeSerres</td><td>#P1909</td><td>To construct panels covering the ceiling, door and back wall of the conditioning chamber in context 1. Needs to be cut to size. Each chamber needs three panels measuring approximately 11.5&quot; x 13.25&quot;. The panels can be joined by the narrower side using duct tape.</td></tr><tr><td>All-purpose strength duct tape, 1.88&quot; x 45 yd.</td><td>Duck Tape</td><td></td><td>Adhesive material to connect the black cardboard panels used to cover the back wall, ceiling and door in context 1.</td></tr><tr><td>Modular test chamber</td><td>Med Associates Inc.</td><td>#ENV-009A</td><td>Conditioning chamber</td></tr><tr><td>Sound attenuating cubicles</td><td>Med Associates Inc.</td><td>#ENV-200R3AM</td><td>Comes with installed 28 V DC fan (#ENV-025F)</td></tr><tr><td>Petri dish</td><td>Fisher</td><td>#08748B</td><td>Bottom only, to contain the sprayed solution that provides the odor stimulus; needs to be centered in the metal tray in conditioning chambers</td></tr><tr><td>PCI interface package</td><td>Med Associates Inc.</td><td>#DIG-700P2-R2</td><td>Connects tabletop interface cabinet to computer; includes 1 interface card, 1 Decode card, 1 ribbon cable and 1 28 V DC power cable</td></tr><tr><td>Large tabletop cabinet and power supply</td><td>Med Associates Inc.</td><td>#SG-6510D</td><td>Used to contain the 12 cards included in the SmartCrtrl 8 Input, 16 Output package</td></tr><tr><td>SmartCtrl 8 Input, 16 Output package</td><td>Med Associates Inc.</td><td>#DIG-716P2</td><td>Used to connect and control the devices in the conditioning chamber. The package includes all the cables, the interface module and the connection panel.</td></tr><tr><td>Med PC IV software</td><td>Med Associates Inc.</td><td>#SOF-735</td><td>Software to run programs. Needs to be installed on the computer.</td></tr><tr><td>Monitor LG, 19&quot; LCD</td><td>Concordia computer store</td><td>#W1942TQ-BF</td><td>Computer monitor; to go with computer running Med PC IV</td></tr><tr><td>HP Z200 tower workstation</td><td>Concordia computer store</td><td>#BZ788US#ABA</td><td>Computer on which Med PC IV is run</td></tr><tr><td>Benzaldehyde, &amp;ge;99%</td><td>Les produits chimiques OMEGA Chemical Company Inc.</td><td>#B37-50</td><td>Dilute in tap water for almond context odor</td></tr><tr><td>Lemon oil, cold pressed, California</td><td>Sigma Aldrich</td><td>#W262528-1KG-K</td><td>Dilute in tap water for lemon context odor</td></tr><tr><td>Ethyl alcohol, 95%</td><td>Commercial Alcohols</td><td></td><td>Dilute in tap water to desired concentration</td></tr></tbody></table>

a procedure to observe context-induced renewal of pavlovian-conditioned alcohol-seeking behavior in rats

הקשרים סביבתיים שבו תרופות של התעללות נצרכות יכולים לעורר תשוקה, תגובה ממוזג הפבלובית סובייקטיבית שיכול להקל על תרופת התנהגות מסוימת לקבלה וחזרה מהירה במשתמשים בסמים מתנזרים. פיתחנו הליך לחקור את התהליכים התנהגותיים ועצביים המתווכים את ההשפעה של הקשר על אלכוהול התנהגות מסוימת לקבלה בחולדות. בעקבות הסתגלות לטעם והשפעות תרופתית של אתנול 15% בכלוב בבית, חולדות הארוכות אוונס גבריים לקבל הכשרה הפבלובית אפליה (PDT) בתאי אוויר. בכל מפגש (שני עד שישי) PDT יומי, 16 ניסויים כל אחד משני גירויים שמיעתיים 10 שניות שונות מותנים להתרחש. במהלך גירוי אחד, + CS, 0.2 מ&quot;ל של 15% אתנול מועבר ליציאת נוזלים לצריכה דרך הפה. הגירוי השני, CS-, לא יחד עם אתנול. מעבר הפעלות, כניסות לנמל הנוזלים במהלך עליית CS +, ואילו ערכים במהלך CS- יתייצבו ברמה נמוכה יותר, מצביעים על כך שprediעמותת ctive בין + CS ואתנול נרכשה. במהלך PDT כל תא מצויד בתצורה ספציפית של גירויים חזותיים קונטקסטואליים, חוש הריח ומישוש. בעקבות PDT, אימון הכחדה מתבצע באותו חדר שכעת מצויד בתצורה של גירויים קונטקסטואליים שונה. + CS וCS- מוצגים כמו קודם, אבל אתנול הוא נמנע, מה שגורם לירידה הדרגתית בערכי נמל ב+ CS. בבדיקה, חולדות ממוקמות בחזרה לתוך הקשר PDT ומוצגות עם + CS וCS- כמו קודם, אך ללא אתנול. מניפולציה זו מעוררת עלייה חזקה ובררנית במספר כניסות נמל שבוצעו במהלך האלכוהול חזוי CS +, ללא שינוי בלהגיב במהלך CS-. אפקט זה, המכונה התחדשות מושרה הקשר, ממחיש את היכולת רבת עוצמה של הקשרים הקשורים לצריכת אלכוהול כדי לעורר התנהגות שוחרת אלכוהול בתגובה לרמזים אלכוהול הפבלובית.

גישה לסירוגין אתנול בכלוב בבית: צריכת אתנול (ז / קילוגרם) ועליית העדפת אתנול על פני הפעלות של גישת אתנול לסירוגין בכלוב בבית, בדרך כלל להגיע לרמות יציבים בתוך 8 - 12 מפגשים (איור 1). בערכת הנתונים מוצגת באיור 1, צריכת אתנול יציבה בממוצע על פני שתי הפגישות האחרונות של גישת אתנול כלוב בבית נעה 1.33-6.44 גר &#39;/ קילוגרם לחולדות בודדות. שלב צריכת אתנול כלוב בבית של הניסוי ניתן לעצור פעם אחת גרם / צריכת קילוגרם יש התייצבה, וחולדות נשמרות ברמה יציבה זה של שתייה למספר המפגשים. כדי לנתח את הנתונים מהשלב הזה, לבצע ניתוח חוזר ונשנה-צעדים נפרדים של שונות (ANOVA) על פני הגורם בתוך-הנושא של מפגש לצריכת אתנול (ז / קילוגרם) והעדפת אתנול. סכמטי של הליך חידוש מושרה הקשר: כל שלב שלהליך ניסיוני (PDT, הכחדה, מבחן חידוש) מתואר באיור 2. ראה כותרת איור לפרטים נוספים. ניתוח מדדים ונתונים תגובה: בכל שלבי ההתנהגות מתוארים להלן, תגובות כניסת יציאה שנעשו במהלך + CS וCS- הם מנורמלים עם התייחסות מראש CS תגובות כניסת בסיס יציאה. כדי ליצור את אמצעי CS מנורמלים, להפחית את מספר ערכי יציאה שנעשו במהלך מרווח הבסיס טרום CS (שניות 10 מייד לפני תחילת CS) ממספר ערכי נמל שבוצעו במהלך המצגות של + CS וCS-. CS + המנורמל ואמצעי CS- מנורמלים לשמש כמדדים של התנהגות שהושרו באופן ספציפי על ידי מצגות CS, מוגבהות מעל רמות בסיס. לנהל חוזרים ונשנים-צעדים נפרדים ANOVA עם גורמי הנושא בתוך והנשנים של פגישה וסוג CS (CS + לעומת CS-) לPDT ושלבי הכחדה. להשוואות בין שלב (PDT, הכחדה, לחדשאל מבחן), נתוני שימוש בממוצע על פני שתי הפגישות האחרונות של PDT והכחדה והמפגש של נתוני בדיקת חידוש אחד בחזרו-אמצעי ANOVA. לעקוב אחר השפעות משמעותיות עיקריות ואינטראקציות, מבחני t post hoc שימוש למדגמים בלתי תלויים או לזווג שמתוקנות להשוואות מרובות. קריטריון למשמעות מוגדר בα = 0.05. PDT: תגובות כניסת נמל לעליית CS + על פני מפגשי PDT, ואילו תגובות כניסת יציאה לCS- יישארו נמוכות ויציב, הכוללים. שים לב שתגובות כניסת היציאה לCS- עלול להגביר מעט כבר בפגישות הראשונות של אימון PDT; עם זאת, ערכי יציאה שנעשו בתגובה לCS- יתייצבו ברמה נמוכה בהרבה מאלה שנעשו בתגובה ל+ CS. אפליה מוצלחת היא שמעידה העלאה משמעותית מבחינה סטטיסטית בערכי יציאה במהלך CS + בהשוואה לCS- (איור 3). תוצאה זו מצביעה על כך שמיזוג הפבלובית אלכוהול התנהגות מסוימת לקבלה יש להיותen הוקם ל+ CS, אבל לא CS-. הכחדה: תגובות כניסת נמל ל+ CS לרדת בהדרגה על פני מפגשי הכחדה. תגובות כניסת נמל לCS- יישארו נמוכות ויציבה על פני מפגשי הכחדה. באופן אידיאלי, מופלה להגיב הוא בוטל על ידי סוף אימון הכחדה, כפי שמעידים על חוסר הבדל משמעותי סטטיסטי בין ערכי נמל ל+ CS וCS-. עם זאת, אין זה נדיר עבור מידה מסוימת של מופלה להגיב להישאר, אפילו בסוף אימון הכחדה. במקרה זה, חשוב לוודא שתגובות כניסת יציאה ל+ CS בסוף אימון הכחדה מבחינה סטטיסטי נמוכים מתגובות כניסת יציאה ל+ CS בתחילת ההכחדה, כמו גם בסוף PDT (איור 3) . דפוס זה של תוצאות מצביע על כך שהמיזוג הפבלובית אלכוהול התנהגות מסוימת לקבלת כבה באופן משמעותי. מבחן חידוש מושרה הקשר: נמלתגובות כניסה לעליית CS + במבחן החידוש מושרה הקשר, ביחס לערכי נמל CS + נצפו בסוף אימון הכחדה. גידול זה הוא סלקטיבי ל+ CS, כערכי יציאה לCS- יישארו ללא שינוי. בנוסף, ערכי יציאה ל+ CS מבחינה סטטיסטי גבוהים בהשוואה לערכי יציאה לCS- במבחן החידוש מושרה הקשר (איור 4). אישור סטטיסטי של השוואות של ערכי CS + יציאה בין ההכחדה ובדיקה, כמו גם השוואות של CS + וערכי יציאת CS- בתוך מבחן, מצביע על התחדשות סלקטיבית של מיזוג הפבלובית התנהגות שוחרת אלכוהול הנגרמת על ידי הקשר האלכוהול קשור במבחן. <img alt="איור 1" fo:content-width="4in" src="/files/ftp_upload/51898/51898fig1highres.jpg" width="400" /> איור 1 הסלמה של צריכת אתנול והעדפה הנגרמת על ידי גישת אתנול לסירוגין בכלוב בבית. ממוצע &amp;177 #; SEM () צריכת אתנול (ז / קילוגרם) והעדפת אתנול (B) על פני 12 מפגשים של גישת אתנול לסירוגין בכלוב בבית. שני הצעדים להגדיל בדרך כלל על פני פגישות ולאחר מכן לייצב. צריכת אתנול יציבה בממוצע על פני שתי הפגישות האחרונות של גישת אתנול כלוב בבית נע 1.33-6.44 גר &#39;/ קילוגרם לחולדות בודדות. נתונים אלה התקבלו באמצעות חולדות זכרים הארוך אוונס שתיית 15% (V / V) אתנול. <img alt="איור 2" fo:content-width="4in" src="/files/ftp_upload/51898/51898fig2highres.jpg" width="400" /> . איור 2 סכמטי של ההליך ניסיוני ההליך מורכב משלושה שלבים: הכשרת אפליה הפבלובית, הכחדה, ומבחן חידוש (PDT) הנגרם על ידי הקשר. במהלך כל מפגש PDT, חולדות לקבל 16 ניסויים של גירוי אחד שמיעתי מותנה (CS +) שמסמן את המשלוח של אתנול ו16 ניסויים שלגירוי שני שמיעתי (CS-) שאינו קשור למשלוח אתנול. מפגשי PDT יתקיימו בהקשר, מורכבים מתצורה ספציפית של חזותי, חוש הריח, וגירויים מישוש. במהלך פגישות הכחדה, שמתנהלות בהקשר B, מורכב מקבוצה של גירויים חזותיים, חוש הריח, ומישוש שונה, + CS וCS- מוצגים אבל אתנול הוא נמנע. למבחן חידוש מושרה הקשר, חולדות חזרו להקשר, ו+ CS וCS- מוצגים ללא אתנול. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/51898/51898fig2highres.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי לצפות בגרסה גדולה יותר של דמות זו.</a> <img alt="איור 3" fo:content-width="4in" src="/files/ftp_upload/51898/51898fig3highres.jpg" width="400" /> איור 3 רכישה והכחדה של m להגיב לאתנול מיזוג הפבלובית. ממוצע מופלים ± SEM ערכי נמל מנורמלade במהלך + CS וCS- פני PDT (מפגשי 1 - 18) בהקשר והכחדה (מפגשי 19 - 26) בB. הקשר נתונים אלה התקבלו באמצעות חולדות ארוך אוונס גבריים, התאמנו עם 10% (v / v) אתנול כגירוי הבלתי מותנה (US) שהוצג בשיתוף עם + CS במהלך PDT. * P &lt;0.05, CS + לעומת CS-. איור שפורסם במקור בChaudhri, Sahuque, וJanak (2008). שימוש באישור מElsevier. <img alt="איור 4" fo:content-width="5in" src="/files/ftp_upload/51898/51898fig4highres.jpg" width="500" /> איור 4 חידוש הערכים להגיב לאתנול מיזוג הפבלובית. ממוצע ± SEM נמל מנורמל נעשו במהלך + CS וCS- במפגשי PDT בהקשר, הפעלות הכחדה בהקשר B, ובדיקת חידוש בהקשר א נתונים הם מעשה הקשר בממוצע לכל שני המפגשים האחרונים של PDT והכחדה; מבחן החידוש הוא פגישה אחת. אלההנתונים התקבלו באמצעות חולדות ארוך אוונס גבריים, התאמנו עם 10% (V / V) אתנול כגירוי הבלתי מותנה (US) שהוצג בשיתוף עם + CS במהלך PDT. * P &lt;0.05; ** P &lt;0.001, CS + לעומת CS-. #p &lt;0.05, CS + PDT לעומת CS + הכחדה. ^ P &lt;0.05, הכחדת CS + לעומת מבחן CS +. איור שפורסם במקור בChaudhri, Sahuque, וJanak (2008). שימוש באישור מElsevier.

Watch this Scientific Journal Video about A Procedure to Observe Context-induced Renewal of Pavlovian-conditioned Alcohol-seeking Behavior in Rats at JoVE.com

A Procedure to Observe Context-induced Renewal of Pavlovian-conditioned Alcohol-seeking Behavior in Rats

הליך ללמוד את היכולת של הקשר סביבתי אלכוהול קשור להפעלת החידוש של אלכוהול התנהגות מסוימת לקבלה בחולדות מתוארת.

נוהל ללב התחדשות מושרה הקשר של התנהגות אלכוהול מחפשי מיזוג הפבלובית בחולדות

Environmental contexts in which drugs of abuse are consumed can trigger craving, a subjective Pavlovian-conditioned response that can facilitate ...

a-procedure-to-observe-context-induced-renewal-pavlovian-conditioned

Research

JoVE Journal

Behavior

12.7K Views.  Concordia University.  הליך ללמוד את היכולת של הקשר סביבתי אלכוהול קשור להפעלת החידוש של אלכוהול התנהגות מסוימת לקבלה בחולדות מתוארת. 

Video: A Procedure to Observe Context-induced Renewal of Pavlovian-conditioned Alcohol-seeking Behavior in Rats

A Method for Evaluating the Reinforcing Properties of Ethanol in Rats without Water Deprivation, Saccharin Fading or Extended Access Training

Operant oral self-administration methods are commonly used to study the reinforcing properties of ethanol in animals. However, the standard methods require saccharin/sucrose fading, water deprivation and/or extended training to initiate operant responding in rats. This paper describes a novel and efficient method to quickly initiate operant responding for ethanol that is convenient for experimenters and does not require water deprivation or saccharin/sucrose fading, thus eliminating the potential confound of using sweeteners in ethanol operant self-administration studies. With this method, Wistar rats typically acquire and maintain self-administration of a 20% ethanol solution in less than two weeks of training. Furthermore, blood ethanol concentrations and rewards are positively correlated for a 30 min self-administration session. Moreover, naltrexone, an FDA-approved medication for alcohol dependence that has been shown to suppress ethanol self-administration in rodents, dose-dependently decreases alcohol intake and motivation to consume alcohol for rats self-administering 20% ethanol, thus validating the use of this new method to study the reinforcing properties of alcohol in rats.

This protocol describes a novel and efficient method to quickly initiate operant responding for ethanol in rats that, contrary to standard methods, does not require water deprivation or saccharin/sucrose fading to initiate responding.

שיטה להערכת מאפייני החיזוק של אתנול בחולדות ללא מצוקת מים, סכרין Fading או הדרכת גישה מורחבת

Operant oral self-administration methods are commonly used to study the reinforcing properties of ethanol in animals. However, the standard methods ...

Pavlovian Conditioned Approach Training in Rats

Cues that are contingently paired with unconditioned, rewarding stimuli can acquire rewarding properties themselves through a process known as the attribution of incentive salience, or the transformation of neutral stimuli into attractive, &#34;wanted&#39; stimuli capable of motivating behavior. Pavlovian conditioned approach (PCA) develops after the response-independent presentation of a conditioned stimulus (CS; e.g., a lever) that predicts the delivery of an unconditioned stimulus (US; e.g., a food pellet) and can be used to measure incentive salience. During training, three patterns of conditioned responses (CRs) can develop: sign-tracking behavior (CS-directed CR), goal-tracking behavior (US-directed CR), and an intermediate response (both CRs). Sign-trackers attribute incentive salience to reward-related cues and are more vulnerable to cue-induced reinstatement of drug-seeking as well as other addiction-related behaviors, making PCA a potentially valuable procedure for studying addiction vulnerability. Here, we describe materials and methods used to elicit PCA behavior from rats as well as analyze and interpret PCA behavior in individual experiments.

Here, we present a protocol to elicit Pavlovian conditioned approach behavior in rats. This procedure can be used to measure individual differences in the tendency to approach and attribute incentive salience to reward-related cues and investigate addiction vulnerability.

הדרכת גישה אלפה הפבלובית בחולדות

Cues that are contingently paired with unconditioned, rewarding stimuli can acquire rewarding properties themselves through a process known as the ...

A General Method for Evaluating Incubation of Sucrose Craving in Rats

For someone on a food-restricted diet, food craving in response to food-paired cues may serve as a key behavioral transition point between abstinence and relapse to food taking 1. Food craving conceptualized in this way is akin to drug craving in response to drug-paired cues. A rich literature has been developed around understanding the behavioral and neurobiological determinants of drug craving; we and others have been focusing recently on translating techniques from basic addiction research to better understand addiction-like behaviors related to food 2-4.
As done in previous studies of drug craving, we examine sucrose craving behavior by utilizing a rat model of relapse. In this model, rats self-administer either drug or food in sessions over several days. In a session, lever responding delivers the reward along with a tone+light stimulus. Craving behavior is then operationally defined as responding in a subsequent session where the reward is not available. Rats will reliably respond for the tone+light stimulus, likely due to its acquired conditioned reinforcing properties 5. This behavior is sometimes referred to as sucrose seeking or cue reactivity. In the present discussion we will use the term "sucrose craving" to subsume both of these constructs.
In the past decade, we have focused on how the length of time following reward self-administration influences reward craving. Interestingly, rats increase responding for the reward-paired cue over the course of several weeks of a period of forced-abstinence. This "incubation of craving" is observed in rats that have self-administered either food or drugs of abuse 4,6. This time-dependent increase in craving we have identified in the animal model may have great potential relevance to human drug and food addiction behaviors.
Here we present a protocol for assessing incubation of sucrose craving in rats. Variants of the procedure will be indicated where craving is assessed as responding for a discrete sucrose-paired cue following extinction of lever pressing within the sucrose self-administration context (Extinction without cues) or as responding for sucrose-paired cues in a general extinction context (Extinction with cues).

Responding for food or drug-paired cues increases over the course of a period of abstinence and this may relate to an increased susceptibility to relapse behaviors. Here we detail a procedure for evaluating this "incubation of craving" in rats that have self-administered sucrose.

שיטה כללית להערכת דגירה של השתוקקות סוכרוז בחולדות

For someone on a food-restricted diet, food craving in response to food-paired cues may serve as a key behavioral transition point between abstinence and ...

Neuroscience

Reinstatement of Drug-seeking in Mice Using the Conditioned Place Preference Paradigm

The present protocol describes the Conditioned Place Preference (CPP) as a model of relapse in drug addiction. In this model, animals are first trained to acquire a conditioned place preference in a drug-paired compartment, and after the post-conditioning test, they perform several sessions to extinguish the established preference. The CPP permits the evaluation of the conditioned rewarding effects of drugs related to environmental cues. Then, the extinguished CPP can be robustly reinstated by the non-contingent administration of a priming dose of the drug, and by exposure to stressful stimuli. Both methods will be explained here. When the animal reinitiates the behavioral response, a reinstatement of the conditioned reward is considered to have taken place.
The main advantages of this protocol are that it is non-invasive, inexpensive, and simple with good validity criteria. In addition, it allows the study of different environmental manipulations, such as stress or diet, which can modulate relapse into drug seeking behaviors. However, one limitation is that if the researcher aims to explore the motivation and primary reinforcing effects of the drug, it should be complemented with self-administration procedures, as they involve operant responses of animals.

This protocol describes the Conditioned Place Preference (CPP) as a model of relapse. This procedure permits the measurement of relapse in laboratory animals, considering the impact of drug-associated environmental cues as craving and relapse in abstaining addicts is currently the focus of drug-abuse treatment programs.

החזרה של שוחרת סמים בעכברים באמצעות הפרדיגמה העדפה המקום ממוזגים

The present protocol describes the Conditioned Place Preference (CPP) as a model of relapse in drug addiction. In this model, animals are first trained to ...

A Conditioned Place Preference Protocol for Measuring Incubation of Craving in Rats

A major cause of repeated relapses is a craving for the drug. Drug craving increases progressively during the abstinence period, a phenomenon termed incubation of drug craving. Here, we describe a morphine conditioned place preference (CPP) protocol for measuring the incubation of craving in rats. In this protocol, a CPP paradigm mainly employing somatosensory cues is used to establish a long-term reward memory of morphine. A three-chamber CPP box that differs in the texture of the chamber floor is constructed. First, the animals are tested for their baseline preference to the two side chambers for three consecutive days. Then, they are injected intraperitoneally with morphine/saline and put into their non-preferred/preferred chamber for 45 min. After 6 days of conditioning, their preference to the side chambers is tested for 15 min at different time points after the last conditioning session. With this paradigm, the reward memory of morphine could last for at least 18 days. To test whether the above-mentioned protocol can model increased craving, the number of entrances into the two side chambers are counted during the abstinence period. The results show that the entrances increased, suggesting that the CPP paradigm could mimic the incubation of craving. Future studies can employ this model to study neural mechanisms underlying long-term memory and incubation of craving.

Here, a morphine conditioned place preference (CPP) protocol is described to measure incubation of craving in rats.

פרוטוקול העדפה המקום ממוזגים למדידת דגירה של השתוקקות אצל חולדות

A major cause of repeated relapses is a craving for the drug. Drug craving increases progressively during the abstinence period, a phenomenon termed ...

A Procedure to Study Stress-Induced Relapse of Heroin Seeking after Punishment-Imposed Abstinence

The punishment-imposed abstinence procedure models the self-imposed abstinence that humans initiate due to the adverse consequences associated with drug-taking. This model has been implemented in experiments using different types of substances of abuse such as methamphetamine, cocaine, and alcohol. However, punishment-induced abstinence in heroin-trained animals has not been demonstrated. Furthermore, acute stress is a key trigger for relapse in humans and animal models. It was previously demonstrated that acute food deprivation robustly induced reinstatement of extinguished cocaine and heroin seeking. The procedure described here can be used to assess the effects of acute stress exposure on heroin seeking after punishment-imposed abstinence. A total of 8 rats were implanted with chronic intravenous (i.v.) catheters and trained to self-administer heroin (0.1 mg/kg/infusion) for 18 days under a seek-take chained schedule. Completing the seek link gave access to the take lever, which was paired with a heroin infusion. The seek lever was programmed with a variable interval 60 schedule of reinforcement (VI60), and the take lever was programmed with a fixed-ratio 1 reinforcement schedule (FR1). Following self-administration training, a mild foot shock was delivered on 30% of the completed seek links instead of the extension of the take lever. Footshock intensity was increased by 0.1 mA per daily session from 0.2 mA to 1.0 mA. Heroin-seeking tests were performed after 24 h of food deprivation (FD) or sated conditions. Rats under acute food deprivation condition robustly increased heroin seeking after punishment-imposed abstinence.

A procedure that demonstrates a robust acute food deprivation-induced relapse to heroin seeking after punishment-imposed abstinence is described. A punishment-imposed abstinence model was successfully implemented using the seek and take chain schedule for heroin self-administration. Heroin-seeking tests are then performed following 24 h of food-deprivation stress.

הליך לחקר הישנות כתוצאה מלחץ של חיפוש הרואין לאחר התנזרות שנכפתה על ידי עונש

The punishment-imposed abstinence procedure models the self-imposed abstinence that humans initiate due to the adverse consequences associated with ...

The Use of Trace Eyeblink Classical Conditioning to Assess Hippocampal Dysfunction in a Rat Model of Fetal Alcohol Spectrum Disorders

Neonatal rats were administered a relatively high concentration of ethyl alcohol (11.9% v/v) during postnatal days 4-9, a time when the fetal brain undergoes rapid organizational change and is similar to accelerated brain changes that occur during the third trimester in humans. This model of fetal alcohol spectrum disorders (FASDs) produces severe brain damage, mimicking the amount and pattern of binge-drinking that occurs in some pregnant alcoholic mothers. We describe the use of trace eyeblink classical conditioning (ECC), a higher-order variant of associative learning, to assess long-term hippocampal dysfunction that is typically seen in alcohol-exposed adult offspring. At 90 days of age, rodents were surgically prepared with recording and stimulating electrodes, which measured electromyographic (EMG) blink activity from the left eyelid muscle and delivered mild shock posterior to the left eye, respectively. After a 5 day recovery period, they underwent 6 sessions of trace ECC to determine associative learning differences between alcohol-exposed and control rats. Trace ECC is one of many possible ECC procedures that can be easily modified using the same equipment and software, so that different neural systems can be assessed. ECC procedures in general, can be used as diagnostic tools for detecting neural pathology in different brain systems and different conditions that insult the brain.

Trace eyeblink classical conditioning (ECC) was used to assess hippocampal-dependent associative learning in adult rats that were administered a high concentration (11.9% v/v) of alcohol during early neonatal brain development. In general, ECC procedures are sound diagnostic tools for detecting brain dysfunction across many psychological and biomedical settings.

השימוש של התניה קלאסית Eyeblink מעקב כדי להעריך תפקוד בהיפוקמפוס במודל של עכברים של אלכוהול עוברית ספקטרום הפרעות

Neonatal rats were administered a relatively high concentration of ethyl alcohol (11.9% v/v) during postnatal days 4-9, a time when the fetal brain ...

A Protocol for Measuring Cue Reactivity in a Rat Model of Cocaine Use Disorder

Cocaine use disorder (CUD) follows a trajectory of repetitive self-administration during which previously neutral stimuli gain incentive value. Cue reactivity, the sensitivity to cues previously linked with the drug-taking experience, plays a prominent role in human craving during abstinence. Cue reactivity can be assessed as the attentional orientation toward drug-associated cues that is measurable as appetitive approach behavior in both preclinical and human studies. Herein describes an assessment of cue reactivity in rats trained to self-administer cocaine. Cocaine self-administration is paired with the presentation of discrete cues that act as conditioned reinforcers (i.e., house light, stimulus light, infusion pump sounds). Following a period of abstinence, lever presses in the cocaine self-administration context accompanied by the discrete cues previously paired with cocaine infusion are measured as cue reactivity. This model is useful to explore neurobiological mechanisms underlying cue reactivity processes as well as to assess pharmacotherapies to suppress cue reactivity and therefore, modify relapse vulnerability. Advantages of the model include its translational relevance, and its face and predictive validities.&#160;The primary limitation of the model is that the cue reactivity task can only be performed infrequently and must only be used in short duration (e.g., 1 hour), otherwise rats will begin to extinguish the pairing of the discrete cues with the cocaine stimulus. The model is extendable to any positively reinforcing stimulus paired with discrete cues; though particularly applicable to drugs of abuse, this model may hold future applications in fields such as obesity, where palatable food rewards can act as positively reinforcing stimuli.

Cue reactivity is conceptualized as sensitivity to cues linked with drug-taking experiences that contribute to craving and relapse in abstinent humans. Cue reactivity is modeled in rats by measuring attentional orientation toward drug-associated cues that results in appetitive approach behavior in a cue reactivity test following self-administration and forced abstinence.

פרוטוקול למדידת Cue תגובתיות במודל של עכברים של הפרעה לשימוש בקוקאין

Cocaine use disorder (CUD) follows a trajectory of repetitive self-administration during which previously neutral stimuli gain incentive value. Cue ...

A Prediction Error-driven Retrieval Procedure for Destabilizing and Rewriting Maladaptive Reward Memories in Hazardous Drinkers

Maladaptive reward memories (MRMs) can become unstable following retrieval under certain conditions, allowing their modification by subsequent new learning. However, robust (well-rehearsed) and chronologically old MRMs, such as those underlying substance use disorders, do not destabilize easily when retrieved. A key determinate of memory destabilization during retrieval is prediction error (PE). We describe a retrieval procedure for alcohol MRMs in hazardous drinkers that specifically aims to maximize the generation of PE and therefore the likelihood of MRM destabilization. The procedure requires explicitly generating the expectancy of alcohol consumption and then violating this expectancy (withholding alcohol) following the presentation of a brief set of prototypical alcohol cue images (retrieval + PE). Control procedures involve presenting the same cue images, but allow alcohol to be consumed, generating minimal PE (retrieval-no PE) or generate PE without retrieval of alcohol MRMs, by presenting orange juice cues (no retrieval + PE). Subsequently, we describe a multisensory disgust-based counterconditioning procedure to probe MRM destabilization by re-writing alcohol cue-reward associations prior to reconsolidation. This procedure pairs alcohol cues with images invoking pathogen disgust and an extremely bitter-tasting solution (denatonium benzoate), generating gustatory disgust. Following retrieval + PE, but not no retrieval + PE or retrieval-no PE, counterconditioning produces evidence of MRM rewriting as indexed by lasting reductions in alcohol cue valuation, attentional capture, and alcohol craving.

This manuscript describes a memory retrieval procedure for destabilizing robust reward memories and rewriting them with counterconditioning prior to their reconsolidation.

הליך אחזור מונחה שגיאה של חיזוי יציב ושכתובם הפרס Maladaptive זכרונות של שתיינים מסוכנים

Maladaptive reward memories (MRMs) can become unstable following retrieval under certain conditions, allowing their modification by subsequent new ...

Intermittent-Access Two-Bottle Choice Drinking with Lick Detection in Rats

Modeling Alcohol Consumption in Rodents Using Two-Bottle Choice Home Cage Drinking and Microstructural Analysis

Two-bottle choice home cage drinking is one of the most widely used paradigms to study ethanol consumption in rodents. In its simplest form, animals are provided with access to two drinking bottles, one of which contains regular tap water and the other ethanol, with daily intake measured by change in bottle weight over the 24 h period. Consequently, this approach requires no specialized laboratory equipment. While such ease of implementation is likely the greatest contributor to its widespread adoption by preclinical alcohol researchers, the resolution of drinking data acquired using this approach is limited by the number of times the researcher measures bottle weight (e.g., once daily). However, the desire to examine drinking patterns in the context of overall intake, pharmacological interventions, and neuronal manipulations has prompted the development of home cage lick detection systems that can acquire data at the level of individual licks. Although a number of these systems have been developed recently, the open-source system, LIQ HD (Lick Instance Quantifier Home cage Device), has garnered significant attention in the field for its affordability and user friendliness. Although exciting, this system was designed for use in mice. Here, we review appropriate procedures for standard and lickometer-equipped two-bottle choice home cage drinking. We also introduce methods for adapting the LIQ HD system to rats including hardware modifications to accommodate larger cage size and a redesigned 3D printed bottle holder compatible with standard off-the-shelf drinking bottles. Using this approach, researchers can examine daily drinking patterns in addition to levels of intake in many rats in parallel thereby increasing the resolution of acquired data with minimal investment in additional resources. These methods provide researchers with the flexibility to use either standard bottles or a lickometer-equipped apparatus to interrogate the neurobiological mechanisms underlying alcohol drinking depending on their precise experimental needs.

This protocol describes a standard intermittent-access two-bottle choice home cage drinking paradigm to model alcohol consumption in rats. In addition, it provides step-by-step instructions to augment the standard protocol with a DIY lick detection system that enables microstructural analysis of drinking behavior.

Two-bottle choice home cage drinking is one of the most widely used paradigms to study ethanol consumption in rodents. In its simplest form, animals are ...