This work was supported by the National Institute on Alcohol Abuse and Alcoholism (RO1 AA014925 awarded to Dr. Patricia H. Janak at University of California, San Francisco, CA, USA), Fonds de recherche du Quebec &#8211; Sant&#233; (NC) and the Natural Sciences and Engineering Research Council (NC, 387224-2010). The open-access publication of this article was made possible by sponsorship from Med Associates Inc.

Tüm prosedürler Concordia Üniversitesi Hayvan Araştırmaları Etik Komitesi tarafından onaylanmış ve Hayvan Bakımı Kanada Konseyi önerileri ile hemfikir edilir. 1. Hayvanlar <ol><li> (- Varışta 240 gr 220) erkek Long-Evans sıçan edinin. </li><li> 07:00 ışıklar olan bir 12 saatlik bir ışık-karanlık döngüsünde bir sıcaklıkta (21 ° C) ve nem (% 44) kontrollü hayvan bakım tesisi fareleri üzerinde muhafaza edin. </li><li> Girişte Pair-ev fareleri. 3 gün sonra, ayrı ayrı p-çip yatak, bir naylon kemik ve standart sıçan yemi ve suya serbest erişim ile plastik ayakkabı kutusu kafeslere ev fareler. Su şişesinin ek olarak, ikinci bir şişe sonraki yerleştirilmesine izin vermek için iki çevirme kenarı olan kafes kapaklarını kullanın. NOT: Ayrı kısa sürede hayvan bakım tesisi geldikçe Rats muhafaza edilebilir. </li><li> Günlük sıçan işlemek için başlayın. NOT: Bir rehber olarak, elleçleme bir hafta pi olmanın onları ACCLIMATE genellikle yeterlidircked kadar ve deneyci tarafından ele. </li></ol> Ana Cage 2. Aralıklı Etanol Erişim NOT: evde kafes içinde Davranış aralıklı etanol erişimi sıçanlar deney davranışsal eğitim safhası 17-19 başlamadan önce etanol fizyolojik önemli miktarlarda içecek sağlamak için. Bu açık ya da koyu çevrimi esnasında herhangi bir zamanda başlatılabilir, ancak aydınlık evresi sırasında bu prosedürü başlatın. <ol><li> Her bir sıçan için, iki şişe hazırlayın. <ol><li> 100 ml plastik etanol şişe ve 473 ml standart plastik su şişesi gibi dereceli silindir kullanın. Nedeniyle sızıntı ve buharlaşma etanol kaybını en aza indirmek için, neredeyse maksimum hacim kapasitesi dolu bir nispeten küçük kapasiteli etanol şişe kullanın. </li><li> Musluk suyu içinde% 95 lik etanol seyreltilmesi,% 15 etanol ile bir doldurunuz. Not: diğer etanol konsantrasyonları, örneğin% 10 veya% 20,% 15 etanol yerine kullanılabilmektedir. </li><li> Fimusluk suyu ile ikinci şişe ll. </li><li> Her şişeye, sızıntıyı en aza indirmek için bir bilye yatağı içeren bir siper tüp ile bir lastik tıpa takın. </li></ol></li><li> Kontrol kafesleri sıçan ya da yatak içermeyen haricinde ev kafesleri aynı tedavi edilen iki kontrol kafesleri, ayarlayın. <ol><li> 2.1.4 - adımlarla 2.1.1 belirtildiği gibi kontrol kafesleri için etanol ve su şişeleri hazırlayın. </li><li> (- 2.8.2 2.8.1 adımda tarif edildiği gibi), etanol ile erişim oturumu boyunca oluşabilecek dökülmesi ve / veya buharlaştırma için kontrol etmek için kontrol kafeslerinden edilen yöntemleri kullanınız. </li></ol></li><li> Tüm etanol ve su şişeleri tartılır. Bütün ağırlıkları kaydedilir. </li><li> Tüm fareler tartılır. Bütün ağırlıkları kaydedilir. </li><li> Etanol şişe ve her ana kafesindeki su şişesi yerleştirin ve aynı zamanda kafes kontrol eder. 24 saat boyunca kafeslerde her iki şişe bırakın. </li><li> 24 saatlik bir süre sonunda, her iki şişe kaldırmaaynı zamanda kafes. </li><li> Tüm etanol ve su şişeleri tartılır. Bütün ağırlıkları kaydedilir. </li><li> Bu 24 saat önce, her bir sıçan için kafese yerleştirildi zaman şişenin ağırlığı kafese bertaraf edildikten sonra 24 saatlik bir süre boyunca tüketilen ne kadar etanol ve su belirlemek için, her şişenin ağırlığının çıkartılması. <ol><li> Iki kontrol kafesler için aynı yapın ve ardından her akışkan için dökülme ortalama miktarını hesaplamak. </li><li> Her bir sıçan için karşılık gelen etanol ve su tüketimi önlemlerden, sırasıyla bir etanol ve su dökülmesi, ortalama miktarını çıkarın. </li><li> G / kg su tüketimi ve etanol tercih etanol tüketimi hesaplamak için bu dökülme kontrol fark yöntemleri kullanınız. </li></ol></li><li> Etanol tüketimi (g / kg), ilk olarak toplam çözeltinin (etanol + su bileşenler) yoğunluğuna dayalı olarak, hacim (mi) içine tüketilen etanol çözeltisi ağırlığını (g) dönüştürmek hesaplamak için, uygunFormül Hacmi (mi) = Ağırlığı (g) / Yoğunluk (g / ml) eklenmiştir. Not: çözeltisinin yoğunluğu etanol konsantrasyonunun bir fonksiyonu olarak değişir. <ol><li> Daha sonra, tüketilen ağırlığı (g), etanol içinde elde etmek için kullanılan belirli bir yüzdesi bir çözüm için ölçekli etanol yoğunluğu (g / ml) tarafından kullanılan, etanol çözeltisi hacmi (mi) çarpar. </li><li> Etanol tüketimi g / kg ölçümünün elde edilmesi için, sıçan ağırlığına (kg) tarafından kullanılan, etanol ağırlığı (g) bölün. </li></ol></li><li> Etanol tercih hesaplamak için, toplam sıvı (etanol + su, mi) alımının bir yüzdesi olarak etanol miktarı (mi) ifade etmektedir. </li><li> Sıçan ev kafesine sadece geri su şişesi getirin. Sonraki 24 saat, suya fareler erişim vermek ama etanole değil. Bunun yerine, bir etanol şişe, ev kafes üzerine ağırlığı önceden tartılmış olan ikinci su şişesi yerleştirin. </li><li> 24 saatlik bir süre sonunda, aynı zamanda kafes hem de su şişeleri çıkarın. </li><li> Su şişeleri her iki seti de tartılır. Kaydedin tüm weights. </li><li> Bu adımda 2.8.1 tarif edildiği gibi kontrol kafeslerinden elde edilen ortalama dökülme ölçü çıkartılmasıyla, 24 saat önce kafese yerleştirildi zaman şişenin ağırlığı kafese bertaraf edildikten sonra, her şişenin ağırlığının çıkartılması - 2.8.2. </li><li> Su tüketimini hesaplamak için bu dökülme kontrollü fark önlemleri kullanın. </li><li> 2,14 adımda 2.1 de tarif edildiği gibi, farelere etanol ve su şişeleri sağlamak suretiyle yeniden çevrimi başlar. <ol><li> Etanol tüketimi, yüksek ve istikrarlı seviyelerini ikna etmek için birden çok (yaklaşık 12) oturumları bu döngüyü tekrarlayın. Ev kafesinde etanol kullanımı için temsili sonuçlar (g / kg) için Şekil 1&#39;e bakınız. </li><li> Bir yan tercih gelişimini önlemek için oturumlar boyunca kafes kapağındaki etanol ve su şişesi uzaysal pozisyonu geçiş yapma. </li><li> Karşısında doğru ve istikrarlı etanol konsantrasyonunu sağlamak için haftada bir kez taze etanol çözüm olunoturumları. Bu yaklaşımı kullanarak, uzun süreli dönemler boyunca etanol buharlaşma etkisini en aza indirmek. </li></ol></li></ol> 3. Aparatlar <ol><li> Bir havalandırmalı, ses azaltıcı kabini içindeki ev, her klima odası. </li><li> Her klima paslanmaz çelik metal çubuk zemin odasını, şeffaf polikarbonat tavan, açık polikarbonat arka duvar ve ön kapı ve alüminyum metal paneli yanaklar Construct. <ol><li> Merkezi sağ, metal yan duvarın tabanına yakın bir sıvı portu takın. Portuna girdilerini algılamak için kızılötesi fotosel ile sıvı noktasına giriş donatmak. </li><li> Bir küt uçlu bir iğne kullanılarak etanol içeren bir 20 ml şırınga ve sıvı giriş arkasından polietilen boru bağlayın. Ses azaltıcı hücre dışında bulunan bir şırınga pompa içine şırınga yerleştirin. Pavlovyan ayrımcılık eğitim oturumları için, pompa içine yerleştirmeden önce şırıngaya etanol yükleyin. Başbakan boru by el pompası ilerleyen ve sonra akışkan bağlantı noktasından fazla etanol silin. </li><li> Sol yan duvar üzerinde, bölmenin tavanına yakın merkezi beyaz houselight gerekmektedir. </li><li> Bir tıkırtı (2 Hz devir) ve sol yan duvarın sol üst köşesinde hoparlör ile bir beyaz gürültü jeneratör yükleyin. </li></ol></li><li> Farklı bir bağlam yaratmak için görsel, koku alma, ve dokunsal uyarılara belirli bir yapılandırma ile her klima odasına kıyafeti. <ol><li> İki farklı bağlamlar, Bağlam 1 ve Bağlam 2 gibi diğer yarısı olarak klima odalarının belirlenmiş Bağlam 1 ve Bağlam 2. Yapılandırma yarısını kullanın. </li><li> Bir Petri kabı içine siyah karton tavan ve ön panel üzerinde ve arka odasının duvarları, (musluk suyunda seyrelterek limon yağı ile yapılan% 10 v / v) sprey limon kokusu yerleştirmek ve ortasına yerleştirin onu, Bağlam oluşturmak için 1 odasının zemininin altında bir metal atık tepsi ve metal r üzerinde şeffaf polikarbonat zemin panelini takınod kat. Emici kağıt havlu veya tezgah liner ile atık kasetini sıralanıyor. </li><li> Bağlam 2 oluşturmak için, onlar açık ki, bir Petri kabı içine (musluk suyunda benzaldehitin seyreltilmesi% 10 v / v) badem koku sprey ve merkezi olarak yerleştirin, ortaya odasının tavan ve ön ve arka duvarları bırakın odasının tabanına altında bir metal atık tepsi, ve bahsedilen metal çubuk, zemin üzerinde bir delikli metal bir taban paneli yerleştirin. Emici kağıt havlu veya tezgah liner ile atık kasetini sıralanıyor. </li></ol></li></ol> 4. Alışma Davranışsal eğitim odası fareleri alışmakta ve iklimlendirme odası içinde iki bağlamda her. Deneyin bu aşaması için, 20 ml şırınga içine etanol yüklemeyin. <ol><li> Iki kısa alışkanlık seansta laboratuvarda davranışsal eğitim odası hayvan bakım tesisi taşınan olma sürecine fareleri alıştırmak. <ol><li> İlk oturumda, sıçan yüklemek in evlerine hayvan bakım tesisi bir tekerlekli arabası üzerine kafesleri ve laboratuvarda davranışsal eğitim odası taşırlar. , Oda ışıkları yanar her ses zayıflatıcı kabinler hayranları açın, oda çıkmak, kapıyı kapatın ve arabası üzerinde evlerinde kafeslerde kalan süre sıçanlar, 20 dakika boyunca bu yeni ortama uyum sağlar. Bu 20 dakikalık sürenin sonunda, hayvan bakım tesisi için fareleri döner. </li><li> İkinci oturumda, laboratuvarda davranışsal eğitim odası fareleri getirmek. Daha önce olduğu gibi, odadaki ışıkları ve kabinler hayranlarını bırakın. Kapı dağılmasını en aza indirmek için kapalı, odada kalır ve idare ve davranışsal eğitim odasında her sıçan tartın. Ağırlıkları kaydedin ve sonra hayvan bakım tesisi için fareleri dönmek. </li></ol></li><li> Iki kısa alışkanlık seansta klima odalarına fareleri alıştırmak. <ol><li> , Davranışsal eğitim odası sıçan taşıyın her rat ağırlığını kaydetmek,ve belirlenen iyileştirme odasının içine, her sıçan yükleyin. </li><li> İlk alışma oturumda yarım Bağlamında 1 olarak odaları ve Bağlamında 2 akçeye kadar ayarlayın. </li><li> İkinci alışkanlık oturumda önceki oturumda kullanılan değildi bağlamda her odasını kurmak. </li><li> , Farelerin yarısı bu tür ideal bir birinci doğrultuda 1. ardından ilk Bağlam 2 maruz Bağlam 2 ve diğer yarısı, ardından Bağlam 1 maruz kaldığı, bir denge şekilde alışkanlık oturumları yürütmek hem alışkanlık oturumları yürütmek Gerekirse iki gün yayılabilir rağmen aynı gün,. </li><li> Alışma oturumları için, programın verildikten sonra houselight 1 dk aydınlatmak için bir bilgisayar programı kullanmak. 20 dakikalık bir süre boyunca yapılan akışkan ağzı girdilerinin sayısı kaydedilir. Oturumun sonunda, kapatmak için houselight programlamak. Alışma oturumları sırasında herhangi etanol veya ipuçlarını sunmak etmeyin. </li></ol></li&gt; <li> , Odalarından fareleri kaldır evlerinde kafeslerde onları geri ve hayvan bakım tesisi onları geri taşıma. </li><li> Ekipmanları (örneğin, zemin panelleri, atık tepsiler, petri) temizleyin. Daha fazla ayrıntı için adım 5.7 bakınız. </li></ol> 5. Pavlovyan Ayrımcılık Eğitimi (PDT) Davranışsal tren sıçan etanol ve olmayan bir ikinci işitsel işaret ile eşleştirilmiş bir işitsel işaret arasındaki ayrım. Deneyin bu safhası için,% 15 etanol ile, 20 ml şırınga doldurun. <ol><li> 3.3.2 ve 3.3.3 adımda tarif edildiği gibi, farklı bir bağlam oluşturmak için görsel, koku alma bölgesinin özel konfigürasyonu ve uyaranı her iyileştirme odası kıyafet <ol><li> Etanol tüketimi ve tercihinize göre, Bağlam 1 ve dengelenmiş biçimde Bağlamında 2 diğer yarısı sıçanların yarısı atama ev kafes etanol erişim prosedürünün son 2 seans arasında ortalama. Devam için başvurunext Bağlam A. NOT olarak PDT sırasında kullanılan: Her sıçan sadece eğitimin bu aşamasında bir bağlam deneyim gerekir. </li><li> Koku uyaran her klima odasına eklenecek son bağlamsal uyaran olduğundan emin olun. Koku uyarıcı ihtiva eden ve farklı koku comingling en aza indirmek için, odacık ve ses zayıflatıcı hücrenin kapıları kapatın. </li></ol></li><li> , Davranışsal eğitim odasına sıçan getirin her rat ağırlığını kaydetmek, ve belirlenen klima odasına her sıçan yükleyin. </li><li> Her PDT oturumu sırasında aşağıdaki olaylar dizisini kontrol bilgisayar programını başlatın. <ol><li> Programından sonra 5 dk verildikten anda, houselight aydınlatmak. </li><li> Beyaz gürültü uyarıcı sunmak ve tıkırtı 16 kez her uyaran. CS + olduğu, bu işitsel uyarımın biri belirler ve diğer iki bağlamlarında bir denge şekilde, CS-için. </li><li> Her CS + ve CS deneme l Yapast 10 sn. </li><li> CS + &#39;nın son 6 sn boyunca sıvı giriş 0.2 ml etanol sağlar. CS- sırasında herhangi etanol teslim etmeyin. </li><li> Her PDT oturumu ortalama son 58 dakika yapın. Bir değişken zaman 67 sn programa CS + ve CS- her sunun. </li><li> 10 sn CS aralık sırasında Tutanak akışkan bağlantı girişleri (CS sunum sırasında 10 sn), 10 saniye önceden CS aralığı (hemen önce CS başlangıcından 10 sn) ve 10 sn sonrası CS aralığı (hemen 10 sn Aşağıdaki CS CS + ve CS sunumlar yanı sıra tüm oturum için toplam sıvı liman girişleri için) ofset. Ayrıca bu aralıklar sırasında yapılan her liman giriş süresini kaydedebilirsiniz. </li><li> Oturum sonunda, houselight kapatın. </li></ol></li><li> , Odalarından fareleri kaldır evlerinde kafeslerde onları geri ve hayvan bakım tesisi onları geri taşıma. </li><li> Sıçanlar, her biri s PDT teslim etanol 3.2 ml tüketilen sağlamak için sıvı noktalarını kontrolsalgılamanın ardından. </li><li> Küçük bir su miktarını ihtiva eden 60 ml&#39;lik bir şırınga ile polietilen borudan dışarı etanol yıkayın. Daha sonra, kuru olduğundan emin olmak için, ikinci bir boş şınnga kullanılarak, boru içinden havanın 60 mi geçmektedir. </li><li> Ekipmanı temizleyin. Günlük temizlik için, zemin panelleri, atık tepsiler ve Petri bulaşıkları yıkamak. Haftada bir kez, tüm klima odasını temizleyin. Deney aparatı içine istenmeyen kokuları almaktan kaçınması kokulu temizlik ürünleri kullanmayın. </li><li> Sıçanlar CS- vs CS + kendi port girişi yanıtları istikrarlı ayrımcılığı göstermek kadar günlük PDT oturumları devam ediyor. NOT: CS- yanıt olarak yapılan liman girişleri düşük kalmalıdır ise CS + cevaben yapılan Liman girişleri, seans içinde yükselecektir. Gerekli PDT oturumların tam sayısı bir rehber olarak, yaklaşık 20 oturum planı, değişebilir yanıt klimalı ayrımcılık, ama gerçekleştirme olanağı. </li></ol> 6. Extinction <ol><li> Her klima cham kıyafetber görsel, koku alma ve dokunma uyaranlara fareler seans FDT sırasında yaşanan birinden farklı bir bağlam yaratmak. Bağlam 1 PDT kullanıldı Örneğin, tükenme oturumları için Bağlamında 2 olarak odasını yapılandırın. Bağlam B olarak nesli sırasında kullanılan bağlamda bakın </li><li> Aynı seans FDT için söndürme oturumları yürütmek, ancak CS + sırasında herhangi etanol teslim yok. <ol><li> CS + ve CS- sunmak için PDT sırasında kullanılan aynı bilgisayar programını kullanın. </li><li> Deneyin aşamalarında genelinde tutarlılığı korumak için, şırınga pompası içine boş bir şırınga yüklemek ve pompa açık bırakın. Polietilen boru tükenme oturumlardan önce etanol içermediğinden emin olun. </li></ol></li><li> Sıçanlar artık gösteri CS + ve CS- arasındaki yanıt ayrımcılığa kadar günlük söndürme oturumları devam ediyor. NOT: differe kalmayıncaya kadar CS + cevaben yapılan Liman girişleri giderek, söndürme oturumlar boyunca azalma olmalıdırCS- yanıt olarak yapılan CS + yanıt olarak yapılan liman girişleri ve liman girişleri arasında nce. Değişebilir yanıt klimalı, ama bir rehber olarak, yaklaşık 8 oturum planı söndürür için gerekli nesli oturumların tam sayısı. </li><li> Adım 5.7 &#39;de tarif edildiği gibi, her bir oturumun sonundaki ekipmanı temizleyin. </li></ol> 7. Bağlam kaynaklı Yenileme Testi <ol><li> PDT oturumları sırasında yaşandı bağlamını oluşturmak için görsel, koku alma ve dokunma uyaranları her klima odasına donatın. Örneğin, belirli bir sıçan seans FDT Bağlam 1 yaşıyorsanız, test bölümünde Bağlamında 1 olarak onun odasını yapılandırın. Bağlam A olarak yenileme testi sırasında kullanılan bağlamda bakın </li><li> Aynı seans FDT için bağlam-kaynaklı yenileme testi yapmak, ancak yenileme testi sırasında herhangi etanol teslim yok. Günümüze Etanol kesintisi CS + ve PDT oturumları sırasında daha önce olduğu gibi CS, ama. <ol><li> Aynı bilgisayar pr kullanınCS + ve CS- sunmak için PDT sırasında kullanılan PROGRAM ÇA Ğ RISI. </li><li> , Fazlar arasında tutarlılığı sağlamak şırınga pompası içine boş bir şırınga yüklemek ve bırakmak için pompa döndü. Polietilen boru test oturumu önce etanol içermediğinden emin olun. </li></ol></li><li> Pavlovyan klimalı alkol-arama davranışının bağlam kaynaklı yenileme gözlemleyin. NOT: Bu yenilenme CS + &#39;ya ve CS- göre CS-, yanıt olarak yapılan liman giriş davranışlarında bir değişiklik, CS +&#39; ya karşılık olarak yapılan bağlantı girişlerin sayısı içerisinde olan selektif bir artış ile daha anlaşılır olacaktır gözlenen yanıt vermenin söndürme eğitimi sonu. </li><li> Adım 5.7 &#39;de tarif edildiği gibi, oturumun sonundaki ekipmanı temizleyin. </li></ol>

<ol>
	<li>Field, M., Duka, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cues+paired+with+a+low+dose+of+alcohol+acquire+conditioned+incentive+properties+in+social+drinkers.">Cues paired with a low dose of alcohol acquire conditioned incentive properties in social drinkers.</a> Psychopharmacology (Berl). 159, 325-334 (2002).</li><li>Litt, M. D., Cooney, N. L., Morse, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reactivity+to+alcohol-related+stimuli+in+the+laboratory+and+in+the+field:+predictors+of+craving+in+treated+alcoholics).">Reactivity to alcohol-related stimuli in the laboratory and in the field: predictors of craving in treated alcoholics).</a> Addiction. 95, 889-900 (2000).</li><li>Pomerleau, O. F., Fertig, J., Baker, L., Cooney, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reactivity+to+alcohol+cues+in+alcoholics+and+non-alcoholics:+implications+for+a+stimulus+control+analysis+of+drinking.">Reactivity to alcohol cues in alcoholics and non-alcoholics: implications for a stimulus control analysis of drinking.</a> Addict Behav. 8, 1-10 (1983).</li><li>Sinha, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=New+findings+on+biological+factors+predicting+addiction+relapse+vulnerability.">New findings on biological factors predicting addiction relapse vulnerability.</a> Curr Psychiatry Rep. 13, 398-405 (2011).</li><li>Conklin, C. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Environments+as+cues+to+smoke:+implications+for+human+extinction-based+research+and+treatment.">Environments as cues to smoke: implications for human extinction-based research and treatment.</a> Exp Clin Psychopharmacol. 14, 12-19 (2006).</li><li>Conklin, C. A., Robin, N., Perkins, K. A., Salkeld, R. P., McClernon, F. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Proximal+versus+distal+cues+to+smoke:+the+effects+of+environments+on+smokers'+cue-reactivity.">Proximal versus distal cues to smoke: the effects of environments on smokers' cue-reactivity.</a> Exp Clin Psychopharmacol. 16, 207-214 (2008).</li><li>Janak, P. H., Chaudhri, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+potent+effect+of+environmental+context+on+relapse+to+alcohol-seeking+after+extinction.">The potent effect of environmental context on relapse to alcohol-seeking after extinction.</a> Open Addict J. 3, 76-87 (2010).</li><li>Chaudhri, N., Sahuque, L. L., Cone, J. J., Janak, P. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reinstated+ethanol-seeking+in+rats+is+modulated+by+environmental+context+and+requires+the+nucleus+accumbens+core.">Reinstated ethanol-seeking in rats is modulated by environmental context and requires the nucleus accumbens core.</a> Eur J Neurosci. 28, 2288-2298 (2008).</li><li>Chaudhri, N., Sahuque, L. L., Janak, P. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Context-induced+relapse+of+conditioned+behavioral+responding+to+ethanol+cues+in+rats.">Context-induced relapse of conditioned behavioral responding to ethanol cues in rats.</a> Biol Psychiatry. 64, 203-210 (2008).</li><li>Crombag, H. S., Shaham, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Renewal+of+drug+seeking+by+contextual+cues+after+prolonged+extinction+in+rats.">Renewal of drug seeking by contextual cues after prolonged extinction in rats.</a> Behav Neurosci. 116, 169-173 (2002).</li><li>Fuchs, R. A., Eaddy, J. L., Su, Z. I., Bell, G. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Interactions+of+the+basolateral+amygdala+with+the+dorsal+hippocampus+and+dorsomedial+prefrontal+cortex+regulate+drug+context-induced+reinstatement+of+cocaine-seeking+in+rats.">Interactions of the basolateral amygdala with the dorsal hippocampus and dorsomedial prefrontal cortex regulate drug context-induced reinstatement of cocaine-seeking in rats.</a> Eur J Neurosci. 26, 487-498 (2007).</li><li>Marchant, N. J., Hamlin, A. S., McNally, G. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lateral+hypothalamus+is+required+for+context-induced+reinstatement+of+extinguished+reward+seeking.">Lateral hypothalamus is required for context-induced reinstatement of extinguished reward seeking.</a> J Neurosci. 29, 1331-1342 (2009).</li><li>Zironi, I., Burattini, C., Aicardi, G., Janak, P. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Context+is+a+trigger+for+relapse+to+alcohol.">Context is a trigger for relapse to alcohol.</a> Behav Brain Res. 167, 150-155 (2006).</li><li>Sciascia, J. M., Mendoza, J., Chaudhri, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Blocking+dopamine+D1-like+receptors+attenuates+context-induced+renewal+of+Pavlovian-conditioned+alcohol-seeking+in+rats.">Blocking dopamine D1-like receptors attenuates context-induced renewal of Pavlovian-conditioned alcohol-seeking in rats.</a> Alcohol Clin Exp Res. 38, 418-427 (2014).</li><li>Chaudhri, N., Woods, C. A., Sahuque, L. L., Gill, T. M., Janak, P. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Unilateral+inactivation+of+the+basolateral+amygdala+attenuates+context-induced+renewal+of+Pavlovian-conditioned+alcohol-seeking.">Unilateral inactivation of the basolateral amygdala attenuates context-induced renewal of Pavlovian-conditioned alcohol-seeking.</a> Eur J Neurosci. 38, 2751-2761 (2013).</li><li>Chaudhri, N., Sahuque, L. L., Schairer, W. W., Janak, P. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Separable+roles+of+the+nucleus+accumbens+core+and+shell+in+context-+and+cue-induced+alcohol-seeking.">Separable roles of the nucleus accumbens core and shell in context- and cue-induced alcohol-seeking.</a> Neuropsychopharmacology. 35, 783-791 (2010).</li><li>Sparks, L. M., Sciascia, J. M., Ayorech, Z., Chaudhri, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vendor+differences+in+alcohol+consumption+and+the+contribution+of+dopamine+receptors+to+Pavlovian-conditioned+alcohol-seeking+in+Long-Evans+rats.">Vendor differences in alcohol consumption and the contribution of dopamine receptors to Pavlovian-conditioned alcohol-seeking in Long-Evans rats.</a> Psychopharmacology (Berl). 231, 753-764 (2014).</li><li>Simms, J. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intermittent+access+to+20%+ethanol+induces+high+ethanol+consumption+in+Long-Evans+and+Wistar+rats.">Intermittent access to 20% ethanol induces high ethanol consumption in Long-Evans and Wistar rats.</a> Alcohol Clin Exp Res. 32, 1816-1823 (2008).</li><li>Wise, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Voluntary+ethanol+intake+in+rats+following+exposure+to+ethanol+on+various+schedules.">Voluntary ethanol intake in rats following exposure to ethanol on various schedules.</a> Psychopharmacologia. 29, 203-210 (1973).</li><li>Bouton, M. E., Westbrook, R. F., Corcoran, K. A., Maren, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Contextual+and+temporal+modulation+of+extinction:+behavioral+and+biological+mechanisms.">Contextual and temporal modulation of extinction: behavioral and biological mechanisms.</a> Biol Psychiatry. 60, 352-360 (2006).</li><li>Pavlov, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Conditioned reflexes: an investigation of the physiological activity of the cerebral cortex. , (1927).</li><li>Gibbon, J., Baldock, M. D., Locurto, C., Gold, L., Terrace, H. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Trial+and+intertrial+durations+in+autoshaping.">Trial and intertrial durations in autoshaping.</a> J Exp Psychol Anim Behav Process. 3, 264-284 (1977).</li><li>Holland, P. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=CS-US+interval+as+a+determinant+of+the+form+of+Pavlovian+appetitive+conditioned+responses.">CS-US interval as a determinant of the form of Pavlovian appetitive conditioned responses.</a> J Exp Psychol Anim Behav Process. 6, 155-174 (1980).</li><li>Stein, L., Sidman, M., Brady, J. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Some+effects+of+two+temporal+variables+on+conditioned+suppression.">Some effects of two temporal variables on conditioned suppression.</a> J Exp Anal Behav. 1, 153-162 (1958).</li><li>Coleman, D. A., Hemmes, N. S., Brown, B. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Relative+durations+of+conditioned+stimulus+and+intertrial+interval+in+conditioned+suppression.">Relative durations of conditioned stimulus and intertrial interval in conditioned suppression.</a> J Exp Anal Behav. 46, 51-66 (1986).</li><li>Schwarz-Stevens, K. S., Cunningham, C. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pavlovian+conditioning+of+heart+rate+and+body+temperature+with+morphine:+effects+of+CS+duration.">Pavlovian conditioning of heart rate and body temperature with morphine: effects of CS duration.</a> Behav Neurosci. 107, 1039-1048 (1993).</li><li>Palm, S., Roman, E., Nylander, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Differences+in+voluntary+ethanol+consumption+in+Wistar+rats+from+five+different+suppliers.">Differences in voluntary ethanol consumption in Wistar rats from five different suppliers.</a> Alcohol. 45, 607-614 (2011).</li><li>Gauvin, D. V., Moore, K. R., Holloway, F. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Do+rat+strain+differences+in+ethanol+consumption+reflect+differences+in+ethanol+sensitivity+or+the+preparedness+to+learn.">Do rat strain differences in ethanol consumption reflect differences in ethanol sensitivity or the preparedness to learn.</a> Alcohol. 10, 37-43 (1993).</li><li>Goodwin, F. L., Amit, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Relative+taste+thresholds+for+ethanol,+saccharin,+and+quinine+solutions+in+three+strains+of+rats+nonselected+for+ethanol:+a+comparative+study.">Relative taste thresholds for ethanol, saccharin, and quinine solutions in three strains of rats nonselected for ethanol: a comparative study.</a> Exp Clin Psychopharmacol. 8, 216-224 (2000).</li><li>Goodwin, F. L., Bergeron, N., Amit, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Differences+in+the+consumption+of+ethanol+and+flavored+solutions+in+three+strains+of+rats.">Differences in the consumption of ethanol and flavored solutions in three strains of rats.</a> Pharmacol Biochem Behav. 65, 357-362 (2000).</li><li>Wilson, A. W., Neill, J. C., Costall, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Strain+differences+in+ethanol+preference+and+reinforced+behaviour:+a+comparison+of+two-bottle+choice+and+operant+self-administration+paradigms.">Strain differences in ethanol preference and reinforced behaviour: a comparison of two-bottle choice and operant self-administration paradigms.</a> Behav Pharmacol. 8, 37-46 (1997).</li><li>Yap, C. S., Richardson, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Extinction+in+the+developing+rat:+an+examination+of+renewal+effects.">Extinction in the developing rat: an examination of renewal effects.</a> Dev Psychobiol. 49, 565-575 (2007).</li><li>Carew, M. B., Rudy, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Multiple+functions+of+context+during+conditioning:+a+developmental+analysis.">Multiple functions of context during conditioning: a developmental analysis.</a> Dev Psychobiol. 24, 191-209 (1991).</li><li>Chaudhri, N., Sahuque, L. L., Janak, P. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ethanol+seeking+triggered+by+environmental+context+is+attenuated+by+blocking+dopamine+D1+receptors+in+the+nucleus+accumbens+core+and+shell+in+rats.">Ethanol seeking triggered by environmental context is attenuated by blocking dopamine D1 receptors in the nucleus accumbens core and shell in rats.</a> Psychopharmacology (Berl). 207, 303-314 (2009).</li></ol>

Tüm deneysel prosedürleri Concordia Üniversitesi Hayvan Araştırmaları Etik Kurulu tarafından onaylanmış ve Hayvan Bakımı Kanada Konseyi kurallarına uygundur edildi. Bu makalenin açık erişim yayın Med Associates Inc sponsorluğunda ile mümkün olmuştur

Bu prosedürün sonuçları rutin alkol teslimatı eşlik ayrık çevresel uyaranlar alkol arama davranışını sürücü kapasitesini edinebilirler ortaya koyuyor. Onlar da önce kullanılabilirliği veya alkol olmaması ile ilişkili bağlamsal uyaranlara ayrık alkol-akıllı ipuçlarına davranışsal tepkiler klimalı rehberliği olduğunu göstermektedir. Protokol çerçevesinde kritik adım Bu görev bağlamları sıçan için dış olan uyaranlara dahil. Ancak, sınavda sıçan interoseptif devlet de yenilenmesini 20 etkileyebilecek bir &#39;bağlam&#39; teşkil edebilir. Bu intrakranial mikroinfüzyonlar veya sistemik enjeksiyonlar gibi, yenileme testi önce ortaya çıkar ve bunların interoseptif durumunu değiştirmek herhangi prosedürlere sıçan alıştırmak için bu nedenle önemlidir. Ayrıca, mikroinfüzyonlar veya sistemik enjeksiyonlar için alışma nesli ve PDT lar hem öncesinde yapılmalıdıressions Deneyin belirli bir fazı ile ilişkili hale gelmesini önlemek için bu yöntemleri. , CS süresi, CS-ABD aralığı ve intertrial aralığı (ITI) gibi zamansal parametreleri, uzun klima paradigmalar 21-26 çeşitli yanıt klimalı etkileyen çeşitli bilinmektedir. Benzer şekilde, zamansal parametreler bizim prosedüründe yenileme etkisi gözlem etkileyebilir. Protokolde belirtilen dışındaki parametrelerin Herhangi bir set deneysel büyük soruşturmalarda bunları istihdam geçmeden önce pilot çalışmalar valide edilmelidir. Değişiklikler ve sorun giderme Önceki araştırmalar, fareler kafes evlerinde tüketmek etanol miktarı 17,27 fareler satın alınan gelen ilgili bir fonksiyonu olarak değişebilir bulmuştur. Tedarikçi nedenle çalışmanın bu aşamasında önemli bir husustur. Aynı şekilde, fare soyunun tercih co olmalıdıretanol tüketimi 28-31 strain farklılıklar çok sayıda rapor var gibi, dikkatli nsidered. Caydırıcı bir klima paradigma önce iş sıçanların gelişimsel yaşı Pavlovyan şartlı korku tepkisi 32 yenilenmesi gözlem etkilediğini göstermiştir. (Doğum sonrası 20 gün daha genç) çok genç sıçanlarda bir yenileme etkisinin olmaması nedeniyle bağlamsal bilgi 33 engelli kodlama olduğu ileri sürülmüştür. Bu prosedür kullanılmak üzere sıçanların gelişimsel yaş bu nedenle dikkate alınmalıdır. 10% 9,16,% 15 14, 15 veya% 20 etanol çözeltileri, ev sahibi kafes etanol erişim ve deney PDT aşamalarında kullanıldığı zaman Pavlov kıvamlandırılmış alkol arama davranışının Yenilenme gözlenmiştir. Araştırmacılar, LABORATOR bu prosedür oluşturan amaçları için etanol, bu konsantrasyonlardan herhangi kullanabilirler. Pavlovyan ayrımcılık eğitim edinimi sırasında teslim edildi, tüm etanol tüketilen edilmiştir sağlamak için her seanstan sonra sıvı portları kontrol etmek önemlidir. Ek 10 için klima odalarına sıçan Leaving - Her seanstan sonra 15 dakika oturumu sırasında tüketilen değildi herhangi etanol tüketimini teşvik etmek için erken PDT yapılabilir. PDT ilerledikçe limanlarda unconsumed etanol bırakarak farelerin sayısı düşmelidir. PDT sıçanların sonunda ya ise (a) tüm etanol tüketen değil ve / veya (b) bu ​​denekler çalışmanın düştü gerektiğini daha sonra CS + yanıt vermiyor. En güvenilir bir sıçan CS- daha CS + &#39;ya daha fazla cevap verir. Ancak, bazı fareler böylece ayrımcılık kanıt gösteren değil, hem ipuçlarına yüksek seviyelerde yanıt verebilir. PDT sırasında yüksek CS + ve CS- hem yanıt göstermektedir fareler çalışmadan bırakılır. Bizim tecrübelerimize göre, bu konular dikkat çekici ayrımcılığı gösteriyorPDT sırasında CS- yanıt kendi yüksek düzeyde sıvı giriş etanol varlığı ile tahrik edilir düşündürmektedir etanol yokluğunda birinci söndürme oturumu süresince,. Bu kişiler de sağlam yenileme etkilerini gösterme eğilimindedir. Prosedürün Sınırlamalar Yenileme Test etanol yokluğunda yürütülür için, CS + ile ortaya çıkarılan durumunu bağlantı girişleri yavaş yavaş test oturumu boyunca azalır. Bu nedenle, davranış toplam miktarı deneysel olarak ortaya çıkan değişiklikler değerlendirilebildiği karşı test üretilen oldukça düşüktür. Yanıt bu görevde test seansı sonunda karşı başlangıcında daha yüksek olma eğilimindedir, çünkü bir deneme-by-deneme olarak yanıt koşullanmış üzerinde deneysel manipülasyon etkilerini incelemek önemlidir. Sıvı prize Yazılar bu görevi ana bağımlı ölçüsünü sunar. Ancak, hatalı bir port girişi regi olabilirbir hayvan visker sıvı giriş açıklığına karşı gelen kızılötesi ışın kırmak için sıvı haznesine yakın olup olmadığını stered. Seyrek, hatalı yanıtlar ortada iken, toplam liman dramatik bir artış önceki oturumlarında deneğin davranışları göreceli girişleri gibi. Hayvanları videoya olası hatalı tepkilerin saptanmasını kolaylaştırmak, eğitim ve test boyunca fareler tarafından sergilenen davranışların bir daha rafine analizi için olanak sağlayacak. Mevcut / alternatif yöntemlere göre tekniğin önemi Ilaç-arama davranışının Bağlam-kaynaklı yenileme büyük ölçüde böyle bir kolu basın 8,34 veya burun 12 poke olarak birincil bağımlı değişken bir operant yanıt olduğu enstrümantal bir klima görevi kullanılarak incelenmiştir. Bu prosedürde, ilaç arama yanıtı sunumları ile ortaya sıvı giriş için &quot;klimalı bir yaklaşım&quot; dirCS +. Bu yanıt muhtemel çevresel uyaranlara ve insanlarda kötüye ilaçların farmakolojik etkileri arasında birliklerin oluşumunu aracılık öğrenme sürecidir Pavlovyan öğrenme yoluyla elde edilir. Gelecek uygulamalar Bu görev, Pavlov durumunu alkol arama davranışının 16 bağlamı kaynaklı yenilenmesine katılan Nöral mekanizmalarını incelemek için Neuropharmacology, optogenetik ve nörokimyasal ile kombinasyon halinde de kullanılabilir. Ayrıca, Pavlovyan klimalı alkol-arama davranışının satın alma ve nesli düzenleyen davranışsal ve nöral mekanizmalar incelenmiştir edilebilir. Son olarak, bu görev, insan addi isteka maruz tedavi sonrası ilaç akıllı işaretlere reaktifliğine çevresel bağlamda ilişkili ilacın etkisini azaltmayı amaçlayan translasyonel araştırma için önemli bir yön yenilenmesini engelleyebilecek tükenme manipülasyonları keşfetmek için kullanılabilircts.

Ayık kalan alkol kötüye bozukluklardan muzdarip bireylerin karşılaştığı önemli bir sorundur. Yoksunluk, Pavlovyan koşullama yoluyla, sarhos¸luk 1,2 ile ilişkili hale gelebilir rutin alkol kullanımı eşlik çevresel uyarıcıların, davranışsal, psikolojik ve fizyolojik etkisi açığı zamanıdır. Alkol akıllı işaretlere maruz kalma nüks 3,4 kolaylaştırmak alkol arayan davranışları teşvik edebilir alkol aşerme gibi şartlanmış tepkiler, ortaya çıkarabilir. Alkol tüketimine neden davranış basmakalıp dizileri uyaranların bazı türleri rutin alkol alımının farmakolojik etkileri hemen önce yaşanan neden olabilir. Örneğin, görme, koku ve alkol tadı güvenilir sarhoşluk öncesinde alkol duyusal özellikleri vardır. &quot;Farklı &#39;veya&#39; Proksima&#39;ya olarak adlandırılır Bu ipuçları, ek olarakl &#39;ipuçları, ilaçlar düzenli ayrıca özlem 5,6 provoke edebilir kullanıldığı çevresel bağlamlarda. Ilaçlar, daha önce bu nedenle 7 nüks için kritik bir tetikleyicisi olabilir ikinci edildiği fiziksel konuma maruz kalma. Hayvan modelleri ilaç arayışı davranışı 8-13 ilaca bağlı bağlamlarda etkisini aracılık nöral mekanizmalarını incelemek için geliştirilmiştir. Burada açıklanan prosedür alkol tüketimi ile ilişkili bağlamları ayrı, alkol akıllı Pavlovyan ipucu tarafından ortaya çıkarmasa alkol arama davranışını modüle nasıl soruşturma için izin verir. Pavlovyan ayrımcılık eğitim sıçan davranışsal iki işitsel koşullanmış uyaran, alkol ile eşleştirilmiş bir CS + ve olmayan bir CS- ayırt eğitilmiş belirli bir çevresel bağlamda, yapılır. Extinction oturumları sonra CS yanıt farklı bir bağlamda, yapılmaktadırAlkol sonucu tevkif ediliyor gibi + azalır. Daha sonra, alkol ilişkili Pavlovyan eğitim bağlamında için reexposure CS- yanıt olarak hiçbir değişiklik CS + tarafından ortaya çıkarılan alkol arama davranışı seçici bir artış, tetikler. Biz sürekli 9,14-16 çoğaltılmadan Bu sonuç, ilaç bağlamlar ilaç dağıtım 10,13 ile ilişkili edimsel tepkilerin yenilenmesini uyardıkları bulunmuştur hangi vesile klima prosedürler bulgularını uzanır.

<table><tbody><tr><td>Heavy-duty utility cart</td><td>Rubbermaid</td><td>#4520-88</td><td>Used to transport rats in their home cage from the colony room to the behavior room or other facilities</td></tr><tr><td>Rats, Long-Evans</td><td>Harlan</td><td></td><td>Rats weighed 220-240 g on arrival</td></tr><tr><td>Ohaus scale</td><td>Fisher</td><td>#S402421</td><td>For weighing rats; tare the bottom of a plastic container first, then put the rat in it to weigh it</td></tr><tr><td>Beta-chips, aspen</td><td>Harlan</td><td>#7090A</td><td>Bedding for home cage</td></tr><tr><td>Nylabone</td><td>Bio-Serv</td><td>#K3580</td><td>Enrichment provided in the home cage</td></tr><tr><td>Autoclavable rodent chow</td><td>Agribrands, Charles River</td><td>#5075</td><td>For feeding rats</td></tr><tr><td>Wire bar cage lid</td><td>Ancare</td><td>#R20SS2B</td><td>Custom made with two slots for&amp;nbsp; bottles</td></tr><tr><td>Cage bottom</td><td>Ancare</td><td>#R20PC</td><td>To house rats</td></tr><tr><td>Stoppers</td><td>Ancare</td><td>#8.5</td><td>Rubber stoppers to occlude opening in water bottles &amp;amp; graduated cylinders; goes with ball point sipper tubes&amp;nbsp;</td></tr><tr><td>Ball point tubes, 1.5&quot; length</td><td>Ancare</td><td>#TD-99</td><td>Inserted in stoppers, enables rats to drink from water bottles and graduated cylinders</td></tr><tr><td>Water bottles</td><td>Ancare</td><td>#FSPC8HT</td><td>473 ml (16 oz) capacity, needs to be occluded with stopper</td></tr><tr><td>Graduated cylinders, 100 ml</td><td>Fisher</td><td>#0300741</td><td>To contain ethanol during alcohol exposure in the home cage; spouted end needs to be cut off to enable occlusion with stoppers</td></tr><tr><td>Mettler scale</td><td>Mettler Toledo</td><td>#MS6001S</td><td>For weighing water bottles and ethanol cylinders</td></tr><tr><td>Polyethylene tubing, 1/32&quot; inner diameter,&amp;nbsp; 1/32&quot; wall thickness, 3/32&quot; outside diameter</td><td>Fisher</td><td>#14-169-1A</td><td>To connect 20 ml ethanol syringe to fluid port</td></tr><tr><td>Needle, 18 g, 1.5&quot; length</td><td>Fisher</td><td>#B305199</td><td>To connect polyethylene tubing to ethanol syringes; needs to be filed</td></tr><tr><td>Syringes, 20 ml, Luer-Lok non-sterile</td><td>Fisher</td><td>#1482316J</td><td>To contain ethanol on the fluid pumps; needs to be connected to the polyethylene tubing by a 18 G 1 1/2 needle</td></tr><tr><td>Syringes, 60 ml, Luer-Lok non-sterile</td><td>Fisher</td><td>#14-820-11</td><td>To flush polyethylene tubing after PDT sessions</td></tr><tr><td>Single speed syringe pump, 3.33 rpm</td><td>Med Associates Inc.</td><td>#ENV-018MD</td><td>To hold 20 ml ethanol syringes and deliver ethanol</td></tr><tr><td>Fluid port</td><td>Med Associates Inc.</td><td>#ENV-254-CB</td><td>To enable ethanol delivery during PDT sessions; connected to ethanol syringes with polyethylene tubing</td></tr><tr><td>Port entry infrared detector</td><td>Med Associates Inc.</td><td>#ENV-215M</td><td>Fixed on both sides of&amp;nbsp; fluid port; need 2 per fluid port</td></tr><tr><td>Houselight, 28 V, 100 mA</td><td>Med Associates Inc.</td><td>#ENV-135M</td><td>Provides general lighting in conditioning chamber</td></tr><tr><td>Clicker module</td><td>Med Associates Inc.</td><td>#ENV-225SM</td><td>Auditory stimulus for conditioning chamber</td></tr><tr><td>White noise generator with speaker</td><td>Med Associates Inc.</td><td>#PHM-100</td><td>Auditory stimulus for conditioning chamber</td></tr><tr><td>Bar floor</td><td>Med Associates Inc.</td><td>#ENV-009A-GF</td><td>To go with modular test chamber</td></tr><tr><td>Bench coat, absorbent</td><td>VWR</td><td>#89126-790</td><td>Absorbent paper to put in metal tray, needs to be cut to fit the metal tray</td></tr><tr><td>Polycarbonate sheet, 1/8&quot; thick, 12-5/8&quot; x 10&quot;</td><td>Johnston Plastics</td><td>#30102515</td><td>To make smooth transparent floor insert used for context 1. Needs to be cut in 11.5&quot; x 12.25&quot; pieces</td></tr><tr><td>Aluminium sheet perforated, 0.063&quot; thick, 48&quot; x 96&quot;, 0.250&quot; holes x 0.375&quot; centers</td><td>Anica Steel</td><td></td><td>To make perforated floor insert used for context 2. Needs to be cut in 11.5&quot; x 12.25&quot; pieces</td></tr><tr><td>Black cardboard, 0.053&quot; thick, 28&quot; x 44&quot;</td><td>Omer DeSerres</td><td>#P1909</td><td>To construct panels covering the ceiling, door and back wall of the conditioning chamber in context 1. Needs to be cut to size. Each chamber needs three panels measuring approximately 11.5&quot; x 13.25&quot;. The panels can be joined by the narrower side using duct tape.</td></tr><tr><td>All-purpose strength duct tape, 1.88&quot; x 45 yd.</td><td>Duck Tape</td><td></td><td>Adhesive material to connect the black cardboard panels used to cover the back wall, ceiling and door in context 1.</td></tr><tr><td>Modular test chamber</td><td>Med Associates Inc.</td><td>#ENV-009A</td><td>Conditioning chamber</td></tr><tr><td>Sound attenuating cubicles</td><td>Med Associates Inc.</td><td>#ENV-200R3AM</td><td>Comes with installed 28 V DC fan (#ENV-025F)</td></tr><tr><td>Petri dish</td><td>Fisher</td><td>#08748B</td><td>Bottom only, to contain the sprayed solution that provides the odor stimulus; needs to be centered in the metal tray in conditioning chambers</td></tr><tr><td>PCI interface package</td><td>Med Associates Inc.</td><td>#DIG-700P2-R2</td><td>Connects tabletop interface cabinet to computer; includes 1 interface card, 1 Decode card, 1 ribbon cable and 1 28 V DC power cable</td></tr><tr><td>Large tabletop cabinet and power supply</td><td>Med Associates Inc.</td><td>#SG-6510D</td><td>Used to contain the 12 cards included in the SmartCrtrl 8 Input, 16 Output package</td></tr><tr><td>SmartCtrl 8 Input, 16 Output package</td><td>Med Associates Inc.</td><td>#DIG-716P2</td><td>Used to connect and control the devices in the conditioning chamber. The package includes all the cables, the interface module and the connection panel.</td></tr><tr><td>Med PC IV software</td><td>Med Associates Inc.</td><td>#SOF-735</td><td>Software to run programs. Needs to be installed on the computer.</td></tr><tr><td>Monitor LG, 19&quot; LCD</td><td>Concordia computer store</td><td>#W1942TQ-BF</td><td>Computer monitor; to go with computer running Med PC IV</td></tr><tr><td>HP Z200 tower workstation</td><td>Concordia computer store</td><td>#BZ788US#ABA</td><td>Computer on which Med PC IV is run</td></tr><tr><td>Benzaldehyde, &amp;ge;99%</td><td>Les produits chimiques OMEGA Chemical Company Inc.</td><td>#B37-50</td><td>Dilute in tap water for almond context odor</td></tr><tr><td>Lemon oil, cold pressed, California</td><td>Sigma Aldrich</td><td>#W262528-1KG-K</td><td>Dilute in tap water for lemon context odor</td></tr><tr><td>Ethyl alcohol, 95%</td><td>Commercial Alcohols</td><td></td><td>Dilute in tap water to desired concentration</td></tr></tbody></table>

a procedure to observe context-induced renewal of pavlovian-conditioned alcohol-seeking behavior in rats

Çevre bağlamlarda hangi ilaç kötüye özlem, kanaatkâr uyuşturucu kullanıcılarının uyuşturucu arama davranışını ve hızlı nüks kolaylaştırabilir öznel bir Pavlovyan klimalı tepkisini tetikleyebilir tüketilir. Biz sıçanlarda alkol-arama davranışının bağlam etkisini aracılık davranışsal ve nöral süreçleri incelemek için bir prosedür geliştirmiştir. Tat aklimasyonundan ve evde kafes içinde% 15 etanol farmakolojik etkileri takiben, erkek Long-Evans sıçan klima odalarına Pavlovyan ayrımcılık eğitimi (PDT) alırsınız. Her günlük (Pazartesi-Cuma) PDT oturumunda, 16 denemeler iki farklı 10 sn işitsel koşullanmış uyaran her oluşur. Bir uyarıcı sırasında, CS +,% 15 etanol içinde, 0.2 ml, oral tüketim için bir sıvı giriş içerisine verilir. İkinci uyaran, CS, etanol ile eşleştirilmiş değil. Seans boyunca, CS- sırasında girişleri ise CS + artışı sırasında sıvı portuna girişleri bir Predi belirten, daha düşük bir seviyede stabilizeCS + ve etanol arasında ctive ilişki elde edilir. PDT sırasında her odası, görsel koku ve dokunma bağlamsal uyaranlara belirli bir yapılandırma ile donatılmıştır. PDT sonra, söndürme eğitim toplam içeriğe uyarıcıların farklı bir konfigürasyona sahiptir, aynı hücre içerisinde gerçekleştirilir. CS + ve CS önce olduğu gibi sunulmaktadır, ancak etanol CS + sırasında liman girişlerinde kademeli bir düşüş neden olan tevkif edilir. Test, sıçanlar, PDT bağlamında bir yere yerleştirilir ve daha önce olduğu gibi CS + ve CS- ile sunulmaktadır, etanol yoktur. Bu manipülasyon CS- sırasında yanıt hiçbir değişiklik ile akıllı CS + alkol sırasında yapılan liman girişlerinin sayısında sağlam ve seçici bir artış, tetikler. Bağlam kaynaklı yenileme olarak adlandırılan bu etki, Pavlovyan alkol uyaranlara yanıt olarak alkol arayan davranışları teşvik etmek alkol tüketimi ile ilişkili bağlamlarda güçlü kapasitesini göstermektedir.

Evde kafes içinde Aralıklı etanol erişim: - 12 seans (Şekil 1) Etanol tüketimi (g / kg) ve evde kafes içinde aralıklı etanol erişim oturumları boyunca etanol tercihi artış, genellikle 8 içinde istikrarlı seviyelere ulaştı. Şekil 1&#39;de gösterildiği veri setinde, kararlı etanol tüketimi ev kafes etanol erişim son iki seans arasında ortalama 1.33 arasında değişmektedir - bireysel sıçanlar için 6.44 g / kg. Ug / kg tüketimi kızağa sonra deney ev kafesinde etanol tüketimini faz durdurulabilir ve sıçanlar seans bir dizi içme bu kararlı bir düzeyde tutulur. Bu aşamada verileri analiz etmek, etanol tüketimi (g / kg) ve etanol tercihi için oturumun denek içi faktör karşısında varyans (ANOVA) ayrı tekrarlanan ölçümler analizi yapmak. Bağlam-kaynaklı yenileme prosedürünün şematik: Her aşamasıdeneysel işlem (PDT, sönme, yenileme testi) Şekil 2&#39;de gösterilmiştir. daha detaylı bilgi için rakam başlığa bakın. Tepki önlemleri ve veri analizi: Aşağıda açıklanan tüm davranış aşamalarında, CS + ve CS- sırasında yapılan liman giriş tepkiler taban port girişi yanıtları-CS öncesi referans normalize edilir. Normalize CS tedbirleri oluşturmak için, ön-CS bazal aralığında yapılan liman girişlerinin sayısını CS + ve CS- sunumlarına sırasında yapılan liman girişlerinin sayısından (CS başlangıcından hemen önce 10 sn) çıkarma. Davranış göstergeleri baz seviyenin üzerinde yükseltilmiş CS sunumlar, spesifik olarak ortaya olarak normalize CS + ve normalize CS tedbirler hizmet vermektedir. Ayrı tekrarlanan ölçümler ANOVA PDT ve sönme aşamaları için oturumu ve CS tipi (CS- vs CS +) tekrarlanan denek içi faktörler ile yürütün. Fazında karşılaştırmalar (PDT, sönme, yenilemekark testi), kullanımı, veri PDT ve nesli son iki seans ve tekrarlanan önlemler ANOVA yenilenme test verilerinin tek oturumda genelinde ortalama. Çoklu karşılaştırmalar için düzeltilmiştir bağımsız veya bağımlı örnekler için anlamlı temel etkileri ve etkileşimleri, kullanım post hoc t-testi takip etmek. Anlamlılık için Kriter α = 0.05 olarak belirlenmiştir. PDT: seans FDT genelinde CS + artışa Liman giriş yanıtları, CS- liman giriş tepkiler genel olarak, düşük ve istikrarlı kalır ise. PDT eğitim erken seanslarda biraz artabilir CS- bu port girişi yanıtları Not; Bununla birlikte, CS- yanıt olarak yapılan bağlantı girişleri CS + &#39;ya karşılık olarak yapılan daha çok daha düşük bir düzeyde kararlı hale getirir. Başarılı ayrımcılık CS sırasında liman girişlerinde istatistiksel olarak anlamlı yükselme gösterdiği + CS- (Şekil 3) ile karşılaştırılır. Bu sonuç Pavlovyan-klimalı alkol arama davranışı olması olduğunu gösterirtr CS CS + kurulmuş, ancak. Extinction: CS + Port giriş tepkiler giderek söndürme oturumlar boyunca düşüş. CS- Port giriş tepkiler söndürme oturumlar boyunca düşük ve istikrarlı kalır. İdeal olarak, CS + ve CS- port girişleri arasında istatistiksel olarak anlamlı fark olmaması kanıtladığı gibi, nesli eğitim sonunda kaldırılmıştır yanıt ayrımcılık. Ancak, hatta nesli eğitim sonunda kalır yanıt ayrımcılığa bazı derecesi için nadir değildir. Bu durumda, söndürme eğitimi, tükenme başında CS + port girişi yanıtların istatistiksel olarak daha düşük olduğu gibi FDT sonunda sonunda CS + port giriş tepkilerini doğrulamak için önemlidir (Şekil 3) . Bu sonuç paterni-Pavlovyan klimalı alkol arama davranışı önemli ölçüde sönmüş olduğunu gösterir. Bağlam kaynaklı yenileme testi: Limansöndürme eğitimi sonunda gözlenen CS + port girişleri göre bağlam kaynaklı yenileme testinde CS + artışı, için giriş yanıtları. CS- port girişleri değişmeden kalır gibi bu artış, CS + seçicidir. Buna ek olarak, bundan dolayı CS + &#39;ya bağlantı girişleri bağlam kaynaklı yenileme test CS- port girişlerinin (Şekil 4) ile karşılaştırıldığında istatistiksel olarak yükselir. CS + port nesli ve test arasındaki girdileri yanı sıra CS + ve test içindeki CS liman girişlerinin karşılaştırmalar karşılaştırmalar istatistiksel onay, testte alkol ilişkili bağlamı tarafından uyarılan Pavlovyan klimalı alkol arama davranışı seçici yenilenmesini gösterir. <img alt="Şekil 1" fo:content-width="4in" src="/files/ftp_upload/51898/51898fig1highres.jpg" width="400" /> Etanol tüketimi ve evde kafes içinde aralıklı etanol erişim tarafından uyarılan tercih 1. Eskalasyon Şekil. &amp; Ortalama# 177; SEM (A) etanol tüketimi (g / kg) ve evde kafes içinde aralıklı etanol erişim 12 seans boyunca (B) etanol tercihi. Her iki tedbir genellikle oturumlar boyunca artırmak ve daha sonra stabilize. Bireysel fareler için 6.44 g / kg - Durağan etanol tüketimi 1,33 arasında değişiyordu ev kafes etanol erişim son iki seans arasında ortalama. Bu veriler,% 15 (h / h) etanol içme Erkek Long-Evans sıçanları kullanılarak elde edilmiştir. <img alt="Şekil 2" fo:content-width="4in" src="/files/ftp_upload/51898/51898fig2highres.jpg" width="400" /> . Şekil 2. Deneysel işlemin şematik bir prosedür üç aşamadan oluşmaktadır: Pavlovyan ayrımcılık eğitimi (PDT), tükenme ve bağlam-kaynaklı yenileme testi. Her PDT oturumu sırasında, sıçanlar etanol teslimi ve 16 denemeler bir işaret, bir işitsel klimalı uyaran (CS +) 16 denemeler almaketanol doğum ile ilişkili olmayan bir ikinci işitsel uyaran (CS). Seans FDT görsel, koku alma belirli yapılandırması ve dokunsal uyaranlara oluşan, Bağlam A&#39;da gerçekleşecek. , Görsel koku ve dokunsal uyaranlara farklı bir dizi oluşur Bağlam B yapılmaktadır söndürme oturumları, sırasında, CS + ve CS sunulmaktadır ancak etanol tevkif edilir. Bağlam-kaynaklı yenileme testi için, sıçanlar Bağlam A iade edilir, ve CS + ve CS etanol olmadan sunulmaktadır. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/51898/51898fig2highres.jpg" target="_blank">, bu rakamın büyük bir versiyonunu görmek için lütfen buraya tıklayınız.</a> <img alt="Şekil 3," fo:content-width="4in" src="/files/ftp_upload/51898/51898fig3highres.jpg" width="400" /> Şekil 3. Toplama ve ayrımcılığa Pavlovyan klimalı etanol için yanıt. Ortalama ± SEM normalize liman girişleri m söndürmeBağlam A ve sönme (oturumları 19-26) - PDT arasında CS + ve CS- boyunca (18 seans 1) ge Bağlam B&#39;de Bu veriler,% 10 eğitimli Erkek Long-Evans sıçanları kullanılarak elde edildi (h / h) PDT sırasında CS + ile birlikte sunuldu koşulsuz uyarıcı (ABD) gibi etanol. * P &lt;0.05, CS- karşı CS +. Şekil başlangıçta Chaudhri, Sahuque &amp; JANAK (2008) yayınladı. Elsevier izni ile kullanılabilir. <img alt="Şekil 4" fo:content-width="5in" src="/files/ftp_upload/51898/51898fig4highres.jpg" width="500" /> Şekil 4. Bağlam kaynaklı Bağlam A. Data Pavlovyan klimalı etanol için yanıt. Ortalama Bağlam A PDT oturumlarında CS + ve CS- sırasında yapılan ± SEM normalize liman girişleri, Bağlam B söndürme oturumları ve yenileme testi yenilenmesidir PDT ve nesli için son iki seans üzerinden ortalama; yenileme testi tek bir oturumu. BuVeri PDT sırasında CS + ile birlikte sunuldu koşulsuz uyarıcı (ABD) ve% 10 (h / h) etanol ile eğitim Erkek Long-Evans fareleri kullanılarak elde edilmiştir. * P &lt;0.05; ** P &lt;0.001, CS- karşı CS +. #p &lt;0.05, CS + nesli karşı CS + PDT. ^ P &lt;0.05, CS + testi karşı CS + sönme. Şekil başlangıçta Chaudhri, Sahuque &amp; JANAK (2008) yayınladı. Elsevier izni ile kullanılabilir.

Watch this Scientific Journal Video about A Procedure to Observe Context-induced Renewal of Pavlovian-conditioned Alcohol-seeking Behavior in Rats at JoVE.com

A Procedure to Observe Context-induced Renewal of Pavlovian-conditioned Alcohol-seeking Behavior in Rats

Bir prosedür, sıçanlarda alkol arama davranışının yenilenmesi açıklanan tetiklemek için, bir alkol ilişkili çevre koşullarından kapasitesini incelemek.

Usulü Sıçanlar Pavlovyan klimalı Alkol arayan Davranış Bağlam kaynaklı Yenileme İnceleyecek

Environmental contexts in which drugs of abuse are consumed can trigger craving, a subjective Pavlovian-conditioned response that can facilitate ...

a-procedure-to-observe-context-induced-renewal-pavlovian-conditioned

Research

JoVE Journal

Behavior

12.7K Görüntüleme.  Concordia University.  Bir prosedür, sıçanlarda alkol arama davranışının yenilenmesi açıklanan tetiklemek için, bir alkol ilişkili çevre koşullarından kapasitesini incelemek. 

Video: A Procedure to Observe Context-induced Renewal of Pavlovian-conditioned Alcohol-seeking Behavior in Rats

A Method for Evaluating the Reinforcing Properties of Ethanol in Rats without Water Deprivation, Saccharin Fading or Extended Access Training

Operant oral self-administration methods are commonly used to study the reinforcing properties of ethanol in animals. However, the standard methods require saccharin/sucrose fading, water deprivation and/or extended training to initiate operant responding in rats. This paper describes a novel and efficient method to quickly initiate operant responding for ethanol that is convenient for experimenters and does not require water deprivation or saccharin/sucrose fading, thus eliminating the potential confound of using sweeteners in ethanol operant self-administration studies. With this method, Wistar rats typically acquire and maintain self-administration of a 20% ethanol solution in less than two weeks of training. Furthermore, blood ethanol concentrations and rewards are positively correlated for a 30 min self-administration session. Moreover, naltrexone, an FDA-approved medication for alcohol dependence that has been shown to suppress ethanol self-administration in rodents, dose-dependently decreases alcohol intake and motivation to consume alcohol for rats self-administering 20% ethanol, thus validating the use of this new method to study the reinforcing properties of alcohol in rats.

This protocol describes a novel and efficient method to quickly initiate operant responding for ethanol in rats that, contrary to standard methods, does not require water deprivation or saccharin/sucrose fading to initiate responding.

Su Yoksunluk, Sakarin Fading veya Genişletilmiş Erişim Eğitim olmadan Sıçanlarda Etanol Güçlendirme Özelliklerinin Değerlendirilmesi Bir Yöntem

Operant oral self-administration methods are commonly used to study the reinforcing properties of ethanol in animals. However, the standard methods ...

Davranış

Pavlovian Conditioned Approach Training in Rats

Cues that are contingently paired with unconditioned, rewarding stimuli can acquire rewarding properties themselves through a process known as the attribution of incentive salience, or the transformation of neutral stimuli into attractive, &#34;wanted&#39; stimuli capable of motivating behavior. Pavlovian conditioned approach (PCA) develops after the response-independent presentation of a conditioned stimulus (CS; e.g., a lever) that predicts the delivery of an unconditioned stimulus (US; e.g., a food pellet) and can be used to measure incentive salience. During training, three patterns of conditioned responses (CRs) can develop: sign-tracking behavior (CS-directed CR), goal-tracking behavior (US-directed CR), and an intermediate response (both CRs). Sign-trackers attribute incentive salience to reward-related cues and are more vulnerable to cue-induced reinstatement of drug-seeking as well as other addiction-related behaviors, making PCA a potentially valuable procedure for studying addiction vulnerability. Here, we describe materials and methods used to elicit PCA behavior from rats as well as analyze and interpret PCA behavior in individual experiments.

Here, we present a protocol to elicit Pavlovian conditioned approach behavior in rats. This procedure can be used to measure individual differences in the tendency to approach and attribute incentive salience to reward-related cues and investigate addiction vulnerability.

Sıçanlar Pavlovyan Koúullanmıú Yaklaşım Eğitimi

Cues that are contingently paired with unconditioned, rewarding stimuli can acquire rewarding properties themselves through a process known as the ...

A General Method for Evaluating Incubation of Sucrose Craving in Rats

For someone on a food-restricted diet, food craving in response to food-paired cues may serve as a key behavioral transition point between abstinence and relapse to food taking 1. Food craving conceptualized in this way is akin to drug craving in response to drug-paired cues. A rich literature has been developed around understanding the behavioral and neurobiological determinants of drug craving; we and others have been focusing recently on translating techniques from basic addiction research to better understand addiction-like behaviors related to food 2-4.
As done in previous studies of drug craving, we examine sucrose craving behavior by utilizing a rat model of relapse. In this model, rats self-administer either drug or food in sessions over several days. In a session, lever responding delivers the reward along with a tone+light stimulus. Craving behavior is then operationally defined as responding in a subsequent session where the reward is not available. Rats will reliably respond for the tone+light stimulus, likely due to its acquired conditioned reinforcing properties 5. This behavior is sometimes referred to as sucrose seeking or cue reactivity. In the present discussion we will use the term "sucrose craving" to subsume both of these constructs.
In the past decade, we have focused on how the length of time following reward self-administration influences reward craving. Interestingly, rats increase responding for the reward-paired cue over the course of several weeks of a period of forced-abstinence. This "incubation of craving" is observed in rats that have self-administered either food or drugs of abuse 4,6. This time-dependent increase in craving we have identified in the animal model may have great potential relevance to human drug and food addiction behaviors.
Here we present a protocol for assessing incubation of sucrose craving in rats. Variants of the procedure will be indicated where craving is assessed as responding for a discrete sucrose-paired cue following extinction of lever pressing within the sucrose self-administration context (Extinction without cues) or as responding for sucrose-paired cues in a general extinction context (Extinction with cues).

Responding for food or drug-paired cues increases over the course of a period of abstinence and this may relate to an increased susceptibility to relapse behaviors. Here we detail a procedure for evaluating this "incubation of craving" in rats that have self-administered sucrose.

Sıçanlarda Sakkaroz Craving Kuluçka değerlendirilmesi için Genel Bir Yöntem

For someone on a food-restricted diet, food craving in response to food-paired cues may serve as a key behavioral transition point between abstinence and ...

Nörobilim

Reinstatement of Drug-seeking in Mice Using the Conditioned Place Preference Paradigm

The present protocol describes the Conditioned Place Preference (CPP) as a model of relapse in drug addiction. In this model, animals are first trained to acquire a conditioned place preference in a drug-paired compartment, and after the post-conditioning test, they perform several sessions to extinguish the established preference. The CPP permits the evaluation of the conditioned rewarding effects of drugs related to environmental cues. Then, the extinguished CPP can be robustly reinstated by the non-contingent administration of a priming dose of the drug, and by exposure to stressful stimuli. Both methods will be explained here. When the animal reinitiates the behavioral response, a reinstatement of the conditioned reward is considered to have taken place.
The main advantages of this protocol are that it is non-invasive, inexpensive, and simple with good validity criteria. In addition, it allows the study of different environmental manipulations, such as stress or diet, which can modulate relapse into drug seeking behaviors. However, one limitation is that if the researcher aims to explore the motivation and primary reinforcing effects of the drug, it should be complemented with self-administration procedures, as they involve operant responses of animals.

This protocol describes the Conditioned Place Preference (CPP) as a model of relapse. This procedure permits the measurement of relapse in laboratory animals, considering the impact of drug-associated environmental cues as craving and relapse in abstaining addicts is currently the focus of drug-abuse treatment programs.

Uyuşturucu arayan farelerde şartına yer tercih paradigması kullanarak iade

The present protocol describes the Conditioned Place Preference (CPP) as a model of relapse in drug addiction. In this model, animals are first trained to ...

A Conditioned Place Preference Protocol for Measuring Incubation of Craving in Rats

A major cause of repeated relapses is a craving for the drug. Drug craving increases progressively during the abstinence period, a phenomenon termed incubation of drug craving. Here, we describe a morphine conditioned place preference (CPP) protocol for measuring the incubation of craving in rats. In this protocol, a CPP paradigm mainly employing somatosensory cues is used to establish a long-term reward memory of morphine. A three-chamber CPP box that differs in the texture of the chamber floor is constructed. First, the animals are tested for their baseline preference to the two side chambers for three consecutive days. Then, they are injected intraperitoneally with morphine/saline and put into their non-preferred/preferred chamber for 45 min. After 6 days of conditioning, their preference to the side chambers is tested for 15 min at different time points after the last conditioning session. With this paradigm, the reward memory of morphine could last for at least 18 days. To test whether the above-mentioned protocol can model increased craving, the number of entrances into the two side chambers are counted during the abstinence period. The results show that the entrances increased, suggesting that the CPP paradigm could mimic the incubation of craving. Future studies can employ this model to study neural mechanisms underlying long-term memory and incubation of craving.

Here, a morphine conditioned place preference (CPP) protocol is described to measure incubation of craving in rats.

Kuluçka özlem sıçanlarda ölçmek için bir şartına yer tercih Protokolü

A major cause of repeated relapses is a craving for the drug. Drug craving increases progressively during the abstinence period, a phenomenon termed ...

A Procedure to Study Stress-Induced Relapse of Heroin Seeking after Punishment-Imposed Abstinence

The punishment-imposed abstinence procedure models the self-imposed abstinence that humans initiate due to the adverse consequences associated with drug-taking. This model has been implemented in experiments using different types of substances of abuse such as methamphetamine, cocaine, and alcohol. However, punishment-induced abstinence in heroin-trained animals has not been demonstrated. Furthermore, acute stress is a key trigger for relapse in humans and animal models. It was previously demonstrated that acute food deprivation robustly induced reinstatement of extinguished cocaine and heroin seeking. The procedure described here can be used to assess the effects of acute stress exposure on heroin seeking after punishment-imposed abstinence. A total of 8 rats were implanted with chronic intravenous (i.v.) catheters and trained to self-administer heroin (0.1 mg/kg/infusion) for 18 days under a seek-take chained schedule. Completing the seek link gave access to the take lever, which was paired with a heroin infusion. The seek lever was programmed with a variable interval 60 schedule of reinforcement (VI60), and the take lever was programmed with a fixed-ratio 1 reinforcement schedule (FR1). Following self-administration training, a mild foot shock was delivered on 30% of the completed seek links instead of the extension of the take lever. Footshock intensity was increased by 0.1 mA per daily session from 0.2 mA to 1.0 mA. Heroin-seeking tests were performed after 24 h of food deprivation (FD) or sated conditions. Rats under acute food deprivation condition robustly increased heroin seeking after punishment-imposed abstinence.

A procedure that demonstrates a robust acute food deprivation-induced relapse to heroin seeking after punishment-imposed abstinence is described. A punishment-imposed abstinence model was successfully implemented using the seek and take chain schedule for heroin self-administration. Heroin-seeking tests are then performed following 24 h of food-deprivation stress.

Ceza Uygulanan Yoksunluktan Sonra Eroinin Strese Bağlı Nüksetmesini İncelemek İçin Bir Prosedür

The punishment-imposed abstinence procedure models the self-imposed abstinence that humans initiate due to the adverse consequences associated with ...

The Use of Trace Eyeblink Classical Conditioning to Assess Hippocampal Dysfunction in a Rat Model of Fetal Alcohol Spectrum Disorders

Neonatal rats were administered a relatively high concentration of ethyl alcohol (11.9% v/v) during postnatal days 4-9, a time when the fetal brain undergoes rapid organizational change and is similar to accelerated brain changes that occur during the third trimester in humans. This model of fetal alcohol spectrum disorders (FASDs) produces severe brain damage, mimicking the amount and pattern of binge-drinking that occurs in some pregnant alcoholic mothers. We describe the use of trace eyeblink classical conditioning (ECC), a higher-order variant of associative learning, to assess long-term hippocampal dysfunction that is typically seen in alcohol-exposed adult offspring. At 90 days of age, rodents were surgically prepared with recording and stimulating electrodes, which measured electromyographic (EMG) blink activity from the left eyelid muscle and delivered mild shock posterior to the left eye, respectively. After a 5 day recovery period, they underwent 6 sessions of trace ECC to determine associative learning differences between alcohol-exposed and control rats. Trace ECC is one of many possible ECC procedures that can be easily modified using the same equipment and software, so that different neural systems can be assessed. ECC procedures in general, can be used as diagnostic tools for detecting neural pathology in different brain systems and different conditions that insult the brain.

Trace eyeblink classical conditioning (ECC) was used to assess hippocampal-dependent associative learning in adult rats that were administered a high concentration (11.9% v/v) of alcohol during early neonatal brain development. In general, ECC procedures are sound diagnostic tools for detecting brain dysfunction across many psychological and biomedical settings.

Hipokampal disfonksiyon Fetal alkol spektrum bozuklukları, fare modeli değerlendirmek için izleme Eyeblink Klasik koşullanma kullanımı

Neonatal rats were administered a relatively high concentration of ethyl alcohol (11.9% v/v) during postnatal days 4-9, a time when the fetal brain ...

A Protocol for Measuring Cue Reactivity in a Rat Model of Cocaine Use Disorder

Cocaine use disorder (CUD) follows a trajectory of repetitive self-administration during which previously neutral stimuli gain incentive value. Cue reactivity, the sensitivity to cues previously linked with the drug-taking experience, plays a prominent role in human craving during abstinence. Cue reactivity can be assessed as the attentional orientation toward drug-associated cues that is measurable as appetitive approach behavior in both preclinical and human studies. Herein describes an assessment of cue reactivity in rats trained to self-administer cocaine. Cocaine self-administration is paired with the presentation of discrete cues that act as conditioned reinforcers (i.e., house light, stimulus light, infusion pump sounds). Following a period of abstinence, lever presses in the cocaine self-administration context accompanied by the discrete cues previously paired with cocaine infusion are measured as cue reactivity. This model is useful to explore neurobiological mechanisms underlying cue reactivity processes as well as to assess pharmacotherapies to suppress cue reactivity and therefore, modify relapse vulnerability. Advantages of the model include its translational relevance, and its face and predictive validities.&#160;The primary limitation of the model is that the cue reactivity task can only be performed infrequently and must only be used in short duration (e.g., 1 hour), otherwise rats will begin to extinguish the pairing of the discrete cues with the cocaine stimulus. The model is extendable to any positively reinforcing stimulus paired with discrete cues; though particularly applicable to drugs of abuse, this model may hold future applications in fields such as obesity, where palatable food rewards can act as positively reinforcing stimuli.

Cue reactivity is conceptualized as sensitivity to cues linked with drug-taking experiences that contribute to craving and relapse in abstinent humans. Cue reactivity is modeled in rats by measuring attentional orientation toward drug-associated cues that results in appetitive approach behavior in a cue reactivity test following self-administration and forced abstinence.

Cue reaktivite kokain kullanımı bozukluğu bir sıçan modelinde ölçmek için bir protokol

Cocaine use disorder (CUD) follows a trajectory of repetitive self-administration during which previously neutral stimuli gain incentive value. Cue ...

A Prediction Error-driven Retrieval Procedure for Destabilizing and Rewriting Maladaptive Reward Memories in Hazardous Drinkers

Maladaptive reward memories (MRMs) can become unstable following retrieval under certain conditions, allowing their modification by subsequent new learning. However, robust (well-rehearsed) and chronologically old MRMs, such as those underlying substance use disorders, do not destabilize easily when retrieved. A key determinate of memory destabilization during retrieval is prediction error (PE). We describe a retrieval procedure for alcohol MRMs in hazardous drinkers that specifically aims to maximize the generation of PE and therefore the likelihood of MRM destabilization. The procedure requires explicitly generating the expectancy of alcohol consumption and then violating this expectancy (withholding alcohol) following the presentation of a brief set of prototypical alcohol cue images (retrieval + PE). Control procedures involve presenting the same cue images, but allow alcohol to be consumed, generating minimal PE (retrieval-no PE) or generate PE without retrieval of alcohol MRMs, by presenting orange juice cues (no retrieval + PE). Subsequently, we describe a multisensory disgust-based counterconditioning procedure to probe MRM destabilization by re-writing alcohol cue-reward associations prior to reconsolidation. This procedure pairs alcohol cues with images invoking pathogen disgust and an extremely bitter-tasting solution (denatonium benzoate), generating gustatory disgust. Following retrieval + PE, but not no retrieval + PE or retrieval-no PE, counterconditioning produces evidence of MRM rewriting as indexed by lasting reductions in alcohol cue valuation, attentional capture, and alcohol craving.

This manuscript describes a memory retrieval procedure for destabilizing robust reward memories and rewriting them with counterconditioning prior to their reconsolidation.

İstikrarsızlaştırma ve tehlikeli içenlere uyumsuz ödül anılarını yeniden yazma için bir tahmin hata odaklı alma yordamı

Maladaptive reward memories (MRMs) can become unstable following retrieval under certain conditions, allowing their modification by subsequent new ...

Intermittent-Access Two-Bottle Choice Drinking with Lick Detection in Rats

Modeling Alcohol Consumption in Rodents Using Two-Bottle Choice Home Cage Drinking and Microstructural Analysis

Two-bottle choice home cage drinking is one of the most widely used paradigms to study ethanol consumption in rodents. In its simplest form, animals are provided with access to two drinking bottles, one of which contains regular tap water and the other ethanol, with daily intake measured by change in bottle weight over the 24 h period. Consequently, this approach requires no specialized laboratory equipment. While such ease of implementation is likely the greatest contributor to its widespread adoption by preclinical alcohol researchers, the resolution of drinking data acquired using this approach is limited by the number of times the researcher measures bottle weight (e.g., once daily). However, the desire to examine drinking patterns in the context of overall intake, pharmacological interventions, and neuronal manipulations has prompted the development of home cage lick detection systems that can acquire data at the level of individual licks. Although a number of these systems have been developed recently, the open-source system, LIQ HD (Lick Instance Quantifier Home cage Device), has garnered significant attention in the field for its affordability and user friendliness. Although exciting, this system was designed for use in mice. Here, we review appropriate procedures for standard and lickometer-equipped two-bottle choice home cage drinking. We also introduce methods for adapting the LIQ HD system to rats including hardware modifications to accommodate larger cage size and a redesigned 3D printed bottle holder compatible with standard off-the-shelf drinking bottles. Using this approach, researchers can examine daily drinking patterns in addition to levels of intake in many rats in parallel thereby increasing the resolution of acquired data with minimal investment in additional resources. These methods provide researchers with the flexibility to use either standard bottles or a lickometer-equipped apparatus to interrogate the neurobiological mechanisms underlying alcohol drinking depending on their precise experimental needs.

This protocol describes a standard intermittent-access two-bottle choice home cage drinking paradigm to model alcohol consumption in rats. In addition, it provides step-by-step instructions to augment the standard protocol with a DIY lick detection system that enables microstructural analysis of drinking behavior.

Two-bottle choice home cage drinking is one of the most widely used paradigms to study ethanol consumption in rodents. In its simplest form, animals are ...