We are grateful to Dr. Clowes for first developing and describing this method. We are also thankful to Dr. Tulis for his detailed protocol which has been fundamentally helpful to our previous, current and future work. This work was supported by grants R01HL097111 and R01HL123364 from the NIH to M.T., and by American Heart Association grant 14GRNT18880008 to M.T.
We would like to thank Rachel Newton for her expert technical support and for her valuable help during the filming process.

הערה: השימוש בבעלי החיים לניסויים הבאים נבדקה ואושרה על ידי הוועדה המוסדית הטיפול בבעלי חיים והשימוש (IACUC). 1. נהלים לפני ניתוח <ol style="margin-left: 40px;;text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לעקר מכשירי ניתוח לפני השימוש. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> החיטוי כל מכשירי הניתוח 24 שעות או פחות לפני הניתוח. אם ניתוחים מרובים מבוצעים באותו היום, לעקר את המכשירים על ידי מעקר את חרוז יבש בין ניתוחים. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> סנן לעקר את תמיסת מלח לפני השימוש. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לשקול את העכברוש ולחשב את המינון של תרופות הרדמה (קטמין 80 מ&quot;ג / קילוגרם ו -7 מ&quot;ג / קילוגרם xylazine). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לנהל את תרופות הרדמה תוך-peritoneally (IP). <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ודא הלימות הרגעה על ידי קמצוץ הבוהן ב5-10 דקות. לנהל מנה קטנה נוספת של תרופות (קטמין 7 מ&quot;ג / קילוגרם ו -0.6 מ&quot;ג / קילוגרם xylazine) אם ההרגעה אינה שלמה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ודא שהמחט היא עמוקה מספיק לסמים משלוח תוך-לitoneally בגלל כישלון כדי לספק את פתרון סמים כל לתוך חלל הצפק יגרום הרגעה לקויה. הערה: כיבים ונשירת שיער בעור במקום ההזרקה יהיו כמה ימים נראים לעין לאחר ניתוח, עקב הזרקה תת עורית פתרון תרופתי (sc) שלא במתכוון. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הזרק 3 מיליליטר תת עורי מלח סטרילית פתרון (sc). באמצעות מקלון צמר גפן סטרילי, למרוח כמות קטנה של משחה עיניים לשני העיניים כדי למנוע את הקרניות מהתייבשות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכן את ציוד החימום. רפידות חום טרום חמות על ידי מיקרוגל או אמבט מים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שים את החיה supinely על הפלטפורמה כירורגית. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להסיר את השיער באזור צוואר הגחון. החל מסיר השיער עם מקלון צמר גפן, לחכות 30 שניות ולנגב לחלוטין עם גזה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ספוגית הצוואר עם לשפשף Povidone-יוד ו -70% אתנול. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לשים על ציוד מגן אישי, כוללים שמלה, כיסוי שיער, מסכת מנתחים, ומשקפיים. לשים על sterאיל כפפות מנתחים בסוף לפני הטיפול במכשירי ניתוח סטרילי והאספקה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לעטוף את העכברוש בסדין ניתוח סטרילי עם רק אזור הצוואר החשוף. </li></ol> 2. ניתוחים <ol style="margin-left: 40px;;text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> במהלך ההליך הכירורגי, לבדוק לעומק הרגעה של בעלי חיים על ידי קמצוץ הבוהן בכל 15 דקות. אם בעל חיים מגיבים לקמצוץ הבוהן, להוסיף מנה קטנה נוספת (10% מהמינון הראשוני) של קטמין וxylazine. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לנתח עורק התרדמה משותף שמאל (CCA) <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> השתמש באזמל כדי לעשות חתך אורכי ישר באמצע הצוואר. האורך המשוער של חתך בעור הוא 1.5-2 סנטימטר, במטרה לבודד חלק 1.5-2 סנטימטר של עורק. האורך עשוי להשתנות תלוי במטרת המחקר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בבוטות לנתח את רקמת חיבור של העור. שמור את הטיפים מלקחיים ולוודא שלא לנקב את העור או הרקמה הבסיסית. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לנתח שכבות שרירים longitudinally אלוןז בצד השמאל של קנה הנשימה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כאשר פותח את שכבת השריר, לדמיין את המרכז לאמנות עכשווית עזב עם העצב התועה המצורף מקרוב. בבוטות לנתח צד עורק התרדמה השמאלי בזהירות רבה כדי להפריד את העצב התועה עם המתיחה מינימאלית. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לנתח CCA distally עד הסתעפות. זהירות לנתח הסתעפות ושני סניפים - עורק התרדמה פנימי (רשפ&quot;ת) ועורק התרדמה חיצוני (ECA). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שמור לנתח סביב המרכז לאמנות העכשווית, עד כ חלק של 1.5-2 סנטימטר של העורק מבודד מהרקמות הסובבות. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> פציעת בלון <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> באופן קבוע לעשות מייתר על ECA בכ 5 מ&quot;מ מהסתעפות. באופן קבוע ולקשור סניף העורפי של ECA המקורב להסתעפות של ECA וICA. כמו כן באופן קבוע ולקשור ענפים אחרים, אם בכלל, איתור בין הסתעפות ומייתר ECA - למשל, הסניף של בלוטת התריס מעולה. תפר שמשמש לכל חיבורי האותיות הוא 4-0 שחורמשי. קליפ על הקצה הפרוקסימלי של המרכז לאמנות עכשווית, ואת הקצה הדיסטלי של ICA. הערה: עכשיו, זרימת דם הופסקה באופן קבוע באמצעות קשירה (על ECA) או באופן זמני באמצעות מסיכה (במרכז לאמנות עכשווי ויק&quot;א). תוכן Luminal באזור הסתעפות היה מבודד מהמחזור המערכתי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> עושה חתך arteriotomy על ECA ידי מספריים קטנים-מיקרו. ודא שהחתך קרוב לקשר תפר דיסטלי. דם נקי עם צמר והכותנה מלוח. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכנס את צנתר בלון 2F תפח לתוך לום ECA. לקדם את צנתר בלון proximally ללום CCA. שמור קידום קטטר proximally עד קצהו מגיע בי קליפ נשאר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חבר את מכשיר ניפוח בלון למנעול luer נקבה על ברזלים 3-בדרך ולהתחבר מנעול luer הגברי של ברזלים 3-בדרך לקטטר הבלון. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאט לנפח את הבלון עם כ -1.5 לחץ כספומט, כדי להתנפח העורק הראשי לפי 1.5 מהקוטר. </li&gt; <li style=";text-align:right;direction:rtl"> משוך בעדינות את הבלון rotationally חזרה להסתעפות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להוציא את האוויר מהבלון ולקדם אותו בחזרה לקצה הפרוקסימלי. לנפח את זה שוב ולחזור על משיכת-גב ההליך עוד פעמיים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> למשוך את צנתר הבלון מלומן העורק. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ממשל Intraluminal של חומרים כימיים (לדוגמא, siRNA, סמים) הערה: כאן, מגיב בשימוש הייתה תמיסה המכילה חלקיקי lentiviral קידוד או shRNA מיקוד מולקולת סטרומה אינטראקציה 1 (STIM1) או שליטה ללא מיקוד shRNA. STIM1 הוא חלבון endoplasmic הטרנסממברני יחיד רשתית (ER) שהוא חיישן ER Ca 2 + שליטה ההפעלה של קרום הפלזמה Ca 2 + ערוצים ומוסדרים במהלך dedifferentiation שריר חלק בכלי הדם לפנוטיפ נודד שגשוג 12,30-33. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> צרף קטטר מעל למחט תוך-כדי מזרק (24 G, 1.6 סנטימטרים). פתרון 30 μl לשאוב של reag הבדיקותמציג. הכנס את קטטר לתוך אותו החתך בECA. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לקדם את קצה הצנתר לתוך המרכז לאמנות העכשווית ולקשור פיסת התפר עם קשר אחד בECA כדי לתקן את הצנתר ולסגור את החתך באופן זמני. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להזריק את הפתרון מגיב בדיקות ללומן של המרכז לאמנות עכשווית. שמור את הפתרון בלומן הכלי למשך 30 דקות. לשמור על הרקמה החשופה לחים עם מי מלח ולכסות אותו עם פיסת הגזה רטובה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאחר דגירה, לשאוב את הפתרון שנותר. שחרר שקשר יחיד ולמשוך את הקטטר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לקשור את ECA עם פיסת התפר proximally לחתך arteriotomy. הפוך את הקשר הקרוב ככל האפשר להסתעפות. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> סגור את הפצע. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מאז פציעת הבלון והכנסת קטטר עלולה לגרום לדליפה או ניקוב כלי הדם, להסיר את הסרטון על ICA ולבדוק אם יש דליפה כלשהי. אם דימום הוא ציין, חל פיסת הגזה ולהפעיל לחץ עדין כדי לעצור את הדימום. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הסרקליפ האחר במרכז לאמנות עכשווי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ודא שאין סימנים של דימום, ולאחר מכן להסיר את כל המהדקים ומכשירי ניתוח אחרים. חותך את התפרים עודפים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> תפרים לסגור פצע באמצעות עור (4-0 משי שחור). ספוגית על כל הצדדים של הפצע הסגור עם Povidon-יוד או אנטי-ספטי / חיידקים / סוכן virucide אחר. הזרק 3 מיליליטר של תמיסת מלח סטרילית sc </li></ol></li></ol> 3. נהלים לאחר ניתוח <ol style="margin-left: 40px;;text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שמור חולדה על משטח חום לאחר ניתוח. לנהל מנה אחת של 0.05 מ&quot;ג / קילוגרם עצירות באמצעות זריקה תוך שרירית (IM) לחולדה. במהלך הליך ההתאוששות, לשמור את העיניים והפה של בעלי החיים לחים. לפקח על בעלי החיים עד שהוא ער ומהלך. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניחים את החיה בכלוב נקי ללא כל מצעים עד שהוא התאושש לחלוטין. לאחר התאוששות, בעלי החיים יוחזרו לחדר בעלי החיים ושוכנו בנפרד. </li></ol>

<ol>
	<li>Landzberg, B. R., Frishman, W. H., Lerrick, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pathophysiology+and+pharmacological+approaches+for+prevention+of+coronary+artery+restenosis+following+coronary+artery+balloon+angioplasty+and+related+procedures.">Pathophysiology and pharmacological approaches for prevention of coronary artery restenosis following coronary artery balloon angioplasty and related procedures.</a> Progress in Cardiovascular Diseases. 39, 361-398 (1997).</li><li>Muller, D. W., Ellis, S. G., Topol, E. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Experimental+models+of+coronary+artery+restenosis.">Experimental models of coronary artery restenosis.</a> J. Am. Coll. Cardiol. 19, 418-432 (1992).</li><li>Clowes, A. W., Reidy, M. A., Clowes, M. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Kinetics+of+cellular+proliferation+after+arterial+injury.+I.+Smooth+muscle+growth+in+the+absence+of+endothelium.">Kinetics of cellular proliferation after arterial injury. I. Smooth muscle growth in the absence of endothelium.</a> Laboratory Investigation: A Journal of Technical Methods and Pathology. 49, 327-333 (1983).</li><li>Clowes, A. W., Reidy, M. A., Clowes, M. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanisms+of+stenosis+after+arterial+injury.">Mechanisms of stenosis after arterial injury.</a> Laboratory Investigation: A Journal of Technical Methods and Pathology. 49, 208-215 (1983).</li><li>Clowes, A. W., Clowes, M. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Kinetics+of+cellular+proliferation+after+arterial+injury.+IV.+Heparin+inhibits+rat+smooth+muscle+mitogenesis+and+migration.">Kinetics of cellular proliferation after arterial injury. IV. Heparin inhibits rat smooth muscle mitogenesis and migration.</a> Circulation Research. 58, 839-845 (1986).</li><li>Li, G., Chen, S. J., Oparil, S., Chen, Y. F., Thompson, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Direct+in+vivo+evidence+demonstrating+neointimal+migration+of+adventitial+fibroblasts+after+balloon+injury+of+rat+carotid+arteries.">Direct in vivo evidence demonstrating neointimal migration of adventitial fibroblasts after balloon injury of rat carotid arteries.</a> Circulation. 101, 1362-1365 (2000).</li><li>Kiechl, S., Willeit, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+natural+course+of+atherosclerosis.+Part+II:+vascular+remodeling.">The natural course of atherosclerosis. Part II: vascular remodeling.</a> Bruneck Study Group. Arteriosclerosis, Thrombosis, and Vascular Biology. 19, 1491-1498 (1999).</li><li>Yamamoto, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Derivation+of+rat+embryonic+stem+cells+and+generation+of+protease-activated+receptor-2+knockout+rats.">Derivation of rat embryonic stem cells and generation of protease-activated receptor-2 knockout rats.</a> Transgenic Research. 21, 743-755 (2012).</li><li>Intengan, H. D., Schiffrin, E. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vascular+remodeling+in+hypertension:+roles+of+apoptosis,+inflammation,+and+fibrosis.">Vascular remodeling in hypertension: roles of apoptosis, inflammation, and fibrosis.</a> Hypertension. 38, 581-587 (2001).</li><li>Meng, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Complex+hemodynamics+at+the+apex+of+an+arterial+bifurcation+induces+vascular+remodeling+resembling+cerebral+aneurysm+initiation.">Complex hemodynamics at the apex of an arterial bifurcation induces vascular remodeling resembling cerebral aneurysm initiation.</a> Stroke. 38, 1924-1931 (2007).</li><li>Sun, C. K., Shao, P. L., Wang, C. J., Yip, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Study+of+vascular+injuries+using+endothelial+denudation+model+and+the+therapeutic+application+of+shock+wave:+a+review.">Study of vascular injuries using endothelial denudation model and the therapeutic application of shock wave: a review.</a> American Journal of Rranslational Research. 3, 259-268 (2011).</li><li>Zhang, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Orai1-mediated+I+(CRAC)+is+essential+for+neointima+formation+after+vascular+injury.">Orai1-mediated I (CRAC) is essential for neointima formation after vascular injury.</a> Circulation Research. 109, 534-542 (2011).</li><li>Ollinger, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bilirubin:+a+natural+inhibitor+of+vascular+smooth+muscle+cell+proliferation.">Bilirubin: a natural inhibitor of vascular smooth muscle cell proliferation.</a> Circulation. 112, 1030-1039 (2005).</li><li>Levitzki, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=PDGF+receptor+kinase+inhibitors+for+the+treatment+of+restenosis.">PDGF receptor kinase inhibitors for the treatment of restenosis.</a> Cardiovascular Research. 65, 581-586 (2005).</li><li>Asahara, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Local+delivery+of+vascular+endothelial+growth+factor+accelerates+reendothelialization+and+attenuates+intimal+hyperplasia+in+balloon-injured+rat+carotid+artery.">Local delivery of vascular endothelial growth factor accelerates reendothelialization and attenuates intimal hyperplasia in balloon-injured rat carotid artery.</a> Circulation. 91, 2793-2801 (1995).</li><li>Lee, K. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Alpha-lipoic+acid+inhibits+fractalkine+expression+and+prevents+neointimal+hyperplasia+after+balloon+injury+in+rat+carotid+artery.">Alpha-lipoic acid inhibits fractalkine expression and prevents neointimal hyperplasia after balloon injury in rat carotid artery.</a> Atherosclerosis. 189, 106-114 (2006).</li><li>Ji, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=MicroRNA+expression+signature+and+antisense-mediated+depletion+reveal+an+essential+role+of+MicroRNA+in+vascular+neointimal+lesion+formation.">MicroRNA expression signature and antisense-mediated depletion reveal an essential role of MicroRNA in vascular neointimal lesion formation.</a> Circulation Research. 100, 1579-1588 (2007).</li><li>Merlet, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=miR-424/322+regulates+vascular+smooth+muscle+cell+phenotype+and+neointimal+formation+in+the+rat.">miR-424/322 regulates vascular smooth muscle cell phenotype and neointimal formation in the rat.</a> Cardiovascular Research. 98, 458-468 (2013).</li><li>Huang, J., Niu, X. L., Pippen, A. M., Annex, B. H., Kontos, C. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adenovirus-mediated+intraarterial+delivery+of+PTEN+inhibits+neointimal+hyperplasia.">Adenovirus-mediated intraarterial delivery of PTEN inhibits neointimal hyperplasia.</a> Arteriosclerosis, Thrombosis, And Vascular Biology. 25, 354-358 (2005).</li><li>Gonzalez-Cobos, J. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Store-independent+Orai1/3+channels+activated+by+intracrine+leukotriene+C4:+role+in+neointimal+hyperplasia.">Store-independent Orai1/3 channels activated by intracrine leukotriene C4: role in neointimal hyperplasia.</a> Circulation Research. 112, 1013-1025 (2013).</li><li>Guzman, L. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Local+intraluminal+infusion+of+biodegradable+polymeric+nanoparticles.+A+novel+approach+for+prolonged+drug+delivery+after+balloon+angioplasty.">Local intraluminal infusion of biodegradable polymeric nanoparticles. A novel approach for prolonged drug delivery after balloon angioplasty.</a> Circulation. 94, 1441-1448 (1996).</li><li>Lipke, E. A., West, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Localized+delivery+of+nitric+oxide+from+hydrogels+inhibits+neointima+formation+in+a+rat+carotid+balloon+injury+model.">Localized delivery of nitric oxide from hydrogels inhibits neointima formation in a rat carotid balloon injury model.</a> Acta Biomaterialia. 1, 597-606 (2005).</li><li>Osterrieder, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Role+of+angiotensin+II+in+injury-induced+neointima+formation+in+rats.">Role of angiotensin II in injury-induced neointima formation in rats.</a> Hypertension. 18, II60-II64 (1991).</li><li>Powell, J. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inhibitors+of+angiotensin-converting+enzyme+prevent+myointimal+proliferation+after+vascular+injury.">Inhibitors of angiotensin-converting enzyme prevent myointimal proliferation after vascular injury.</a> Science. 245, 186-188 (1989).</li><li>. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Does+the+new+angiotensin+converting+enzyme+inhibitor+cilazapril+prevent+restenosis+after+percutaneous+transluminal+coronary+angioplasty?+Results+of+the+MERCATOR+study:+a+multicenter,+randomized,+double-blind+placebo-controlled+trial.+Multicenter+European+Research+Trial+with+Cilazapril+after+Angioplasty+to+Prevent+Transluminal+Coronary+Obstruction+and+Restenosis+(MERCATOR)+Study+Group.">Does the new angiotensin converting enzyme inhibitor cilazapril prevent restenosis after percutaneous transluminal coronary angioplasty? Results of the MERCATOR study: a multicenter, randomized, double-blind placebo-controlled trial. Multicenter European Research Trial with Cilazapril after Angioplasty to Prevent Transluminal Coronary Obstruction and Restenosis (MERCATOR) Study Group.</a> Circulation. 86, 100-110 (1992).</li><li>Faxon, D. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+high+dose+angiotensin-converting+enzyme+inhibition+on+restenosis:+final+results+of+the+MARCATOR+Study,+a+multicenter,+double-blind,+placebo-controlled+trial+of+cilazapril.">Effect of high dose angiotensin-converting enzyme inhibition on restenosis: final results of the MARCATOR Study, a multicenter, double-blind, placebo-controlled trial of cilazapril.</a> The Multicenter American Research Trial With Cilazapril After Angioplasty to Prevent Transluminal Coronary Obstruction and Restenosis (MARCATOR) Study Group. J Am Coll Cardiol. 25, 362-369 (1995).</li><li>Geurts, A. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Knockout+rats+via+embryo+microinjection+of+zinc-finger+nucleases.">Knockout rats via embryo microinjection of zinc-finger nucleases.</a> Science. 325, 433 (2009).</li><li>Tesson, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Knockout+rats+generated+by+embryo+microinjection+of+TALENs.">Knockout rats generated by embryo microinjection of TALENs.</a> Nature Biotechnology. 29, 695-696 (2011).</li><li>Li, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heritable+gene+targeting+in+the+mouse+and+rat+using+a+CRISPR-Cas+system.">Heritable gene targeting in the mouse and rat using a CRISPR-Cas system.</a> Nature Biotechnology. 31, 681-683 (2013).</li><li>Potier, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evidence+for+STIM1-+and+Orai1-dependent+store-operated+calcium+influx+through+ICRAC+in+vascular+smooth+muscle+cells:+role+in+proliferation+and+migration.">Evidence for STIM1- and Orai1-dependent store-operated calcium influx through ICRAC in vascular smooth muscle cells: role in proliferation and migration.</a> FASEB Journal : Official Publication Of The Federation Of American Societies For Experimental Biology. 23, 2425-2437 (2009).</li><li>Aubart, F. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=RNA+interference+targeting+STIM1+suppresses+vascular+smooth+muscle+cell+proliferation+and+neointima+formation+in+the+rat.+Molecular+Therapy.">RNA interference targeting STIM1 suppresses vascular smooth muscle cell proliferation and neointima formation in the rat. Molecular Therapy.</a> The Journal Of The American Society Of Gene Therapy. 17, 455-462 (2009).</li><li>Berra-Romani, R., Mazzocco-Spezzia, A., Pulina, M. V., Golovina, V. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ca2++handling+is+altered+when+arterial+myocytes+progress+from+a+contractile+to+a+proliferative+phenotype+in+culture.+American+journal+of+physiology.">Ca2+ handling is altered when arterial myocytes progress from a contractile to a proliferative phenotype in culture. American journal of physiology.</a> Cell Physiology. 295, C779-C790 (2008).</li><li>Bisaillon, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Essential+role+for+STIM1/Orai1-mediated+calcium+influx+in+PDGF-induced+smooth+muscle+migration.+American+journal+of+physiology.">Essential role for STIM1/Orai1-mediated calcium influx in PDGF-induced smooth muscle migration. American journal of physiology.</a> Cell Physiology. 298, C993-C1005 (2010).</li><li>Tulis, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rat+carotid+artery+balloon+injury+model.">Rat carotid artery balloon injury model.</a> Methods In Molecular Medicine. 139, 1-30 (2007).</li><li>Zhang, W., Trebak, M., Szallasi, A., B&#237;r&#243;, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Balloon+Injury+in+Rats+as+a+Model+for+Studying+TRP+Channel+Contribution+to+Vascular+Smooth+Muscle+Remodeling.">Balloon Injury in Rats as a Model for Studying TRP Channel Contribution to Vascular Smooth Muscle Remodeling.</a> T TRP Channels in Drug DiscoveryMethods in Pharmacology and Toxicology. , 101-111 (2012).</li><li>Tulis, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Histological+and+morphometric+analyses+for+rat+carotid+balloon+injury+model).">Histological and morphometric analyses for rat carotid balloon injury model).</a> Methods In Molecular Medicine. 139, 31-66 (2007).</li></ol>

The authors declare that they have no competing financial interests.

פציעת בלון התרדמה העכברוש תוארה היטב על ידי Tulis בשנת 2007 34. זה כבר נדון באופן מקיף את כל הפרטים של הליך זה על ידי ד&quot;ר Tulis. הקוראים המעוניינים בביצוע הליך זה מומלצים מאוד לקרוא הפרוטוקול &#39;Tulis. עם זאת, יש דבר אחד שאנחנו לא מסכימים עם ד&quot;ר Tulis: במקום ניפוח הבלון עם מי מלח או כל ?...

צנתרים בלון הם מכשירים רפואיים, המשמשים בהליך של צנתור, במטרה להרחיב את האתר חסום (ים) של טרשת או פקיק בכלי דם. לומן הכלי הצטמצם נאלץ לפתוח על ידי הבלון המנופח ואספקת דם תוחזר ברצף כדי להקל על תסמיני איסכמיה במורד הזרם, כגון אנגינה, אוטם שריר לב, וכאבי רגליים. עם זאת, ההצלחה הגדולה של אנגיופלסטיקה כבר פחתה בסיבוכים שלאחר ניתוח, כגון תוצאות מכוח גורמות בארוטראומה כלי דם (פגיעת בלון), כלומר קיר כלי שיפוץ ובמקרים רבים מחדש היצרות של לומן הכלי (היצרות) 1. מספר המודלים של בעלי החיים פותחו מחקה את הליך הצנתור כדי לסייע לחוקרים להבין את המנגנונים העומדים בבסיס קיר שיפוץ כלי שיט הקשורים לבלון פציעה 2. בין כל המינים של בעלי החיים המשמשים לדוגמנות, עכברוש הוא אחד נפוץ ביותר בשימוש. Compared לארנבים, כלבים וחזירים, היתרונות של חולדות הם עלותם הנמוכה, הקלות היחסית שלהם שימוש והידע הנוכחי של פיזיולוגיה חולדה. למרות שיש לי עכברי יתרון נוסף במגוון רחב של זני מניפולציות גנטיים, כלי העכברים קטנים מדי כדי להכניס צנתר בלון. במהלך שלושת העשורים האחרונים, חולדות ניסוי אפשרו לחוקרים להגיע להבנה טובה יותר של המנגנונים המולקולריים ותאיים בבסיס היווצרות neointima וכלי דם שיפוץ 3-6. מעבר לפגיעה בבלון, שיפוץ כלי דם גם מעורב ברוב המחלות של כלי דם גדולים, כגון טרשת עורקים 7,8, יתר לחץ דם 9, ופרצת 10. כך, ידע שנרכש באמצעות מודל פציעת בלון הוא באופן כללי מועיל למחקרי קיר מחלת כלי דם הכוללים. המטרה הכללית של מודל פציעת בלון העכברוש היא לא רק להבין נוסף מחלות כלי דם, אלא גם כדי לבדוק את העוצמה של סוכנים חדשים לבקרת מחלות 11,12. טיפול תרופתי קליני נוכחי להיצרות מוחל על ידי סטנטים משחררי תרופה הונחו באמצעות לומן הכלי מייד לאחר אנגיופלסטיקה. במודלים של בעלי חיים, יעיל עדיין חסכוני יותר בדרך לבדיקת סוכן חדשה היא שיטת זלוף intraluminal מפותחת מקומית. סוכני מועמד שנבדקו באמצעות שיטה זו כוללים תרופות מולקולה קטנות 13,14, ציטוקינים או צמיחת גורמי 15,16, סוכני גן מניפולציה (שיבוטים cDNA, siRNA, וכו &#39;) 17-20, ופורמולציות תרופות רומן 21,22. עד כה, מודל פציעת בלון העכברוש נשאר אחד המודלים השימושיים ביותר ללימוד מחלות / הפרעות של כלי דם. זהו הצעד המהותי מספסל לצד המיטה, בדרך כלל כצעד הראשון עובר במבחנה לin vivo, אבל זה לא צריך להיות אחרון. התוצאה של ניסויים בעכברים צריכה להיות נדונה ועוד מאופיין לפני התרגום לאדםשימוש קליני, בשל ההבדל במיטות כלי דם וכלי האנטומיה כמו גם הבדלים המהותיים בין מינים אנושיים והעכברוש 23-26. עם זאת, הוא עדיין כלי חיוני במחקר רפואי translational. בעוד מחקר כזה היה אמור להיות מוגבל על ידי חוסר חולדות מהונדסים גנטי, שהוא כבר לא היה בעיה שכן גישות הגנומי רומן כגון אבץ-אצבע nucleases 27, TALENs 28 וCRISPR-קאש 29 עשו חולדות נוקאאוט נגישות בקלות.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="1059">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:384px;">Name of Material/ Equipment</td>
			<td style="width:389px;">Company</td>
			<td style="width:119px;">Catalog Number</td>
			<td style="width:167px;">Comments/Description</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Fogarty balloon embolectomy catheters, 2 French&#160;</td>
			<td>Edwards Lifesciences, Germany</td>
			<td>&#160;120602F</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Deltaphase Operating Board - Includes 2 Pads &#38; 2 Insulators</td>
			<td>Braintree Scientific, Inc.</td>
			<td>39OP</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">&#160;LED light source</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>12-563-501&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Hartmann Mosquito Forceps 4&#8221; curved</td>
			<td>Apiary Medical, Inc. San Diego, CA</td>
			<td>gS 22.1670</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Crile Retractor 4&#8221; double ended</td>
			<td>Apiary Medical, Inc.</td>
			<td>gS 34.1934</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Other surgical instruments</td>
			<td>Roboz Surgical Instrument Company, Inc., Gaithersburg, MD</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Peripheral Intravenous (I.V.) Cannula, 24G</td>
			<td>BD</td>
			<td>381312</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Ketamine HCl, 100mg/mL, 10mL</td>
			<td>Ketaset- Patterson Vet</td>
			<td>07-803-6637&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Xylazine (AnaSed),20mg/mL,20mL</td>
			<td>Ketaset- Patterson Vet</td>
			<td>07-808-1947</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Buprenex, 0.3mg/1ml (5 Ampules/Box)</td>
			<td>Ketaset- Patterson Vet</td>
			<td>07-850-2280</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Nair Baby Oil Hair Removal Lotion-9 oz</td>
			<td>Amazon/Walmart/CVS</td>
			<td>N/A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Inflation Device</td>
			<td>Demax Medical</td>
			<td>DID30</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">D300 3-way Stopcock</td>
			<td>B.Braun Medical Inc.</td>
			<td>4599543</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Artificial Tears Ointment&#160;</td>
			<td>Rugby Laboratories, Duluth, GA</td>
			<td>N/A</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

vascular balloon injury and intraluminal administration in rat carotid artery

מודל פציעת בלון העורק הראשי בחולדות כבר מבוסס היטב במשך למעלה משני עשורים. הוא נשאר שיטה חשובה ללמוד את המנגנונים המולקולריים ותאיים מעורבים בdedifferentiation כלי דם שרירים חלק, היווצרות neointima ושיפוץ של כלי דם. Sprague-Dawley חולדות זכרי חיות המועסקות בתדירות הגבוהה ביותר עבור דגם זה. חולדות נקבות לא העדיפו כהורמונים נשיים הם מגן מפני מחלות כלי דם ובכך להציג את וריאציה להליך זה. התרדמה עזבה נפגעה בדרך כלל עם התרדמה תקין המשרתת כביקורת שלילית. פציעת הצוואר עזב נגרמת על ידי הבלון המנופח שdenudes האנדותל ולהתנפח של קיר הכלי. בעקבות פציעה, ניתן להעריך אסטרטגיות טיפוליות פוטנציאליות כגון שימוש בתרכובות תרופתיות ובין אם גן או העברת shRNA. בדרך כלל לגן או העברת shRNA, הסעיף נפצע בלומן הכלי הוא transduced מקומי למשך 30 דקות עם vחלקיקי iral קידוד או חלבון או shRNA למסירה וביטוי בדפנות כלי הדם שנפגעו. עיבוי Neointimal מייצג תאי שריר שגשוג של כלי דם חלקים בדרך כלל מגיע לשיא בשבועות 2 לאחר פציעה. כלי בעיקר נקצרים בנקודת זמן לניתוח תאי ומולקולרי של מסלולי איתות תא, כמו גם ביטוי גנים וחלבונים זה. יכולים גם להיות שנקטפו כלי בנקודות זמן קודמים על מנת לקבוע את התחלתה של ביטוי ו / או הפעלה של חלבון או מסלול ספציפי, בהתאם למטרות הניסיוניות נועדו. ניתן לאפיין כלים והוערכו באמצעות צביעה היסטולוגית, אימונוהיסטוכימיה, מבחני החלבון / mRNA, ומבחני פעילות. עורק התרדמה הימני שלם מאותו בעל החיים הוא בקרה פנימית אידיאלית. מושרה פציעת שינויים בפרמטרים מולקולריים ותאיים יכולים להיות מוערכים על ידי השוואת העורק נפצע בעורק השליטה תקין הפנימי. כמו כן, ניתן להעריך שיטות טיפוליות על ידי השוואה פוצעתעורק ד והתייחס לשליטה נפצע עורק בלבד.

שבועיים לאחר פציעה, עורקי הראש נקצרים, מחולקים ונתונים לניתוח מורפולוגי. עורקים הם בחתך רוחב ומוכתם עם H &amp; E (איורים 1, 2 ב &#39;, ג&#39; ו -3). קיר עורק התרדמה עכברוש מכיל ארבע שכבות של lamina אלסטי, המופיעות כקווים ורודים. השטח שבין lamina החיצוני ביותר, lamina אלסטי החיצוני (?...

Watch this Scientific Journal Video about Vascular Balloon Injury and Intraluminal Administration in Rat Carotid Artery at JoVE.com

Vascular Balloon Injury and Intraluminal Administration in Rat Carotid Artery

פרוטוקול זה משתמש קטטר בלון כדי לגרום לפציעה intraluminal על העורק הראשי חולדה ולהלן לעורר hyperplasia neointimal. זהו מודל מבוסס היטב לחקר המנגנונים של שיפוץ של כלי דם בתגובה לפציעה. כמו כן הוא משמש באופן נרחב כדי לקבוע את תוקפו של גישות טיפוליות פוטנציאליות.

כלי דם בלון פגיעה וIntraluminal מנהל בעורקי תרדמת העכברוש

The carotid artery balloon injury model in rats has been well established for over two decades. It remains an important method to study the molecular and ...

vascular-balloon-injury-intraluminal-administration-rat-carotid

Research

JoVE Journal

Medicine

16.2K Views.  State University of New York College of Nanoscale Science and Engineering (SUNY CNSE).  פרוטוקול זה משתמש קטטר בלון כדי לגרום לפציעה intraluminal על העורק הראשי חולדה ולהלן לעורר hyperplasia neointimal. זהו מודל מבוסס היטב לחקר המנגנונים של שיפוץ של כלי דם בתגובה לפציעה. כמו כן הוא משמש באופן נרחב כדי לקבוע את תוקפו של גישות טיפוליות פוטנציאל?...

Video: Vascular Balloon Injury and Intraluminal Administration in Rat Carotid Artery

Training a Sophisticated Microsurgical Technique: Interposition of External Jugular Vein Graft in the Common Carotid Artery in Rats

Neointimal hyperplasia is one the primary causes of stenosis in arterialized veins that are of great importance in arterial coronary bypass surgery, in peripheral arterial bypass surgery as well as in arteriovenous fistulas.1-5 The experimental procedure of vein graft interposition in the common carotid artery by using the cuff-technique has been applied in several research projects to examine the aetiology of neointimal hyperplasia and therapeutic options to address it. 6-8 The cuff prevents vessel anastomotic remodeling and induces turbulence within the graft and thereby the development of neointimal hyperplasia.
Using the superior caval vein graft is an established small-animal model for venous arterialization experiment.9-11 This current protocol refers to an established jugular vein graft interposition technique first described by Zou et al., 9 as well as others.12-14 Nevertheless, these cited small animal protocols are complicated.
To simplify the procedure and to minimize the number of experimental animals needed, a detailed operation protocol by video training is presented. This video should help the novice surgeon to learn both the cuff-technique and the vein graft interposition. Hereby, the right external jugular vein was grafted in cuff-technique in the common carotid artery of 21 female Sprague Dawley rats categorized in three equal groups that were sacrificed on day 21, 42 and 84, respectively. Notably, no donor animals were needed, because auto-transplantations were performed. The survival rate was 100 % at the time point of sacrifice. In addition, the graft patency rate was 60 % for the first 10 operated animals and 82 % for the remaining 11 animals. The blood flow at the time of sacrifice was 8&plusmn;3 ml/min. In conclusion, this surgical protocol considerably simplifies, optimizes and standardizes this complicated procedure. It gives novice surgeons easy, step-by-step instruction, explaining possible pitfalls, thereby helping them to gain expertise fast and avoid useless sacrifice of experimental animals.

Neointimal hyperplasia is the primary cause of stenosis in arterialized veins. We propose a new protocol whereby the right external jugular vein is grafted using the cuff technique in the common carotid artery of Sprague Dawley rats. The survival rate was 100 % at the time point of sacrifice.

אימון טכניקה מתוחכמת מייקרו: התערבותם של שתלי וריד צוואר חיצוניים בעורק התרדמה המשותף בחולדות

Neointimal hyperplasia is one the primary causes of stenosis in arterialized veins that are of great importance in arterial coronary bypass surgery, in ...

Optimized System for Cerebral Perfusion Monitoring in the Rat Stroke Model of Intraluminal Middle Cerebral Artery Occlusion

The translational potential of pre-clinical stroke research depends on the accuracy of experimental modeling. Cerebral perfusion monitoring in animal models of acute ischemic stroke allows to confirm successful arterial occlusion and exclude subarachnoid hemorrhage. Cerebral perfusion monitoring can also be used to study intracranial collateral circulation, which is emerging as a powerful determinant of stroke outcome and a possible therapeutic target. Despite a recognized role of Laser Doppler perfusion monitoring as part of the current guidelines for experimental cerebral ischemia, a number of technical difficulties exist that limit its widespread use. One of the major issues is obtaining a secure and prolonged attachment of a deep-penetration Laser Doppler probe to the animal skull. In this video, we show our optimized system for cerebral perfusion monitoring during transient middle cerebral artery occlusion by intraluminal filament in the rat. We developed in-house a simple method to obtain a custom made holder for twin-fibre (deep-penetration) Laser Doppler probes, which allow multi-site monitoring if needed. A continuous and prolonged monitoring of cerebral perfusion could easily be obtained over the intact skull.

Cerebral perfusion monitoring has been demonstrated to improve accuracy in ischemic stroke models. Technical difficulties often limit the use of this essential tool for cerebrovascular research. In this video, an optimized system is shown to obtain a single or multi-site hemodynamic monitoring during intraluminal middle cerebral artery occlusion in rats.

מערכת אופטימלית לניטור זלוף מוחות במודל שבץ העכברוש של חסימת עורק מוח האמצעית intraluminal

The translational potential of pre-clinical stroke research depends on the accuracy of experimental modeling. Cerebral perfusion monitoring in animal ...

Catheterization of the Carotid Artery and Jugular Vein to Perform Hemodynamic Measures, Infusions and Blood Sampling in a Conscious Rat Model

The success of a small animal model to study critical illness is, in part, dependent on the ability of the model to simulate the human condition. Intra-tracheal inoculation of a known amount of bacteria has been successfully used to reproduce the pathogenesis of pneumonia which then develops into sepsis. Monitoring hemodynamic parameters and providing standard clinical treatment including infusion of antibiotics, fluids and drugs to maintain blood pressure is critical to simulate routine supportive care in this model but to do so requires both arterial and venous vascular access. The video details the surgical technique for implanting carotid artery and common jugular vein catheters in an anesthetized rat. Following a 72 hr recovery period, the animals will be re-anesthetized and connected to a tether and swivel setup attached to the rodent housing which connects the implanted catheters to the hemodynamic monitoring system. This setup allows free movement of the rat during the study while continuously monitoring pressures, infusing fluids and drugs (antibiotics, vasopressors) and performing blood sampling.

Vascular accesses to measure hemodynamics, provide fluids and perform blood sampling are important to any small animal model study. We present a technique for implanting catheters into the carotid artery and the common jugular vein in an anesthetized rat for connecting to a system to perform monitoring, infusions and sampling.

צנתור של עורק התרדמה וצוואר הווריד לבצע צעדים המודינמית, חליטות ודגימת דם במודל עכברוש מודע

The success of a small animal model to study critical illness is, in part, dependent on the ability of the model to simulate the human condition. ...

Carotid Artery Infusions for Pharmacokinetic and Pharmacodynamic Analysis of Taxanes in Mice

When proposing the use of a drug, drug combination, or drug delivery into a novel system, one must assess the pharmacokinetics of the drug in the study model. As the use of mouse models are often a vital step in preclinical drug discovery and drug development1-8, it is necessary to design a system to introduce drugs into mice in a uniform, reproducible manner. Ideally, the system should permit the collection of blood samples at regular intervals over a set time course. The ability to measure drug concentrations by mass-spectrometry, has allowed investigators to follow the changes in plasma drug levels over time in individual mice1, 9, 10. In this study, paclitaxel was introduced into transgenic mice as a continuous arterial infusion over three hours, while blood samples were simultaneously taken by retro-orbital bleeds at set time points. Carotid artery infusions are a potential alternative to jugular vein infusions, when factors such as mammary tumors or other obstructions make jugular infusions impractical. Using this technique, paclitaxel concentrations in plasma and tissue achieved similar levels as compared to jugular infusion. In this tutorial, we will demonstrate how to successfully catheterize the carotid artery by preparing an optimized catheter for the individual mouse model, then show how to insert and secure the catheter into the mouse carotid artery, thread the end of the catheter out through the back of the mouse&#8217;s neck, and hook the mouse to a pump to deliver a controlled rate of drug influx. Multiple low volume retro-orbital bleeds allow for analysis of plasma drug concentrations over time.

This method was developed with the goal of delivering a steady drug solution via the carotid artery, to assess the pharmacokinetics of novel drugs in mouse models.

חליטות עורק הראשי לpharmacokinetic וpharmacodynamic ניתוח של taxanes בעכברים

When proposing the use of a drug, drug combination, or drug delivery into a novel system, one must assess the pharmacokinetics of the drug in the study ...

Ferric Chloride-induced Thrombosis Mouse Model on Carotid Artery and Mesentery Vessel

Severe thrombosis and its ischemic consequences such as myocardial infarction, pulmonary embolism and stroke are major worldwide health issues. The ferric chloride injury is now a well-established technique to rapidly and accurately induce the formation of thrombi in exposed veins or artery of small and large diameter. This model has played a key role in the study of the pathophysiology of thrombosis, in the discovery and validation of novel antithrombotic drugs and in the understanding of the mechanism of action of these new agents. Here, the implementation of this technique on a mesenteric vessel and carotid artery in mice is presented. The method describes how to label circulating leukocytes and platelets with a fluorescent dye and to observe, by intravital microscopy on the exposed mesentery, their accumulation at the injured vessel wall which leads to the formation of a thrombus. On the carotid artery, the occlusion caused by the clot formation is measured by monitoring the blood flow with a Doppler probe.

The FeCl3 induced thrombosis model in mice is described herein. A method to monitor thrombus growth by intravital microscopy observation on a mesenteric vessel and by blood flow measurement in the carotid artery is presented.

פקקת עכבר דגם על עורק ראשי וכלי לפדר מושרה כלוריד Ferric

Severe thrombosis and its ischemic consequences such as myocardial infarction, pulmonary embolism and stroke are major worldwide health issues. The ferric ...

A Rat Carotid Balloon Injury Model to Test Anti-vascular Remodeling Therapeutics

The rat carotid balloon injury is a well-established surgical model that has been used to study arterial remodeling and vascular cell proliferation. It is also a valuable model system to test, and to evaluate therapeutics and drugs that negate maladaptive remodeling in the vessel. The injury, or barotrauma, in the vessel lumen caused by an inflated balloon via an inserted catheter induces subsequent neointimal growth, often leading to hyperplasia or thickening of the vessel wall that narrows, or obstructs the lumen. The method described here is sufficiently sensitive, and the results can be obtained in relatively short time (2 weeks after the surgery). The efficacy of the drug or therapeutic against the induced-remodeling can be evaluated either by the post-mortem pathological and histomorphological analysis, or by ultrasound sonography in live animals. In addition, this model system has also been used to determine the therapeutic window or the time course of the administered drug. These studies can leadto the development of a better administrative strategy and a better therapeutic outcome. The procedure described here provides a tool for translational studies that bring drug and therapeutic candidates from bench research to clinical applications.

The rat carotid balloon injury model described below allows researchers to evaluate drugs or therapeutics that negate injury-induced arterial hyperplasia. Detailed pre-surgical preparation, surgical procedure, and post-surgical cares of the animal are described.

פציעת בלון עכברוש ראש דגם כדי לבדוק Therapeutics שיפוץ אנטי-וסקולרית

The rat carotid balloon injury is a well-established surgical model that has been used to study arterial remodeling and vascular cell proliferation. It is ...

Intraluminal Drug Delivery to the Mouse Arteriovenous Fistula Endothelium

Delivery of therapeutic agents to enhance arteriovenous fistula (AVF) maturation can be administered either via intraluminal or external routes. The simple murine AVF model was combined with intraluminal administration of drug solution to the venous endothelium at the same time as fistula creation. Technical aspects of this model are discussed. Under general anesthesia, an abdominal incision is made and the aorta and inferior vena cava (IVC) are exposed. The infra-renal aorta and IVC are dissected for clamping. After proximal and distal clamping, the puncture site is exposed and a 25 G needle is used to puncture both walls of the aorta and into the IVC. Immediately after the puncture, a reporter gene-expressing viral vector was infused in the IVC via the same needle, followed by 15 min of incubation. The intraluminal administration method enabled more robust viral gene delivery to the venous endothelium compared to administration by the external route. This novel method of delivery will facilitate studies that explore the role of the endothelium in AVF maturation and enable intraluminal drug delivery at the time of surgical operation.

After puncturing the aorta through the inferior vena cava (IVC) to create an aorto-caval fistula in the mouse, solution containing a drug is infused into the IVC via the same needle, followed by incubation. This method enables more robust drug delivery to the venous endothelium compared to the external route.

החדרת תרופות Intraluminal אל האנדותל מורסה arteriovenous עכבר

Delivery of therapeutic agents to enhance arteriovenous fistula (AVF) maturation can be administered either via intraluminal or external routes. The ...

The Rabbit Model of Accelerated Atherosclerosis: A Methodological Perspective of the Iliac Artery Balloon Injury

Acute coronary syndrome resulting from coronary occlusion following atherosclerotic plaque development and rupture is the leading cause of death in the industrialized world. New Zealand White (NZW) rabbits are widely used as an animal model for the study of atherosclerosis. They develop spontaneous lesions when fed with atherogenic diet; however, this requires long time of 4 - 8 months. To further enhance and accelerate atherogenesis, a combination of atherogenic diet and mechanical endothelial injury is often employed. The presented procedure for inducing atherosclerotic plaques in rabbits uses a balloon catheter to disrupt the endothelium in the left iliac artery of NZW rabbits fed with atherogenic diet. Such mechanical damage caused by the balloon catheter induces a chain of inflammatory reactions initiating neointimal lipid accumulation in a time dependent fashion. Atherosclerotic plaque following balloon injury show neointimal thickening with extensive lipid infiltration, high smooth muscle cell content and presence of macrophage derived foam cells. This technique is simple, reproducible and produces plaque of controlled length within the iliac artery. The whole procedure is completed within 20 - 30 min. The procedure is safe with low mortality and also offers high success in obtaining substantial intimal lesions. The procedure of balloon catheter induced arterial injury results in atherosclerosis within two weeks. This model can be used for investigating the disease pathology, diagnostic imaging and to evaluate new therapeutic strategies.

Animal models of atherosclerosis are essential to understand the mechanism and to investigate newer approaches to prevent plaque development or rupture, a leading cause of death in the industrialized world. This protocol uses a combination of balloon injury and cholesterol rich diet to induce atherosclerotic plaques in rabbit iliac artery.

הדגם הארנב של טרשת עורקים מואצת: מבט מתודולוגי הפגיעה בעורק Iliac בלון

Acute coronary syndrome resulting from coronary occlusion following atherosclerotic plaque development and rupture is the leading cause of death in the ...

Phase Contrast Magnetic Resonance Imaging in the Rat Common Carotid Artery

Phase contrast magnetic resonance imaging (PC-MRI) is a noninvasive approach that can quantify flow-related parameters such as blood flow. Previous studies have shown that abnormal blood flow may be associated with systemic vascular risk. Thus, PC-MRI can facilitate the translation of data obtained from animal models of cardiovascular diseases to pertinent clinical investigations. In this report, we describe the procedure for measuring blood flow in the common carotid artery (CCA) of rats using cine-gated PC-MRI and discuss relevant analysis methods. This procedure can be performed in a live, anesthetized animal and does not require euthanasia after the procedure. The proposed scanning parameters yield repeatable measurements for blood flow, indicating excellent reproducibility of the results. The PC-MRI procedure described in this article can be used for pharmacological testing, pathophysiological assessment, and cerebral hemodynamics evaluation.

The overall goal of this procedure is to measure the blood flow in the rat common carotid artery by using noninvasive phase contrast magnetic resonance imaging.

שלב ניגודיות תהודה מגנטית בעורק החולדה נפוצים

Phase contrast magnetic resonance imaging (PC-MRI) is a noninvasive approach that can quantify flow-related parameters such as blood flow. Previous ...

Ferric Chloride-induced Canine Carotid Artery Thrombosis: A Large Animal Model of Vascular Injury

Occlusive arterial thrombosis leading to cerebral ischemic stroke and myocardial infarction contributes to ~13 million deaths every year globally. Here, we have translated a vascular injury model from a small animal into a large animal (canine), with slight modifications that can be used for pre-clinical screening of prophylactic and thrombolytic agents. In addition to the surgical methods, the modified protocol describes the step-by-step methods to assess carotid artery canalization by angiography, detailed instructions to process both the brain and carotid artery for histological analysis to verify carotid canalization and cerebral hemorrhage, and specific parameters to complete an assessment of downstream thromboembolic events by utilizing magnetic resonance imaging (MRI). In addition, specific procedural changes from the previously well-established small animal model necessary to translate into a large animal (canine) vascular injury are discussed.

Here, we present the modifications necessary to a well characterized and commonly used small animal ferric chloride-induced (FeCl3) carotid artery injury model for use in a large animal vascular injury model. The resulting model can be utilized for pre-clinical trial assessment of both prophylactic and thrombolytic pharmacological and mechanical interventions.

פקקת הברזל ותחמוצת כלוריד-induced הכלבי העורק הראשי: דגם בעל חיים גדול של פגיעה בכלי הדם

Occlusive arterial thrombosis leading to cerebral ischemic stroke and myocardial infarction contributes to ~13 million deaths every year globally. Here, ...