צורת הננו-חלקיק משפיעה על ספיגת התאים, אך נעשתה עבודה מוגבלת כדי לשנות את צורתם של פולימרים. פרוטוקול זה מדגים כיצד להאריך פולימרים עבור יישומי משלוח תרופות משופרים. טכניקה זו מספקת גישה פשוטה שיכולה ליצור צורות פולימריות רבות ושונות עם יישומים פוטנציאליים באספקת תרופות, תאים מדומים או עבור שדות אחרים שלא נחקרו.
פולימרים מוארכים יכולים בו זמנית לספק תרופות הידרופוביות והידרופיליות ובקלות רבה יותר לתאים. טכניקה זו יכולה לעזור להעביר תרופות מעבר למחסום הדם - מוח, להתמודד עם אתגר רפואי גדול. כדי להתחיל, להמיס 0.015 גרם של פוליאסטר נבחר במיליליטר אחד של DMSO על ידי מערבולת במשך 15 דקות, ולהגדיר את מנגנון הזרקת ממס.
מניחים את צלחת ההתחלה ישירות מתחת למשאבת המזרק האנכית, ואז מניחים מרה זכוכית של חמישה מיליליטר עם מיליליטר אחד מסוג שני מים דה-יוניזציה בבר כוכבים מיניאטורי על צלחת הערבוב. כוונן את גובה משאבות המזרק כדי לאפשר לקצה המחט להיות שקוע לחלוטין במים מסוג שני deionized ולהגדיר את קצב העירוי של משאבת המזרק לחמישה מיקרוליטרים לדקה. בצע את הזרקת הממס על ידי ציור פתרון ממס אורגני פוליאסטר לתוך מחט 27 מד.
מניחים את המחט לתוך משאבת המזרק ולוודא שהיא מאובטחת. כוונן את בלוק הדוחף כדי לגעת בקצה הבוכנה של המזרק. התחל את צלחת ערבוב כך המים מסתובבים ב 100 סיבובים לדקה, ולאחר מכן להתחיל את משאבת המזרק.
לאחר משאבת המזרק יש חדורה מלאה את הממס האורגני ואת הפולימר לתוך המים, להסיר את מוט stir וכובע זכוכית נתעבת. לאפיון של פולימרים באמצעות פיזור אור דינמי או DLS, להוסיף מיליליטר אחד של מים עם אחוז קטן של ממס אורגני ופולימר כדי cuvette מיליליטר אחד. ביצע DLS על-ידי הצבת ה- cuvette במערכת והגדרת הריצה.
קרא את הקוטר המשוקלל בעוצמה פולימרית ואת אינדקס polydispersity או PDI. לאחר שטיפת קרום דיאליזה 300 קילודלטון על פי פרוטוקולים שסופקו על ידי היצרן, להוסיף מיליליטר אחד של פתרון פולימרי למאגר של התקן הדיאליזה. מניחים את מכשיר הדיאליזה ב-250 מיליליטר עם 150 מיליליטר מסוג שני מים דו-מיניים על צלחת ערבוב.
מניחים את צלחת הערבוב למהירות המאפשרת תנועה עדינה של מכשיר הדיאליזה ומשאירים אותה לערבב לילה. לאחר הדיאליזה הושלמה, לחלץ את פתרון פולימר מיליליטר אחד מהתקן הדיאליזה. צור 150 מיליליטר של חוצץ מלח הרצוי עם 50, 100 או 200 מילימטרים ריכוז של נתרן כלורי מבוסס על המאפיינים הפולימריים הרצויים הסופיים ולשמור על העומס של מכשיר דיאליזה ב 150 מיליליטר של תמיסת מלח במשך 18 שעות עבור ערבוב.
לאחר אפנון הצורה, בצע מדידות DLS. שימו לב במיוחד למדידות PDI בהשוואה לפולימרים רוחניים, שכן שינוי ב-PDI מצביע על שינוי צורה יעיל בפולימרים. השתמש בפקדים מתאימים להדמיה, במיוחד פולימרים מאופננים שאינם צורה כדי להבטיח את הצלחת השיטה.
תצפית TEM של פולימרים מבוססי PEG-PLA מצביעה על מבנה כדורי כולל עם קו חיצוני עבה יותר המעיד על ממברנה. הפולימרומים מציגים כמבנים פיזיים ו- SEM עם מברשת כמו שכבה חיצונית של PEG. דיאליזה של שעה במים הובילה לאותו קוטר ממוצע כולל עם הסרת ממסים המפחיתה את הקוטר הפולימרי.
כאשר ריכוזים ראשוניים גדולים יותר של ממס אורגני משמשים, ירידות בקוטר גדול יותר צפויות. בעת ביצוע פולימרים PEG-PLA, שינויים צנועים PDI צפויים, אשר עשוי להצביע על שינוי בצורת. בעת חיוג PEG-PLGA פולימרומים, שהם קצת יותר הידרופוביים מאשר פולימרים PEG-PLA נגד מלח, הגידול PDI עולה בקנה אחד עם התארכות עם כל שיפועי מלח נחקרו המוביל לעלייה PDI.
תוצאות דומות יש לראות בעת שימוש שיפוע מלח 50 מילימולר כדי לגרום לשינוי צורה ללא קשר הידרופוביה פוליאסטר. בינתיים, שיפועי מלח נתרן כלורי 100 ו 200 מילימולר מציגים את המגמה הישירה שדלתא PDI מגדילה עם הידרופוביה פוליאסטר גוברת. תמונות TEM של פולימרים PEG-PLA חייגו עם 50 מיליון נתרן כלורי נמוך יותר הראו עם סטומטוציטים ומוטות מוארכים.
כמו ריכוז המלח גדל ל 100 מילימולר, מספר גדל של היווצרות מוטות עם מספר מופחת של stomatocytes נצפתה. דיאליזה נגד 200 פולימרים מילימולר נוצר באופן עקבי יותר פרולטים עם יחסי רוחב-גובה צנועים. החלק המאתגר ביותר בפרוטוקול זה הוא להפוך את הפולימרים לפולימריים באופן עקבי.
לכן חשוב לתרגל את ההליך.
