纳米粒子形状影响细胞吸收,但改变聚合物体形状的工作有限。此协议演示了如何拉长聚合物以增强药物输送应用。该技术提供了一个简单的方法,可以创建许多不同的聚合物形状,在药物输送,伪细胞,或其他未开发的领域的潜在应用。
拉长聚合物可以同时提供疏水和亲水药物,更容易地输送到细胞中。这项技术可以帮助将药物穿梭于血脑屏障,应对重大的医学挑战。首先,通过15分钟的涡流将0.015克选定的聚酯溶解在一毫升的DMSO中,并设置溶剂注射装置。
将启动板直接放在垂直注射器泵下方,然后将一个五毫升玻璃胆汁与一毫升二型电离水放在搅拌盘上的微型星条中。调整注射器泵的高度,使针尖完全浸入二型去离子水中,并将注射器泵的输液率设置为每分钟五微升。将有机溶剂和聚酯溶液绘制成 27 量表针,执行溶剂注射。
将针头放入注射器泵中,确保其安全。调整推手块以触摸注射器柱塞的末端。启动搅拌盘,使水以每分钟 100 转的速度旋转,然后启动注射器泵。
一旦注射器泵将有机溶剂和聚合物完全注入水中,取出搅拌棒并盖住玻璃杯。要通过动态光散射或 DLS 对聚合物体进行定性,请将一毫升含有少量有机溶剂和聚合物的水添加到一毫升的 cuvette 中。通过将 cuvette 放入系统并设置运行来执行 DLS。
阅读聚合物强度加权直径和多分散性指数或 PDI。根据制造商提供的协议清洗 300 千达尔顿透析膜后,在透析装置的储液库中加入一毫升聚合物溶液。将透析装置放在 250 毫升烧甲器中,将 150 毫升的二型电离水放在搅拌盘上。
将搅拌板设置为允许透析装置的轻柔运动的速度,并让它在一夜之间搅拌。透析完成后,从透析装置中提取一毫升聚合物溶液。根据最终所需的聚合物特性,使用 50、100 或 200 毫摩尔浓度的氯化钠创建 150 毫升所需的盐缓冲器,并将透析装置的负载保持在 150 毫升盐溶液中 18 小时进行搅拌。
调整形状后,执行 DLS 测量。与精神聚合物相比,特别注意 PDI 测量,因为 PDI 的变化表明聚合物体的形状发生了有效的变化。使用适当的控制进行成像,特别是非形状调制聚合物,以确保该方法的成功。
TEM 对 PEG-PLA 基聚合物的观察表明,整体球形结构具有较厚的外线,表明膜。聚合物体作为物理结构存在,SEM 具有像 PEG 外部层一样的刷子。在水中透析一小时,总平均直径相同,溶剂去除会降低聚合物直径。
当使用更大的有机溶剂初始浓度时,预计直径会减少。在制造PEG-PLA聚合物的同时,PDI有望略有变化,这可能表明形状有所变化。当透析PEG-PLGA聚合物时,PDI的增加与所有探索的盐梯度相一致,导致PDI增加。
使用 50 毫摩尔盐梯度导致形状变化时,无论聚酯疏水性如何,都应观察到类似的结果。同时,100和200毫摩尔氯化钠盐梯度呈现出随着聚酯水恐惧性增加而增加的三角洲PDI的直接趋势。PEG-PLA聚合物的TEM图像用5000万低氯化钠解析,显示用雾化细胞和拉长棒。
随着盐浓度增加到100毫摩尔,观察到的棒形成数量增加,番茄细胞数量减少。对200毫摩尔聚合物体进行透析,形成更一致的前列腺,具有适度的纵横比。此协议中最具挑战性的部分是始终如一地制造聚合物体。
因此,重要的是要实践这个程序。