나노 입자 모양은 세포 섭취에 영향을 미치지만 중합체의 모양을 바꾸기 위한 제한된 작업이 수행되었습니다. 이 프로토콜은 향상된 약물 전달 응용 프로그램을 위해 폴리머좀을 길게 하는 방법을 보여줍니다. 이 기술은 약물 전달, 의사 세포 또는 다른 미개척 필드에 대한 잠재적 인 응용 프로그램과 많은 다른 중합체 모양을 만들 수있는 간단한 접근 방식을 제공합니다.
길쭉한 중합체는 동시에 소수성 및 소수성 약물을 전달하여 세포에 더 쉽게 전달할 수 있습니다. 이 기술은 혈액-뇌 장벽을 가로 질러 마약을 셔틀 도움이 될 수 있습니다., 주요 의료 문제를 해결. 시작하려면, 15분 동안 소용돌이를 통해 선택된 폴리에스테르 0.015 그램을 DMSO 1밀리리터로 용해시키고 용매 주입 장치를 설정한다.
시작 판을 수직 주사기 펌프 바로 아래에 놓고 5 밀리리터 유리 담즙을 저어 접시의 미니어처 스타 바에 2형 의 1밀리리터의 탈온화 물을 넣습니다. 주사기 펌프 높이를 조정하여 바늘 의 끝이 2형 의 제열물에 완전히 침지되고 주사기 펌프의 주입 속도를 분당 5 마이크로리터로 설정합니다. 유기 용매 및 폴리 에스테르 용액을 27 게이지 바늘로 끌어서 용매 주입을 수행하십시오.
바늘을 주사기 펌프에 넣고 안전하게 지내십시오. 푸셔 블록을 조정하여 주사기 플런저 끝을 만드시면 됩니다. 분당 100회전에서 물이 회전할 수 있도록 교반판을 시작한 다음 주사기 펌프를 시작합니다.
주사기 펌프가 유기 용매와 폴리머를 물에 완전히 주입하면 교반 바를 제거하고 유리 사악을 캡하십시오. 동적 광 산란 또는 DLS를 통해 중합체의 특성화를 위해, 1 밀리리터 큐벳에 유기 용매및 폴리머의 작은 비율로 1 밀리리터의 물을 추가합니다. 큐벳을 시스템에 배치하고 실행을 설정하여 DLS를 수행했습니다.
폴리머모 강도 가중 직경 및 다분산도 지수 또는 PDI를 읽어보십시오. 제조업체가 제공하는 프로토콜에 따라 300킬로달톤 투석 막을 세척한 후 투석 장치의 저장소에 폴리머용 용액 1밀리리터를 추가합니다. 투석 장치를 250 밀리리터 비커에 넣고 2형 의 2가지 탈이온화된 물을 교반판에 넣습니다.
교반판을 투석 장치의 부드러운 움직임을 허용하는 속도로 설정하고 밤새 저어 둡니다. 투석이 완료된 후 투석 장치에서 1밀리리터 폴리머솜 용액을 추출합니다. 최종 원하는 폴리머성질을 기준으로 염화나트륨의 50, 100 또는 200 밀리알 농도로 원하는 소금 완충제 150밀리리터를 생성하고 교반을 위해 150밀리리터의 염용액에 투석 장치의 부하를 유지한다.
형상 변조 후 DLS 측정을 수행합니다. PDI의 변화로 인해 영적 중합체에 비해 PDI 측정에 특히 주의를 기울이면 중합체의 효과적인 모양 변화가 있음을 시사한다. 이미징, 특히 비형상 변조 폴리머솜에 적합한 컨트롤을 사용하여 방법의 성공을 보장합니다.
PEG-PLA 계합체의 TEM 관측은 멤브레인을 나타내는 두꺼운 외부 라인을 가진 전반적인 구형 구조를 나타낸다. 페그 외부 층과 같은 브러시가 있는 물리적 구조 및 SEM으로 존재하는 중합체. 물에서 1시간 투석은 중합체 직경을 감소시키는 용매 제거와 동일한 전체 평균 직경으로 이어졌다.
유기 용매의 초기 농도가 클수록 직경이 클 것으로 예상됩니다. PEG-PLA 중합체를 만드는 동안, PDI에 있는 겸손한 변경이 예상됩니다, 모양의 변경을 나타낼 수 있는. 페그-PLGA 폴리머를 투석할 때, 이는 소금에 대한 PEG-PLA 폴리머보다 약간 더 소수성이며, PDI의 증가는 PDI의 증가로 이어지는 모든 탐사염 그라데이션과 연신과 더 일치합니다.
50 밀리머 염그라데이션을 사용하여 폴리에스테르 소수성에 관계없이 모양 변화를 일으킬 때 유사한 결과를 관찰해야 한다. 한편, 100 및 200 밀리머 나트륨 염화염 그라데이션은 폴리에스테르 소수성 증가와 함께 델타 PDI가 증가하는 직접적인 추세를 표시합니다. 5천만 개의 낮은 염화나트륨으로 투석된 PEG-PLA 폴리머좀의 TEM 이미지는 스토마토세포와 길쭉한 막대로 나타났다.
염 농도가 100 밀리머로 증가함에 따라, 스토마토 세포의 감소와 막대 형성의 증가 수를 관찰했다. 투석200 밀리머 폴리머솜에 대한 투석은 겸손한 종횡비로 더 일관되게 형성되었다. 이 프로토콜의 가장 어려운 부분은 중합체를 일관되게 만드는 것입니다.
따라서 절차를 연습하는 것이 중요합니다.
