גישת השתלה מדרדרית למיקום צנתר דיאליזה פריטוניאלית בעכברים

הפרוטוקולים הקודמים למודלים עכבריים של דיאליזה פריטוניאלית סובלים ממגבלות המונעות שימוש ארוך טווח בהם. מגבלות אלה, כגון סלילת קטטר ותזוזה, מטופלות במחקר זה. טכניקה זו מונעת תקלה בצנתר פרקינסון מסיבות מכניות, ומאפשרת את השימוש בהם למשך זמן רב יותר לחקר פתולוגיות, כגון פיברוזיס פריטוניאלי.

טכניקה זו תספק מודל עכבר טוב יותר כדי לחקור פתוגנזה מולקולרית וטיפולים חדשניים של פיברוזיס הצפק. מגבלה מרכזית של מחלת פרקינסון בבני אדם. מחלת פרקינסון היא עמוד התווך של טיפול בתחליפי כליות בילדים עם ESKD.

מודל אופטימלי זה יספק מיטת בדיקה טובה יותר כדי לחקור את כל הבעיות עם PD בבני אדם. ליצירת מודל של בעלי חיים יש עקומת למידה. סרטון שלב אחר שלב זה יסייע לאדם ביישום טכניקה זו כדי ליצור מודל עמיד לדיאליזה פריטוניאלית בהצלחה.

כדי להתחיל, הניחו את עכבר C57 שחור/6J בן שמונה עד 12 שבועות בהרדמה מלאה במצב צדדי שמאלי. לאחר גילוח העכבר כמפורט בכתב היד, יש לחטא את אזור הניתוח על ידי חשיפת האגף הימני של העכבר לשמיכת החימום. לאחר מכן הניחו את הווילון הכירורגי הסטרילי מעל העכבר.

הקצה את כיס יציאת הגישה סנטימטר אחד מעל זנב העכבר. החזק את מקטע ההתקנה עם האינדקס הלא דומיננטי ואצבע האגודל מעל האזור שהוקצה ליד הזנב. מניחים את הצנתר מעל העור, ומעריכים את המקום להחדרת צינור הצנתר בתוך חלל הבטן.

לאחר מכן סמן את המקום שהוקצה להחדרת הצינור, תוך כיבוד הכיפוף המינימלי של הצינור ליד קו האמצע הקדמי. נקב חור צדדי מעל מסגרת קטע המאגר עם תג אוזני העכבר. בצע חתך עור אופקי ברוחב סנטימטר אחד מעל הזנב.

לאחר מכן נתחו בבוטות את המישור התת עורי מהשכבה השרירית שמתחתיה כדי ליצור פאוץ' למיקום הצנתר כדי להבטיח שיציאת ההתקנה שוכנת בחופשיות בכיס היציאה האידיאלי. מעבר לתפר 3-0 מהחור הצדדי המותאם אישית. תקן את יציאת הגישה למיטה השרירית על ידי הידוק התפר שעבר, תוך שמירה על מסלול הצינור.

בצע חתך של סנטימטר אחד מעל האזור המסומן רשמית ליד קו האמצע. מניחים תפר מיתר ארנק רופף עם תפר נספג 4-0 עגול סביב שריר דופן הבטן החתוך. יש לבצע חתך של סנטימטר אחד מעל שכבת השרירים הקרובה לקו האמצע הימני ולעבור את הלבד הפרוקסימלי של הצנתר בתוך החתך.

מעבירים את צינור הצנתר דרך מערכת העיכול המוכנה. הדקו את תפר חוט הארנק המוכן סביב הצינור, תוך שמירה על הלבד השני מחוץ לחוט הארנק מעל שכבת השרירים, וסגרו את העור עם 3-0 תפרים נספגים. ודא כי הצנתר ממוקם הוא פונקציונלי.

בדוק את הפונקציה עם מזרק של מיליליטר אחד המחובר למחט הובר הספציפית עבור היציאה. הזריקו מי מלח רגילים ליציאת ההתקנה. לאחר אישור זרימה חלקה עם אפס סובלנות להתנגדות, לסגור את חתכי העור סביב מאגר היציאה עם 3-0 תפרים נספגים.

הזן את היציאה עם מחט הובר והזריק 100 מיקרוליטר של מלח רגיל לתוך היציאה כדי לאשר את מסלול הפטנט. לאחר מכן להזריק 200 מיקרוליטר של lipopolysaccharide, ואחריו 100 מיקרוליטר של מלוחים להשקיה צינור ולוודא כי אין התנגדות. לאחר שבעה ימים של זריקות LPS ושבועיים של השתלת קטטר, תכננו את ביופסיית הצפק.

לאחר אישור הרדמה מוצלחת, יש לבצע חתך עור בקו האמצע משלפוחית השתן לתת-קסיפואיד. לאחר מכן לבלבל את המישור subfascial עם PBS קר. ודא שהמטוס מנותח לחלוטין מבלי להפריע לשלמות הצפק.

ניתוח של חלקים מוכתמים hematoxylin ו eosin הראה עלייה משמעותית במטריצה החוץ תאית, או ECM, בחלל subperitoneal. ה-ECM הממוצע בחלל התת-פריטוניאלי של עכברי הביקורת היה מחצית מזה של עכברי ה-LPS שנחשפו ל-LPS. צביעת הטריכרום של מאסון מזהה פיברוזיס, הנמדדת כצפיפות עוצמה מנורמלת לשטח הפנים.

שינויים בכלי הדם והרחבת החלל התת-צפיקי נותחו באמצעות סמן תאי אנדותל CD31, ונמדדו כצפיפות משולבת בתמונות שדה בעלות עוצמה גבוהה שנבחרו באופן אקראי. בהשוואה לביקורת, נצפתה עלייה של פי שלושה בפיברוזיס תת-פריטוניאלי, עלייה של פי שמונה עד תשעה בכלי הדם, ועלייה של פי שניים בחלל התת-פריטוניאלי, המסומן כ-SP. הניחו את הצנתר מעל העור וסמנו את הנקודה להחדרת הצנתר, תוך הימנעות מכיפוף הצינור.

ההכנסה צריכה להיות ליד קו האמצע הפנימי. מתן שיטת מיקום צנתר PD מורין עמידה יותר תאפשר לחוקרים לתכנן ולבצע ניסויים ארוכי טווח כדי לחקור ולהתמקד בכשל בקרום הצפק.