באמצעות פרוטוקול זה של מודל חולדות סיליקוזיס, ניתן לחקות מקרוב את התהליך הפתולוגי של סיליקוזיס אנושי. טכניקה זו קלה לביצוע חסכונית עם חזרתיות טובה, ואין טראומה לחיה. מודל החולדות המבוסס במחקר זה תורם לזיהוי מוקדם, אבחון מדויק וטיפול בסיליקוזיס.
כדי להתחיל, מניחים את חלקיקי הסיליקה במכתש אגת וטוחנים במשך שעה וחצי לפני כל חשיפה לבעלי חיים. לאחר מכן שוקלים 30 גרם סיליקה הקרקע באיזון אלקטרוני ומניחים אותו במיכל זכוכית. אופים בחום של 180 מעלות צלזיוס במשך שש שעות במייבש חימום חשמלי ונושף אוויר כדי לסלק פתוגנים מפני השטח של חלקיקי הסיליקה.
הגדר את בקר החשיפה לסיליקה על ידי חיבור מערכות ההזרקה והגנרטור. לאחר מכן הניחו את הסיליקה הנשקלת בגנרטור ואשרו שחיבור הצינור תקין. כבל החשמל מחובר וספק הכוח תקין.
לאחר שווידאתם שהשסתומים של תא השאיפה סגורים, הפעילו את מכשיר פריקת גז הפליטה ואת מקור האוויר כדי לוודא שפנים ארון המיגון נמצא במצב לחץ שלילי. בדוק את ריכוז הסיליקה בארון באמצעות דוגם אטמוספרי מכויל בהתאם להוראות היצרן. לקביעה כבידתית, השתמשו באיזון דיגיטלי, חד פעמי, אנליטי והשקילו את הסיליקה.
הכניסו את החולדה לכלוב, ואז הכניסו 10 חולדות לתא השאיפה וסגרו את תא השאיפה ואת דלתות הארונות המרושתות. לאחר מכן המשיכו בניסוי שאיפת הסיליקה כמתוכנן. בסיום הניסוי, סגור את שסתום בקרת זרימת הגז המעורב ופתח את שסתום זרימת הגז הטהור כדי להזריק את הגז לתא השאיפה.
לאחר 20 דקות, סגור את שסתום זרימת האוויר הטהור. פתחו את הדלת והוציאו את הכלוב מתא השאיפה. לאחר מכן הוציאו את החולדות מהכלוב והחזירו אותן לחדר נטול הפתוגנים.
לאחר מכן, הסירו את מתלה החולדות ואת רכיבי צינור הענף ברצף והניחו אותם בכיור לניקוי. לאחר השטיפה, סגור את שסתום הניקוי האוטומטי ופתח את הצוהר. לאחר מכן נגבו את הקיר הפנימי במטלית נקייה כדי לייבש את המיכל.
לבסוף, יש לחטא את המיכל באתנול 75% ולסגור את שער הפליטה. לאחר מכן, פתח במהירות את דלת תא השאיפה כדי לאדות את הלחות כך שהחלק הפנימי של תא השאיפה יישאר יבש. החולדות שנחשפו לסיליקה במשך שבועיים ו-24 שבועות גילו התעבות דופן הנאדית לאחר שבועיים של שאיפת סיליקה, בעוד שמבנה הנאדיות נעלם, ואזורים גדולים של פיברוזיס נוצרו לאחר 24 שבועות.
יתר על כן, חלקיקי הסיליקה נראו לכודים במקרופאגים של אונות הריאה שנצפו דרך מיקרוסקופ אור מקוטב. צביעה אימונוהיסטוכימית של CD 68 בריאה חשפה את האבולוציה הדינמית של גושים סיליקוטיים בין שבועיים ל -24 שבועות. ככל שזמן החשיפה התארך, גם שטח הגושים גדל בהדרגה, והגושים הסיליקוטיים הסמוכים התמזגו לגושים גדולים יותר.
נגעים פיברוטיים מרובים בגדלים שונים נוצרו בריאות של חולדות שנחשפו לסיליקה בהשוואה לחולדות הביקורת. עם זאת, לא נמצאו הבדלים משמעותיים בכליות, בכבד ובטחול בין החולדות עם סיליקוזיס לבין קבוצת הביקורת. אבל מעניין, אובדן עצם נצפה בחולדות עם סיליקוזיס.
הדבר החשוב ביותר בפרוטוקול זה הוא לוודא שהסיליקה טחונה היטב, והריכוז קבוע לפני תחילת ההליך.
