Используя этот протокол силикоза на модели крысы, можно точно имитировать патологический процесс силикоза человека. Этот метод прост в выполнении с минимальными затратами и хорошей повторяемостью, и не травмирует животное. Установленная в этом исследовании модель на крысах способствует раннему выявлению, точной диагностике и лечению силикоза.
Для начала поместите частицы кремнезема в ступку из агата и измельчайте в течение 1,5 часов перед каждым воздействием на животное. Затем взвесьте 30 грамм молотого кремнезема на электронных весах и поместите их в стеклянную емкость. Выпекать при температуре 180 градусов Цельсия в течение шести часов в сушилке с электрическим обогревом и продувкой воздухом, чтобы удалить болезнетворные микроорганизмы с поверхности частиц кремнезема.
Настройте контроллер экспозиции диоксида кремния, подключив системы впрыска и генератора. Затем поместите взвешенный диоксид кремния в генератор и убедитесь, что соединение трубопровода правильное. Шнур питания подключен, и блок питания работает нормально.
Убедившись, что клапаны ингаляционной камеры закрыты, включите устройство отвода выхлопных газов и источник воздуха, чтобы убедиться, что внутренняя часть экранирующего шкафа находится в состоянии отрицательного давления. Проверьте концентрацию кремнезема в шкафу с помощью калиброванного атмосферного пробоотборника в соответствии с инструкциями производителя. Для гравиметрического определения используйте цифровые аналитические весы с одной чашкой и взвесьте диоксид кремния.
Поместите крысу в клетку, затем поместите 10 крыс в ингаляционную камеру и закройте ингаляционное отделение и экранированные дверцы шкафа. Затем приступайте к эксперименту с ингаляцией диоксида кремния, как и планировалось. По завершении эксперимента закройте клапан управления потоком смешанного газа и откройте клапан потока чистого газа, чтобы впрыснуть газ в ингаляционную камеру.
Через 20 минут закройте клапан подачи чистого воздуха. Откройте дверцу и выньте клетку из ингаляционной камеры. Затем вытащите крыс из клетки и отведите их обратно в комнату, свободную от патогенов.
Затем последовательно снимите решетку для крыс и компоненты патрубка и поместите их в раковину для очистки. После промывки закройте клапан автоматической очистки и откройте люк. Затем протрите внутреннюю стенку чистой тряпкой, чтобы высушить бак.
Наконец, продезинфицируйте бак 75%-ным этанолом и закройте выпускную заслонку. Затем быстро откройте дверцу ингаляционной кабины, чтобы испарить влагу, чтобы внутренняя часть ингаляционной кабины оставалась сухой. У крыс, подвергавшихся воздействию диоксида кремния в течение двух и 24 недель, было выявлено утолщение альвеолярной стенки после двух недель ингаляции диоксида кремния, в то время как альвеолярная структура исчезла, а через 24 недели образовались большие участки фиброза.
Кроме того, частицы кремнезема были обнаружены в макрофагах долей легких, наблюдаемых с помощью поляризованного светового микроскопа. Иммуногистохимическое окрашивание CD 68 в легких выявило динамическую эволюцию силикозных узелков от 2 до 24 недель. По мере увеличения времени экспозиции площадь узелков также постепенно увеличивалась, и соседние силикозные узелки срастались в более крупные узелки.
Множественные фиброзные поражения различных размеров образовывались в легких крыс, подвергшихся воздействию диоксида кремния, по сравнению с контрольными крысами. Тем не менее, не было обнаружено существенных различий в почках, печени и селезенке между крысами с силикозом и контрольной группой. Но интересно, что потеря костной массы наблюдалась у крыс с силикозом.
Самое важное в этом протоколе - убедиться, что диоксид кремния хорошо измельчен, а концентрация постоянна перед началом процедуры.
