이 규폐증 쥐 모델의 프로토콜을 사용하면 인간 규폐증의 병리학적 과정을 밀접하게 모방할 수 있습니다. 이 기술은 우수한 반복성으로 비용 효율적으로 수행하기 쉽고 동물에 대한 외상이 없습니다. 이 연구에서 확립된 쥐 모델은 규폐증의 조기 식별, 정확한 진단 및 치료에 기여합니다.
시작하려면 실리카 입자를 마노 모르타르에 넣고 각 동물에 노출되기 전에 1.5시간 동안 갈아줍니다. 그런 다음 전자 저울에서 분쇄 실리카 30g의 무게를 측정하고 유리 용기에 넣습니다. 섭씨 180도에서 6시간 동안 전기 가열식 공기 분사 건조기에서 구워 실리카 입자 표면에서 병원균을 제거합니다.
주입 시스템과 발생기 시스템을 연결하여 실리카 노출 컨트롤러를 설정합니다. 그런 다음 계량된 실리카를 발생기에 넣고 파이프라인 연결이 적절한지 확인합니다. 전원 코드가 연결되어 있고 전원 공급이 정상입니다.
흡입 챔버의 밸브가 닫혀 있는지 확인한 후 배기 가스 배출 장치와 공기 공급원을 켜서 차폐 캐비닛 내부가 음압 상태인지 확인합니다. 제조업체의 지침에 따라 보정된 대기 샘플러로 캐비닛의 실리카 농도를 확인하십시오. 중량 측정 측정을 위해 디지털 단일 팬 분석 저울을 사용하고 실리카의 무게를 줄입니다.
쥐를 케이지에 넣은 다음 흡입실에 쥐 10마리를 넣고 흡입실과 차폐 캐비닛 도어를 닫습니다. 그런 다음 계획대로 실리카 흡입 실험을 진행합니다. 실험이 완료되면 혼합 가스 유량 제어 밸브를 닫고 순수 가스 유량 밸브를 열어 흡입 챔버에 가스를 주입합니다.
20분 후 순수 공기 흐름 밸브를 닫습니다. 도어를 열고 흡입실에서 케이지를 꺼냅니다. 그런 다음 쥐를 새장에서 꺼내 병원균이 없는 방으로 다시 데려가십시오.
그런 다음 쥐 선반과 분기 파이프 구성 요소를 순서대로 제거하고 청소를 위해 싱크대에 놓습니다. 헹굼 후 자동 세척 밸브를 닫고 해치를 엽니다. 그런 다음 깨끗한 천으로 내벽을 닦아 탱크를 말리십시오.
마지막으로 75 % 에탄올로 탱크를 소독하고 배기 게이트를 닫습니다. 그런 다음 흡입 캐빈의 문을 빠르게 열어 수분을 증발시켜 흡입 캐빈 내부가 건조한 상태를 유지하도록 합니다. 2주와 24주 동안 실리카에 노출된 쥐는 실리카 흡입 2주 후 폐포벽 두꺼워진 반면, 폐포 구조는 사라지고 24주 후에는 넓은 부위의 섬유화가 형성되었습니다.
또한, 실리카 입자는 편광 현미경을 통해 관찰된 폐엽의 대식세포에 갇혀 있는 것이 관찰되었습니다. 폐에서 CD 68의 면역조직화학적 염색은 2주에서 24주까지 규소성 결절의 역동적인 진화를 보여주었습니다. 노출 시간이 증가함에 따라 결절의 면적도 점차 증가하고, 인접한 규폐 결절은 더 큰 결절로 융합되었습니다.
다양한 크기의 여러 섬유화 병변이 대조군 쥐와 비교하여 실리카에 노출된 쥐의 폐에 형성되었습니다. 그러나 신장, 간, 비장에서는 규폐증이 있는 쥐와 대조군 사이에 유의미한 차이가 발견되지 않았다. 그러나 흥미롭게도, 규폐증이 있는 쥐에서 뼈 손실이 관찰되었다.
이 프로토콜에서 가장 중요한 것은 절차를 시작하기 전에 실리카가 잘 분쇄되고 농도가 일정한지 확인하는 것입니다.
